犬颈部模拟爆炸条件下颈总动脉的病理改变

目的 探讨在一种新的颌面颈部致伤模型的作用下，颈部大血管（颈总动脉）受爆炸伤后的病理变化。方法 采用雷管置于面部咬肌上方10cm处引爆模拟爆炸冲击波，同时，颈部用五三式滑膛弹道枪致颈部切线伤或贯通伤模拟爆炸时破片致伤作用。结果 致伤后距伤道中点1，3和5cm的颈总动脉均有不同程度的损伤。光镜下均可见血管内皮粗糙、血栓形成、中膜弹力纤维断裂以及中外膜大量炎细胞浸润。电镜下内皮细胞、平滑肌细胞的表现以变性坏死为主。结论 颈总动脉间接火器性损伤后血栓形成以24h为高峰（P＜0.05）。在上述模型作用下，除距伤道1cm处的动脉内皮损伤较重外，其他距离的内皮细胞和中膜损伤程度均未发现明显差异。说明爆炸＋破片复合伤（简称破－冲复合伤）的作用较单纯的破片损伤程度为重。另外，致伤后的内膜及中膜的断裂有使外膜疝出的趋势，为研究临床上间接性火器损伤所 假性动脉瘤的形成机制提供了理论依据。     

基质金属蛋白酶9与高血压动脉重构

基质金属蛋白酶9(MMP-9)是基质金属蛋白酶家族中的重要一员,是锌离子依赖的细胞外基质(ECM)的降解酶。ECM的重塑通过影响细胞的结构和功能参与多种疾病的病理过程。MMP-9作为ECM的主要降解酶,通过调控基质胶原成分的合成和降解,直接影响血管平滑肌细胞形态和功能,并在高血压血管重构过程中发挥重要作用。同时,MMP-9也有望成为心脑血管疾病特别是高血压的潜在标志分子。     

阿魏酸钠对球囊损伤大鼠颈总动脉血管内膜增生的影响

目的 :研究阿魏酸钠对球囊损伤大鼠颈总动脉内膜增生的影响。方法 :制作球囊损伤的大鼠颈总动脉内膜增生模型 ,Wistar雄性大鼠 15只随机分为①对照组 (n =7)腹腔内注射生理盐水 (4ml/d)。②阿魏酸钠治疗组 (n =8)腹腔内注射融于生理盐水的阿魏酸钠 (2 0 0mg/d) ,球囊损伤 14d后 ,损伤区域的血管段取材固定后 ,分析血管断面组织形态学的变化 ;免疫组化方法观察增殖细胞核抗原 (PCNA)阳性细胞以了解血管壁细胞的增殖情况。结果 :阿魏酸钠可明显减少新生内膜面积 ,增加管腔面积 ,抑制平滑肌细胞的增殖。结论 :阿魏酸钠具有抑制血管内膜增生的作用。     

硫化氢抑制大鼠颈总动脉球囊损伤后血管内膜增生的研究

目的 探讨硫化氢（hydrogen sulfide,H₂S）供体对球囊损伤大鼠颈总动脉后血管新生内膜面积（neointimal area,NA）、血清白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）和内膜B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达的影响。方法 假手术组作为正常参照,用球囊损伤对照组、H₂S组和PPG组大鼠的颈总动脉,各组12只,每组再平均分为14天和28天两个亚组。建模后,假手术组和对照组每天用生理盐水腹腔注射,H₂S组每天用硫氢化钠（sodium hydrogen sulfide,NaHS）溶液（2.8mg/kg）经腹腔注射给药,PPG组每天用炔丙基甘氨酸（propargylglycine,PPG-内源性H₂S生成抑制剂）药物（37.5mg/kg）经腹腔注射给药。预定时间点,观察管腔病理改变、ELISA检测IL-6的含量和免疫组化法测Bcl-2与Bax蛋白的表达。结果 与对照组相比,相同亚组的H₂S组NA及内膜中膜比（neointimal area/medial area,NA/MA）均明显减小（P<0.05）,Bcl-2表达减弱,Bax表达增强（P<0.05）,14天亚组IL-6含量减低（P<0.05）,28天亚组IL-6含量差异无统计学意义（P>0.05）。与对照组相比,相同亚组的PPG组NA及NA/MA显著增加（P<0.05）,Bcl-2表达增强,Bax表达减弱（P<0.05）,14天亚组IL-6含量增加（P<0.05）,28天亚组IL-6含量差异无统计学意义（P>0.05）。结论 H₂S可以减轻损伤后血管的狭窄,其作用机制可能包括通过影响Bcl-2蛋白和Bax蛋白表达,从而使血管损伤后增殖和迁移至内膜的血管平滑肌细胞（vascular smooth uscle cell,VSMC）凋亡大于增殖和通过减少早期IL-6的分泌来影响IL-6通过JAK/STAT通路诱导的VSMC的增殖。     

