槲皮素调控EGFR/AKT/mTOR信号通路影响人乳腺癌细胞株T47D增殖、凋亡的实验研究

目的对槲皮素调控表皮生长因子/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(EGFR/AKT/m TOR)信号通路影响人乳腺癌细胞株T47D增殖、凋亡进行分析。方法人乳腺癌细胞株T47D随机分为三组:对照组、雷帕霉素组和槲皮素组。对照组T47D细胞给予溶剂DMSO孵育,雷帕霉素组T47D细胞给予雷帕霉素(10μM)孵育,槲皮素组T47D细胞给予槲皮素(20μM)孵育。分析各组T47D细胞的凋亡蛋白及EGFR/AKT/m TOR信号通路蛋白的表达。结果与对照组相比,槲皮素组和雷帕霉素组细胞增殖受到明显地抑制(P0.05);槲皮素组和雷帕霉素组T47D细胞的促进凋亡分子Bax、Caspase3和Caspase9蛋白及mRNA水平明显高于对照组而抑制凋亡分子Bcl2蛋白及mRNA水平明显低于对照组(P0.05);槲皮素组和雷帕霉素组T47D细胞EGFR、AKT及m TOR蛋白及荧光强度均明显低于对照组(P0.05)。结论槲皮素能够通过抑制EGFR/AKT/m TOR信号通路促进人乳腺癌细胞株T47D的细胞凋亡过程。     

地特胰岛素对人乳腺癌细胞株MCF-7的增殖及凋亡的影响

目的：探讨地特胰岛素对人乳腺癌细胞株MCF-7的增殖和凋亡的影响及其分子机制.方法：用10 U/L地特胰岛素处理人乳腺癌细胞株MCF-7,处理不同时间后,用MTT法检测细胞的增殖情况,用流式细胞术检测细胞的凋亡情况,用Western blotting法检测胰岛素受体（insulin receptor,INS-R）和胰岛素样生长因子1类受体（type 1 insulin-like growth factor receptor,IGF-1R）的表达,用real-time PCR法检测B细胞淋巴瘤因子2（B cell lymphoma 2,Bcl 2）、IGF-1R、Myc-1和caspase-3的mRNA水平.结果：人乳腺癌细胞株MCF-7经地特胰岛素处理后,细胞增殖水平随处理时间的延长呈现增高趋势（r=0.753,P ＜0.01）,细胞凋亡水平则随处理时间的延长而降低（r=-0.821,P＜0.01）;INS-R和IGF-1R蛋白的表达水平随处理时间的延长而升高,之后有所降低;凋亡抑制基因Bcl-2、IGF-1R和Myc-1的mRNA水平也呈类似变化趋势（r=0.813,P＜0.01）,而促凋亡相关基因caspase-3则呈现相反的变化趋势（r=-0.719,P＜0.01）.结论：地特胰岛素处理可以促进人乳腺癌细胞株MCF-7的增殖并抑制其凋亡,其机制可能与促进凋亡抑制基因表达以及抑制凋亡基因表达有关.     

槲皮素对人结肠癌细胞体外增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的研究植物化学药物槲皮素对人结肠癌细胞的生长抑制作用和凋亡诱导效应。方法分别用不同浓度的槲皮素对人结肠癌细胞（Lovo细胞株）进行干预,采用MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期。结果与对照组相比,槲皮素对Lovo细胞具有显著的增殖抑制作用（P〈0.05）,细胞增殖抑制随浓度增加、时间延长逐渐降低,呈现量-效、时-效关系。槲皮素引起明显的细胞周期阻滞（P〈0.05）,将细胞周期阻滞在G2/M期。槲皮素呈浓度依赖性诱导细胞凋亡（P〈0.05）。结论槲皮素对结肠癌Lovo具有增殖抑制效应及凋亡诱导效应,是一种具有发展潜力的抗结肠癌药物。     

槲皮素联合顺铂调控PI3K/Akt信号通路对肺癌A549/DDP细胞增殖与凋亡的影响

目的 研究槲皮素联合顺铂对肺癌A549/DDP细胞增殖与凋亡的影响,并探讨磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路的作用机制.方法 将对数生长期人肺腺癌耐顺铂细胞株A549/DDP分为槲皮素+顺铂组(给予160μmol/L浓度的槲皮素和25μmol/L浓度的顺铂)、顺铂组(给予25μm...     

