膀胱癌EphA2 mRNA和EphrinA1 mRNA的表达及其意义

[目的]研究EphA2 mRNA和EphrinAl mRNA在膀胱癌中的表达及其意义.[方法]应用逆转录一聚合酶链式反应(RT-PCR)检测50例膀胱癌冰冻标本中EphA2 mRNA和EphrinAl mRNA的表达,比较各自mRNA与其蛋白表达的相关性及与临床病理特征的关系.[结果]膀胱癌组织中EphA2、EphrinAl mRNA的表达均与组织学分级、淋巴结转移及TNM分期显著相关(P＜0.05); EphA2和EphrinA1蛋白在膀胱癌的表达与各自mRNA的表达水平不完全一致.[结论]EphA2 mRNA和EphrinA1mRNA阳性表达与膀胱癌的恶性行为相关.     

乳腺癌组织EphA2和EphrinA1蛋白表达及其临床意义的探讨

目的:研究EphA2和Ephri-1nA1蛋白在乳腺癌组织中的表达及其意义.方法:用免疫组织化学SP法检测130例乳腺癌组织中EphA2和EphrinA1的蛋白表达水平及其与临床病理因素的关系.结果:130例乳腺癌组织中,EphA2和EphrinA1蛋白的阳性表达率分别为72.31%和59.23%;EphA2蛋白在乳腺癌的阳性表达率与临床分期、淋巴结转移和组织学分级显著相关,P(0.05.EphrinA1蛋白的阳性表达率与临床分期、组织学分级显著相关,P<0.05.EphA2和EphrinA1蛋白阳性染色共同定位于大致相同的肿瘤区域和血管内皮细胞,两者在乳腺癌组织中的阳性表达显著相关,P<0.05.结论:EphA2和EphrinA1可能与乳腺癌的发生发展有关.它们的联合检测有助于客观评估乳腺癌的生物学行为,可用来指导临床用药和预测预后.     

EphA2/EphrinA1在胃癌中的表达及其意义

目的：探计EphA2及其配体EphrinA1在胃癌组织中的表达及与胃癌临床病理特征的关系。方法：利用免疫组织化学法检测82例胃癌手术切除标本的癌组织、癌旁组织及正常胃粘膜内EphA2、EphrinA1和E-cadherin的表达；并采用流式细胞术对其中随机选取的45例标本进行上述三种蛋白的定量分析，采用SPSS软件进行统计学处理。结果：胃癌组织中EphA2、EphrinA1的表达明显高于癌旁组织及正常胃粘膜（P〈0．01），而癌旁组织与正常胃粘膜之间无显著性差异（P〉0．05）；E—cadherin在胃癌组织中的表达明显低于癌旁组织和正常胃粘膜（P〈0．01），而癌旁组织与正常胃粘膜间无显著性差异（P〉0．05）。在胃癌组织中，随分化程度的降低，EphA2、EphrinA1蛋白的表达均显著升高（P〈0．05），而E-cadherin蛋白的表达则显著降低（P〈0．05）；随浸润深度的增加，EphA2、EphrinA1蛋白的表达均显著升高（P〈0．05），而E-cadherin蛋白的表达显著降低（P〈0．05）；淋巴结转移组中EphA2、EphrinA1蛋白的表达显著高于无淋巴结转移组（P〈0．05），而E-cadherin蛋白的表达则显著低于无淋巴结转移组（P〈0．05）；EphA2、EphrinA1和E-cadherin蛋白的表达与肿瘤直径、患者的性别和年龄无关（P〉0．05）EphA2与E—cadherin蛋白的表达呈显著负相关（r=-0．231，P〈0．01），EphrinA1与E-cadherin蛋白的表达呈显著负相关（r=-0．403，P〈0．01），EphA2与EphrinA1蛋白的表达呈显著正相关（r=0．707，P〈0．01）。结论：EphA2／EphrinA1与E-cadherin蛋白表达异常可能共同参与了胃癌的发生、发展与转移；联合捡测三种蛋白对于评价胃癌的恶性程度、判断其转移潜能具有一定的参考价值。     

