NK/LAK细胞对人口腔癌耐细胞药株杀伤活性的观察

目的明确免疫活性细胞对肿瘤细胞的杀伤活性是否与肿瘤的耐药性相关。方法采用连续形态学观察及MTT比色法,研究淋巴因子激活的杀伤(LAK)细胞及自然杀伤(NK)细胞,对人口腔癌耐药细胞株KBV200耐药性逆转前后及亲本敏感株KB的杀伤活性。(1)在肿瘤细胞与LAK细胞共育后3 h内连续在倒置显微镜下观察LAK细胞对上述3者的杀瘤效应;(2)采用MTT比色法检测NK及LAK对3株细胞的杀伤率。结果与KB细胞组相比,在KBV200和KBV200 维拉帕米组,LAK细胞出现在靶细胞周围的时间早、数量多,伸出伪足的LAK细胞比率高,出现集落样细胞团块时间亦早。NK、LAK细胞对KBV200细胞株耐药性逆转前后的杀伤率均明显高于敏感株KB(P<0.05),而对耐药株耐药性逆转前后的杀伤率无统计学差异(P>0.05);LAK对各株的杀伤活力均明显强于NK细胞(P<0.05)。结论免疫活性细胞对KBV200细胞株有较强的杀伤作用,逆转耐药性不降低免疫活性细胞杀伤活力,提示细胞过继免疫治疗可能成为控制化疗耐药病人病情发展的一个有效手段。     

高压氧对S-180肉瘤小鼠抗肿瘤免疫功能的影响

实验中检测了各组荷瘤小鼠体内抗肿瘤免疫功能,同时,观察了小鼠荷瘤的体积,溃破率及动物死亡率,结果显示:与对照组相比,高压氧(HBO)组荷瘤小鼠体内 NK、LAK 及巨噬细胞(M_φ)活性显著升高,并可诱导产生较强的 CTL 活性(P<0.01);实验动物肿瘤体积明显缩小,荷瘤组织溃破率明显增高(P<0.01);且实验组小鼠的存活时间显著延长(P<0.05)。提示:高压氧暴露可以提高 S-180肉瘤小鼠体内 NK、LAK、和CTL 细胞的杀伤活性,增强巨噬细胞的杀伤效率,从而抑制荷瘤的生长。     

黄芩苷对小鼠NK细胞杀伤活性的作用

目的探讨黄芩苷对小鼠NK细胞杀伤活性的影响,为黄芩苷在抗肿瘤方面的应用提供理论依据。方法使用乳酸脱氢酶释放法,测定黄芩煎剂、黄芩苷注射液对小鼠NK细胞杀伤活性的影响,进而探讨黄芩苷抗肿瘤活性及其机制。结果黄芩煎剂(4.5g/kg),黄芩苷注射液(6mg/kg)能明显提高小鼠NK细胞的杀伤活性(P<0.05),且具有剂量差异性。结论黄芩苷具有体内抗肿瘤活性,其机制与促进小鼠NK细胞杀伤活性有关。     

小鼠LAK细胞MHC表达水平对其体外杀伤肿瘤活性的影响

目的探讨LAK细胞表面MHC的表达水平与体外肿瘤细胞杀伤活性的关系。方法使用siRNA沉默小鼠LAK细胞MHC-Ⅰ(H-2Kd)分子的表达,同时设空转染组和无关序列组,流式细胞仪检测不同组别靶蛋白的表达,LDH释放试验检测H-2Kd表达降低的LAK细胞对K562和H22肿瘤细胞株的杀伤活性。结果流式细胞检测证实siRNA能够抑制靶蛋白的表达,H-2Kd表达降低组对K562和H22肿瘤细胞的杀伤活性与对照组相比明显降低,空转染组和无关序列组与对照组无显著性差异。结论小鼠脾LAK细胞表面H-2Kd的表达水平与其体外杀伤活性相关。     

CIK细胞的体外增殖及对Lewis肺癌小鼠抑瘤作用的实验研究

目的：观察CIK(cytokine induced killer)细胞及LAK(Lymphokine activated killer)细胞对Lewis肺癌小鼠的抑瘤作用。方法：建立Lewis肺癌小鼠动物模型，静脉输入CIK细胞做抗肿瘤治疗，同时设LAK对照，用同位素法检测各组小鼠T细胞增殖反应，同时用MTT法检测各组小鼠NK细胞毒活性。结果：CIK细胞对Lewis肺癌小鼠的抗肿瘤作用显著强于LAK细胞。结论：CIK细胞对Lewis肺癌小鼠有明显的抗肿瘤作用，并且优于LAK细胞。     