阿魏酸钠对球囊损伤大鼠颈总动脉血管内膜增生的影响

目的：研究阿魏酸钠对球囊损伤大鼠颈总动脉内膜增生的影响。方法：制作球囊损伤的大鼠颈总动脉内膜增生模型，Wistar雄性大鼠15只随机分为①对照组(n=7)腹腔内注射生理盐水(4ml／d)。②阿魏酸钠治疗组(n=8)腹腔内注射融于生理盐水的阿魏酸钠(200mg/d)，球囊损伤14d后，损伤区域的血管段取材固定后，分析血管断面组织形态学的变化；免疫组化方法观察增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞以了解血管壁细胞的增殖情况。结果：阿魏酸钠可明显减少新生内膜面积，增加管腔面积，抑制平滑肌细胞的增殖。结论：阿魏酸钠具有抑制血管内膜增生的作用。     

高血压病的血管重构及其逆转

高血压血管重构(ＶａｓｃｕｌａｒＲｅｍｏｄｅｌｉｎｇｉｎＨｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ)是指高血压所导致的血管结构改变,主要包括血管壁增厚及组织学异常,血管壁/腔比值增大,随之产生血管功能异常[1]。高血压可使血管壁的结构发生许多重要变化,其中一些变化是机体为适应血管张力增高而发生的反应,而另一些则是高血压所造成的病理损害,但事实上两者很难截然分开。1　高血压血管重构的病理变化高血压所造成的血管壁增厚,其一是由于中层平滑肌细胞(ＳＭＣ)体积增大,即肥大(ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙ)和/或ＳＭＣ数量增多,即增生(ｈｙｐｅｒｐｌａ…     

高血压的血管重构及其逆转

高血压的血管重构及其逆转李中言关青（中国人民解放军第４６５医院１３２０１１）赵连友审校早在一个世纪以前，人们即观察到高血压病人中等大的动脉壁增厚，但对其意义缺乏充分的认识，仅认为是疾病晚期的结果。最近几年对人及动物模型的血管标本研究发现，其直径小于４...     

钙蛋白酶介导低氧诱导的肺动脉高压肺血管重构

目的：研究钙蛋白酶(calpain)在低氧诱导肺动脉高压肺血管重构中的作用及机制。方法：SD大鼠随机分为低氧模型组和常氧对照组。插管法测定大鼠右心室收缩压及平均肺动脉压,右心室/(左心室+室间隔)比值评价右心肥厚指数,HE染色检测血管重构情况,分别采用实时荧光定量PCR和Western印迹检测肺动脉calpain-1,-2和-4 mRNA和蛋白的表达。原代培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞分为4组：常氧对照组、常氧对照+ MDL28170(calpain抑制剂)组、低氧模型组、低氧模型+MDL28170组。MTS及流式细胞术观察细胞增殖情况,实时荧光定量PCR检测Ki-67及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA) mRNA表达情况。结果：与常氧对照组大鼠比较,低氧模型组大鼠右心室收缩压、平均肺动脉压及右心肥厚指数显著增加,肺动脉血管显著重构;同时,低氧模型组大鼠肺动脉中calpain-1,-2,-4 mRNA和蛋白表达也显著上调。与常氧对照组细胞比较,低氧模型组细胞显著增殖,MDL28170可显著抑制低氧诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖,同时逆转低氧诱导的Ki-67和PCNA mRNA表达上调。结论：calpain介导低氧诱导的肺动脉高压肺血管重构,其机制可能与介导低氧诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖有关。     

小鼠血管内皮细胞转化机制研究

目的 运用转基因小鼠股动脉的损伤模型模拟临床的血管内膜损伤,通过谱系追踪分析血管损伤后血管重构、血管内皮细胞增生及分化病理机制.方法 运用可诱导的内皮细胞特异性标记的转基因小鼠与带有报告基因YFP(黄色荧光蛋白)的小鼠杂交,繁殖出可在诱导剂Tamoxifen注射后,YFP在内皮细胞特异表达的转基因小鼠.并模拟临床静脉移植术,建立小鼠颈静脉一股动脉内膜移植模型,设立术后0 h(未损伤)、3、7、14和35 d 5个时间点.于各时间点取组织进行免疫化学染色和计数观察.结果 活体的静脉移植实验中,标记YFP的内皮细胞系细胞逐渐获得平滑肌细胞的特征,而失去内皮细胞的特征.在离体实验中,内皮细胞(EOMA细胞)在TGF-β,诱导4 d后同样显示出平滑肌细胞的特性.结论 在血管移植后移植血管发生了血管重构,增厚的新生内膜中的内皮细胞转化为平滑肌样细胞.     