肾癌中EphA2和EphrinA1的表达及其与微血管密度的关系

目的 探讨EphA2和EphrinA1在肾癌组织中的表达,及其与肿瘤血管生成的关系.方法 应用用免疫组化法检测68例肾癌组织、24例正常肾组织中EphA2和EphfinA1的表达,采用CD34抗体标记微血管内皮细胞,计算微血管密度(MVD).结果 肾癌组织中EphA2和EphrinA1蛋白的表达明显高于正常肾组织(均P<0.01).正常肾组织中MVD为25.23±7.09,肾癌组织中MVD为39.68±7.24,差异有统计学意义(P<0.01).在肾癌组织中,分化程度为2、3级组的EphA2和EphrinA1蛋白表达水平高于分级为1级组(P<0.01,P<0.05),分期为Ⅲ、Ⅳ期组高于Ⅰ、Ⅱ期组(P<0.01,P<0.05),有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组(P<0.05);肿瘤直径≥7 cm组的MVD高于<7 cm组(P<0.05),分化程度为2、3级组高于1级组(P<0.01),分期为Ⅲ、Ⅳ期组高于Ⅰ、Ⅱ期组(P<0.05),有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组(P<0.01).相关分析结果显示,EphA2、EphrinA1的表达与MVD呈正相关(r分别为0.555和0.485,均P<0.01).结论 EphA2和EphrinA1在肾癌组织中高表达,并与肿瘤的分化程度、临床分期、肿瘤血管生成有关.     

EphA2及其配体EphrinA1在恶性脑胶质瘤中的表达及与血管生成的关系

  目的  检测酪氨酸激酶受体EphA2及其配体EphrinA1在恶性脑胶质瘤中的表达,并探讨其与胶质瘤血管生成的关系。  方法  采用免疫组织化学S-P法检测62例胶质瘤组织及8例正常脑组织中EphA2、EphrinA1的表达情况,并采用CD105抗体标记微血管内皮细胞,计算微血管密度（microvesseldensity,MVD）。探讨EphA2、EphrinA1的表达水平与胶质瘤的微血管生成之间可能存在的关系。  结果  EphA2、MVD在胶质瘤中阳性表达明显高于正常脑组织,二者差异显著（P<0.01）。而且随着肿瘤恶性程度增加,EphA2及MVD蛋白染色强度和阳性细胞数均明显升高,高级别脑胶质瘤（Ⅲ~Ⅳ）中EphA2及MVD强阳性表达明显高于低级别胶质瘤组,差异有显著统计学意义（P<0.01）。EphrinA1则具有相反的趋势,在大多数恶性脑胶质瘤中呈低水平表达,在低级别胶质瘤和正常组织中呈较高水平表达,且胶质瘤级别越低EphrinA1表达越高。EphA2表达与MVD呈显著正相关（r=0.713,P<0.01）,EphrinA1表达与MVD呈显著负相关（r=-0.772,P<0.01）,EphA2的表达与EphrinA1呈显著负相关（r=-0.912,P<0.01）。  结论  EphA2在恶性脑胶质瘤中特异性高表达、EphrinA1特异性低表达与胶质瘤的侵袭性和恶性程度密切相关,且EphA2过表达和EphrinA1的缺陷表达可能协同促进胶质瘤组织新生血管的生成,在胶质瘤的发病及恶性进展中发挥重要作用。      