GM-CSF对体外培养的LAK细胞抗肿瘤作用影响的初步研究

目的　探讨GM CSF对LAK细胞抗肿瘤作用影响 ,为临床应用GM CSF提供一些实验数据。方法　按常规分离正常人外周血成单个核细胞 ,分GM CSF组和LAK细胞组进行实验 ,观察GM CSF对LAK细胞的增殖活性和LAK细胞的细胞毒活性的影响。结果　GM CSF组细胞增殖活性较LAK组细胞增殖活性高 ,增殖第 7天时 ,GM CSF组达 7 3× 1 0 6/ml细胞 ,而LAK组只有 5 9× 1 0 6/ml细胞。GM CSF组效应细胞对肝癌细胞杀伤活性为 (1 7 4 8± 1 0 6 5 ) % ,LAK组效应细胞对肝癌细胞杀伤活性为 (32 36± 7 2 9) % ;说明GM CSF组对肝癌细胞的杀伤活性较LAK组效应细胞的杀伤活性为低 (P <0 0 0 5 )。结论　GM CSF对LAK细胞抗肿瘤功能具有抑制作用     

免疫口服液对小鼠NK细胞活性的影响

目的　研究免疫口服液对正常和免疫抑制小鼠NK细胞活性的影响。方法　用不同剂量免疫口服液给正常小鼠和环磷酰胺免疫抑制小鼠灌胃 ,于第 11d分别检测小鼠NK细胞的活性。结果　免疫口服液对正常小鼠NK细胞活性无明显影响 (P均 >0 .0 5 ) ,对免疫抑制小鼠NK细胞活性有显著增强作用 (P <0 .0 5或 0 .0 1)。结论　免疫口服液对免疫抑制小鼠NK细胞活性有正调节作用。     

合欢皮总皂甙对小鼠NK细胞杀伤活性的影响

使用LDH(乳酸脱氢酶 )释放法 ,测定合欢皮总皂甙对小鼠NK细胞杀伤活性的影响 ,进而探讨合欢皮免疫活性成分及其抗肿瘤机制。结果 :合欢皮总皂甙能明显提高小鼠NK细胞的杀伤活性 (p <0 0 5或p <0 0 1 ) ,且具有剂量差异性 ,揭示合欢皮总皂甙是合欢皮的重要免疫活性成分 ,合欢皮体内抗肿瘤机制与此密切相关。     

GITR抗体介导增强NK细胞杀伤活性的实验研究

目的 探讨糖皮质激素诱导的TNF受体家族相关受体(glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptorfamily related receptor,GITR)的抗体通过抑制Treg细胞的功能,进而增强NK细胞杀伤活性来对L615白血病细胞产生杀伤作用.方法 通过不同的给药方式将L615白血病小鼠设立为4个实验组,提取实验分组后的小鼠脾脏中NK细胞作为效应细胞,以L615白血病细胞作为靶细胞,在体外观察了NK细胞的杀伤活性变化情况,并运用RT-PCR,进一步观察了体现NK细胞杀伤活性的几个相关指标的变化.结果 GITR抗体可以明显增强小鼠脾脏中NK细胞的杀伤活性,具体表现为同NK细胞活性密切相关的3个指标穿孔素(Perforin),γ干扰素(IFN-γ),Fas的表达量明显增加.结论 GITR抗体能够通过Treg细胞的调节增强NK细胞的杀伤活性,进而有效的抑制L615白血病细胞.     

