大黄素对糖尿病大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的探讨大黄素对糖尿病大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病对照组、糖尿病大黄素治疗组,经大黄素治疗糖尿病大鼠2,4和8周后,分别观察大鼠血肌酐及24 h尿蛋白定量,以及肾脏MCP-1表达的变化。结果与正常对照组相比,糖尿病大鼠的24 h尿蛋白以及肾组织MCP-1表达显著增加,经大黄素治疗后上述指标在一定程度上有所减轻。结论糖尿病时MCP-1表达增加,大黄素可能通过抑制糖尿病大鼠肾脏MCP-1表达而达到延缓糖尿病肾病的进展。     

大黄素对高糖培养的GMC增殖、FN表达及p38MAPK的影响

目的本研究旨在观察大黄素对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞(GMC)的增殖与细胞外基质的主要成分——纤维连接蛋白(FN)表达的影响,观察大黄素对高糖培养的p38MAPK信号转导通路的影响,以探讨大黄素调节p38MAPK信号通路抗糖尿病肾脏纤维化的分子作用机制。方法 MTT比色法检测细胞活力;流式细胞仪检测细胞周期分布;Western blot方法检测FN、p-p38MAPK蛋白表达情况。结果高糖能够诱导大鼠GMC增殖、上调FN的表达以及促进p38MAPK活化,与正常培养组相比差异有统计学意义(P<0.05);大黄素可以抑制高糖诱导的大鼠GMC增殖、FN表达与p38MAPK活化,与高糖组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论大黄素抗糖尿病肾脏纤维化的作用可能与大黄素抑制p38MAPK信号通路密切相关。     

通心络胶囊对糖尿病小鼠视网膜组织LN和FN表达的影响

目的探讨通心络胶囊对糖尿病小鼠视网膜组织纤维粘连蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)表达的影响。方法 40只KK/Upj-Ay小鼠分为模型组与通心络高、中、低剂量(4、2、1 g/kg)组,每组10只,灌胃途径给药,持续12周;另取10只C57BL/6小鼠作正常对照组。应用RT-PCR法检测各组小鼠视网膜组织中FN、LN的mRNA表达;Western blot法检测视网膜组织中FN、LN蛋白的表达。结果与对照组相比,模型组小鼠视网膜组织LN、FN mRNA和蛋白表达均明显增高(P<0.05),通心络低、中、高各剂量组LN、FN mRNA和蛋白表达水平均较模型组明显下降(P<0.05)。结论通心络胶囊可通过抑制糖尿病小鼠视网膜组织LN、FN的表达从而改善视网膜病变。     

维生素C保护糖尿病大鼠主动脉的作用机制

目的：观察维生素C对糖尿病大鼠血脂和主动脉纤维连接蛋白（FN）表达的影响。方法：利用链脲佐菌素腹腔注射法诱导建立1型糖尿病大鼠模型，将用实验SD大鼠随机分正常对照组、造模组（包括糖尿病组和维生素C治疗组）。治疗16周，观察治疗期间及治疗后大鼠的一般状况、血糖（BG）、三酰甘油（TG）、胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、糖化血红蛋白（HbA1c）和糖化低密度脂蛋白（G-LDL）。大鼠麻醉处死，分离主动脉，HE染色及免疫组织化学检测主动脉内膜FN表达。结果：造模组大鼠均出现血脂异常及主动脉病理形态改变。维生素C对血糖无影响，但能降低糖尿病大鼠的三酰甘油、胆固醇、LDL、HbA1c、G—LDL，升高HDL，且能降低主动脉纤维连接蛋白表达。结论：维生素C无降糖作用，但可通过调节血脂，抑制主动脉纤维连接蛋白表达对糖尿病大鼠主动脉起到保护作用。     

糖尿病大鼠肾间质TGF-β1表达与细胞外基质沉积的关系

目的：了解糖尿病（DM）大鼠肾间质转化生长因子－β1（TGF－β1）表达与纤维粘连蛋白（FN）和胶原Ⅲ型（ColⅢ)沉积的关系。方法：四氧嘧啶复制糖尿病模型，免疫组化法检测肾间质TGF－β1、FN和ColⅢ,PAS染色观察肾组织形态学改变。结果：正常肾间质和糖尿病1周，可见FN和ColⅢ,但未见TGF－β1表达，糖尿病2周开始肾小管见TGF－β1表达，并随疾病进展而逐渐增多。糖尿病1月肾间质中见FN和ColⅢ沉积开始增多，2月时更多，FN和ColⅢ增多与TGF－β1呈正相关。结论：TGF－β1促进糖尿病大鼠肾小管间质FN和ColⅢ的沉积。     

