抗桥粒芯蛋白抗体对天疱疮的临床诊断价值

目的研究天疱疮患者血清中抗桥粒芯蛋白(desmoglein,Dsg)1和抗Dsg3抗体水平在天疱疮的临床诊断价值。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定62例天疱疮患者血清中抗Dsg1和抗Dsg3抗体水平;间接免疫荧光法(IIF)测定天疱疮抗体Ig G水平。结果 62例天疱疮患者中抗Dsg1抗体或抗Dsg3抗体任一阳性共50例,阳性率80.65%,与间接免疫荧光法(IIF)相比两种方法差异无统计学意义(P0.05)。因此抗Dsg抗体具有和IIF一样的临床诊断价值。34例寻常型天疱疮(PV)中抗Dsg3抗体阳性或抗Dsg1和抗Dsg3抗体均阳的28例,阳性率82.35%;24例落叶型天疱疮(PF)中抗Dsg1抗体阳性的为20例,阳性率83.33%。可见抗Dsg3抗体是PV的鉴别诊断指标,抗Dsg1抗体是PF的鉴别诊断指标。此外,通过对治疗前后抗Dsg1抗和Dsg3抗体的滴度水平的检测发现,抗Dsg1和抗Dsg3抗体还可作为天疱疮治疗监测的指标。结论采用ELISA方法测定天疱疮患者外周血抗Dsg1抗体和抗Dsg3抗体,方法简便,对患者创伤小,有一定的诊断和鉴别诊断价值。另外,抗Dsg1抗体和抗Dsg3抗体还可作为监测天疱疮治疗效果的指标。     

天疱疮患者病情与抗桥粒芯蛋白抗体水平的相关性研究

目的:研究天疱疮患者血清中抗桥粒芯蛋白(desmoglein,Dsg)1和抗Dsg3抗体水平与其皮肤、口腔黏膜损害严重程度的相关性,同时对间接免疫荧光(IIF)检测的天疱疮抗体滴度与治疗中使用皮质类固醇控制剂量的相关性进行分析。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒测定55例天疱疮患者血清中抗Dsg1和抗Dsg3抗体水平。结果:抗Dsg1抗体水平与患者皮肤损害严重程度有显著相关性(P<0.01),抗Dsg3抗体水平与口腔黏膜损害严重程度有显著相关性(P<0.01)。天疱疮患者血清IIF滴度与抗Dsg1抗体水平相关(P<0.01),寻常型天疱疮患者IIF滴度与抗Dsg1和抗Dsg3抗体水平均有相关性(P分别<0.01和<0.05)。寻常型天疱疮患者皮质类固醇控制剂量与抗Dsg1抗体水平和IIF滴度显著相关(P<0.05)。结论:ELISA方法检测天疱疮患者抗Dsg1和抗Dsg3抗体对天疱疮的临床诊断、分型、衡量口腔黏膜和皮肤损害严重程度具有一定意义。     

ELISA技术检测寻常型天疱疮桥粒芯蛋白3抗体水平研究

目的:评价酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗桥粒芯蛋白(desmoglein,Dsg)3抗体在寻常型天疱疮(PV)诊断中的意义.方法:对来自不同中心的106例PV患者和106例对照人群血清标本编盲后,进行ELISA检测抗Dsg3自身抗体和间接免疫荧光(IIF)法检测血清天疱疮自身抗体.结果:ELISA法检测Dsg3抗体敏感度为77.4%,特异性为94.3%;IIF法检测抗体敏感度为79.2%,特异性为94.3%.两组间的差异无统计学意义.结论:ELISA方法检测Dsg3抗体对于寻常型天疱疮的诊断是一种较好的辅助方法.     

