血管内皮细胞生长因子对人脐静脉间充质干细胞生长增殖的影响

背景：在体外构建组织工程材料的过程中，快速获得足够数量且纯度高的种子细胞极为重要，但目前人脐静脉间充质干细胞原代培养的增殖率仍较低。 目的：观察血管内皮细胞生长因子对人脐静脉间充质干细胞原代生长、增殖的影响。 设计、时间及地点：细胞学体外观察，于2008-03/07在辽宁医学院解剖学实验室完成。 材料：正常健康产妇顺产或剖宫产的新生儿脐带20条，由锦州市凌河区妇幼保健院及辽宁医学院附属第一医院提供。 方法：采用胶原酶消化法分离人脐静脉间充质干细胞，以1×108 L-1的密度接种于24孔培养板，设立2组，实验组加入150 g/L血管内皮细胞生长因子，对照组不加入任何细胞因子。 主要观察指标：观察细胞形态变化，MTT法检测细胞生长曲线，免疫细胞化学法鉴定细胞CD166的表达。 结果：接种后6 h细胞开始贴壁，48 h后细胞完全贴壁生长，出现呈椭圆形、多角形的内皮细胞，以及呈梭形的成纤维样细胞，有的形成漩涡状生长集落；原代培养1周后细胞以梭形为主；传代后24 h细胞基本完成贴壁，48 h细胞开始分裂增殖，5~7 d可见多核的成纤维样细胞贴壁，呈长杆状、三角形、梭形等。与对照组比较，实验组细胞生长状态较好，增殖较快，单位时间内获得的细胞数量明显增加(t=2.235，P < 0.05)，CD166阳性细胞率显著升高(t=1.638，P < 0.01)。 结论：血管内皮细胞生长因子可促进人脐静脉间充质干细胞贴壁，且更有利于间充质干细胞的增殖和纯化。     

RNA干扰抑制DLL4基因表达对人血管内皮细胞增殖的影响

背景：Delta-like 4 (DLL4) 是近年新发现的血管生长调控因子,研究表明抑制DLL4可导致过度无效的血管生成。 目的：研究RNA干扰抑制DLL4基因表达对人血管内皮细胞增殖的影响。 设计、时间及地点：随机分组,对比观察,于2007-07/2008-09在南昌大学医学院和江西省医学生物高技术重点实验室完成。 材料：人微血管内皮细胞由上海细胞生物和生物化学研究所提供。 方法：设计和化学合成靶向DLL4基因的siRNA序列,lepofectamineTM2000介导DLL4 siRNA转染人微血管内皮细胞。提取细胞总RNA,进行反转录-聚合酶链反应扩增,琼脂糖电泳检测DLL4 mRNA。提取细胞总蛋白,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳。采用四甲基偶氮唑盐法检测DLL4 siRNA对人微血管内皮细胞增殖的影响,实验分4组：①85 nmol/L DLL4 siRNA-duplex组。②85 nmol/L DLL4 siRNA -scrambled 阴性对照组。③lepofectamine 组。④未经处理组。 主要观察指标：RNA干扰后,人微血管内皮细胞DLL4 的转录和蛋白表达及人微血管内皮细胞的增殖。 结果：反转录-聚合酶链反应和Western blot实验结果显示,人微血管内皮细胞转录DLL4 和表达DLL4蛋白;85 nmol/L DLL4 siRNA 完全抑制人微血管内皮细胞DLL4转录和DLL4蛋白的表达。DLL4 siRNA抑制人微血管内皮细胞DLL4表达的有效浓度为85 nmol/L。四甲基偶氮唑盐实验结果显示,85 nmol/L DLL4 siRNA -duplex组的细胞增殖率为190.00%,未经处理组的细胞增殖率为110.00%。 结论：人微血管内皮细胞表达DLL4,DLL4 siRNA抑制人微血管内皮细胞表达DLL4并促进人微血管内皮细胞增殖,DLL4对人微血管内皮细胞增殖具有抑制作用。     