糖尿病大鼠视网膜组织中缺氧诱导因子-1α、内皮素-1的表达研究

目的检测缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）与内皮素-1（ET-1）在糖尿病视网膜组织中的表达变化,探讨其在糖尿病视网膜病变（DR）发生、发展中的作用。方法将SD大鼠随机分为对照组（CON）和糖尿病（DM）组。其中糖尿病组采用STZ一次性尾静脉注射建立糖尿病模型,制模成功后分别于2、4、8、12周处死大鼠,取眼球组织,应用免疫组化和放免法检测各组大鼠视网膜组织中HIF-1α、ET-1的表达变化。结果免疫组织化学染色显示正常对照组大鼠视网膜不表达HIF-1α,DM组2周时有少量表达,4周时阳性细胞数量增多,8周达到高峰,12周时表达已降低,各组之间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。经放免法测定,对照组大鼠视网膜组织中仅有少量ET-1,而DM组大鼠随病程延长,视网膜组织中的ET-1含量呈进行性增加。各组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论HIF-1α与其下游基因ET-1在DM病程中的表达变化提示二者可能与视网膜组织的损伤有关,并在DR的发生、发展中发挥重要作用。     

海藻提取物对病毒诱导的1型糖尿病中Vβ13基因表达和Treg细胞的影响

目的：测定巨细胞病毒（KRV）感染大鼠脾淋巴细胞中Vβ13mRNA和Treg细胞的表达,以及海藻提取物对1型糖尿病的治疗效果。方法40只大鼠随机分为两组。使用与KRV组合的大鼠巨细胞病毒建立1型糖尿病大鼠模型。治疗组中的大鼠用海藻提取物每天治疗40天,而实验组给予相同量的无菌盐水。通过RT-PCR评估脾脏中Vβ13mRNA的表达,并通过流式细胞术（FCM）检测CD4 CD25 Treg细胞。通过HE染色检测脾细胞中Vβ13mRNA的表达。结果：在实验组中,90％的大鼠患有糖尿病（18/20）,平均血糖水平为3.15g / L。实验组Vβ13的表达高于治疗组。实验组中CD25 Treg细胞的比例为6.2％,治疗组为13.5％（P <0.05）。结论病毒性糖尿病早期Vβ13mRNA的表达显着高于实验组,CD4 CD25 Treg细胞比例较低。海藻提取物增加Treg细胞表达可以用于治疗糖尿病。     

西洛他唑对糖尿病大鼠视网膜ICAM-1和VCAM-1的影响及其机制

 目的：观察西洛他唑对糖尿病大鼠视网膜细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响,并探讨其可能的作用机制。方法：以链脲佐菌素（STZ）诱发大鼠糖尿病。大鼠被随机分为正常对照组、糖尿病模型对照组、西洛他唑高剂量（27 mg?kg-1?d-1）和低剂量（9 mg?kg-1?d-1）组。西洛他唑治疗12周后测定血糖和糖化血红蛋白（HbAlc）;利用RT-PCR和Western blot技术检测视网膜组织中ICAM-1,VCAM-1,过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ) mRNA和蛋白质的表达。结果：与糖尿病模型对照组相比,西洛他唑能显著降低ICAM-1和VCAM-1 mRNA以及蛋白表达水平;西洛他唑治疗后,PPAR-γ mRNA和蛋白表达水平明显提高。结论：西洛他唑降低糖尿病大鼠视网膜ICAM-1和VCAM-1表达的作用可能与上调PPAR-γ有关。     