槲皮素对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及迁移的抑制作用

目的探讨槲皮素对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及迁移能力的影响。方法采用不同浓度槲皮素处理乳腺癌MCF-7细胞,以CCK8法观察乳腺癌MCF-7细胞的增殖活性,以划痕迁移实验检测槲皮素对MCF-7细胞迁移情况的影响。结果槲皮素处理后乳腺癌MCF-7细胞增殖率明显降低,且呈浓度和时间依赖性(P<0.05);划痕迁移实验中,随着槲皮素浓度提高,MCF-7迁移率呈递减趋势。结论槲皮素可抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖,并阻断MCF-7细胞迁移。     

丙泊酚调控PI3K/AKT信号通路对肺癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响

目的 探讨丙泊酚调控PI3 K/AKT信号通路对肺癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响.方法 传代培养人肺癌A549细胞株,根据细胞培养基中添加丙泊酚浓度的不同分为control组(未添加丙泊酚)、pL组(添加丙泊酚1.5μg/ml)和pH组(添加丙泊酚2.2μg/ml);克隆形成实验、细胞划痕实验及流式细胞术检测丙泊酚对肺癌...     

二氢杨梅素对乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡的影响

目的研究二氢杨梅素(DMY)对乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡的影响。方法 2014年3月至2015年2月,该院采用99%纯度的DMY为抑制剂,以乳腺癌MCF-7细胞为研究对象,采用MTT法、流式细胞术法和免疫细胞化学来分析乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡的情况。结果当使用浓度大于20μg/mL的DMY处理细胞时,出现了抑制效果,但效果不佳;当用40与80μg/mL的DMY时,明显地抑制了乳腺癌细胞MCF-6的增殖,且有不同程度的敏感性。当DMY为80μg/mL时,其IC50为226.9μg/mL。抑制率和IC50分别与0μg/mL DMY比较,差异有统计学意义(P0.05)。40与80μg/mL的DMY处理乳腺癌细胞MCF-6可以诱导其周期阻滞在G2/M期(P0.01),并表现出明显的细胞凋亡现象,同时,G0/G1期也受到阻滞,S期细胞比例降低明显,差异有统计学意义(P0.05);当使用浓度大于20μg/mL的DMY时,PCNA阳性率有所下降,当浓度为40μg/mL的DMY时,乳腺癌细胞MCF-6的PCNA阳性率明显下降(P0.01),尤其浓度为80μg/mL的DMY时,阳性率为10.00%。与0μg/mL DMY比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论对乳腺癌患者采用DMY可以有效抑制癌细胞快速增殖,加速器凋亡,减缓患者病情,疗效突出。     

异甘草酸镁诱导乳腺癌细胞凋亡及对PI3K/AKT信号通路的影响

目的 探究异甘草酸镁通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)对乳腺癌细胞的影响。方法 在美国典型培养物保藏中心(ATCC)细胞库购买乳腺癌细胞株,随机分为三组：高浓度组采用500μmol/L异甘草酸镁溶液混合培养;低浓度组采用50μmol/L异甘草酸镁溶液混合培养;对照组不做其他处理,正常培养。分析三组乳腺癌细胞凋亡、增殖情况,以及PI3K、AKT的蛋白含量和mRNA的表达含量的差异性。结果 高浓度组细胞凋亡率明显高于低浓度组和对照组,低浓度组细胞凋亡率高于对照组(χ²分别=3.42、4.98、6.78,P均<0.05);高浓度组细胞增殖OD值低于低浓度组和对照组,低浓度组细胞增殖OD值低于对照组(t分别=3.12、3.80、6.45,P均<0.05);高浓度组乳腺癌细胞中PI3K、AKT蛋白含量低于低浓度组和对照组,低浓度组蛋白含量明显低于对照组(t分别=3.16、4.12、5.18、3.12、3.65、4.12,P均<0.05);高浓度组PI3K、AKT mRNA含量明显低于低浓度组和对照组,低浓度组PI3K、AKT mRNA表...     