RAC1活化介导缺氧的人脐静脉内皮细胞凋亡*☆

背景：目前研究证实,Rac1蛋白能够调控甘油醛-3-磷酸脱氢酶氧化酶的表达,刺激内源性活性氧产生,引起内皮细胞毒性改变。 目的：探讨Rac1蛋白在缺氧诱导的人血管内皮细胞凋亡中的作用及其调控机制。 设计、时间及地点：单一样本观察,于2007-01/2008-05在解放军沈阳军区总医院医学实验科完成。 材料：自备人脐静脉内皮细胞、Phoenix amphotropic 293包装细胞、持续活化型pLNCX-L61Rac1和主导抑制的pLNCX-N17Rac1反转录病毒真核表达载体。 方法：体外培养人脐静脉内皮细胞,将细胞以体积分数为1% O2、5% CO2及94% N2 缺氧条件下培养72 h。用持续活化型pLNCX-L61Rac1 (L61Rac1感染组)和主导抑制型pLNCX-N17Rac1 (N17Rac1感染组)反转录病毒真核表达载体转染人脐静脉内皮细胞,并筛选稳定表达的细胞克隆。 主要观察指标：①感染后稳定表达阳性克隆筛选。②采用pull-down和Western blot分析感染前后细胞内Racl的活化。③采用持续缺氧的方法诱导内皮细胞凋亡,用TUNEL染色和Western blot检测缺氧72 h后各实验组细胞中cleave-caspase3表达。④应用免疫荧光和Western blot分析血清反应因子的表达和定位。 结果：筛选出稳定表达持续活化型pLNCX- L61Rac1和主导抑制型的pLNCX-N17Rac1的人脐静脉内皮细胞克隆;应用pull down和Western blot证实各组细胞内Racl的活化改变;与人脐静脉内皮细胞和N17Rac1感染细胞比较,缺氧72 h后L61Rac1细胞发生明显凋亡。进一步应用Western blot分析证实3组细胞中血清反应因子表达无明显改变,但人脐静脉内皮细胞和N17Rac1-HUVECs中血清反应因子为入核表达,而L61Rac1- HUVECs中血清反应因子蛋白在细胞核周大量表达,血清反应因子发生出核转位。 结论：Rac1参与了内皮细胞凋亡的调控,机制可能与其调控血清反应因子蛋白核转位有关。     

没食子儿茶素没食子酸酯抑制牛主动脉内皮细胞增殖和对细胞周期分布的影响

背景：血管内皮细胞在肿瘤血管生成中起关键作用,没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)可抑制内皮细胞生长和增殖,但其作用机制仍不清楚。 目的：观察没食子儿茶素没食子酸酯对牛主动脉内皮细胞增殖和细胞周期分布的影响。 设计、时间及地点：以细胞为观察对象的随机分组实验,于2006-08/2008-05在广州医学院完成。 材料：出生1 d、未哺乳的新生牛,取主动脉内皮细胞进行原代培养。 方法：将指数生长期密度为5×107 L-1的牛主动脉内皮细胞接种于96孔培养板,实验分为2组：实验组和对照组分别加入以培养基RPMI 1640配制的不同浓度的EGCG 180 μL(终浓度为5,10,20,40,80 g/L)及等体积不含EGCG的培养基,全自动酶标仪上测定不同时间3,6,12,24,36 h各孔吸光度值,并计算细胞生长抑制率。选择适当的药物浓度和作用时间点进行EGCG抑制作用的半数抑制浓度(IC50)实验。收集对数生长期的牛主动脉内皮细胞,实验组加入不同浓度(10,20,30,40 g/L)的EGCG,对照组加入不含药物的培养基,Multicycle软件分析G1/G0期、S期和G2/M期细胞所占比例。 主要观察指标：①不同剂量EGCG在不同时间点对牛主动脉内皮细胞生长、增殖的影响。②运用直线回归分析EGCG对牛主动脉内皮细胞抑制的IC50。③流式细胞仪检测EGCG对内皮细胞周期分布的影响。 结果：①EGCG呈剂量及时间依赖性抑制内皮细胞的增殖：EGCG作用12 h后,细胞抑制率达高峰,此后其抑制率逐渐下降(P < 0.05);从10 g/L起,EGCG对内皮细胞增殖的抑制效应逐渐增加,40 g/L即达高峰(P < 0.05);40 g/L与80 g/L剂量组相比,抑制率无明显差异(P > 0.05)。②在3,6,12,24 h和36 h等时间点EGCG的IC50分别为23.14,18.79,13.23,14.19,17.45 g/L,IC50在12 h达高峰,时间继续延长,作用并不增加。③各组G2/M期细胞所占比率无明显差异(P > 0.05)。S期细胞比率由(58.02±1.21)%下降为(27.62±3.12)%,其中30 g/L和40 g/L剂量组与对照组相比,差异有显著性意义(P < 0.01)。G0/G1期细胞比率由(29.22±3.21)%上升到(62.32±4.11)%,其中30 g/L和40 g/L剂量组与对照组相比,差异有显著性意义(P < 0.01)。 结论：EGCG在体外能有效抑制牛主动脉内皮细胞增殖,且使其周期主要受阻于G0/G1期,可能是其抑制内皮细胞增殖的机制之一。     