脐血LAK与CIK细胞杀伤活性研究

目的　寻求一种可用于过继免疫疗法的高效免疫活性细胞。方法　用多种细胞因子诱生CIK细胞 ,用MTT法测定LAK和CIK细胞杀伤活性。结果　在峰值期CIK细胞杀伤活性均显著高于LAK细胞 (P <0 .0 5 )。结论　CIK细胞与LAK细胞属不同的细胞毒性细胞 ,脐血CIK细胞的高杀伤活性提示其可能成为过继免疫疗法的生力军。     

Effect of Shenmai Injection（参麦注射液）on sIL－2R NK and LAK Cells of Patiente with Advanced Carcinoma

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曲古抑菌素A对外周血自然杀伤细胞活性和功能的影响

目的探讨曲古抑菌素A（TSA）对正常人外周血自然杀伤细胞(NK)活性和功能的影响。方法从正常人外周血单个核细胞（PBMCs）分离淋巴细胞（PBLs）（主要包括T细胞和NK细胞）或纯化NK细胞。体外应用白介素 2（IL 2）诱导PBLs 72?h产生淋巴因子激活的杀伤（LAK）细胞。将PBLs, LAK或NK细胞进行体外培养,给予不同浓度的TSA处理12、24、48?h。流式细胞术检测NK细胞和T细胞的凋亡;采用51Cr释放试验检测NK细胞的杀伤功能。结果TSA以剂量和时间依赖方式诱导PBLs和LAK细胞凋亡,TSA处理组淋巴细胞及LAK细胞凋亡百分率明显高于对照组（P＜0.05）;TSA同样可诱导静止期NK细胞的凋亡,0.1?μmol/L TSA作用于NK细胞24?h后,36%NK细胞凋亡,显著高于未处理组（P＜0.05）;0.1?μmol/L TSA作用于NK细胞１2?h后,其杀伤白血病细胞的能力明显低于对照组（P＜0.01）。结论TSA能够诱导人外周血静止期NK细胞及LAK细胞发生凋亡,并影响NK细胞的细胞毒作用。     

拟黑多刺蚁醇提取物对荷瘤鼠免疫功能的影响

目的：研究拟黑多刺蚁(PVR)醇提取物对荷瘤鼠免疫功能的影响,从免疫学角度探讨其抑瘤机理。方法：随机将小鼠分为对照组,PVR醇提液高、中、低实验组。各组小鼠腋下接种S₁₈₀小鼠腹水肉瘤细胞,建立肿瘤动物模型。对照组用蒸馏水灌胃,实验组分别以0.5、1.0和1.5 g•kg^-1 PVR醇提液灌胃,连续10 d,以肿瘤重量、抑瘤率,脾脏指数,白细胞介素2（IL-2）,NK和LAK细胞活性及T、B淋巴细胞增殖为评价指标。结果：PVR明显抑制荷瘤鼠肿瘤细胞的生长,促进脾细胞增殖反应和IL-2分泌,增强LAK和NK细胞的活性。结论：PVR体内抑瘤作用与其增强机体抗肿瘤免疫功能有关。     

抗肿瘤多价转移因子对肿瘤患者NK及LAK活性的影响

目的：制备并观察抗肿瘤多价转移因子（M－TF）对肿瘤患者NK及LAK活性的影响。方法：分别用肝癌细胞悬液,胃癌细胞悬液免疫山羊,取其淋巴组织均匀浆透析法制备肝癌特异性转移因子（HCC－STF）和胃癌特异性转移因子（GC－STF）,用肝癌,胃癌及大肠癌混合细胞悬液免疫山羊,制备M－TF。比较其理化性质及对肿瘤患者NK及LAK活性的影响。结果：三种转移因子理化性质十分相似,肽类,核苷酸类物质及氨基酸俯含量相近。HCC－STF能明显增加肝癌患者NK,LAK活性及LAK细胞对肝癌7721细胞的特异细胞毒作用,GC－STF能明显增加胃癌和大肠癌患者NK,LAK活性及LAK细胞对胃癌7901细胞的特异细胞毒作用,M－TF能显著增加肝癌,胃癌及大肠癌的NK,LAK活性及LAK细胞对7721和7901细胞的细胞毒作用,其增加效果与HCC－STF及GC－STF比无明显差异。结论：M－TF具有免疫调节性强,抗肿瘤谱广的特性,值得推广应用。     

过继免疫疗法对子宫内膜异位症模型鼠免疫功能的影响

目的：探讨过继免疫疗法对子宫内膜异位症的疗效及免疫功能的影响。方法：38只SD大鼠随机分为空白对照、模型对照、LAK细胞注射、LHRH－a注射四组。观察异位病灶变化,并分别测定各组大鼠腹腔液中自然杀伤细胞（NK细胞）活性及血清中白细胞介素－6（IL－6）、子宫内膜抗体（EMAb）的水平。结果：LAK细胞治疗组异位内膜萎缩,NK细胞活性提高,IL－6水平与子宫内膜抗体含量下降,各项指标与模型组均有显著差异。结论：LAK细胞能调整子宫内膜异位症紊乱的免疫机制,提示过继免疫疗法对子宫内膜异位症具有治疗作用。     