槲皮素对宫颈癌HeLa细胞STAT3的表达及其信号通路的影响

目的初步探讨信号转导子和转录激活子STAT3在宫颈癌发生发展中的作用以及槲皮素对宫颈癌细胞中STAT3表达的影响。方法用RT-PCR检测不同浓度的槲皮素作用人宫颈癌HeLa细胞中STAT3 mRNA的表达,并以细胞免疫荧光技术观察凋亡细胞内STAT3和磷酸化STAT3(P-STAT3)的改变。结果槲皮素处理HeLa细胞后,当槲皮素浓度从6.25μmol/L增加到50μmol/L,相同时间HeLa细胞内STAT3 mRNA表达逐渐降低,除6.25μmol/L组与溶剂对照组相比无统计学差异(P>0.05)外,余差异全部有统计学意义(P<0.05),且处理24h后,STAT3 mRNA表达量与给药浓度呈负相关,r1=-0.861,P=0.000;各时间段不同浓度组(6.25、12.5、25、50μmol/L)两两相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。随着时间变化,相同浓度组中STAT3 mRNA表达明显降低,在给予6.25μmol/L槲皮素后,STAT3 mRNA的表达量呈时间依赖性,r2=-0.539,P=0.000。运用免疫荧光技术观察到STAT3蛋白及磷酸化水平随槲皮素浓度及时间增加表达呈明显下降趋势。结论槲皮素能明显抑制HeLa细胞的生长;槲皮素可抑制细胞内STAT3表达,从而可能通过抑制JAK/STAT信号通路诱导宫颈癌细胞凋亡。     

高强度聚焦超声治疗对乳腺癌肿瘤细胞凋亡和增殖细胞核抗原的影响研究

目的研究高强度聚焦超声（HIFU）治疗乳腺癌后原发灶中肿瘤细胞的凋亡和增殖细胞核抗原（PCNA）的变化,探讨HIFU联合化疗药物对肿瘤的治疗效果。方法选取同期经病理确诊可手术的女性乳腺癌患者40例,分为HIFU治疗组和对照组各20例,HIFU治疗组患者术前接受化疗的同时进行一次HIFU治疗,对照组术前只接受化疗,两组患者均行乳腺癌改良根治性手术。应用原位末端标记法（TUNEL）及免疫组化SABC法,分别检测两组患者治疗前后乳腺癌原发灶中肿瘤细胞的凋亡指数（AI）和肿瘤组织的增殖细胞核抗原（PCNA）表达。结果HIFU治疗组化疗前AI和PCNA表达率分别为（0.57±0.09）%和（77.78±6.83）%,化疗后分别为（24.33±5.12）%和（30.23±4.51）%,化疗前后比较差异有显著性意义（P〈0.05）;对照组化疗前AI和PCNA表达率分别为（0.60±0.01）%和（76.34±7.27）%,化疗后分别为（10.67±3.43）%和（55.67±5.62）%,化疗前后比较差异有显著性意义（P〈0.05）;HIFU治疗组两种指标变化均较对照组明显,差异有显著性意义（P〈0.05）。结论HIFU治疗能明显提高化疗药物的疗效,诱导肿瘤细胞凋亡并抑制其增殖发挥抗肿瘤作用,有利于乳腺癌的治疗。     

人生长激素对人胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨人生长激素对人胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型,将40只裸鼠随机分为4组:对照组、重组人生长激素(rhGH)组、曲古抑菌素A(TSA)组和rhGH+TSA组,各组腹腔注射给药,2周后,观察各组药物对肿瘤生长的影响.MTF法检测肿瘤细胞的增殖,免疫组织化学检测肿瘤细胞增殖,缺口末端标记(TUNEL)法检测移植瘤组织的细胞凋亡.结果 与对照组相比,TSA组和rhGH+TSA组S期细胞、肿瘤质量及细胞增殖指数明显降低(P<0.05),凋亡指数、G0/G1期及G2M期细胞明显升高(P<0.05),但TSA组与rhGH+TSA组以及rhGH 组与对照组各项指标比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 人生长激素在体内对人胰腺癌细胞既无明显的增殖作用,也无明显的凋亡作用.     