厄贝沙坦对溶血磷脂酰胆碱所致人静脉内皮细胞损害的影响

目的 观察厄贝沙坦（Irbesartan,Irb）对由溶血磷脂酰胆碱（Lysophosphatidyl choline,LPC）所致人脐静脉内皮细胞（Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）损害的影响。方法 体外培养HUVECs,分为（1）正常对照组;（2）低浓度LPC组（10μg/L）;（3）中浓度LPC组（20μg/L）;（4）高浓度LPC组（40μg/L）;（5）Irb对照组（含LPC20μg/L）;（6）低浓度Irb组(10-7μmol/L+LPC20μg/L);（7）中浓度Irb组(10-6μmol/L+LPC20μg/L);（8）高浓度Irb组(10-5μmol/L+LPC20μg/L)。采用放免及RT-PCR法分别观测LPC对HUVECs血管紧张素II(Angiotensin II,ATII)蛋白及AT1型受体（Angontensin II 1 receptor,AT1R）、AT2型受体（Angontensin II2 receptor,AT2R）mRNA（messenger Ribonucleic Acid）的表达的影响;采用化学比色法测定一氧化氮（NO）含量,一氧化氮合酶（NOS）及超氧化物歧化酶（SOD）活性;并观测使用Irb干预后的效果。结果 与正常对照组相比,LPC使HUVECs ATII蛋白及AT1RmRNA的表达显著增加,使NO含量、NOS及SOD活性显著下降;经Ibr干预后显著增加了HUVECs NO含量、NOS及SOD的活性。结论 Irb可以对LPC所致的内皮细胞损害发挥部分保护作用。     

构建内皮型一氧化氮合酶真核表达载体及在内皮细胞的表达

背景：内皮型一氧化氮合酶表达产物对内皮细胞的影响是血管外科基础研究中的重要课题，对于生物人工血管的研制有重要意义。 目的：构建内皮型一氧化氮合酶基因真核表达载体pcDNA3.1/eNOS，以脂质体为介导观察其在血管内皮细胞中的转染效率，评价表达产物内皮型一氧化氮合酶的酶学活性及其对内皮细胞生长的影响。 设计、时间及地点：单一样本观察，实验于2005-07/2007-05在南京大学医学院附属鼓楼医院生物化学实验室完成。 材料：质粒PCMV-eNOS由勋阳医学院张群林教授惠赠。pcDNA3.1真核表达载体由南京大学博士后贾立军馈赠，pcDNA3.0/EGFP质粒由戚金亮博士提供。大肠杆菌DH5a和人脐静脉内皮细胞株(ECV304)为南京大学生物系保存。 方法：采用分子生物学技术，先用限制性核酸内切酶EcorⅠ酶切质粒PCMV/eNOS,电泳回收3.6 kb编码人内皮型一氧化氮合酶cDNA序列，克隆入质粒pcDNA3.1的EcorⅠ酶切位点，通过内皮型一氧化氮合酶cDNA序列中的XhoⅠ酶切位点筛选其插入载体的方向，构建pcDNA3.1/eNOS重组质粒。以Lipofec-tamine为介导将其与pcDNA3.0/EGFP共转染分离培养的人脐静脉内皮细胞(ECV304)。 主要观察指标：①观察转染后对ECV304生长的影响，在流式细胞仪和荧光显微镜下计算转染效率。②以反转录-聚合酶链反应和免疫组织化学检测内皮型一氧化氮合酶基因的表达，测定内皮型一氧化氮合酶活性以及一氧化氮产量。③观察施加不同因素（L-精氨酸、氯化钙、乙二胺四乙酸、L-NAME）对内皮型一氧化氮合酶活性及一氧化氮合成的影响；同时检测此时ECV304生长所受影响。 结果：以脂质体为介导转染人脐静脉ECV304后，其转染效率为(32.6±2.6)%，反转录-聚合酶链反应和免疫组织化学检测到相应的内皮型一氧化氮合酶mRNA和蛋白表达，与对照组有明显差别；同时在上述不同因素影响下内皮型一氧化氮合酶活性出现明显差别；随着培养液一氧化氮浓度升高，ECV304生长曲线下降。 结论：成功构建pcDNA3.1/eNOS，在脂质体介导下能高效转染ECV304并良好表达，Ca2+是内皮型一氧化氮合酶的必要激活条件，ECV304的增生受到高浓度一氧化氮抑制。     