桥粒芯蛋白1酶联免疫吸附试验检测落叶型天疱疮血清抗体的评价

目的 探讨桥粒芯蛋白1（Dsg1）酶联免疫吸附试验（ELISA）检测落叶型天疱疮（PF）血清学抗体的意义。方法 将80例PF患者和132例对照人群的血清标本进行编盲,用ELISA法检测所有标本中抗Dsg1自身抗体,同时应用间接免疫荧光（IIF）法检测所有标本的抗体滴度,操作过程为随机检测,最后将两方法的结果进行比较。结果 75例PF患者和5例对照人群（包括1例不确定值,大疱性类天疱疮、SLE、皮肌炎、湿疹及健康者各1例）Dsg1 ELISA为阳性,71例PF患者和0例对照人群IIF为阳性。Dsg1 ELISA的敏感性为93.8%（95%可信区间0.85 ~ 0.98）,特异性为96.2%（95%可信区间0.91 ~ 0.99）。IIF的敏感性为88.8%（95%可信区间0.82 ~ 0.96）,特异性为100%（95%可信区间0.96 ~ 1.00）。两者相比,敏感性（P = 0.289）和特异性（P = 1.000）差异均无统计学意义。结论 Dsg1 ELISA是一种简便、敏感、特异的血清学检测方法,可作为诊断PF的一种辅助手段。     

非桥粒芯糖蛋白抗体在寻常型天疱疮中的作用机制

既往发现寻常型天疱疮(pemphigus vulgaris,PV)发病机制与桥粒芯糖蛋白1(desmoglein,Dsg1)和Dsg3抗体有关,目前在PV患者中发现大量非Dsg自身免疫性抗体,包括桥粒胶蛋白1(desmocollin,Dsc1)和Dsc3、斑菲素蛋白1(plakophilin,PKP1)和PKP3、斑珠...     

抗构象表位桥粒芯蛋白抗体和乙酰胆碱受体抗体滴度与寻常型天疱疮病情活动度的相关性研究

【摘要】 目的 研究寻常型天疱疮患者血清中相关抗体滴度与病情严重程度和病情活动度的相关性。方法 收集2012—2015年于中国医学科学院皮肤病医院首次就诊的24例活动期寻常型天疱疮（PV）患者,评估患者活动期和稳定期天疱疮疾病面积指数（PDAI）,并采集血清标本。采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测血清标本中具有致病作用的抗构象表位桥粒芯蛋白（Dsg）抗体滴度、总Dsg抗体滴度和乙酰胆碱受体（AChR）抗体滴度。计量资料比较采用t检验,计数资料比较采用Fisher 精确检验法,相关性比较采用Pearson分析。结果 活动期患者的Dsg1抗体滴度（611.4 ± 136.8）与抗构象表位Dsg1抗体滴度（585.5 ± 134.7）差异无统计学意义（t = 0.13,P = 0.89）,Dsg3抗体滴度（708.6 ± 130.7）高于抗构象表位Dsg3抗体滴度（297.2 ± 54.4,t = 2.90,P < 0.01）。活动期患者的Dsg1抗体滴度及抗构象表位Dsg1抗体滴度与PDAI评分均呈正相关（r = 0.54、0.54,均P < 0.01）;Dsg3抗体滴度与PDAI评分无相关性（r = 0.11,P = 0.62）,抗构象表位Dsg3抗体滴度与PDAI评分呈正相关（r = 0.53,P < 0.01）。20例稳定期患者血清中Dsg1抗体与抗构象表位Dsg1抗体滴度与首次就诊时比较均明显下降。Dsg3抗体滴度仅7例明显下降;13例仍存在较高滴度的Dsg3抗体,其中6例抗构象表位Dsg3抗体滴度明显下降,5例AChR抗体滴度由阳性转为阴性。结论 Dsg1抗体及抗构象表位Dsg1抗体滴度都可以反映病情活动度。部分患者病情活动度与Dsg3抗体滴度不一致,抗构象表位Dsg3抗体或者AChR抗体可能有助于反映病情活动度。     

