γ拟钉螺等位基因的研究

目的：探讨γ拟钉螺分类演化的遗传学基础。方法：用微量平面淀粉胶电泳法，检测浙江省开化及淳安县６个螺群宋氏γ拟钉螺和１个螺群中国γ拟钉螺的２４种等位基因酶谱。结果：共测得２９个位点，宋氏γ拟钉螺多态位点所占比例为６．９％－１３．８％；中国γ拟钉螺全部为单态位点。宋氏γ拟钉螺的种内Ｎｅｉ氏遗传距离（Ｎｅｉ＇ｓＤ）小于０．１２；但宋氏γ拟钉螺与中国γ拟钉螺两者种间Ｎｅｉ＇ｓＤ为０．７３。结论：在等位基因水平显示γ拟钉螺种内变异不明显，种间差异显著。     

湖北省庙河地区钉螺细胞色素C氧化酶1基因差异的研究

目的　比较湖北省庙河沿岸地区钉螺CO1基因序列的差异 ,探讨光壳螺与肋壳螺差异的原因。方法　在该地区选 7个点 (上游 4个点 ,下游 3个点 )采集钉螺 ,用CTAB法提取钉螺基因组DNA ,PCR方法扩增CO1基因 ,纯化后测序 ,运用ESEE软件排序并比较变异位点 ,观察各点钉螺的CO1基因单倍体型 ,运用PHYLIP软件计算遗传距离 ,绘制基因进化树。结果　获得CO1基因大小为 638bp ,上游和下游累积变异位点数分别为 2 9和 46,两者差异具有显著性 ;各采集点内钉螺按变异位点多少可分为两组 ;各采集点间存在有相同的基因单倍体型 ;上游和下游螺群之间的遗传距离为 0 0 2 2 1± 0 0 10 5 ;在FITCH绘制的基因进化树上 ,上游和下游地区钉螺交错分布在同一亚种不同的两个分支中。结论　在不同的生态环境下 ,下游地区钉螺CO1基因的变异强度比上游大 ;庙河各采集点螺群间存在一定的基因流动 ;庙河地区螺群属湖北钉螺湖北亚种 (O h hupensis) ,可能存在着两种不同进化速率的螺群。     

中国大陆钉螺种群遗传学研究——Ⅲ.遗传变异与地理分布的关系

本研究目的是通过检测中国大陆钉螺不同种群的等位基因频率,研究种群遗传变异与相应地理分布之关系,以确定流行区现场钉螺的种群结构。结果显示,7个多态基因位点的等位基因频率地理分布呈现3种类型:均衡、分散和非连续变向分布。3个主要多态基因位点(Est—4、Got和Mdh—2)均显示了非连续变向。样本种群间遗传距离与地理距离的回归分析表明,Logistic S曲线回归为最佳拟合曲线。结合其它数据,认为分裂亚群模型是中国大陆钉螺种群的基因结构模型。     

日本血吸虫中间宿主钉螺的种群遗传变异研究

以采自中国湖北、江苏、四川省三地现场钉螺和饲养在泰国玛希伦大学实验室的菲律宾钉螺为研究种群,用水平淀粉凝胶电泳方法研究各种群间的遗传变异.实验共观察7个酶中的14个等位点,并以杂合子、多态位点百分比和每位点平均等位基因数衡量遗传变异,结果表明中国大陆钉螺种群的变异程度较高.湖北省钉螺与菲律宾钉螺间的遗传距离最大,为0.44,湖北省与江苏省钉螺间遗传距离最小,为0.03.以UPGMA相似性聚类分析而构建的分校图谱显示中国大陆钉螺存在多亚种.     

中国大陆钉螺种群遗传学研究 Ⅰ.种群遗传变异

用采自34个现场螺点的钉螺进行水平淀粉凝胶电泳,并进行13种酶系统染色.结果17个等位基因中,7个为多态基因位点.种群间遗传距离的变化范围0.03—0.27.UPGMA、Fitch-Mar-golish最小方差法、最大相似性聚类分析图显示,聚类的组别与形态学或/和地理分布相一致.各分析指标提示,肋壳钉螺种群显著地不同于光亮钉螺种群,两组间的遗传距离为0.15.     