EphrinA1、ERα 和 ERβ 在乳腺癌中的表达及其意义

目的：研究乳腺癌中EphrinAl、ERa和ERB蛋白的表达及其意义。方法：用免疫组织化学SP法检测130例乳腺癌组织中EphrinAl、ERa及ERB蛋白的表达水平,研究其与各临床病理因素的关系。结果：130例乳腺癌组织中EphrinAl、ERa和ERB的阳性率分别为59．23％、63．08％和53．08％。EphrinAl蛋白在乳腺癌的阳性表达率与临床分期、淋巴结转移和组织学分级显著相关（P〈0．05）;ERa蛋白阳性表达率与各临床病理因素均无显著相关（P〉0．05）;ERB蛋白的阳性表达与组织学分级显著相关（P〈0．05）。EphrinAl在乳腺癌中表达与ERa表达无显著相关（P〉0．05）;EphrinAl蛋白在乳腺癌中表达与ERB蛋白显著相关（P〈0．05）。结论：EphrinAl、ERa和ERB可能在乳腺癌的发生发展中发挥重要作用。联合检测可评估乳腺癌的生物学行为,并指导临床用药和预测预后。     

肾癌中EphA2/EphrinA1和E-cadherin的表达及其意义

目的：探讨EphA2/EphrinA1和E—cadherin在肾癌组织中的表达及与肾癌临床病理特征的关系．方法：利用免疫组织化学法检测68例肾癌组织、24例正常肾组织中EphA2、EphrinA1和E—cadherin的表达；并采用流式细胞术对上述三种蛋白进行定量分析，采用SPSS13．0进行统计学处理。结果：肾癌组织中EphA2、EphrinA1的表达明显高于正常肾组织（P〈0．01）；E-cadhetin的表达明显低于正常肾组织（P〈0．01）。在肾癌组织中，肿瘤高分级组EphA2、EphrinA1蛋白的表达水平（IHC、FCM）显著高于低分级组（P〈0．01，P〈0．05），而E—eadherin蛋白的表达（IHC）显著低于低分级组（P〈0．01）；肿瘤高分期组EphA2、EphrinA1蛋白的表达水平（IHC、FCM）显著高于低分期组（P〈0．01，P〈0．05），而E—cadherin蛋白的表达（IHC）显著低于低分期组（P〈0．01），淋巴结转移组EphA2、EphrinA1蛋白的表达（IHC、FCM）显著高于无淋巴结转移组（P〈0．05）。而E—cadherin蛋白的表达（IHC）显著低于无淋巴结转移组（P〈0．05）。免疫组织化学显示EphA2与E-cadherin蛋白的表达呈显著负相关（r=-0．483，P〈0．01），EphrinA1与E-cadherin蛋白的表达呈显著负相关（E-0．414，P〈0．01）．EphA2与EphrinA1蛋白的表达呈显著正相关（r=-0．906，P〈0．01）。结论：EphA2／EphrinA1与E—cadherin蛋白表达异常可能共同参与了肾癌的发生、发展与转移；联合检测三种蛋白对于评价肾癌的恶性程度、判断其转移潜能具有一定的参考价值。     

CD15、CD44v6和nm23H1的mRNA在鼻咽癌中表达的临床意义及相关性

目的　探讨CD15mRNA及其蛋白、CD44v6和nm2 3H1的mRNA表达与鼻咽癌 (NPC)临床意义及其相关性。方法　应用免疫组化和原位杂交CSA方法 ,检测 6 5例NPC中CD15mRNA及其蛋白、CD44v6和nm2 3H 1的mRNA表达 ,结合临床病理指标及随访病例进行研究分析。结果　在NPC中CD15mRNA及其蛋白、CD44v6和nm 2 3H1的mR NA表达阳性率分别为 44.6 %、40 %、47.7%和 5 2 .3 %。CD15mRNA及其蛋白、CD44v6mRNA阳性表达和nm2 3H1mR NA阴性表达与NPC原发病灶分期和淋巴结转移均呈正相关 ,患者 5年内复发转移率高 (P <0 .0 1) ,5年存活率低 (P <0 .0 5 )。CD15mRNA与其蛋白表达和CD44v6mRNA表达呈正相关 ,与 2 3nmH1mRNA表达呈负相关。结论　 (1)NPC中CD15mRNA表达与CD44v6和nm2 3H1的mRNA表达具有调节和负调节的协同作用。 (2 )CD15、CD44v6和nm 2 3H1的mRNA均可作为预测NPC转移、复发和评估预后的重要生物学指标。     

