大鼠免疫复合物性肾损伤模型的建立与验证CSCD

目的通过建立与验证大鼠免疫复合物(immune complex,IC)性肾小球肾炎模型,为生物技术药物非临床安全性评价毒性试验中IC性肾损伤提供快速、简便和准确的检测方法。方法SD大鼠通过C-BSA诱导免疫2周后加强免疫给药4周建立IC性肾损伤模型,并通过尿液分析、血液学检查、血清生化检查、肾组织病理学检查、免疫组化分析和透射电子显微镜检查进行验证。结果模型组动物给药后出现蛋白尿,肾绝对重量增加,组织病理学检查及PAS染色发现肾可见肾小球系膜基质增加以及肾小球基底膜增厚,免疫组化分析发现C3补体和IgG沉积于肾小球毛细血管,电子显微镜结果显示基底膜增厚、足细胞足突部分融合及电子致密物沉积。结论成功建立并验证了大鼠IC性肾损伤模型,能够用于进一步探讨生物技术药物导致IC性肾损伤的发病机制,并为今后生物技术药物非临床安全性评价毒性试验IC性肾损伤的检测提供一定参考。     

木瓜苷对佐剂性关节炎大鼠血清抗体水平的下调作用

目的探讨木瓜苷(glucosides of cheanomeles speciosa,GCS)对AA大鼠血清抗体水平的影响。方法SD大鼠随机分为6组:正常对照组、模型组(AA组)、GCS3个剂量组和雷公藤多苷组(GTW)。大鼠足跖皮内注射弗氏完全佐剂(FCA)诱发大鼠AA模型,聚乙二醇(PEG)6000法检测血清循环免疫复合物(circulating immune complexes,CIC);酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中抗Ⅱ型胶原抗体(anti-CⅡan-tibody)水平、抗结核杆菌抗体(anti-TB antibody)水平。结果大鼠免疫后d17开始分别灌胃GCS(30、60、120mg·kg-1)和GTW(40mg·kg-1)对照药,连续给药8d。GCS(60、120mg·kg-1)体内给药可明显降低AA大鼠血清中升高的CIC水平、抗CⅡ抗体水平和抗结核菌素抗体水平。结论GCS具有明显的下调AA大鼠血清抗体水平的作用,可能是其发挥治疗AA作用的重要机制之一。     

循环免疫复合物聚乙二醇沉淀法及其临床应用

循环免疫复合物(CIC)在免疫复合物(ICD)的发病机制中起重要作用,因此测定CIC对有关疾病的诊断、病程动态观察等具有一定的意义。有关CIC的测定方法,文献报道较多。本文根据低浓度的聚乙二醇(PEG)在碱性溶液中能沉淀血清中免疫复合物(IC)而不能沉淀正常球蛋白及大部分游离抗原或抗体的的基本原理,采用450nm透射比浊法,以     

大鼠肺炎支原体感染的ELISA实验研究

目的 探讨支原体感染大鼠的血清抗体反应及其间接ELISA检查与诊断方法.方法 将肺炎支原体疫苗分别以滴鼻、腹腔注射、尾静脉注射方式免疫大鼠,收集动物血清,以方阵滴定法和间接法确立ELISA检测实验的最适条件,用间接法检测不同方法与时间免疫动物的血清特异性IgG抗体.结果 ELISA系统的最适工作条件包括抗原包被浓度10×10-4g/ml、血清稀释度1:40、酶结合物1:5000.以该系统检测滴鼻免疫大鼠共21只,免疫6次2只大鼠血清抗体阳性(66.67%),免疫7次后阳性率达100%;腹腔免疫和静脉免疫大鼠各18只,免疫2次后2只大鼠可检出特异性抗体(66.67%),免疫5次后全部动物均为血清抗体阳性(100%).结论 肺炎支原体0.0016g/只以滴鼻、腹腔注射、尾静脉注射的方法均能够使大鼠产生特异性抗体,以间接ELISA检测法检查腹腔免疫组和静脉免疫组大鼠血清免疫2次后即有部分大鼠血清抗体检测即呈阳性,5次后阳性率达100%,而滴鼻免疫组大鼠直至免疫6次后部分血清抗体检测才可呈阳性其阳性率与腹腔免疫和静脉免疫2次阳性率相当.间接ELISA法可有效检测支原体感染动物的血清特异性抗体,是一种具有较高特异性的快速简便方法.     