西洛他唑对人血管内皮细胞增殖及P38MAPK表达的抑制作用

目的 观察西洛他唑(CLZ)对体外培养的血管内皮细胞(VEC)增殖和磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)表达的影响.方法 体外培养人脐静脉血管内皮细胞饵(HUVECs)株EA.hy926,应用10、30、100、300 μmo/L CLZ作用24h(同时设空白对照组)后采用MTT法检测HUVECs的增殖状态,Western blotting检测细胞磷酸化P38MAPK蛋白的表达.结果 与空白对照组比较,30、100、300 μmo/L CLZ组细胞A值降低,且30、100、300μmo/L CLZ组之间比较细胞A值依次降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);与空白对照组比较,30、100、300 μmol/L CLZ组细胞磷酸化P38MAPK蛋白的表达下降,且300 μmol/L CLZ组细胞磷酸化P38MAPK蛋白表达低于30μmol/L CLZ组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 CLZ对体外培养的VEC增殖和磷酸化P38MAPK蛋白的表达均有明显的抑制作用.     

低强度氦氖激光对内皮细胞增殖与ICAM-1的影响

应用低强度激光辐照体外培养的血管内皮细胞并观测其对内皮细胞增殖与细胞间粘附分子 (ICAM- 1)表达变化的规律 ,从细胞与分子水平揭示低强度激光辐照疗法的治疗机制。1　材料与方法1.1　内皮细胞培养　取体重为 180± 2 0 g健康 Wistar大鼠的腹主动脉段 ,切成 2× 2 m m小动脉片 ,贴入灭菌的5 0 m l培养瓶中 ,加塞后侧立置于 3 7℃、5 % CO2 培养箱中培养 ,将长成单层的原代内皮细胞消化后 ,加入 12 m l含有15 %胎牛血清的 M199培养基 ,加入另 1个 5 0 m l的培养瓶中 ,继续培养。1.2　鉴定是否为内皮细胞　血管内皮细胞具有合成与释放…     

氧合血红蛋白对脑微血管内皮细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨氧合血红蛋白（OxyHb）对体外培养的大鼠脑微血管内皮细胞增殖和凋亡的影响。方法 将原代培养的大鼠脑血管内皮细胞与不同浓度的氧合血红蛋白共孵育,以MTT法检测脑血管内皮细胞的存活率;将氧合血红蛋白与脑血管内皮细胞共培养,以流式细胞仪和Hochest33258荧光染色法检测细胞凋亡的情况。结果 氧合血红蛋白能显著抑制血管内皮细胞的增殖,与对照相比存在统计学意义,能显著诱导血管内皮细胞凋亡。结论 在一定浓度范围内的OxyHb能够明显抑制原代培养的脑血管内皮细胞增殖并引起凋亡,提示SAH后内皮细胞凋亡可能是发生CVS的原因之一。     

