酶免疫法检测妊娠妇女hCG、SP_1、PAAG的研究现状及其临床应用

<正> 由于对妇女早孕、异位妊娠、妇科肿瘤等诊断和研究的需要,Midgley 等(1966年)建立了人绒毛膜促性腺激素(hCG)的放射免疫分析法(RIA)。1972年Vaitukaitis 又建立了hCG-β亚单位的RIA 技术。但总的来说,hCG-RIA 本身还存在着一定的缺点:(一)需要有放射性同位素试剂药盒,而且某些放射性试剂必须在短时期内应用;(二)放射性同位素试剂的安全防护及其处理问题;(三)仪器设备昂贵,试验费用较高。为此,近年来进一步发展了有独特优点的非同位素标记的酶免疫技术(Enzyme-Immunoassay,EIA),它与RIA 法可说是相辅相成。目前酶免疫法在精确度、准确性、灵敏度、特异性方面基本上可与RIA 相媲美,某些方面甚至超过RIA。     

组织激肽释放酶、激肽原在子痫前期患者胎盘中表达的研究

目的:研究胎盘中组织激肽释放酶、激肽原表达水平,探讨组织激肽释放酶-激肽系统在子痫前期发病中的作用。方法:采集子痫前期患者(轻度9例,重度11例)及正常妊娠妇女的新鲜胎盘标本各20例。用酶免疫分析法检测胎盘中活化型组织激肽释放酶水平,用免疫组化技术对各组胎盘中激肽原表达进行定位、定量分析。结果:子痫前期患者胎盘中活化型组织激肽释放酶水平为(2.40±0.88)×10-4ku/mg,显著低于正常妊娠妇女的(3.61±1.25)×10-4ku/mg(P<0.01),激肽原于胎盘绒毛间隙毛细血管内皮细胞表面表达,子痫前期患者胎盘组织的表达阳性率显著低于正常妊娠妇女(P<0.05),而子痫前期轻度组与重度组之间组织激肽释放酶和激肽原的表达均无显著性差异(P>0.05;P>0.05)。结论:胎盘组织激肽释放酶、激肽原低表达可能是子痫前期发生的重要原因。     

用萤火虫萤光酶测定大白鼠精子中的ATP

<正> 利用萤火虫萤光酶来测定生物体中腺核苷三磷酸(ATP)的技术,可应用于诊断疾病、环境保护、生物学研究等许多领域,本文介绍用萤光酶测定大白鼠精子中的ATP 含量,以期对男性计划生育效果评价提供一个新的指标.一原理萤火虫之所以会发光,是由于它的尾腹部有一个发光器,称为“萤火虫灯”,灯中含有发光细胞层,约有15,000个大的发光细胞,下面衬着小的发光细胞,内含尿酸盐。发光细胞中含有五种能籍以发光的物质:     

血清雌二醇水平分析方法研究进展

血清雌二醇(estradiol,E_2)水平的检测是重要的临床指标和实验评价手段。由于生物种属的差异、测定目的和测定要求的不同,所选择的分析方法也不尽相同。本文对目前血清E_24种常用的分析方法:色谱质谱联用法、放射免疫测定法、酶免疫分析法、化学发光免疫分析法进行综述和评价,以期为从事临床检测、临床研究、药学研究和分析方法开发的工作人员提供参考和依据。     

患妊娠并发症时的抗磷脂抗体

为研究抗磷脂抗体(antiphospholipid antibodies,APA)对妊娠高血压综合征(PIHS)或PIHS合并胎儿宫内发育迟缓(IUGR)的诊断意义,74例患PIHS及有严重产科病史孕妇纳入本研究,患者平均年龄29.0±0.6岁。另选25例健康孕妇为对照组。每3～4孕周用酶联免疫分析法(ELIA)检测血清APA。根据血清APA含量将74例PIHS孕妇分成两组:1组47例(63.5％)免疫球蛋白M(IgM)型和/或IgG型     