桥粒芯糖蛋白抗体与天疱疮临床表型和疾病活动度的关系及其变化规律

【摘要】 目的 评估酶联免疫吸附试验（ELISA）检测桥粒芯糖蛋白1（Dsg1）、Dsg3抗体与天疱疮患者临床表型、疾病活动度的关系及变化规律。方法 收集2015年1月至2018年1月在中国医学科学院皮肤病医院就诊的天疱疮患者111例,按临床分型,采用ELISA测定患者初发时、控制阶段、维持阶段及复发时血清Dsg1、Dsg3抗体水平变化,并分析其变化规律。采用SPSS22软件,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD?t检验。结果 天疱疮初发时、控制阶段、维持阶段及复发时分别有92例、53例、33例、9例患者完成检测。92例初发患者中,36例落叶型天疱疮患者Dsg1和Dsg3抗体水平阳性率分别为100%、2.77%,10例黏膜型寻常型天疱疮分别为20%、80%,46例黏膜皮肤型寻常型天疱疮分别为97.82%、95.65%。初发时、控制阶段、维持阶段和复发时落叶型天疱疮患者Dsg1抗体水平分别为（137.43 ± 77.74）、（13.94 ± 14.81）、（21.50 ± 58.33）、（121.13 ± 86.89） U/ml;黏膜型寻常型天疱疮患者Dsg3抗体水平分别为（125.61 ± 94.81）、（34.5 ± 16.26）、0.6、258 U/ml;黏膜皮肤型寻常型天疱疮患者Dsg1抗体水平分别为（115.39 ± 70.62）、（15.74 ± 25.10）、（3.62 ± 12.09）、（78.60 ± 92.25） U/ml;Dsg3抗体水平分别为（137.98 ± 81.25）、（58.14 ± 63.46）、（29.26 ± 64.70）、（136.9 ± 101.47） U/ml。落叶型天疱疮Dsg1抗体水平和黏膜型寻常型天疱疮、黏膜皮肤型寻常型天疱疮Dsg3抗体水平在控制阶段、维持阶段均低于初发时、复发时（P < 0.05）。治疗过程中2例患者出现表位扩展现象,4例患者病情稳定期时出现Dsg抗体高滴度现象。结论 Dsg抗体谱与天疱疮临床表型相关,其ELISA值可用于监测疾病活动,并可对治疗的有效性作出评价。     

天疱疮患者桥粒芯糖蛋白抗体水平和疾病活动度关系及变化规律分析

目的 研究56例天疱疮患者疾病严重程度和桥粒芯糖蛋白1（Dsg1）和桥粒芯糖蛋白3（Dsg3）酶联免疫吸附试验（ELISA）指数之间的关系,探讨Dsg ELISA指数在不同型别天疱疮中转归的规律。 方法 用ELISA测定36例寻常型天疱疮和20例落叶型天疱疮患者治疗前、病情缓解且糖皮质激素开始减量时、糖皮质激素减量至相当于初始量1/2时、维持治疗开始时以及随诊2年时体内Dsg1和Dsg3 ELISA指数。 结果 Dsg ELISA指数与天疱疮疾病活动度相关,在疾病缓解时,Dsg ELISA指数下降,与治疗前差异均有统计学意义（P < 0.01）。在患者病情稳定使用维持量糖皮质激素、疗程到2年时,落叶型天疱疮中10例（50%）、寻常型天疱疮中7例（19.4%）Dsg1 ELISA指数出现阴性,只有1例（2.7%）寻常型天疱疮患者Dsg3 ELISA指数阴性。 结论 Dsg ELISA指数和天疱疮患者疾病严重程度相关,可能是一种评估病情的有用指标,可对治疗的有效性作出评价。     

抗StuD1抗体在诊断系统性红斑狼疮中的意义

目的 了解抗SmDI抗体在诊断系统性红斑狼疮(SLE)中的特异性和感敏性,探讨其在SLE诊断中的意义.方法 取120例SLE患者和230例非SLE患者的血清,并同时进行抗核抗体(间接免疫荧光法)、抗Sm抗体(免疫斑点法)、抗DNA抗体及抗SmD1抗体(免疫印迹法)检测,统计分析其对SLE患者诊断的特异性与敏感性.结果 SLE患者抗SmD1抗体的敏感性为69.17%,特异性为97.82%.结论 抗SmD1抗体特异性和敏感性均较高,可作为诊断SLE的参考指标,对SLE的诊断具有重要意义.     