低强度氦氖激光对内皮细胞增殖与ICAM-1的影响

目的 研究低强度氮氖激光对内皮细胞增殖与内皮细胞间黏附分子(Intercellular Adhe-sio Molecule-1,ICAM一1)表达的影响。方法 应用不同功率低强度氮氖激光辐照体外培养的血管内皮细胞，采用噻唑蓝(MTT)比色法研究内皮细胞的增殖情况，用免疫组化方法观测其ICAM一1的变化。结果 在辐照后48小时、72小时、96小时发现，随着辐照次数与辐照时间的延长，反映内皮细胞增殖的光密度(OD)值逐渐变高，其增高无统计学意义(P＜0．05)；内皮细胞ICAM一1表达则逐渐减低。结论 经低强度氮氖激光辐照后，内皮细胞没有出现增殖，但能抑制内皮细胞ICAM一1表达。     

Alkylindole‐sensitive receptors modulate microglial cell migration and proliferation

Ligands targeting G protein‐coupled receptors (GPCR) expressed by microglia have been shown to regulate distinct components of their activation process, including cell proliferation, migration and differentiation into M1 or M2 phenotypes. Cannabinoids, including the active component of the Cannabis plant, tetrahydrocannabinol (THC), and the synthetic alkylindole (AI) compound, WIN55212‐2 (WIN‐2), activate two molecularly identified GPCRs: CB₁ and CB₂. Previous studies reported that WIN‐2 activates an additional unknown GPCR that is not activated by plant‐derived cannabinoids, and evidence indicates that microglia express these receptors. Detailed studies on the role of AI‐sensitive receptors in microglial cell activation were difficult as no selective pharmacological tools were available. Here, three newly‐developed AI analogues allowed us to determine if microglia express AI‐sensitive receptors and if so, study how they regulate the microglial cell activation process. We found that mouse microglia in primary culture express functional AI‐sensitive receptors as measured by radioligand binding and changes in intracellular cAMP levels, and that these receptors control both basal and ATP‐stimulated migration. AI analogues inhibit cell proliferation stimulated by macrophage‐colony stimulating factor (M‐CSF) without affecting basal cell proliferation. Remarkably, AI analogues do not control the expression of effector proteins characteristic of M1 or M2 phenotypes; yet activating microglia with M1 and M2 cytokines reduces the microglial response to AI analogues. Our results suggest that microglia express functional AI‐sensitive receptors that control select components of their activation process. Agonists of these novel targets might represent a novel class of therapeutics to influence the microglial cell activation process. GLIA 2015;63:1797–1808     

肿瘤血管内皮细胞对胶质瘤细胞侵袭力的影响

目的 探讨胶质瘤血管内皮细胞(GVEC)在胶质瘤瘤细胞浸润过程中的作用.方法 通过免疫磁珠分离肿瘤血管内皮细胞,Tanswell 研究内皮细胞对胶质瘤细胞的迁徙和侵袭能力.结果 将内皮细胞与胶质瘤细胞共同培养后能显著增加其迁徙和侵袭能力,并能增加MMP-2,9 蛋白的表达.结论 血管内皮细胞与胶质瘤浸润的过程密切相关,通过增加MMP-2,9 蛋白的表达提高浸润的能力.     

In vitro effects of hyperlipoproteinemic sera on human endothelium: Inhibition of endothelial cell migration by familial hypercholesterolemic sera

Since hyperlipoproteinemia is associated with an increased risk of atherosclerosis we have evaluated the effects of sera of different hyperlipoproteinemic clinical patterns on human endothelial cells in vitro. Cultured human umbilical vein endothelial cells were treated with sera from 2 patients homozygous for familial hypercholesterolemia and 4 patients heterozygous for that disorder. Familial hypercholesterolemic sera inhibited endothelial cell migration by 50% during a 72 hour incubation (p <0.0001) compared to normal pooled human serum or single donor AB serum when measured by an agarose gel technique. The inhibition of migration was not observed when cells were treated with familial combined hyperlipidemic sera (4 patients) or familial hypertriglyceridemic sera (5 patients). Endothelial cell detachment in vitro was not induced by any of the classical patterns of hyperlipoproteinemic sera tested. The development of atherosclerosis in familial hypercholesterolemia may be in part related to an impairment of endothelial repair.     