皮下埋植避孕剂埋植前后血清细胞因子的改变

目的:探讨皮下埋植避孕前后血清中相关细胞因子含量的改变及其对月经的影响。方法:用放射免疫分析法(RIA)测定31例妇女皮埋前、后血清TNFα和EGF的含量。用酶联免疫分析法(ELISA)测定IL-2、IL-4和TGF-β1的含量,并进行统计学分析。结果:皮埋后TNFα和IL-2含量象均有不同程度的经间点滴出血。结论:皮埋早期某些细胞因子的含量有一定改变,可能影响明显上升;IL-4、TGF-β1含量明显下降;EGF含量微量下降,但与皮埋前差异无显著性。研究对正常月经周期,导致经间的点滴出血及其他副作用。     

同型半胱氨酸、叶酸、维生素B12与妊娠高血压综合征发病的关系

目的探讨同型半胱氨酸(Hcys)、叶酸、维生素B12与妊娠高血压综合征(妊高征)发病的关系. 方法采用荧光偏振免疫分析法检测59例妊高征患者(妊高征组)和60例正常晚期妊娠妇女(对照组)血清中Hcys水平;并同时用微粒子酶联免疫分析法检测两组孕妇血清中叶酸、维生素B12水平. 结果 (1)妊高征组孕妇血清Hcys水平为(13.1±3.7) μmol/L,对照组孕妇为(10.4±3.9) μmol/L, 两组比较,差异有显著性( P <0.05).(2)妊高征组孕妇血清叶酸、维生素B12水平分别为(12.9±4.0) μmol/L及(339.5±115.6) μmol/L; 对照组孕妇叶酸、维生素B12水平分别为(13.7±2.5) μmol/L及(350.1±153.0) μmol/L.两组比较,差异无显著性( P >0.05). 结论 Hcys代谢异常在妊高征发病中起重要作用,叶酸、维生素B12水平与妊高征发病无直接关系.     

FGF21在PCOS患者血清中的表达及意义

目的:评价多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清中成纤维细胞因子21(FGF21)的表达,初步探讨FGF21在PCOS发病中的作用。方法:研究对象分为PCOS组和正常对照组。PCOS组分为肥胖患者和非肥胖患者。分别用酶联免疫法(ELISA)测定血清FGF21水平;采取磁酶免法测定黄体生成素(LH)、睾酮(T);应用化学发光法检测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(Ins)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)水平。结果:PCOS组FGF21表达明显高于对照组(P<0.01),并且与体重指数(BMI)、Ins(r=0.423,P<0.01;r=0.341,P<0.05)成正相关;在PCOS组中,肥胖患者血清中的FGF21水平高于非肥胖患者(P<0.05),与IR、LH(r=0.440,P=0.046;r=0.44,P=0.044)成正相关。结论:PCOS患者血清中FGF21水平明显高于对照组,在PCOS组中肥胖患者血清中FGF21水平明显高于非肥胖患者。FGF21有望成为PCOS治疗中的新突破。     

β-hCG时间分辨荧光免疫分析法的建立

目的:采用时间分辨荧光免疫分析技术建立高灵敏度、高特异性的β-hCG的快速全自动超微量检测方法。方法:以β-hCG单克隆抗体812#包被板,双功能螯合剂异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸络合Eu3+标记β-hCG单克隆抗体827#,发光增强系统为以β-二酮体为主的增强液。采用结果:特异性试验显示,与AFP、LH均无交叉反应;平均回收率为96.5%;健全性佳;50例血清β-hCG的TRFIA检测与CLIA(BeckmanAcess)分析结果一致,相关系数为0.972。结论:β-hCG时间分辨荧光免疫分析法灵敏度高、稳定性好,具有很好的临床应用前景。平衡饱和法建立β-hCG时间分辨荧光免疫分析,数据采用Logit-Log法函数数据处理程序处理。     

