吡咯烷二硫代氨基甲酸酯在二甲基亚硝胺诱导肝纤维化大鼠中的作用及机制

目的观察吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)对二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine,DMN)诱导肝纤维化大鼠肝组织核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)及Ⅲ型胶原(collagen typeⅢ,Col-Ⅲ)表达的影响,探讨PDTC抗肝纤维化的可能机制。方法 22只SD大鼠随机分为对照组6只,模型组8只和治疗组8只。模型组和治疗组腹腔注射质量分数0.5%DMN溶液2mL/kg,每2d注射1次,连续4周,诱导大鼠肝纤维化模型;对照组腹腔注射等量生理盐水。治疗组造模期间给予PDTC溶液150mg/(kg·d)灌胃,对照组、模型组给予等量蒸馏水灌胃。实验结束后处死大鼠,取肝左叶组织光镜下观察肝组织病理改变,采用电泳迁移率试验检测肝组织NF-κBp65活性,实时荧光定量PCR法检测肝组织NF-κBp65、TGF-β1和Col-ⅢmRNA表达,免疫组织化学法检测肝组织NF-κBp65着色细胞数目和Col-Ⅲ着色面积。结果对照组肝小叶结构正常,细胞排列规律,未见肝细胞变性、坏死;模型组肝细胞融合性坏死,胶原纤维明显增生,假小叶形成;治疗组肝细胞肿胀、变性及炎症细胞浸润程度均较模型组轻;模型组、治疗组肝组织NF-κBp65活性[(76.6±6.5)%、(51.2±4.6)%],NF-κBp65mRNA(0.019 3±0.005 0、0.009 5±0.002 1)、TGF-β1mRNA(0.017 5±0.001 2、0.009 7±0.001 1)及Col-ⅢmRNA表达(0.077 5±0.030 5、0.030 1±0.003 3)均高于对照组((28.5±3.3)%、0.003 0±0.001 4、0.004 7±0.000 9、0.015 2±0.005 5)(P0.05),NF-κBp65着色细胞数目[(68.60±4.65)、(49.65±3.60)个]均较对照组[(14.68±2.98)个]多(P0.05),Col-Ⅲ着色面积[(10.39±1.53)、(7.36±1.17)μm2]均较对照组[(2.46±0.31)μm2]大(P0.05);模型组肝组织NF-κBp65活性,NF-κBp65mRNA、TGF-β1mRNA及Col-ⅢmRNA表达均较治疗组高,NF-κBp65着色细胞数目较治疗组多,Col-Ⅲ着色面积较治疗组大(P0.05);Pearson相关分析结果显示,肝组织NF-κBp65活性与NF-κBp65mRNA、TGF-β1mRNA、Col-ⅢmRNA表达,NF-κBp65着色细胞数目,Col-Ⅲ着色面积均呈正相关(r=0.884,P0.001;r=0.976,P0.001;r=0.769,P0.001;r=0.934,P0.001;r=0.942,P0.001),TGF-β1 mRNA与Col-ⅢmRNA表达及Col-Ⅲ着色面积均呈正相关(r=0.831,P0.001;r=0.918,P0.001)。结论PDTC可能通过抑制NF-κB活性,下调TGF-β1表达,抑制以Col-Ⅲ为主要成分的细胞外基质过度沉积,来发挥抗肝纤维化作用。     