葫芦巴总皂苷对链脲佐霉素诱导的糖尿病大鼠血小板活化的调节作用

目的:观察葫芦巴总皂苷(TFGs)对链脲佐霉素(STZ)诱导的糖尿病大鼠血小板活化的调控作用。方法:将正常大鼠和糖尿病大鼠随机分为未治疗对照组、治疗对照组、未治疗糖尿病组和治疗糖尿病组。两治疗组采用TFGs治疗4周。治疗结束后,分别检测大鼠体质量、血糖和胰岛素水平,采用流式细胞术检测各组大鼠血小板膜P选择素(CD62P)的表达,采用比浊法检测各组大鼠血小板最大聚集率。结果:与正常大鼠相比,糖尿病大鼠血糖明显升高,体质量和胰岛素水平显著下降,糖尿病大鼠经TFGs治疗后体质量明显增加,血糖下降,胰岛素水平升高;糖尿病大鼠血小板CD62P表达和血小板聚集率明显增高,经TFGs治疗后明显降低。结论:TFGs具有明显抑制STZ糖尿病大鼠血小板活化作用,是一种具有防治糖尿病血管病变作用的降糖药物。     

1型糖尿病患者T细胞亚群和共刺激分子的表达及其意义

目的：动态观察1型糖尿病患外周血T淋巴细胞亚群及CD28、CD80等共刺激分子的表达，探讨其在1型糖尿病发病中的作用。方法：应用免疫荧光标记技术和流式细胞仪，检测17例正常对照组及37例1型糖尿病患外周血T细胞亚群、CD28、CD80、人类白细胞抗原（HLA－DR）分子的表达，并进行随访。结果：（1）1型糖尿病组外周血CD4^ 、CD4^ CD28^ T细胞的百分率增加，CD8^ 、CD8^ CD28^ T细胞显降低，CD28、CD80、HLA－DR的表达也增加，与正常组比，差异均有显性。（2）经胰岛素治疗6个月后随访，T细胞亚群的失衡、共刺激分子的异常表达得到不同程度的改善，但CD4^ CD28^ 、CD8^ CD28^ T细胞、HLA－DR表达仍未恢复正常。结论：共刺激分子CD28、CD80及HLA－DR的异常表达、T细胞亚群的异常激活、增殖在1型糖尿病的发生、发展中起着重要的作用，监测其变化，为临床上免疫调节治疗，提供了理论依据。     

糖尿病大鼠视网膜中IGF-1的动态表达及巴曲酶对其的影响

目的探讨胰岛素样生长因子（IGF-1）在糖尿病大鼠视网膜中的动态变化规律，初步证实巴曲酶对IGF-1的影响并探讨其机制，为临床上治疗糖尿病视网膜病变（DR）提供理论依据。方法将大鼠腹腔注射链脲佐菌素制作实验性糖尿病模型，再分别于成模后2个月和3个月时腹腔注射巴曲酶进行干预。通遏免疫组织化学和原位杂交双重检测IGF-1在视网膜中的表达。结果DM造模后2个月时视网膜中IGF-1的含量明显增加，且随时间变化有统计学差异，而巴曲酶治疗后IGF-1的表达明显增加。结论DR大鼠视网膜中IGF-1表达增加可能参与DR的发病机制。巴曲酶对DR有保护作用，其机制可能包括对IGF-1的调节。     

小檗碱对高脂合并STZ诱导的糖尿病肾病大鼠肾脏FN与CTGF表达的影响

目的探讨小檗碱(berberine,BBR)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾病变的保护作用及其部分机制。方法以高脂饲料喂养联合低剂量链脲佐菌素(STZ)诱导DN大鼠模型,动物分为正常对照组、模型组、3个BBR治疗组、依那普利治疗组、消渴丸治疗组。给药8周后取大鼠肾脏,Masson染色观察肾组织形态学改变;免疫组织化学检测肾组织纤维连接蛋白(FN)与结缔组织生长因子(CTGF)的表达。结果与模型组比较,BBR可改善DN大鼠肾脏形态学异常,降低肾组织中FN与CTGF的表达。结论 BBR可延缓糖尿病大鼠肾脏损伤,此作用可能与下调肾脏组织FN与CTGF的表达有关。     

柴胡桂枝汤对肝纤维化大鼠FN、a-SMA表达的影响

目的：观察柴胡桂枝汤对肝纤维化大鼠纤维连接蛋白（FN）和a．平滑肌动蛋白（a-SMA）表达的影响。方法：采用CCI．复合法制备肝纤维化大鼠模型；用免疫组化方法观察实验动物模型肝脏中FN、a-SMA表达的情况。结果：柴胡桂枝汤可抑制肝纤维化大鼠肝脏中FN、a-SMA的表达，中药中等浓度组FN和a-SMA的表达水平明显低于模型组、中药高剂量组、中药低剂量组和西药对照组，具有极显著性差异（P〈O．01）。结论：柴胡桂枝汤能够有效的控制纤维化肝脏中FN、a-SMA的高表达。抑制HSC活化，具有抗肝纤维化的作用。     