桥粒芯糖蛋白1和2在不同表皮肿瘤中的表达

目的 探讨桥粒相关蛋白与皮肤肿瘤的关系,对桥粒芯糖蛋白1和2在鳞状细胞癌、日光性角化病、角化棘皮瘤、脂溢性角化病中的表达水平进行了比较研究.方法 免疫组化染色方法.结果 桥粒芯糖蛋白1和2在正常皮肤表皮全层细胞间呈现较强的染色,鳞状细胞癌组织中表达显着减弱或完全无表达,日光性角化病表皮正常区域表达正常或下调,细胞间变区域无染色,角化棘皮瘤和脂溢性角化病表皮中表达水平与正常皮肤的表达非常近似.结论 桥粒芯糖蛋白1和2在恶性皮肤癌中表达下调,可能与皮肤肿瘤的侵袭和转移有关.     

噬菌体展示技术构建寻常型天疱疮患者桥粒芯糖蛋白3抗体文库

目的：用噬菌体展示技术构建寻常型天疱疮患者桥粒芯糖蛋白3抗体文库。方法：收集寻常型天疱疮患者外周血,分离淋巴细胞抽提RNA,采和RT－PCR反应以人的抗体特异性HuVHBACK、HuJHFOR和HuVkBACK、HuJkFOR引物扩增抗体重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）基因片段,并将其与接头拼接成ScFv片段克隆于大肠杆菌。结果：抗体基因ScFv片段与噬菌体基因III的产物以融合蛋白的形式在噬菌体表面表达,构建了天疱疮患者的重组噬菌体抗体库,ELISA检测证明ScFv基因产物具有抗体活性。结论：天疱疮噬菌体抗体库的构建为天疱疮发病机理、诊断和治疗研究打下了基础。     

抗精子抗体和抗心磷脂抗体在不育夫妇血清中的表达及意义

目的:探讨抗精子抗体和抗心磷脂抗体在不育夫妇血清中的表达和意义。方法:应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测50对不育夫妇和40对正常生育夫妇血清中抗精子抗体和抗心磷脂抗体的表达情况及精液分析。结果:不育组男性血清抗精子抗体表达较对照组明显增高(P0.05),抗心磷脂抗体表达无统计学意义。不孕组女性抗精子抗体和抗心磷脂抗体表达较对照组明显增高具有统计学意义(P0.05)。男性中抗精子抗体阳性对精液量、PH值、精子密度及b级精子无影响。精子活率、a级精子、直线运动速度和曲线运动速度实验组与对照组相比差异有统计学意义(P0.01)。结论:抗精子抗体可降低精液质量;抗精子抗体和抗心磷脂抗体影响精子活率及精子运动,从而导致不孕不育。     

血清几丁质酶3样蛋白1水平在寻常型天疱疮中的临床意义研究

【摘要】 目的 检测寻常型天疱疮患者血清中几丁质酶3样蛋白1（YKL-40）水平,并分析其与病情严重程度的相关性。方法 2017年1月至2018年5月于西南医科大学附属医院皮肤科采集38例寻常型天疱疮患者血清,同时收集14例年龄、性别、体重指数匹配的健康对照者血清,采用多功能流式点阵仪测定血清中YKL-40以及Th1/Th2/Th17相关细胞因子浓度。采用Mann-Whitney U检验分析患者组与对照组细胞因子差异;利用二元Logistic回归法分析与病情严重程度独立相关的因素;绘制受试者操作特征曲线（ROC）,采用曲线下面积（AUC）、敏感性及特异性评价YKL-40预测天疱疮严重程度的能力。结果 与对照组相比,寻常型天疱疮患者血清中YKL-40水平［M（Q1,Q3）］［15.22（14.19,15.93）比13.64（13.21,14.63） μg/L,z = -3.88］以及细胞因子白细胞介素（IL）-6［2.05（1.49,4.21）比1.57（1.38,1.75） ng/L,z = -2.44］、IL-7［7.45（5.63,11.63）比3.77（2.21,5.97） ng/L,z = -3.26］、IL-8［6.59（3.60,14.73）比4.36（2.96,6.53） ng/L,z = -1.96］、IL-2R-α［509.08（386.36,757.67）比336.44（309.86,458.71） ng/L,z = -2.35］和C5a水平［100.35（78.31,140.84）比72.08（37.23,82.08） ng/L,z = -3.04］均显著升高（P < 0.05）。天疱疮患者YKL-40血清浓度随着皮损面积的减少而逐渐降低（r = 0.63,P < 0.001）,且YKL-40与病情严重程度独立相关［P = 0.025,优势比：46.54（95% CI：1.61 ~ 1 347.19）］。YKL-40区分重度和极重度患者与轻中度患者的AUC为0.783（95% CI：0.613 ~ 0.953）］。结论 血清YKL-40水平与寻常型天疱疮严重程度相关性强,具有预测寻常型天疱疮病情严重程度的潜在价值。     