芍药苷对佐剂性关节炎大鼠脾细胞产生抗体和cAMP水平的影响

探讨芍药苷(paeoniflorin,Pae)对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis，AA)大鼠血清抗体水平和脾脏淋巴细胞cAMP水平的影响。大鼠足跖皮内注射弗氏完全佐剂(FCA)诱发大鼠AA模型，聚乙二醇(PEG)6000法检测血清循环免疫复合物(circulating immune complexes，CIC)；酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中抗C II抗体(anti-C II antibody)水平和抗结核杆菌抗体(anti-TB antibody)水平；放射免疫法(RIA)检测芍药苷体外给药对脾细胞中cAMP水平的影响。大鼠免疫后第17天开始分别灌胃给予芍药苷(25、 50及100 mg·kg^-1)和雷公藤多苷(40 mg·kg^-1)对照药，连续给药7 d。芍药苷(50及100 mg·kg^-1)可明显降低AA大鼠血清中升高的CIC水平、抗C II抗体水平和抗结核杆菌抗体水平，芍药苷组对AA模型组的抑制率(inhibition ratio，IR)与剂量呈正相关；芍药苷体外给药(12.5、62.5及312.5 mg·L^-1)使AA大鼠脾细胞升高的cAMP水平降低。芍药苷治疗后，明显降低AA大鼠的血清抗体水平及大鼠脾细胞升高的cAMP水平。     

贵州部分地区精神分裂症患者血清PBMC博尔纳病病毒CIC及抗体的检测

目的对贵州省部分地区精神分裂症患者血清外周血单个核细胞(PBMC)进行检测,探讨博尔纳病病毒(BDV)感染与精神分裂症的相关性;方法运用新型的三联ELISA测循环免疫复合物(CIC)的方法,检测97例精神分裂症患者组及48例健康对照组PBMC中BDV特异性CIC;结果 97例精神分裂症组中有24例CIC为阳性,阳性率为24.7%(24/97);抗体检出率为14.4%(14/97),48例对照组中CIC及抗体阳性1例,阳性率为2.1%(1/48);精神分裂症组检出率高于健康对照对照组,具有统计学意义(P<0.05);结论贵州省部分地区存在着BDV的感染,BDV感染与精神分裂症可能相关。     

血清循环免疫复合物与抗核抗体在系统性红斑狼疮患者检测的意义

目的 分析患者血清中血液循环系统免疫复合物(CIC)、抗核抗体(ANA)含量与系统性红斑狼疮(SLE)的临床关系,为疾病SLE的综合临床判断诊疗以及对病情活动性和预后治疗效果的综合分析提供更多可靠性的指标。方法 采用ELISA法对健康对照人员和不同发病期的SLE患者血清中CIC、ANA的含量进行测定,并将检测后得出的数据综合进行相关的统计学数据分析。结果 SLE患者血清中CIC的含量明显高于正常对照组,且疾病活动期患者明显高于缓解期患者;CIC与ANA同时进行检测还可以有效提高检出早期患者的阳性率。结论 血清中CIC含量及其动态变化情况可以在一定程度上反映出SLE患者疾病的发展程度,可以将其作为SLE诊疗及疾病活动状态判断的重要参考指标。     

肾衰宁对系膜细胞产生细胞间黏附分子的影响

目的：探讨具有益气固本、化瘀泄浊作用的中药复方制剂肾衰宁灌肠液（简称肾衰宁，SSN）防治慢性肾功能衰竭（CRF）的作用机制。方法：采用双抗夹心ELISA法，观察体外培养的人肾小球系膜细胞分别加入重组rhIL-1β（A组）及rhIL-1β＋SSN大鼠血清（B组）后产生细胞间黏附分子1（ICAM-1）和血管细胞黏附分子1（VCAM-1）的水平。结果：A组人肾小球系膜细胞产生ICAM-1和VCAM-1增加，B组低于A组，且随SSN药物浓度的增加ICAM-1和VCAM-1越少。结论：SSN对rhIL-1β刺激后肾小球系膜细胞所产生的ICAM-1和VCAM-1有明显的抑制作用。提示SSN抑制系膜细胞自分泌ICAM-1和VCAM-1是预防肾小球硬化发生发展的重要作用机制之一。     

双黄连注射剂过敏症动物模型的研究

目的：探索双黄连注射剂中引起工型过敏反应的致敏性物质，建立双黄连注射剂过敏症动物模型。方法：将双黄连注射剂与正常兔血清体外孵育制备抗原，免疫新西兰纯种兔，制备抗双黄连注射剂中过敏性物质的抗血清，并采用ELISA法检测其效价及抗体特异性。结果：双抗夹心ELISA检测抗血清效价，稀释至1：128倍仍为阳性，间接竞争ELISA测定血清特异性并绘制抑制曲线，得到回归方程I：13．3621gC＋50．503，相关系数r=0．966，半数抑制浓度IC50=0．92mg/mL。结论：此法初步建立了双黄连注射剂过敏症动物模型，对双黄连注射剂中致敏物质的研究有一定意义。     