叶酸联合甲古胺对妊娠期高血压疾病患者高同型半胱氨酸血症的影响

目的　研究血浆总同型半胱氨酸 (tHcy)水平与妊娠期高血压疾病的关系及叶酸联合甲古胺对其的影响。方法　 2 0 0 1年 1月至 2 0 0 3年 6月广东省东莞市人民医院采用荧光偏振免疫分析法测定 16 2例妊娠期高血压疾病患者和 15 0例正常晚期妊娠妇女血浆tHcy水平 ,同时采用离子捕捉免疫分析法检测其血清叶酸水平和微粒子酶联免疫分析法检测其血清VitB1 2 水平 ,并对 36例合并高Hcy血症的患者采用叶酸联合甲古胺进行干预治疗 ,4周后再次测定其血浆tHcy水平、血清叶酸和VitB1 2 水平。结果　妊娠期高血压疾病患者血浆tHcy水平显著高于正常妊娠组 (P <0 0 1) ,血清叶酸和VitB1 2 水平显著低于正常妊娠组 (P <0 .0 5 ) ;36例合并高Hcy血症的患者治疗后血浆tHcy水平比治疗前显著下降 (P <0 0 1) ,而血清叶酸和VitB1 2 水平比治疗前则显著升高 (P <0 0 5 )。结论　高Hcy血症是妊娠期高血压疾病发病的重要因素之一 ,应用叶酸联合甲古胺治疗 ,可显著降低妊娠期高血压疾病合并高Hcy血症患者的血浆tHcy水平 ,减少高Hcy对血管的毒性作用 ,有助于改善妊娠期高血压疾病患者的疾病转归。     

人附睾分泌蛋白4在卵巢成熟畸胎瘤诊断中的临床应用价值

目的:探讨人附睾分泌蛋白4(HE4)在卵巢成熟畸胎瘤诊断中的临床应用价值.方法:选取88例卵巢成熟畸胎瘤患者(实验组)、80例健康女性(对照组),术前、术后采用酶联免疫法(ELISA)检测血清HE4水平;电化学发光免疫分析法检测血清CA 199水平.通过制作受试者工作特征曲线(ROC),以曲线下面积(AUC)反映诊断的准确性,比较HE4及CA199对卵巢成熟畸胎瘤诊断的敏感度、特异度和阳性率.结果:实验组术前血清HE4和CA 199水平分别为94.56 pmol/L和54.72 kU/L,对照组为29.13 pmol/L和15.47 kU/L,实验组均明显高于对照组,分别比较,差异有统计学意义(P ＜0.01,P＜0.05).实验组术后血清HE4和CA199水平分别为29.21 pmol/L和18.23 kU/L,术后血清HE4和CA199水平下降幅度比较,差异有统计学意义(P＜0.01).实验组检测HE4阳性率54.5％,CA 199阳性率26.1％ (P ＜0.05).血清HE4和CA199单项检测的AUC分别为0.921和0.628;特异度为95％时的敏感度分别为64.3％和21.6％;特异度分别为96.2％和88.9％.结论:HE4在卵巢成熟畸胎瘤诊断中有意义,其检测阳性率高于CA 199,诊断准确性、敏感度和特异度均优于CA199.     

早期自然流产患者绒毛KiSS-1、MMP-9和MMP-2基因及其蛋白表达

目的研究早期自然流产患者绒毛肿瘤转移抑制基因KiSS-1与基质金属蛋白酶(MMP-9、MMP-2)mRNA及蛋白的表达,探讨其与自然流产的关系。方法采用半定量RT-PCR、免疫印迹法检测30例正常早期妊娠和30例早期自然流产患者绒毛KiSS-1、MMP-9和MMP-2的mRNA及蛋白水平,用明胶酶谱分析法检测上述样本孵育液MMP-9、MMP-2的酶活性。结果(1)自然流产患者绒毛组织中MMP-9及MMP-2mRNA表达水平低于正常早期妊娠组(P<0.05),KiSS-1mRNA的表达高于正常早期妊娠组差异有统计学意义(P<0.05);(2)Westernblotting分析显示自然流产患者绒毛MMP-9、MMP-2蛋白表达低于正常早期妊娠差异有统计学意义(P<0.05),KiSS-1蛋白表达高于正常早期妊娠差异有统计学意义(P<0.05);(3)明胶酶谱分析结果显示,自然流产患者绒毛MMP-9、MMP-2酶活性低于正常早期妊娠者差异有统计学意义(P<0.05)。结论自然流产患者绒毛促浸润基因MMP-9、MMP-2mRNA及其蛋白表达水平降低,同时抑制浸润基因KiSS-1mRNA及其蛋白表达增加,造成滋养细胞浸润能力下降,可能与自然流产的发生有关。     