胶质瘤干细胞来源的外泌体对血管内皮细胞增殖和迁移的影响

目的探讨胶质瘤干细胞(glioma stem cells,GSCs)来源的外泌体对人脑微血管内皮细胞(HBMECs)的增殖和迁移的影响。方法培养和分离人胶质瘤U87细胞系来源的胶质瘤干细胞(GSCs),对培养的肿瘤球细胞及其诱导分化的细胞采用免疫组织化学染色的方法鉴定。然后提取胶质瘤干细胞分泌的外泌体(GSCs-exo),分别添加不同浓度的GSCsexo (20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml)处理人脑微血管内皮细胞(HBMECs)。在处理结束后,采用CCK-8法检测GSCs-exo对血管内皮细胞增殖的影响、Transwell小室检测GSCs-exo对细胞迁移能力的影响。结果肿瘤球细胞培养状态下呈悬浮生长,免疫组织化学荧光染色法证明培养的肿瘤球细胞中特异性表达CD133和Nestin,其诱导分化的细胞染色可见GFAP和Neun表达阳性。随着GSCs-exo浓度的升高,促血管内皮细胞的增殖能力逐渐增强,迁移能力也大大提高(P 0. 05)。结论在胶质瘤微环境中,胶质瘤干细胞来源的外泌体可以促进血管内皮细胞的增殖和迁移,GSCs-exo可能是胶质瘤血管形成的关键因素。     

Comparison of electric field modeling pipelines for transcranial direct current stimulation

ObjectivesElectric field modeling utilizes structural brain magnetic resonance images (MRI) to model the electric field induced by non-invasive transcranial direct current stimulation (tDCS) in a given individual. Electric field modeling is being integrated with clinical outcomes to improve understanding of inter-individual variability in tDCS effects and to optimize tDCS parameters, thereby enhancing the predictability of clinical effects. The successful integration of modeling in clinical use will primarily be driven by choice of tools and procedures implemented in computational modeling. Thus, the electric field predictions from different modeling pipelines need to be investigated to ensure the validity and reproducibility of tDCS modeling results across clinical or translational studies.MethodsWe used T1w structural MRI from 32 healthy volunteer subjects and modeled the electric field distribution for a fronto-temporal tDCS montage. For five different computational modeling pipelines, we quantitatively compared brain tissue segmentation and electric field predicted in whole-brain, brain tissues and target brain regions between the modeling pipelines.ResultsOur comparisons at various levels did not reveal any systematic trend with regards to similarity or dissimilarity of electric field predicted in brain tissues and target brain regions. The inconsistent trends in the predicted electric field indicate variation in the procedures, routines and algorithms used within and across the modeling pipelines.ConclusionOur results suggest that studies integrating electric field modeling and clinical outcomes of tDCS will highly depend upon the choice of the modeling pipelines and procedures. We propose that using these pipelines for further research and clinical applications should be subject to careful consideration, and indicate general recommendations.     

恒定磁场中大鼠成骨细胞的增殖和功能活性

背景：磁场对成骨细胞生物学的影响存在一定的分歧。 目的：探讨不同强度恒定磁场作用不同时间后成骨细胞增殖和功能活性的改变。 方法：用体外培养的SD大鼠成骨细胞第3~5代分别在0,5,22,86,135 mT恒定磁场下培养,观察8,12,24 h后细胞增殖和凋亡变化及细胞上清液中骨钙素及Ⅰ型前胶原C端前肽的表达。 结果与结论：磁场作用8,12 h后,5,22,86,135 mT磁场培养的细胞增殖指数均高于对照组(P < 0.05),作用24 h时,仅5 mT组高于对照组(P < 0.05)。而0,5,22,86,135 mT恒定磁场下培养8,12,24 h的凋亡百分数差异无显著性意义。磁场作用8 h后,22,86,135 mT组骨钙素分泌量均高于对照组(P < 0.05);作用24 h后,135 mT组骨钙素分泌量则明显低于对照组(P < 0.05);而磁场作用8,12 h后,22,86 mT组Ⅰ型前胶原C端前肽分泌量明显高于对照组(P < 0.05),作用24 h后,135 mT组Ⅰ型前胶原C端前肽分泌量则明显低于对照组(P < 0.05)。表明低强度磁场、短时间作用可促进成骨细胞的增殖及成骨物质的分泌,而高强度磁场或磁场暴露时间过长则抑制成骨细胞增殖及成骨物质的分泌。     