SSR-PCR技术研究9种拟钉螺的遗传变异

目的对9种拟钉螺进行遗传变异研究,为拟钉螺从基因水平分类提供依据。方法采用微卫星锚定PCR（SSR-PCR）技术对海峡两岸4省7地的拟钉螺基因组DNA进行PCR扩增,根据扩增产物按Nei的方法计算遗传距离,并应用SPSS构建系统进化树。结果各地拟钉螺标本的PCR产物呈多态性,其中台湾邱氏拟钉螺与中国大陆拟钉螺地域株遗传距离为0.7391～0.9130;向氏拟钉螺和秉氏拟钉螺间扩增产物相似性最大,遗传距离为0.2174;神农架拟钉螺与向氏拟钉螺、秉氏拟钉螺的遗传距离为0.3333～0.3913;十堰拟钉螺和洪山拟钉螺之间的遗传距离为0.5556;福建拟钉螺与湖北拟钉螺地域株的遗传距离为0.3913～0.7000;武鸣拟钉螺与湖北拟钉螺地域株的遗传距离为0.6667～0.8889。结论9种拟钉螺在基因水平上至少可以分为4类：1）向氏拟钉螺、秉氏拟钉螺和神农架拟钉螺为一类;2）洪山拟钉螺和十堰拟钉螺为一类;3）武鸣拟钉螺为一类;4）福建拟钉螺为一类。台湾邱氏拟钉螺应为钉螺。     

中国大陆钉螺等位基因位点研究

检测安徽、上海、江苏、浙江、江西、湖南、湖北、四川、云南９省（市）的９地代表性钉螺的ＡＡＴ、ＡＣＰＨ、ＡＫ、ＡＯ、ＡＰＨ、ＣＫ、ＥＳＴ、ＧＤＨ、ＧＰＩ、Ｇ６ＰＤ、ＨＢＤ、ＩＳＤＨ、ＬＡＰ、ＬＤＨ、ＭＥ、ＭＤＨ、ＭＰＩ、ＮＡＤＤ、ＯＣＴ、ＰＧＭ、６ＰＧＤ、ＳＤＨ、ＳＯＤ、ＸＤＨ２４种酶。检得４０个等位基因位点，１１７个等位基因；其中变异最大的位点是ＧＰＩ和ＰＧＭ－Ⅰ。２２个位点的等位基因在３个以上。多态位点酶有１４个，占所测酶的５８．３３％。表明中国大陆钉螺存在遗传多态现象。同时发现ＰＧＭ、ＭＤＨ酶是中国大陆钉螺及日本血吸虫共有的多态位点酶，为虫、螺两者相互关系的研究提供新的线索。     

中国大陆钉螺种群遗传学研究 Ⅳ.钉螺等位基因酶谱

本研究采用水平淀粉凝胶电泳,对中国大陆7个地区钉螺的12个等位基因酶酶谱进行了分析。结果:在17个等位基因位点中10个为无变异的单态位点:Aldh、Ao、G6pd、Gpdh、Hbdh、Ldh、Sdh、Est-2、Est-3和Est-6;7个为变异的多态位点:Est-4、Est-5、Xdh、Mdh、Idh、Got和Ap。在检测的13个酶中,检得6个多态位点酶:EST、XDH、MDH、IDH、GOT和AP,占所测酶数的46.15％,结果提示:7地钉螺间存在着一定的亲缘关系,但其基因水平发生了变异,7个呈多态性的等位基因位点可能为影响中国大陆钉螺遗传变异较为重要的等位基因位点。     

用RAPD技术对安徽省三地钉螺遗传差异的初步研究

目的采用随机扩增多态性技术（RAPD）研究安徽省3个代表性地区的钉螺的遗传多样性．方法提取钉螺足部的基因组DNA．用随机引物进行扩增．扩增产物经8％的聚丙烯酰胺凝胶电泳．0．6％硝酸银染色．根据扩增结果,计算不同地域株钉螺的遗传距离,并聚类分析．结果三个地区钉螺标本的PCR扩增产物均呈现多态性。经聚类分析．其中广德钉螺与宁同钉螺关系最近,可归为一类,而贵池钉螺则单为一类。结论安徽省三个有代表性区域的钉螺存在一定的亲缘天系,但种内发牛了遗传变异．血吸虫病不易感区和有螺无病区的螺群遗传距离接近,两地钉螺的遗传棚似系数与钉螺的易感性相一致．但对于不易感和有螺无病区的钉螺是否与易感区的钉螺在遗传学上产生较特异的变化．还将通过分子生物学方法进一步研究。     

用RAPD技术对安徽省三地钉螺遗传差异的初步研究

目的采用随机扩增多态性技术（RAPD）研究安徽省3个代表性地区的钉螺的遗传多样性．方法提取钉螺足部的基因组DNA．用随机引物进行扩增．扩增产物经8％的聚丙烯酰胺凝胶电泳．0．6％硝酸银染色．根据扩增结果，计算不同地域株钉螺的遗传距离，并聚类分析．结果三个地区钉螺标本的PCR扩增产物均呈现多态性。经聚类分析．其中广德钉螺与宁同钉螺关系最近，可归为一类，而贵池钉螺则单为一类。结论安徽省三个有代表性区域的钉螺存在一定的亲缘天系，但种内发牛了遗传变异．血吸虫病不易感区和有螺无病区的螺群遗传距离接近，两地钉螺的遗传棚似系数与钉螺的易感性相一致．但对于不易感和有螺无病区的钉螺是否与易感区的钉螺在遗传学上产生较特异的变化．还将通过分子生物学方法进一步研究。