妊娠高血压综合征患者血清sICAM-1含量测定及其在妊高征发病中的作用

目的　探讨可溶性细胞间粘附分子 1(soluble intercellular adhesion molecule- 1,s ICAM- 1)在妊娠高血压综合征 (简称妊高征 )发病中的作用。　方法　应用酶联免疫吸附法 (EL ISA)测定 6 5例妊高征患者 (妊高征组 ,包括轻度 15例 ,中度 2 4例 ,重度 2 6例 )及 2 5例同期正常妊娠孕妇(对照组 )外周血清中 s ICAM- 1的含量 ;应用化学发光酶联免疫分析法测定两组孕妇血清中白细胞介素 1(interleukin- 1,L I- 1β)及肿瘤坏死因子 (tum or necrosing factor alpha,TNF- α)含量 ;并记录新生儿体重及妊娠结局。　结果　轻、中、重度妊高征组母血清中 s ICAM- 1的含量 [(36 8.5 6± 6 2 .81) μg/L、(6 0 6 .6 3± 10 5 .0 4 ) μg/ L、(85 9.36± 2 0 0 .92 ) μg/ L]均显著高于对照组 [(2 36 .6 9± 96 .33) μg/ L](P<0 .0 5 ,P<0 .0 1,P<0 .0 1) ,中、重度妊高征组母血清中 IL- 1β及 TNF- α的含量均显著高于对照组(P<0 .0 5 ,P<0 .0 1) ;中、重度妊高征组 s ICAM- 1的水平与相应 IL- 1β及 TNF- α的水平呈显著的正相关 (r=0 .6 97,P<0 .0 1;r=0 .74 6 ,P<0 .0 1)。重度妊高征组伴胎儿生长受限 (fetal growth restric-tion,FGR)者血中 s ICAM- 1含量显著高于同组其他孕妇之含量 (P<0 .0 5 )。妊高征组     

精子特异酶的研究现状及其免疫避孕的应用前景

<正> 精子特异酶研究是男性生育调节研究中的一个重要方面。由于它在精子发生、代谢、获能以及受精等过程中有重要意义,而且对免疫生育调节也有潜在可能,所以,对精子特异酶的研究日益得到人们的重视。近年来,免疫酶学、细胞化学、放射免疫、单克隆抗体等生化分析及制备方法的发展,使精子抗原的研究出现了全新局面。目前已发现     

孕期接触可卡因对新生儿心血管的影响

为比较慢性接触可卡因和未接触可卡因的足月新生儿的一些心血管参数,选择1992年3月～1993年3月间生后24小时内的新生儿及早产儿为研究对象。其母均为患高血压、糖尿病、甲状腺疾病、爱滋病、系统性红斑狼疮者,入ICU监护的新生儿不列入研究。调查包括产妇(87例)服用可卡因和其它药物情况,复习母子病历、新生儿生后24小时内的尿样,由酶免疫分析法检测是否含有可卡因主要代谢产物——苯甲酰爱冈宁。据产妇服用可卡因的历史     

卵巢癌细胞与成纤维细胞相互作用对明胶酶释放与活化的影响

明胶酶-A(MMP-2)和明胶酶-B(MMP-9)具有降解细胞外基质的主要成分——Ⅳ型胶原和明胶的功能，参与恶性肿瘤的侵袭与转移。有研究发现，明胶酶免疫组织化学(免疫组化)着色重的区域集中在癌巢的边缘，提示卵巢癌细胞与成纤维细胞的相互作用，对明胶酶的释放和活化产生影响。我们观察了卵巢癌细胞与成纤维细胞在非接触性和     