双抗夹心ELISA法快速检测人用狂犬病疫苗的效价

目的：用单克隆抗体制备的双抗夹心ELISA法，快速检测人用狂犬病疫苗中的狂犬病毒糖蛋白G的含量，并探讨其替代NIH法的可行性。方法：将疫苗样品用NIH法检定，同时以国家标准品为参考疫苗，用双抗夹心ELISA法检测。结果：用双抗夹心ELISA法测得的IgED50为2．60～2．78；用NIH法测得的IgED50为2．55～2．85。对两种检测方法进行F检验，两种检测方法的灵敏度有显著差异（F=5．76，P〈0．05）；用t检验法对这两种检测方法进行分析，表明两组测定值的差异无统计学意义（t=0．187，P〉0．05）。结论：双抗夹心ELISA法与NIH法测得的IgED50呈正相关性。与NIH法相比，双抗夹心ELISA法具有重复性好、成本低、快速等优点。用双抗夹心ELISA法取代NIH法测狂犬病疫苗效价是可行的。     

120例乙肝病人循环免疫复合物的检测

目的：探讨循环免疫复合物（CIC）在乙肝发病机制上的作用。方法：应用聚乙二醇（PEG）沉淀试验对120例乙肝病人和120例正常人群进行了循环免疫复合物检测。结果：乙肝病人CIC的阳性率达49．2％，正常人群CIC阳性率仅为11．7％，两者比较差异有非常显著意义（P＜0．005），结论：循环免疫复合物在乙肝病理性免疫损害中有重要地位。     

破伤风特异性免疫对献血浆者体内循环免疫复合物含量的影响

目的 通过检测献血浆者血浆中循环免疫复合物（circulating immune complex,CIC）补体成分3d（complement component 3d,C3d）含量,分析破伤风特异性免疫对献血浆者CIC含量的影响。方法 选取2020年8月25日至9月4日期间,在山东省夏津泰邦单采血浆站和山亭泰邦单采血浆站的献血浆者,分为普通组、常规免疫组和强化免疫组,采用CIC-C3d ELISA试剂检测献血浆者血浆CIC-C3d含量。结果 3组献血浆者CIC-C3d浓度均＜16 μg/ml,3组献血浆者CIC-C3d浓度间差异无统计学意义（F=1.00,P=0.37）。结论 破伤风特异性免疫对献血浆者体内CIC浓度无明显影响。     

中晚期流行性出血热患者免疫疗法的疗效观察

本文应用联合抗过敏加新鲜血浆疗效对132例中晚期流行性出血热患者(EHF)进行了治疗。经本疗法治疗后,病人的补体溶解免疫复合物活性(CRA)增强,血清中循环免疫复合物(CIC)水平下降;临床各项指标及肾功能明显改善,病死率下降。     

Circulating immune complexes as indicators of environmental contamination

The aim of this study was to examine the effect of environmental contamination on the concentration of circulating immune complexes (CIC) in bovine blood. We determined that in a conventionally ecologically clear district, the CIC concentration in healthy bovine blood serum was within the limits of 0.18-0.52 mg/mL, (mean = 0.31 mg/mL, V = 30.14%). In a conventionally ecologically contaminated district, the CIC concentration in healthy bovine blood serum was detected within the limits of 0.48-0.99 mg/mL (mean = 0.65 mg/mL, V = 17.97%; P < 0.05). The CIC concentration in serum of bovine leukemia virus (BLV)-infected bovines from different districts was within the limits of 0.29-1.76 mg/mL (mean = 0.81 mg/mL, V = 36.67%; P < 0.05). According to these preliminary results of the investigation, it may be supposed that the increased concentration of CIC is closely related to the environmental contamination. Therefore, studies of CIC concentration in healthy mammals are of great importance for the monitoring of anthropogenic factors and can be exploited as an indicator of environmental contamination.     

系统性红斑狼疮患者血循环免疫复合物和补体水平变化及其临床意义

目的探讨定量检测血循环免疫复合物（circulating immune complexes,CIC）以及补体C3、C4在系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）诊断及评价活动性中的意义。方法用ELISA法定量检测SLE患者和其他风湿病患者血清中的CIC,散射比浊法检测补体C3、C4。据SLEDAI积分表,将SLE患者分为Ⅰ组（SLEDAI评分0．4分）、Ⅱ组（SLEDAI评分5—9分）和Ⅲ组（SLEDAI评分≥10分）。结果SLE患者CIC明显高于疾病对照组（P值〈0．05）,补体C3、C4明显低于疾病对照组（P值〈0．05）;CIC和补体C3：Ⅱ组、Ⅲ组与Ⅰ组比较差异有显著性（P值〈0．05）,而补体C4仅Ⅲ组与Ⅰ组比较差异有显著性（P值〈0．05）。相关分析显示CIC与SLEDAI积分呈正相关,补体C3、C4与SLEDAI积分呈负相关。结论血清CIC和补体C3、C4可作为SLE诊断及评价活动性的有用指标,动态观测CIC和补体C3来评价SLE活动性优于补体C4。     