人生长激素对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨人生长激素对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型,将40只裸鼠随机分为4组:对照组、重组人生长激素(rhGH)组、5-氟尿嘧啶(5-FU)组和rhGH+5-FU组,各组腹腔注射(ip)给药,2周后观察各组药物对肿瘤生长的影响.分别采用MTT法和免疫组化检测肿瘤细胞增殖,TUNEI法检测移植瘤组织的细胞凋亡.结果 与对照组相比,5-FU组和rhGH+5-FU组S期细胞、肿瘤质量及PI明显降低(均P＜0 01),凋亡指数、G0/G1期细胞明显升高(均P＜0.05);与5-FU组相比,rhGH+5-FU组的肿瘤质量、细胞增殖指数(PI)及G2M期下降率明显优于5-FU组,G0/G1期上升率明显优于5-FU组(均P＜0.05),而rhGH 组与对照组各项指标比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 人生长激素在体内对人乳腺癌细胞既无明显的增殖作用,也无明显的凋亡作用,但与5-FU联用后能增强MCF-7乳腺癌细胞的化疗效果,且具有协同作用.     

着丝粒蛋白CENP-H对乳腺癌细胞株MCF7增殖能力的影响

目的 研究CENP-H对乳腺癌细胞增殖能力的影响,初步探讨CENP-H与乳腺癌发生、发展的关系.方法 将反转录病毒质粒pMSCV和pMSCV-CENP-H经脂质体转染至293FT细胞制备病毒,并感染MCF7细胞,用嘌呤霉素筛选及Western blot鉴定,建立CENP-H基因稳定表达的MCF7细胞株;应用噻唑盐(MTT)法、平板集落形成实验、5-溴-2-脱氧尿苷(BrdU)掺入法检测CENP-H对MCF7细胞增殖的影响.结果 成功建立稳定表达CENP-H的MCF7细胞株,并发现CENP-H过表达可上调细胞增殖相关分子cyclin D1的表达;MTT、平板克隆实验及Brdu掺入实验结果显示CENP-H过表达后,MCF7的增殖能力模型增强.结论 CENP-H可上调cyclin D1的表达,增强MCF7的增殖能力,提示CENP-H可能在乳腺癌发生、发展中起重要作用.     

槲皮素对人骨肉瘤细胞系MG-63中凋亡相关因子caspase-3的表达影响

目的:探讨黄酮类化合物槲皮素对人骨肉瘤细胞系MG-63的凋亡相关因子caspase-3的作用.方法:应用RT-PCR方法和Western-blot分别检测caspase-3的mRNA和蛋白水平的表达.结果:槲皮素能明显促进MG-63细胞caspase-3的表达,存在剂量依赖与时间依赖性.结论:槲皮素能通过caspase-3途径诱导MG-63细胞的凋亡.     

外源性硫化氢单独或联合131I对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨外源性硫化氢(H2S)单独或联合131I照射对人乳腺癌MCF-7细胞增殖与凋亡的影响,及其在γ射线中增敏或拮抗的作用.方法:体外培养人乳腺癌MCF-7细胞,1 500μmol/L硫氢化钠(NaHS)单独或联合0.3 mCi的131I作用于细胞;台盼蓝染色法检测细胞死亡率,Hoechst 33342/PI双染观察细胞形态改变,流式细胞术检测细胞周期分布的改变及细胞凋亡.结果:NaHS明显抑制MCF-7细胞增殖,使其阻滞于G0/G1期,G2/M期百分率则明显减少,与对照组比较差异有显著性(P＜0.05).NaHS联合131I作用于细胞96h,与131I照射组比较:照射时间≥2h时细胞凋亡率及死亡率显著增加(P＜0.05),并呈照射时间依赖性.结论:外源性H2S抑制MCF-7细胞增殖,但未能诱导明显凋亡;H2S增加MCF-7细胞对γ射线的辐射敏感性,可能与其使细胞G2/M期显著减少相关.     