PCI后血管重构相关的血管活性物质

经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后再狭窄的防治，成为目前心血管病研究的热点。PCI后，对损伤近乎一致的细胞学反应是新生内膜的增生，增生组织内的细胞主要源于经过增生、迁移进入内膜的中层血管平滑肌细胞(VSMC)。在血管再狭窄过程中起重要作用的细胞还包括血小板、单核巨噬细胞和内皮细胞(EC)等，以及细胞受刺激后合成、分泌的多种生长因子、细胞因子等血管活性物质，它们在引发和维持增殖性反应中起重要作用^[1]。     

卡托普利对大鼠左向右分流模型肺小动脉重构的影响

目的观察血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）对肺循环容量负荷过重导致的肺血管重构的影响。方法采用腹主动脉一下腔静脉瘘制造大鼠容量负荷性肺动脉高压（PH）模型,并应用卡托普利进行干预,6周后观察各组肺动脉收缩压（PASP）、舒张压（PADP）、右室收缩压（RVSP）变化;心室重量变化;采用免疫组化染色比较肺血管平滑肌细胞（VSMC）α-平滑肌肌动蛋白（α-actin）及增殖细胞核抗原（PCNA）的阳性表达,比较15-50μm无肌性动脉肌性化程度以及肺小动脉50～100μm和101150μm血管厚度与血管外径之比（％WT）。结果手术组动物RVSP、PASP、PADP较对照组显著升高（P〈0．05）,手术＋卡托普利组RVSP、PASP、PADP均低于手术组（P〈0．05）;手术组RV／（LV＋S）、RV／BW、（LV＋S）／BW较对照组显著增加（P〈0．001）,而手术＋卡托普利组则较手术组明显降低（p〈0．01）,同对照组比较,手术组α-actin染色IOD值显著降低（P〈0．01）,而手术＋卡托普利组IOD值则高于手术组（P〈0．05）,手术组细胞PCNA阳性率显著升高（P〈0．01）,而手术＋卡托普利组低于手术组（P〈0．05）;手术组同其他两组比较,50～100μm、101～150μm血管％WT及15～50μm血管肌性化百分比显著增加（P〈0．01,）。结论卡托普利能有效地抑制肺动脉VSMC由收缩表型向合成表型转化,抑制VSMC的增生和肥厚,防止无肌性肺小动脉的肌性化,减缓PH肺血管重构进程,提示ACEI对左向右分流型先心病肺动脉高压有治疗前景。     

大鼠移植静脉重塑中Wnt5a表达的变化

 目的研究Wnt5a在自体移植静脉重塑过程中的表达变化。方法建立大鼠颈静脉-腹主动脉移植模型,分别于术后7、14、28d取材移植血管,采用免疫组化方法检测Wnt5a蛋白在移植血管中的表达,Real-timePCR定量检测Wnt5amRNA的表达;以对侧颈静脉作为对照。结果免疫组化结果显示：正常静脉、术后7、14、28d移植静脉Wnt5a阳性细胞比例分别为（4.67±0.21）%、（20.34±0.26）%、（35.25±0.20）%和（57.24±0.52）%,正常静脉与移植静脉之间差异有统计学意义（P<0.01）。Real-timePCR结果显示：术后7、14、28d大鼠Wnt5amRNA表达增加,分别为对照组的3.56、8.44和16.87倍。结论自体静脉移植后,Wnt5a在新生内膜及中膜中高表达,并可能与细胞增殖有关。     

Geminin基因RNA干扰对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的以RNA干扰抑制血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)Geminin基因的表达观测VSMCs增殖情况及表型标志物。方法分别利用RT-PCR,Western blot检测VSMCs中Geminin基因、蛋白表达的变化,筛选出干扰效果最为显著的序列用于构建慢病毒包裹的稳定干扰模型。应用[3H]-TdR、EdU掺入试验检测VSMCs增殖的情况;同时使用Western blot分别检测干扰前后相关标志性基因的表达。结果①siRNA转染后,以第1亚组干扰效果最为显著,与另外2个阳性亚组及对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。②[3H]-TdR、EdU掺入实验显示:阳性干扰组的掺入量较两对照组明显升高(P<0.05)。③siRNA转染使Geminin基因表达减弱后,阳性组VSMCs合成型标志物骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达水平显著升高,收缩型标志物平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin,α-Actin)表达水平明显降低,与对照组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 RNA干扰介导的Geminin基因沉寂可显著增强VSMCs的增殖能力,并有助于VSMCs的表型由收缩型向合成型转化。     