Pokemon mRNA与c-myc蛋白在乳腺癌组织中的表达及其相关性

目的探讨人乳腺癌中原癌基因c-myc和Pokemon mRNA在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌发生、转移的关系。方法收集本院2008年1月至10月45例浸润性导管癌组织标本、20例癌旁乳腺组织标本和20例正常乳腺组织标本,均为女性,年龄23～69岁。所有标本均经临床病理确诊。采用原位杂交法检测Pokemon mRNA表达,采用免疫组织化学法检测c-myc表达。采用卡方检验和等级相关法进行统计分析。结果 (1)Pokemon mRNA的阳性表达率在乳腺癌组织、癌旁乳腺组织和正常乳腺组织中分别是71.11%(32/45),30.00%(6/20)和20.00%(4/20),3者间差异有统计学意义(P=0.000)。c-myc阳性表达率在乳腺癌组织、癌旁乳腺组织和正常乳腺组织中分别是86.67%(39/45),60.00%(12/20)和50.00%(10/20),3者间差异有统计学意义(P=0.004)。(2)乳腺癌细胞质Pokemon mRNA表达和乳腺癌细胞质c-myc表达都与乳腺癌腋窝淋巴结转移有关(P=0.012,P=0.027)。(3)乳腺癌细胞质Pokemon mRNA表达与c-myc表达有关联性(r=0.585,P0.000)。结论 Pokemon mRNA和c-myc蛋白可能参与乳腺导管癌的发生和转移。Pokemon mRNA表达和c-myc表达两者间有相关性。     

RUNX3基因在乳腺癌组织和乳腺癌细胞系中的表达及意义

[目的]探讨乳腺癌组织和细胞系中RUNX3基因mRNA与蛋白表达及在乳腺癌发生中的作用。[方法]运用RT-PCR、WesternBlot方法研究5种乳腺癌细胞系、1种正常乳腺细胞系和30对新鲜乳腺癌及癌旁对照组织中RUNX3mRNA和蛋白表达。[结果]5种乳腺癌细胞系中有3种(T47D、MCF7和SKBR3)RUNX3mRNA和蛋白表达阴性。30例新鲜的乳腺癌组织中RUNX3mRNA和蛋白表达明显低于癌旁正常对照组织,差异具有统计学意义。RUNX3蛋白表达与乳腺癌临床分期、淋巴结转移相关,而与患者的年龄、病理分级无关。[结论]RUNX3基因可能作为一个抑癌基因参与乳腺癌的发生。     

乳腺癌中MTA1、MMP-9mRNA表达与临床病理研究

目的：探讨MTA1、MMP-9mRNA表达量与乳腺癌淋巴转移的关系及临床意义,初步探讨MTA1、MMP-9mRNA之间的关系。方法：采用免疫组化法对45例侵润性乳腺导管癌中MTA1表达进行检测,原位杂交法对MMP-9mRNA表达进行检测。结果：乳腺癌中MTAI、MMP-9mRNA（肿瘤细胞）、MMP-9mRNA（间质细胞）阳性表达率为71％、49％、58％。MTA1与淋巴结转移相关,与年龄、肿瘤大小、ER、PR、c—erbB-2无相关性;MTA1蛋白定位变化与乳腺癌淋巴结转移相关（P〈0．05）;MMP-9mRNA（肿瘤细胞）与临床病理特征均无相关性;MMP-9mRNA（间质细胞）与淋巴结转移正相关（P〈0．05）,与PR呈负相关（P〈0．05）;MTA1阴性时肿瘤细胞内MMP-9mRNA表达率为38％,MTA1阳性时MMP-9mRNA表达率为50％,无显著性差异。结论：MTA1高表达促进乳腺癌细胞的淋巴结转移,MTA1蛋白定位变化与乳腺癌淋巴结转移相关;MTA1的过度表达可能是导致肿瘤细胞内MMP-9mRNA表达下降的因素。     

Up-regulation of EphA2 and down-regulation of EphrinA1 are associated with the aggressive phenotype and poor prognosis of malignant glioma