肝细胞生长因子对人胃癌细胞株AGS增殖的促进作用

目的:肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)是一种多肽生长因子,具有促进细胞增殖、诱导细胞迁移和形态改变的作用。本研究探讨HGF对人胃癌细胞株AGS增殖的影响。方法:体外培养人胃癌细胞株AGS,应用浓度为25、50、75、100 ng/mL的HGF分别处理AGS细胞24 h、48 h、72 h,采用CCK-8法检测AGS细胞的增殖情况。结果:CCK-8法检测结果显示,不同浓度的HGF对AGS细胞均有促增殖作用,随着HGF浓度的增加或作用时间的延长,细胞增殖活力呈上升趋势,在72 h最为明显,呈时间、浓度依赖关系(t为3.89、5.28、9.73、11.00,P0.01)。结论:HGF能显著促进人胃癌细胞株AGS的增殖。     

他莫昔芬通过调控ERK1/2信号通路对乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用及作用机制研究

目的 探究他莫昔芬通过调节细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2途径对乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用及作用机制.方法 通过皮下注射MCF7细胞构建乳腺癌裸鼠模型.将45只荷瘤小鼠按照随机数字表法分为对照组、他莫昔芬组和他莫昔芬+LY3214996组,每组各15只.他莫昔芬组他莫昔芬(25 mg/kg)灌胃,他莫昔芬+LY...     

海带硫酸多糖对人宫颈癌细胞株增殖和凋亡的影响

目的:探讨海带硫酸多糖(LPS)对人宫颈癌细胞株HeLa的体外生长、凋亡及细胞周期的影响。方法:以不同浓度的LPS处理HeLacell,用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)测定细胞增殖情况,细胞染色法观察细胞凋亡的形态,用流式细胞仪记录细胞周期改变、bcl-2及NF-κBp65基因表达情况。结果:LPS使细胞增殖能力下降,细胞出现凋亡的形态学改变,细胞周期受到阻滞,bcl-2蛋白与NF-κBp65的表达随着LPS浓度的增加与作用时间的延长而降低。结论:LPS明显抑制人宫颈癌细胞株的生长,并通过影响bcl-2、NF-κBp65基因蛋白的表达促进宫颈癌细胞凋亡。     

胰岛素对人腹膜间皮细胞增殖、损伤及凋亡的影响

目的明确胰岛素是否对人腹膜间皮细胞具有毒性或者保护作用。方法使用人腹膜间皮细胞细胞株，传代培养。用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定HPMC的增殖程度。采用全自动生化分析仪测定培养液中乳酸脱氢酶LDH水平示细胞损伤，Hoechst33258染色观察细胞凋亡形态学变化及计算凋亡细胞百分比。分为单纯培养基对照组，4．25％葡萄糖组，不同浓度胰岛素组和不同浓度的胰岛素加4．25％葡萄糖组。结果与对照组相比，4．25％葡萄糖致LDH水平明显增高，并显著降低NIT渗入量，明显增加凋亡细胞百分比；不同浓度的胰岛素对HPMC增殖无影响，不同浓度胰岛素24h后可明显升高LDH水平(P＜0．05)，不同浓度胰岛素作用12h均后导致凋亡细胞百分比显著升高(P＜0．05)；不同浓度葡萄糖胰岛素组12h、24hMMT渗入量较葡萄糖组明显升高(P＜0．05)，组间差异无显著性(P＞0．05)，浓度大于25U／L胰岛素加葡萄糖组作用24h后与葡萄糖组相比显著降低LDH水平(P＜0．05)；不同浓度胰岛素加葡萄糖组作用12h后与葡萄糖组相比凋亡细胞百分比明显下降(P＜0．05)。结论胰岛素能导致HPMC损伤、诱导凋亡，同时在一定范围内可缓解高糖对HPMC的毒性作用。     

LncRNA-HOTAIRM1下调对Jurkat细胞增殖、凋亡及KIT/AKT通路的影响

目的:观察长链非编码-HOX反义基因间RNA髓样1(LncRNA-HOTAIRM1)下调对人白血病T淋巴细胞Jurkat增殖及凋亡的影响,并初步探讨其作用机理.方法:体外培养Jurkat细胞,随机分为对照组、HOTAIRM1 siRNA-NC组、HOTAIRM1 siRNA组;利用实时荧光定量PCR法检测转染后各组Ju...