泛素蛋白连接酶1在大鼠颈动脉球囊损伤后新生内膜中的表达及意义

目的 研究胞质泛素蛋白连接酶1(KPC1)在大鼠颈动脉球囊损伤后的蛋白表达情况,探讨其在新生内膜形成过程中的生物学功能.方法 将成年雄性SD大鼠(450 ～ 500 g)随机分为假手术组和颈动脉球囊损伤模型组,建模后以左侧损伤动脉为实验组,同时以假手术组的左侧正常颈动脉为对照组.实验组大鼠于损伤后1d、3d、7d、14d、28d分别处死并取材,采用Western blot检测KPC1蛋白、内膜增殖细胞核抗原(PCNA)表达情况,以qRT-PCR检测KPC1的mRNA表达,苏木精-伊红(HE)染色后比较内膜增生程度;采用体外培养血管平滑肌细胞(VSMC)建立增殖模型,运用Western blot及qRT-PCR检测其KPC1蛋白、KPC1 mRNA表达特征.结果 Western blot结果显示,颈动脉球囊损伤后实验组KPC1蛋白表达水平明显低于正常对照组(P＜0.05),而PCNA蛋白表达量明显高于正常对照组(P＜0.05);qRT-PCR检测结果显示,实验组KPC1的mRNA水平明显低于对照组(P＜0.05);HE染色结果示颈动脉球囊损伤后1d、3d时光镜下血管内膜增生不明显;7d时光镜下可见新生内膜,增生的VSMC向内膜下迁移,管腔开始狭窄;14d时,可见明显新生内膜,VSMC排列紊乱,内弹力膜断裂,管腔明显狭窄,内膜厚度超过中膜;28d时,血管内膜继续不规则增生,血管腔狭窄程度继续加重,狭窄超过50％.体外培养并模拟VSMC增殖,提取细胞进行Western blot和qRT-PCR检测显示,KPC1蛋白、KPC1 mRNA表达在血小板源性生长因子-BB刺激增殖后开始逐渐减低.结论 抑制KPC1基因表达可促进损伤内膜增生,其作用机制可能与促进VSMC增殖有关.     

High glucose decreases the expression of ATP-binding cassette transporter G1 in human vascular smooth muscle cells

Objective:ATP-binding cassette transporters(ABC)A1 and G1 play an important role in mediating cholesterol efflux and preventing macrophage foam cell formation.In this study,we examined the regulation of ABC transporters by high glucose in human vascular smooth muscle cells(VSMCs),the other precursor of foam cells.Methods:Incubation of human VSMCs with D-glucose(5 to 30 mM)for 1 to 7 days in the presence or absence of antioxidant and nuclear factor(NF)-κB inhibitors,the expressions of ABCA1 and ABCG1 were analyzed by real time PCR and Western blotting.Results:High glucose decreased ABCG1 mRNA and protein expression in cultured VSMCs,whereas the expression of ABCA1 was not significantly decreased.Down-regulation of ABCG1 mRNA expression by high glucose was abolished by antioxidant N-acetyl-L-cysteine(NAC)and NF-κB inhibitors,BAY 11-7085 and tosyl-phenylalanine chloromethyl-ketone(TPCK).Conclusion:High glucose suppresses the expression of ABCG1 in VSMCs,which is the possible mechanism of VSMC derived foam cell transformation.     

细胞内游离钙在ACEI逆转SHR血管重构中的作用

目的：探讨细胞内游离钙在血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)逆转自发性高血压大鼠(SHR)血管重构中的作用。方法：采用SHR、正常血压大鼠(WKY)配对，服药前后对比及离体血管、淋巴细胞药物处理研究。结果：①SHR与WKY比较有以下血管重构现象：血管内膜有WBC粘附和侵袭，中层血管平滑肌细胞(VSMC)排列紊乱、纤维成分增多；血管内皮细胞及VSMC线粒体增多，体密度增加、肿胀，肌浆网扩张，比表面减少。②SHR外用淋巴细胞[Ca^2 ]i，主动脉平滑肌^45Ca静息内流，血浆血管紧张素Ⅱ浓度[ATⅡ]均较WKY显增加；③ACEI治疗后SHR血管重构现象得到逆转，血浆[ATⅡ]、淋巴细胞[Ca^2 ]i、主动脉平滑肌^45Ca静息内流均降低；④离体情况下ATⅡ能使SHR、WKY主动脉平滑肌^45Ca静息内流及淋巴细胞[Ca^2 ]i增加，ACEI使以上指标下降。结论：ACEI能有效逆转高血压血管重构现象，其作用可能同有效纠正血管平滑肌细胞内皮细胞钙超负荷及调节异常细胞内游离钙代谢有关。     