三七三醇皂苷对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞的保护作用

【摘要】目的探讨三七三醇皂苷（PTS）对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞（RGC）的保护作用及机制。方法SD大鼠随机分为对照组、糖尿病组及治疗组,糖尿病组及治疗组腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病动物模型,治疗组给予PTS50mg·kg-1·d-1灌胃,1个月后免疫荧光组化双标检测Nogo受体与RGC特异性标志物Brn3a的共存情况,Western blot检测视网膜Nogo受体表达,试剂盒检测视网膜丙二醛（MDA）含量,HE染色观察RGC数量。结果Brn3a与Nogo受体于视网膜内大量共存。与对照组相比,糖尿病组视网膜Nogo受体表达上调,MDA含量增加,RGC数量减少（均P＜0.001）;与糖尿病组相比,治疗组视网膜Nogo受体表达减少,MDA含量降低,RGC数量增加（P＜0.001）。结论PTS可能通过抑制糖尿病大鼠视网膜RGC内Nogo受体的表达,抑制视网膜氧化应激,从而保护糖尿病视网膜RGC。     

枸杞多糖对2型糖尿病大鼠视网膜炎症因子表达的影响

目的探讨枸杞多糖对2型糖尿病大鼠模型视网膜炎症因子表达的影响。方法大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,盐酸二甲双胍阳性对照组,枸杞多糖(LBP)高、中、低剂量组。除正常对照组外,其余各组均以高糖高脂饲料加链脲佐菌素复制2型糖尿病大鼠模型,治疗结束后,用酶联免疫(ELISA)法检测各组大鼠视网膜组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),C反应蛋白(CRP)浓度。结果与正常对照组相比,2型糖尿病模型组大鼠视网膜TNF-α,IL-6,CRP浓度均明显升高(P<0.05);与2型糖尿病模型组比较,LBP高剂量组大鼠视网膜TNF-α浓度显著降低(P<0.01),LBP高、中剂量组大鼠视网膜IL-6浓度明显降低(P<0.05),LBP高、中剂量组大鼠视网膜CRP浓度显著降低(P<0.01)。结论 LBP可能通过调节视网膜组织的TNF-α,IL-6,CRP水平,减少血-视网膜屏障炎症因子的表达,从而有效改善2型糖尿病视网膜病变炎症。     

羟苯磺酸钙改善糖尿病大鼠视网膜病变及其机制研究

目的观察羟苯磺酸钙对糖尿病大鼠视网膜病变的影响并探讨其机制.方法以65 mg/kg一次性ip链脲佐菌素诱导糖尿病模型,将糖尿病模型大鼠分为模型组、复方血栓通组(1.05 g/kg)和羟苯磺酸钙组(0.334 g/kg),另设对照组,均ig给药,1次/d,对照组给予等剂量蒸馏水,共12周.采用Real-time PCR法检测Ⅳ型胶原及血管内皮生长因子(VEGF) mRNA 在视网膜组织中的表达;光镜下观察视网膜血管形态学改变,测定视网膜毛细血管面积密度;透视电镜观察大鼠视网膜超微结构.结果与对照组比较,模型组大鼠视网膜Ⅳ型胶原mRNA表达升高(P<0.05),VEGF mRNA升高(P<0.01),毛细血管面积密度显著增高(P<0.001).与模型组比较,羟苯磺酸钙组大鼠视网膜Ⅳ型胶原mRNA、VEGF mRNA表达和毛细血管面积密度均降低(P<0.05).结论 羟苯磺酸钙能下调视网膜中Ⅳ型胶原、VEGF的表达,抑制纤维组织增生和血管新生,从而改善糖尿病视网膜病变.     