热休克蛋白70在天疱疮中的意义

目的探讨HSP70在外周血单个核细胞(PBMC)及血清表达与天疱疮发病的关系,为进一步阐明天疱疮的发病机制提供新的理论依据。方法用实时定量PCR方法测定天疱疮患者PBMC中HSP70 mRNA含量;采用ELISA方法测定天疱疮患者外周血血清HSP70含量,同时以健康人为对照。ELISA方法测定天疱疮血清抗Dsg1和抗Dsg3滴度。结果天疱疮患者PBMC中HSP70 mRNA表达显著高于健康人(P0.05),并且寻常型(PV)组的表达显著高于落叶型(PF)组,差异有统计学意义(P0.05)。血清中HSP70的含量显著高于健康对照组(P0.05),并且PV组的表达显著高于PF组,差异有统计学意义(P0.05)。抗Dsg1阳性结果与PF组HSP70 mRNA的表达和HSP70存在线性相关;抗Dsg3阳性结果与PV组HSP70 mRNA的表达和HSP70存在线性相关。结论 HSP70的表达增高可能参与天疱疮的致病过程,HSP70有可能如抗Dsg一样,与天疱疮的发生、恶化、好转以及复发成正相关,可能成为诊断和监测天疱疮的一个新指标。     

副肿瘤性天疱疮抗Dsg1和抗Dsg3抗体滴度及亚型和细胞因子的表达

目的对不同病期的副肿瘤性天疱疮(PNP)患者血清中抗桥粒芯糖蛋白(Dsg)1和抗Dsg3抗体的滴度、亚型及其外周血单个核细胞(PBMC)中细胞因子IFN-γ和IL-4水平进行观察,探讨PNP的特殊发病机制。方法采用ELISA法检测6例PNP患者不同病期抗Dsg1和抗Dsg3抗体滴度及其IgG1和IgG4抗体亚型;采用流式细胞术(FCM)检测上述患者PBMC中T细胞的IFN-γ和IL-4水平,并与10例寻常型天疱疮(PV)患者、10例落叶型天疱疮(PF)患者及20例正常对照进行比较。结果 PNP患者组在急性期抗Dsg1和抗Dsg3抗体滴度均升高,稳定期均明显降低,抗Dsg1和抗Dsg3抗体亚型IgG1/IgG4均以IgG1为主,与PV组相比,差异均有统计学意义(P均<0.05),与PF组患者的抗Dsg1抗体亚型IgG1/IgG4比较,差异也有统计学意义(P<0.01);PNP组患者CD8+T细胞及CD4+T细胞内IFN-γ水平明显高于PV组患者和PF组患者(P=0.001),且稳定期CD8+T细胞及CD4+T细胞内IFN-γ水平较急性期明显降低(P<0.05)。PNP组急性期患者的CD4+T细胞内IL-4水平显著低于PV组患者(P<0.05)和PF组患者(P<0.01),但在稳定期时,其水平与急性期比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PNP患者在抗Dsg1和Dsg3抗体的亚型、细胞因子等方面与其他类型的天疱疮存在明显差异。     