Malignant gliomas display over-expression of the receptor tyrosine kinase EphA2. However, expression levels of the EphA2 ligand, EphrinA1, have not been fully elucidated. Seventy-eight patients with primary gliomas were included in this study who underwent surgical resection, radiation, and chemotherapy. The expression of EphA2 and EphrinA1 in tumors was assessed by immunohistochemistry and was statistically analyzed in combination with the follow-up data of patients. EphA2 was highly expressed in most malignant gliomas, but EphrinA1 was expressed at low levels in these tumors. The increased EphA2 expression is associated with higher-grade histology and poor patient prognosis. Contrary to this, the increased EphrinA1 expression is associated with lower-grade histology, but not associated with poor patient prognosis. Moreover, patients with tumors positive for EphA2 and negative for EphrinA1 had significantly shorter overall and progression-free survival than patients with tumors positive for both EphA2 and EphrinA1, negative for both EphA2 and EphrinA1, or negative for EphA2 and positive for EphrinA1. RNAi-mediated suppression of endogenous EphA2 in human glioblastoma multiforme cells resulted in increased EphrinA1 levels, as well as decreased cell viability, anchorage independence and in vitro invasion, and increased apoptosis. Furthermore, suppression of EphA2 resulted in delayed tumor growth in mice xenografts. Together, these data indicate that up-regulation of EphA2 and down-regulation of Ephrina1 may correlate with poor prognosis for patients with high-grade glioma. EphA2 suppression partially reversed the aggressive phenotypes of malignant gliomas, possibly through up-regulating EphrinA1 expression, which may help explain how EphA2 modulates the malignant progression of gliomas.     

Immunocompetent mouse model of breast cancer for preclinical testing of EphA2-targeted therapy

EphA2, a receptor tyrosine kinase, is elevated in many invasive human breast cancers, and the majority of EphA2 remains unphosphorylated. The successful attachment of ligand EphrinA1 present on the surface of adjacent cells to EphA2 initiates EphA2 phosphorylation leading to its turnover. In vivo efficacy of various approaches targeting EphA2 for breast cancer therapy is usually evaluated in nude mice bearing human breast cancer xenografts. In order to establish an immunocompetent mouse model of breast cancer for EphA2-targeted therapies, we evaluated a mouse breast cancer cell line (MT1A2) for EphA2 expression and phosphorylation. Overexpression of EphA2 was observed in MT1A2 cells and the majority of it remained unphosphorylated signifying that EphA2 in MT1A2 cells behaved similar to that of human breast cancer cells. Human adenovirus subtype 5 (HAd5) vectors expressing secretory forms of EphrinA1 were used for in vitro and in vivo targeting of MT1A2-derived EphA2. MT1A2 cells infected with HAd-EphrinA1-Fc (HAd expressing extracellular domain of human EphrinA1 attached to Fc portion of human IgG1 heavy chain) induced EphA2 activation and its turnover. This led to inhibition in MT1A2 cell colony formation in soft agar and cell viability in monolayer culture. In addition, MT1A2 cells-infected with HAd-EphrinA1-Fc failed to form tumors in syngeneic FVB/n mice at least 32 days postinoculation. Moreover, intratumoral inoculation of FVB/n mice-bearing MT1A2-induced tumors with HAd-EphrinA1-Fc slowed the tumor growth and also resulted in the development of vector-specific immune response. These results indicate that FVB/n mice-bearing MT1A2-induced tumors could serve as an immunocompetent model of breast cancer for EphA2-targeted therapeutic strategies.     