实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠Th1、Th2和Th17免疫反应检测

目的探讨不同类型免疫反应在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)发病中的作用。方法 24只SD大鼠随机均分为EAE组和对照组,通过行为观测和大脑微观形态学确认免疫诱导的EAE模型,用ELISA法检测淋巴结和脾细胞培养上清液中IL-4、IFN-γ和血清中IgG水平,流式细胞术检测淋巴结和脾细胞中IL-17及Foxp3细胞频数。结果与对照组相比,EAE组IgG、IFN-γ、IL-17及IL-4水平均明显增高(P<0.05或P<0.01)。结论 Th1、Th2和Th17免疫细胞在EAE的发病均起着重要的作用。     

血小板生成素与系统性红斑狼疮合并血小板减少的相关性研究

的：探讨系统性红斑狼疮（SLE）合并血小板减少的发生机制及血小板生成素（TPO）在SLE合并血小板减少诊治中的作用和意义.方法：采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测42例SLE患者、17例再生障碍性贫血（AA）患者及30例正常对照血清TPO水平.结果：SLE组血清TPO水平高于正常对照组（P＜0.01）,低于AA组（P＜0.05）.SLE组血清TPO水平与循环免疫复合物和血沉呈正相关（P＜0.01）,与补体C3呈负相关（P＜0.01）.结论：SLE患者TPO水平升高,并与体内的免疫和炎症反应密切相关,在SLE伴血小板减少的发生机制中具有一定意义.     

食管癌患者红细胞免疫功能测定及临床意义

目的 :观察食管癌患者的红细胞免疫功能状态及其临床意义。方法 :使用长海医院“郭峰法”测定 3 0例食管癌患者外周血中红细胞膜 C3 B受体花环形成率 (RBC-C3 BRR)、红细胞膜吸附免疫复合物花环形成率 (RBC-ICR)、体循环免疫复合物花环形成率 (CIC)的含量及其手术前后的变化 ,并于对照组正常 3 0名进行比较分析。结果 :食管癌患者红细胞免疫功能状态明显改善。结论 :测定食管癌患者的红细胞免疫功能状态可能有助于食管癌的诊断 ,并可观察疗效、判断预后     

Recombinant human hepatocyte growth factor (HGF), but not rat HGF,elicits glomerular injury and albuminuria in normal rats via an immune complex‐dependent mechanism

1. Hepatocyte growth factor (HGF) has the therapeutic potential to improve renal fibrosis and proteinuria in rodents with chronic kidney disease. In contrast, long‐term administration of human HGF to normal rats reportedly elicits proteinuria. Thus, the role of HGF during proteinuria remains contentious. The aim of the present study was to demonstrate that human HGF is antigenic to rodents and that immune complex formation causes proteinuria. 2. We administered either human or rat HGF to normal rats for 28 days. Albuminuria was evaluated by sodium dodecyl sulphate–polyacrylamide gel electrophoresis. The renal phenotypes of the two HGF treatments were examined using histological techniques. 3. Administration of human HGF (1 mg/kg per day, i.v.) to rats led to severe albuminuria and glomerular hypertrophy in association with increased blood levels of anti‐human HGF IgG and IgG deposition in mesangial areas. Furthermore, an immune complex between human HGF and anti‐human HGF IgG stimulated the production of proteinuric cytokines (including transforming growth factor‐β) in rat cultured mesangial cells. In contrast, treatment of healthy rats with rat HGF for 4 weeks caused neither mesangial IgG deposition nor elevated anti‐HGF IgG in the blood. Overall, rat HGF did not provoke albuminuria. 4. We conclude that human HGF produces pseudotoxic effects in normal rat kidneys via an immune complex‐mediated pathway, whereas syngenic HGF is safe due to less deposition of glomerular IgG. Our results affirm the safety of the repeated use of syngenic HGF for the treatment of chronic organ diseases, such as renal fibrosis and liver cirrhosis.     

2型糖尿病患者红细胞免疫功能研究

目的探讨 2型糖尿病患者的红细胞免疫功能。方法运用酶免疫测定法 (EIA)检测 2型糖尿病 36例及正常对照组 30例 ,对比观察两组对象的红细胞免疫粘附性 (RCIA)及红细胞膜免疫复合物 (CIConRM) ,并将糖尿病组RCIA与临床代谢指标进行直线相关分析。结果糖尿病组RCIA及CICOnRM均显著低于正常对照组 (P <0 0 1及P <0 0 5 ) ,RCIA与病程及HbAlc成负相关 (P <0 0 1)。结论糖尿病患者存在红细胞免疫功能下降 ,其下降与病程及糖代谢控制不良有关。