Hax-1对胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的作用

目的 探讨造血干细胞特异性相关结合蛋白-1(Hax-1)对胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 选择2018年9月至2019年6月手术切除并得到术后病理证实的胶质瘤组织35例和颅脑损伤内减压术切除的正常脑组织35例,采用qRT-PCR检测Hax-1 mRNA水平;同时检测胶质瘤细胞系(U87、A172、T98及U34...     

Lithium promotes proliferation and suppresses migration of Schwann cells

Schwann cell proliferation,migration and remyelination of regenerating axons contribute to regeneration after peripheral nervous system injury.Lithium promotes remyelination by Schwann cells and improves peripheral nerve regeneration.However,whether lithium modulates other phenotypes of Schwann cells,especially their proliferation and migration remains elusive.In the current study,primary Schwann cells from rat sciatic nerve stumps were cultured and exposed to 0,5,10,15,or 30 mM lithium chloride(LiCl)for 24 hours.The effects of LiCl on Schwann cell proliferation and migration were examined using the Cell Counting Kit-8,5-ethynyl-2′-deoxyuridine,Transwell and wound healing assays.Cell Counting Kit-8 and 5-ethynyl-2′-deoxyuridine assays showed that 5,10,15,and 30 mM LiCl significantly increased the viability and proliferation rate of Schwann cells.Transwell-based migration assays and wound healing assays showed that 10,15,and 30 mM LiCl suppressed the migratory ability of Schwann cells.Furthermore,the effects of LiCl on the proliferation and migration phenotypes of Schwann cells were mostly dose-dependent.These data indicate that lithium treatment significantly promotes the proliferation and inhibits the migratory ability of Schwann cells.This conclusion will inform strategies to promote the repair and regeneration of peripheral nerves.All of the animal experiments in this study were ethically approved by the Administration Committee of Experimental Animal Center of Nantong University,China(approval No.20170320-017)on March 2,2017.     

Long-term administration of scopolamine interferes with nerve cell proliferation,differentiation and migration in adult mouse hippocampal dentate gyrus,but it does not induce cell death

Long-term administration of scopolamine, a muscarinic receptor antagonist, can inhibit the survival of newly generated cells, but its effect on the proliferation, differentiation and migration of nerve cells in the adult mouse hippocampal dentate gyrus remain poorly understood. In this study, we used immunohistochemistry and western blot methods to weekly detect the biological behaviors of nerve cells in the hippocampal dentate gyrus of adult mice that received intraperitoneal administration of scopolamine for 4 weeks. Expression of neuronal nuclear antigen(Neu N; a neuronal marker) and Fluoro-Jade B(a marker for the localization of neuronal degeneration) was also detected. After scopolamine treatment, mouse hippocampal neurons did not die, and Ki-67(a marker for proliferating cells)-immunoreactive cells were reduced in number and reac hed the lowest level at 4 weeks. Doublecortin(DCX; a marker for newly generated neurons)-immunoreactive cells were gradually shortened in length and reduced in number with time. After scopolamine treatment for 4 weeks, nearly all of the 5-bromo-2′-deoxyuridine(Brd U)-labeled newly generated cells were located in the subgranular zone of the dentate gyrus, but they did not migrate into the granule cell layer. Few mature Brd U/Neu N double-labeled cells were seen in the subgranular zone of the dentate gyrus. These findings suggest that long-term administration of scopolamine interferes with the proliferation, differentiation and migration of nerve cells in the adult mouse hippocampal dentate gyrus, but it does not induce cell death.