缬沙坦对2型糖尿病模型大鼠 肾组织巨噬细胞浸润的影响

［摘要］目的探讨缬沙坦对糖尿病模型大鼠肾组织单核/巨噬细胞（MO/Mφ）浸润的影响。方法应用高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素（streptozotocin，STZ）诱导建立单侧肾切除2型糖尿病模型大鼠，随机分为：单切对照组、糖尿病模型组、缬沙坦治疗组各10只，8周末检测各组大鼠尿清蛋白排泄率（UAER）、血糖（BG）、血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）、内生肌酐清除率（Ccr）等变化；应用免疫组化技术检测各组肾组织中单核细胞趋化蛋白 1 （MCP 1）与CD68的表达。结果缬沙坦治疗组大鼠肾重/体重、Scr、BUN、UAER明显低于模型组（P＜0.05）；模型组肾组织MCP 1的表达及CD68阳性细胞数明显高于对照组（P＜0.01）；缬沙坦治疗组可明显下调MCP 1的表达，减少CD68阳性细胞浸润（P＜0.01）。结论缬沙坦对糖尿病模型大鼠肾脏有明显保护作用，其机制可能部分与抑制肾组织MO/Mφ浸润有关。     

阿托伐他汀对活化蛋白-1和转化生长因子-β1在糖尿病大鼠肾组织表达的影响

目的：研究活化蛋白-1（AP-1）和转化生长因子-β1（TGF-β1）在糖尿病大鼠肾脏中的分子机制以及阿托伐他汀对它们的影响。方法：大鼠随机分成3组：正常对照组（C组）、糖尿病组（DM组）、糖尿病阿托伐他汀治疗组（DA组）。免疫组织化学法检测各组肾组织AP-1（c-jun）、TGF-β1及纤维连接蛋白（Fibronectin，FN）的表达，生化法测定各组血糖、总胆固醇、三酰甘油、肌酐及24h尿蛋白。结果：DM组AP-1的活性和TGF-β1的表达明显高于C组（P〈0．01），阿托伐他汀抑制AP-1活性（P〈0．05）、降低TGF-β1和FN的表达（P〈0．01）、减少24h尿蛋白排泄（P〈O．05）、改善肾功能指标及肾组织病理学损害。结论：AP-1在糖尿病肾病发生发展中具有重要作用，阿托伐他汀对AP-1和TGF-β1活性的抑制可能是其非降脂性肾脏保护作用的诸多机制之一。     

大蒜胶囊对糖尿病大鼠肾脏TGF-β_1表达影响及保护性研究

目的观察糖尿病大鼠肾脏TGF-β1表达及大蒜胶囊的治疗作用。方法采用STZ注射法制作糖尿病（DM）大鼠模型30只,随机分为正常对照组、DM组、大蒜胶囊组,各10只。灌胃给药8周后,采用免疫组化等技术测定24h尿白蛋白排泄（UAER）,肾小球滤过率（GFR）,肾皮质TGF-β1、Col-Ⅳ、FN的表达。结果（1）功能学变化：大蒜胶囊组大鼠的24hUAER和GFR显著低于DM组,差异均有统计学意义（P〈0.05）;（2）免疫组化：大蒜胶囊组大鼠肾皮质TGF-β1、FN、Col-Ⅳ的表达显著低于DM组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论与DM组相比,大蒜胶囊组24hUAER、GFR及肾体质量指数明显降低,肾皮质TGF-β、FN、Col-Ⅳ的表达程度明显减轻。     

胆汁酸膜受体TGR5对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞FN、TGF-β1的调控作用

目的探究G蛋白偶联受体TGR5在大鼠肾小球系膜细胞中的表达以及高糖条件下对纤维连接蛋白(fibronectin,FN)以及转化生长因子(transforming growth factor-β1,TGF-β1)蛋白水平的影响,探索其在糖尿病肾病中可能发挥的作用。方法高糖(30 mmol·L-1glucose,HG)条件下,用特异性激动剂INT-777激活TGR5,或者对TGR5进行过表达、干扰处理,通过Western blot来检测大鼠肾小球系膜细胞中TGR5的表达情况以及FN、TGF-β1蛋白水平的变化。结果在大鼠肾小球系膜细胞中存在TGR5的表达;与对照组相比,激活TGR5后,由高糖引起的FN、TGF-β1蛋白水平的上升受到抑制(P<0.01,P<0.05);另一方面,干扰TGR5后,FN、TGF-β1的蛋白水平与对照组相比异常升高,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论在大鼠肾小球系膜细胞中,TGR5可以抑制由高糖引起的FN、TGF-β1蛋白水平的升高,在糖尿病肾病的发生发展中可能发挥保护作用。