慢性缺氧所致肺血管结构改建机制的探讨

利用常压缺氧舱建立大鼠肺缺氧模型,通过ＨＥ、ＶＧ、免疫组化染色及电镜,观察慢性缺氧所致的肺血管结构改建。发现其结构改建主要表现为：①肺动脉外膜胶原纤维增生;②肺外周肌性小动脉中膜增厚;③肺泡内无肌性小动脉肌型化。并对慢性缺氧所致肺血管结构改建的机制进行了探讨。     

姜黄素诱导的平滑肌细胞凋亡在球囊损伤后内膜增生中的作用

目的:观察姜黄素对家兔髂动脉球囊损伤后血管内膜增生的影响。方法:新西兰大白兔30只,随机分为3组:对照(C1)组、阿托伐他汀(G2)组、姜黄素(G3)组,每组各10只。所有实验组在高脂饮食基础上均予灌胃给药,其中G3组予姜黄素100mg/(kg·d),G2组予阿托伐他汀2.5mg/(kg·d),G1组予生理盐水5ml/d。1周后制作髂动脉球囊损伤模型,5周后取目的血管,经苏木精-伊红、弹力纤维染色观察内膜增生情况,同时电镜观察细胞凋亡,并检测凋亡基因p53、Caspase3。结果:病理切片图像分析显示内膜增生程度由强到弱为:G1组>G2组>G3组。在G3组p53表达明显增高,其他两组无差异(P>0.05)。Caspase3表达以G3组最高。电镜观察G3组平滑肌细胞可呈早中期凋亡现象。结论:姜黄素具有诱导血管平滑肌细胞凋亡作用,在一定程度上抑制血管内膜增生。     

Dichloroacetate与肺动脉平滑肌细胞增殖及凋亡关系的研究

目的探讨Dichloroacetate（DCA）对低氧导致的肺动脉平滑肌细胞（PASMC）增殖和凋亡的影响及其机制。方法原代培养大鼠肺动脉平滑肌细胞并传代纯化，实验用第3～8代细胞，实验共分3组：①对照组：不加特殊试剂，不作低氧处理；②低氧组：低氧处理24 h，不加特殊试剂；③低氧＋DCA组：低氧处理24 h，在进行低氧处理之前加入终浓度为0.1 mol/L的DCA。每组各6孔细胞。用免疫组化的方法检测并比较3组细胞的增殖和凋亡情况。结果低氧组增殖细胞核抗原（PCNA）的平均光度值是对照组的2.7倍，而低氧＋DCA组仅是对照组的1.7倍，Caspase-3在低氧组的表达最低，是对照组的1/4，低氧＋DCA组Caspase-3表达较对照组减低，但较低氧组明显增加，是低氧组的2倍。TUNEL法同样提示凋亡在低氧组最低，对照组最高，低氧＋DCA组居中。结论DCA可抑制PASMC增殖并促进其凋亡，可能对阻止肺动脉高压血管重构起一定作用。     

血府逐瘀汤对野百合碱诱导肺血管重构大鼠ET-1、NO的干预作用

目的：观察血府逐瘀汤（XFZYT）对野百合碱（MCT）诱导肺血管重构大鼠ET-1、NO干预作用,探讨其作用机制。方法：雄性SD大鼠54只,随机分成正常对照组、模型组、血府逐瘀汤预防组、血府逐瘀汤治疗组、对照Ⅰ组和对照Ⅱ组,每组9只。采用一次性腹腔注射MCT（60mg/kg）复制肺血管重构模型,血府逐瘀汤预防组、对照Ⅰ组造模第2天起给药,血府逐瘀汤治疗组、对照Ⅱ组造模第15天起给药。至实验第28天采集组织标本,观察各组大鼠肺血管病理形态学及测定血ET-1、NO含量变化。结果：与正常对照组比较,模型组大鼠肺小动脉管壁变厚、管腔变小,血浆ET-1增多,血清NO减少（P〈0.01）;与模型组比较,各药物组血浆ET-1含量降低,血清NO含量升高（除外血府逐瘀汤治疗组）,肺小动脉管壁有不同程度变薄、管腔变大（P〈0.01~0.05）。结论：血府逐瘀汤能有效减轻大鼠肺血管重构,其机制可能与通过调节ET-1和NO代谢有关。