非大疱性类天疱疮患者血清中的抗基底膜抗体

本文采用间接免疫荧光技术对208例不同病种患者及健康人的血清作抗基底膜抗体测定,其中包括大疱性类天疱疮25例、小腿溃疡58例、银屑病42例、心血管疾病43例以及健康人40名。25例类天疱疮中19例发现有抗基底膜抗体,滴度范围在1:80～     

桥粒芯糖蛋白3刺激下寻常型天疱疮患者外周血T淋巴细胞增殖检测分析

目的 观察桥粒芯糖蛋白3（Dsg3）对寻常型天疱疮（PV）患者外周血T淋巴细胞增殖的影响。方法 PV患者12例,正常人22例,提取外周血单一核细胞（PBMC）,采用流式细胞仪技术分别检测Dsg3刺激下PBMC中T淋巴细胞亚群变化及T淋巴细胞增殖情况,分析PV患者与正常人之间存在的差异。结果 PV患者PBMC在Dsg3刺激下Th2型T淋巴细胞所占比例为12.17% ± 5.32%,Th1型T淋巴细胞所占比例为4.08% ± 1.50%;未经Dsg3刺激的阴性对照组分别为9.84% ± 5.41%和3.91% ± 1.38%。PV患者PBMC在Dsg3刺激和无Dsg3刺激时的Th2型T淋巴细胞所占比例均显著高于正常人（P < 0.05）;Dsg3刺激下PV患者T淋巴细胞发生增殖,CD4+ T淋巴细胞增殖率为4.65% ± 3.28%,显著高于正常人（P < 0.05）。结论 Dsg3可诱导PV患者CD4+ T淋巴细胞发生特异性增殖,且主要为Th2优势型。     

天疱疮抗体亚类在天疱疮发病中的作用

目的 了解天疱疮抗体亚类在天疱疮发病中的作用。方法 用亲和层析法提取并纯化天疱疮抗体亚类,在天疱疮器官培养模型上观察各抗体亚类致棘层松解的作用：并用免疫印迹法测定各抗体亚类与角质形成细胞膜抗原的结合。结果 纯化的抗体亚类在浓度达到０．５ｍｇ／ｍＬ时均能在器官培养模型上致表皮产生棘层松解,并能与角质形成细胞膜表面相对分子质量为１０００００和１５０００蛋白结合。结论 天疱疮抗体亚类在体外模型上均有一定     

抗细胞浆自身抗体在诊断和随访Wegener肉芽肿病中的意义

组者对65例经活检证实的 Wegener 肉芽肿病(WG)、54例系统性血管炎、22例复发性多软骨炎、20例结节病、20例肺部恶性病变和15例其他疾病患者的周围血中性白细胞的细胞离心制备物,采用间接免疫荧光技术检测抗细胞浆自身抗体(ACPA),以评估 ACPA 对 WG 的特异性,敏感性与病变范围和活动程度的关系,以及以此作为诊断及随访 WG 的价值。     

抗dsDNA抗体、抗核小体抗体及抗C1q抗体在系统性红斑狼疮诊断中的价值

目的了解抗dsDNA抗体、抗核小体抗体(AnuA)和抗C1q抗体诊断系统性红斑狼疮(SLE)的价值。方法检测111例SLE患者、54例非SLE风湿患者及43名正常对照者血清中抗dsDNA抗体、AnuA和抗C1q抗体,比较3种抗体单独或联合诊断SLE的敏感性和特异性。结果 SLE组抗C1q抗体阳性率和AnuA阳性率及平均浓度与非SLE风湿组、正常对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。3种抗体单独检测诊断SLE,AnuA敏感性最高(52.3%),抗dsDNA抗体特异性最高(97.9%),3种抗体联合检测以抗dsDNA抗体+AnuA敏感性和特异性最高(分别为29.7%、99.0%)。3种抗体在研究人群中的分布,抗dsDNA抗体与AnuA符合率为81.25%,Kappa值为0.515。结论采用串联试验,3种抗体联合检测可增强SLE诊断的特异性,但敏感性降低。诊断SLE,抗C1q抗体和AnuA的浓度水平是否也应作为参考的指标,有待于对其与病情进展的关系作进一步研究。