skp2、p27kip1在正常胃黏膜和胃癌组织中的表达

[目的]探讨细胞S相激酶相关蛋白2（skp2）和细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白27（p27^kip1）表达与胃癌发生的关系。[方法]用免疫组化SP法检测69例胃癌组织中skp2、p27^kip1蛋白的表达，并与28例正常胃黏膜作对比；用RT-PCR方法随机检测其中3例胃癌组织中skp2的mRNA表达，并与其正常胃黏膜作对比。[结果]p27^kip1蛋白阳性表达率在胃癌中为46.38％，而正常胃组织中为96．43％（P〈0．00。p27^kip1蛋白在胃癌中的阳性表达率随肿瘤分化程度的降低、浸润深度的加深、淋巴结转移、病理分期进展而降低（10〈0．05）。skp2 mRNA在胃癌组织中的表达明显上凋（P〈0．01）。skp2蛋白阳性表达率在胃癌中为33.33％，而正常胃组织中为10．71％（P〈0．05）。skp2蛋白阳性表达率随肿瘤的分化程度降低而升高fP〈0．05）。skp2、p27^kip1蛋白在胃癌中的表达呈负相关（P〈0．01）。[结论]p27^kip1、skp2蛋白检测有助于胃癌的临床诊断及判断预后。     

E6蛋白、UBE3A和p53蛋白在38例乳腺癌中的表达

[目的]研究E6蛋白、UBE3A与p53蛋白在乳腺癌组织中的表达。[方法]免疫组化（SP法）染色法观察38例乳腺浸润性导管癌及正常乳腺组织中UBE3A、E6蛋白与p53蛋白的表达情况。[结果]38例乳腺癌组织中UBE3A与E6蛋白表达均为阳性（100%）;p53蛋白在乳腺癌组织中有34例（89.5%）表达阴性,4例（11.5%）表达阳性。在正常组织中UBE3A、E6蛋白表达均为阴性（100%）,p53表达为弱阳性（100%）。[结论]HPVE6蛋白与UBE3A及p53蛋白结合可能导致p53蛋白的降解,对该降解机制进行干预可能是乳腺癌生物学治疗的一个靶点。     

乳腺癌组织中BRMS1mRNA表达及意义

[目的]探讨BRMS1mRNA在乳腺癌中的表达及其与乳腺癌临床病理特征的关系。[方法]采用Trizol提取组织总RNA，将mRNA转录成cDNA，用实时荧光定量聚合酶链反应（RFQ-PCR）技术检测乳腺组织BRMS1mRNA表达，以BRMS1mRNA和GAPDHmRNA含量的比值表示BRMS1表达水平。[结果]乳腺癌组织中BRMS1mRNA的表达水平明显低于癌旁组织（P〈0．01），也明显低于正常乳腺组织（P〈0．01），BRMR1mRNA低表达与临床病理分期和淋巴结转移有关（P〈0．05，P〈0．01），而与患者年龄、癌肿大小、病理类型无关（P〉0．05）。[结论]乳腺癌组织中BRMS1mRNA的低表达与乳腺癌的发展与转移有关，可能成为判断乳腺癌转移的一个标志物。     

乳腺癌 EphA2,ERα 和 ERβ 蛋白的表达及意义简

目的：研究EphA2,ERα和ERβ等在乳腺癌中的表达及意义。方法：用免疫组织化学SP法检测130例乳腺癌组织中EphA2,ERα和ERβ表达水平及与临床病理因素的关系。结果：EphA2,ERα和ERβ在130例乳腺癌组织中的阳性率分别为72．31％,63．08％和53．08％。EphA2在乳腺癌的阳性表达率与临床分期、淋巴结转移和组织学分级显著相关（P〈0．05）。ERα的阳性表达率与各临床病理因素均无显著相关（P〉0．05）。ERβ的阳性表达与组织学分级显著相关（P〈0．05）。EphA2的阳性表达率在乳腺癌ERα阴性组显著高于ERα阳性组（P〈0．05）。EphA2在乳腺癌中表达的阳性率与ERβ在乳腺癌中的阳性率呈显著性相关（P〈0．05）,即EphA2表达的阳性率随着ERβ阳性率的增高呈升高趋势。结论：乳腺癌的发生发展与E—phA2,ERα和ERβ有关。可通过联合检测它们在乳腺癌中的表达来评估乳腺癌的生物学行为、指导临床用药和预测预后。