正常妊娠外周血组织多肽抗原与完整hCG关系的探讨

目的 :测定正常妊娠妇女外周血中组织多肽抗原 (TPA)和完整hCG的浓度 ,探讨两者变化的关系。方法 :使用TPA酶免试剂盒与双抗体夹心法定量测定血清中TPA的含量。应用时间分辨荧光免疫分析法 (time resolvedfluorescenceimmunoassay)测定hCG的浓度。结果 :正常妊娠期外周血TPA的浓度随妊娠进展逐步增加 ,晚孕期最高。与早、中孕期及非孕期比较差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。血清完整hCG浓度早孕期明显高于其它各期 (P <0 .0 5 )。结论 :外周血TPA水平随妊娠进展逐步增加可能代表滋养细胞凋亡的情况 ;hCG浓度与滋养细胞增殖相关。TPA、hCG对预测某些病理妊娠可能有帮助。     

胎母相互作用的免疫生物学及免疫病理学——第七届国际生殖免疫学会议文献综述

1988年5月底,在保加利亚滨海城市瓦尔纳召开了第七届国际生殖免疫学讨论会。与会182人,来自29个国家,宣读及发表了有关:1.配子抗原结构,2.对生殖系统特异性抗原的免疫应答;3.胎儿母体相互作用的免疫生物学及免疫病理学,4.内分泌与生殖免疫的关系;5.生殖道及乳腺的粘液免疫等5个专题的近200篇论文。现将有关胎母关系的研究报告归纳如下: 一、排卵及(?)床前期的免疫学东德Boehme等用单克隆抗T细胞抗体免疫过氧化物酶技术研究了正常妇女子宫内膜活检标本中的T细胞亚群分布,见抑制性T细胞(Ts)所占比例在排卵期增加,在黄体期减少,辅助性T细胞(Th)数量在月经周期中无规则性变化。哈佛医学     

绒毛膜促性腺激素检测的进展及其应用

自Aschheim及Zondek(1928)首先建立生物学妊娠试验以来,检测绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)用以诊断和随访某些疾病已成为妇产科临床实践中的主要方法。近60年来随着免疫学的不断发展,有关hCG的检测方法发展很快。迄今为止hCG的检测方法大体可分为:(1)生物学测定,(2)免疫试验;(3)放射免疫测定 (Radioimmunoassay,RIA);(4)放射受体测定(Radioreceptorassay,RRA);(5)酶免疫吸附分析;(6)荧光免疫分析法等。本文主要综述近20年来hCG测定方法的进展及其临床应用。一、检测hCG方法的进展 (一)放射免疫测定 RIA法是60年代初发展起来的一种放射性同位素技术与免疫化学技术相结合的体外测定超微量物质的新技术。RIA法应用hCG检测是Wide及Gemzdl(1960)首创。目前用于放射免疫     

卵巢癌酶学诊断的进展

卵巢癌是危害妇女的常见的恶性肿瘤,因临床症状不明显,不易早期诊断。据统计最多有30%的卵巢癌病人能做到早期诊断,而70%的卵巢癌病人都是在肿瘤已生长很大或肿瘤已发生转移时才被发现。因此,寻找灵敏的和早期的诊断方法是迫切需要的。近几年在卵巢癌病人血清酶谱方面作了不少研究工作,也初步找出了几种与卵巢癌关系密切的酶作为卵巢癌标记酶使用,现将几种有关的酶介绍如下。一、半乳糖转移酶和唾液酸转移酶这两种酶是糖基转移酶,是催化糖蛋白寡糖链合成的一类酶。 (一)半乳糖转移酶(Galactosyltransferase,简称GT):此酶催化尿二磷-半乳糖(UDP-GAL)中的半乳糖转移到要合成