EffectofShenmaiInjection（参麦注射液）onlmmunologicFunctioninStomachCancerPatientsafterChemotherapy

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肝癌患者外周血NK和LAK活性及T细胞亚群的变化

采用３ＨＴｄＲ释放法测定了２０例肝癌患者的外周血自然杀伤细胞（ＮＫ）活性及淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ）活性，同时用ＡＢＣ法检测其外周血Ｔ细胞亚群变化。结果显示，肝癌患者的外周血ＮＫ和ＬＡＫ活性显著低于正常人（Ｐ＜０．０１），Ｔ细胞亚群ＣＤ３及ＣＤ４细胞减少（Ｐ＜０．０１），ＣＤ８细胞增多（Ｐ＜０．０１），ＣＤ４／ＣＤ８比值显著降低（Ｐ＜０．０１）且出现倒置。上述结果提示肝癌患者细胞免疫功能出现紊乱及免疫活性细胞功能有缺陷。     

Effect of Shenmai injection on immunologic function in stomach cancer patients after chemotherapy) on immunologic function in stomach cancer patients after chemotherapy

Sixty-three cases with stomach cancer were randomized into 2 groups and observed, the results showed that the count of T lymphocytes in chemotherapy combined with Shenmai injection (SMI) group increased, while in the control group it decreased, the difference being quite significant (P<0.05). The results also showed that the count of OKT₁ cells and the OKT₄/OKT₈ ratio decreased after chemotherapy, but in SMI group both parameters increased in advance, which were higher in the 4th week after chemotherapy than that before chemotherapy. However in the meantime, the count of OKT₁ cells and OKT₄/OKT₈ ratio of control group were still in low level. After chemotherapy the serum interleukin-2 receptor (sIL-2R) level also decreased (P<0.05), while activities of natural killer cell (NK) and lymphokine activated killer cell (LAK) level increased (P<0.05) in SMI group. But in the control group, although the sIL-2R level had no change, both NK and Lak level decreased significantly (P<0.05). In addition, the difference of IgA, IgM, IgG levels was not significant between these two groups. These results suggested that SMI might improve human immunologic function to facilitate the chemotherapy of patients with stomach cancer.     

多病毒感染时T细胞亚群、NK与LAK细胞活性的变化及其意义

目的：探讨多病毒感染时细胞免疫和ＮＫ,ＬＡＫ细胞活性的变化及其意义。方法：以１种或多种病毒抗原,或ＩｇＭ抗体阳性的住院患儿６１例为观察对象,其中单病毒组３８例,多病毒组２３例,另设对照组３０例,采用ＥＬＩＳＡ法测定柯萨奇病毒（ＣＶＢ）抗原和ＩｇＭ抗体、ＥＢ病毒（ＥＢＶ）ＩｇＭ,巨细胞病毒（ＣＶＭ）ＩｇＭ、乙肝病毒（ＨＢＶ）血清标志物５项,单克隆抗体的间接ＡＢＣ免疫组化法测定Ｔ细胞亚群;＾３Ｈ－Ｔｄ     

Effect of shenmai Injection on SIL-2R NK and LAK cells of patients with advanced carcinoma

Serum interleukin-2 receptor (sIL-2R) level, activities of natural killer cell (NK) and lymphokine activated killer (LAK) cells were determined in 60 patients with advanced carcinoma (AC) before and after treatment with Shenmai Injection (SMI), forty healthy persons were taken as non-carcinoma control (NC). The results showed that: Serum sIL-2R level in AC were much higher than those in NC (P<0.05) and activities of NK and LAK cells in AC were much lower than those in NC (P<0.05) before treatment. There was no significant difference among gastric, colonic and lung cancer (P>0.05). After treatment with SMI, it was found that the level of sIL-2R in all patients were obviously lowered (P<0.05) while the activities of NK and LAK cells were signifficantly higher than that prior the treatment (P<0.05). Relevancy was not found between sIL-2R and NK, LAK cells. These data suggested that the immune function was compromised in AC, and SMI has a wide effect of immuno-regulation.