糖皮质激素对大潮气量机械通气大鼠肺组织巨噬细胞炎症蛋白-1 α和核因子-κB表达的影响

目的 观察大潮气量机械通气大鼠血浆和支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)巨噬细胞炎症蛋白-1α(MIP-1α)含量以及肺组织MIP-1α mRNA和NF-κBp65 mRNA表达水平.方法 32只健康雄性Wistar大鼠随机(随机数字法)分为对照组,机械通气致肺损伤(VILI)组、地塞米松干预(DEX)组和布地奈德干预(BUD)组.给与相应处理后分别采用ELISA法检测各组大鼠BALF和血浆MIP-1α含量,采用RT-PCR法检测其肺组织MIP-1αmRNA和NF-κB p65mRNA表达水平,比较4组之间的差异,并将VILI,DEX,BUD组间MIP-1α mRNA与MIP-1α含量,MIP-1α mRNA与NF-κB p65 mRNA表达水平间进行直线相关分析.结果 DEX组和BUD组BALF及血浆中MIP-1α含量及肺组织MIP-1αmRNA和NF-κBp65 mRNA表达水平均明显低于VILI组(P＜0.05),同时肺组织损伤程度明显减轻;BUD组BALF和血浆中MIP-1α含量及肺组织MIP-1α mRNA和NF-κB p65 mRNA表达水平虽高于DEX组,但差异无统计学意义(P＞0.05).相关分析结果表明,肺组织MIP-1α mRNA表达量与BALF中MIP-1α含量呈正相关(r=0.895,P＜0.05);肺组织MIP-1α mRNA表达量与NF-κB p65 mRNA表达量呈正相关(r=0.801,P＜0.05).结论 糖皮质激素可能通过抑制NF-κB的活性而下调肺组织MIP-1α的表达,对VILI有一定防治作用;局部应用糖皮质激素对VILI的保护作用与全身用药的作用相似,且副作用小.     

脂多糖诱导大鼠急性肺损伤时核因子-κB信号转导及盐酸氨溴索的作用

目的探讨脂多糖（LPS）诱导的大鼠急性肺损伤（acute lung injury,ALI）时核因子κB（NF-κB）的信号转导,以及盐酸氨溴索（AMB）对其的作用。方法雄性SD大鼠108只,实验分为两部分：第一部分选择其中90只,采用随机排列表法分为6组（n=15）：A组无菌生理盐水（NS）0．5ml腹腔注射1h后,再腹腔注射NS0．5ml;B组腹腔注射AMB10mg／kg 1h后腹腔注射NS0．5ml;C组腹腔注射NS0．5ml 1h后腹腔注射LPS5mg／kg;D、E、F组分别腹腔注射AMB5、10、20mg／kg后1h腹腔注射LPS5mg／kg。各组分别按1、2、4h再分为3个亚组,每组5只。采用酶联吸附免疫法（ELISA）测定肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）和巨噬细胞炎性蛋白-2（MIP-2）水平,并测定BALF中乳酸脱氢酶（LDH）与总蛋白量的变化。采用蛋白印迹法（Western blot）测定肺组织细胞胞核中NF-κBp65、胞浆中NF-κB抑制蛋白-α（IκBβ）及C—Jun氨基末端激酶（JNK）的表达。第二部分选择18只大鼠按上述分组法随机分为6组（n=3）,A、B、C、D、E、F组,给药方法同第一部分,腹腔注射NS（A组、B组）或腹腔注射LPS（C、D、E、F组）后4h观察大鼠肺组织病理形态学变化。结果第一部分：与A组比较,C、D、E、F组BALF中LDH、总蛋白量、总蛋白量、TNF-α、IL-1β和MIP-2均明显升高（P〈0．05或P〈0．01）：与C组比较,E、F组上述指标均降低（P〈0．05或P〈0．01）。与A组比较,C、D、E、F组肺组织细胞中的NF-κB p65与JNK表达明显增多（P〈0．01）,而IκBα的表达量减少（P〈0．01）;与C组比较,E、F组NF-κB p65与磷酸化JNK的表达减少（P〈0．05或P〈0．01）,而IκBα的表达量增多（P〈0．05或P〈0．01）。第二部分：A、B组肺组织形态学正常,C组呈明显的肺损伤病理形态学改变,D组肺损伤程度与C组相似,E、F组肺损伤程度较C组减轻。结论AMB可以减轻LPS诱导大鼠ALI．其机制可能与抑制肺组织细胞NF-κB065与JNK的活化,并促进IκBα的表达,以及下调TNF-α、IL-1β和MIP-2的表达有关,且呈剂量依赖性。     

茶多酚减轻哮喘大鼠气道损伤的作用观察及信号通路调控机制探讨

目的观察茶多酚减轻哮喘大鼠气道损伤的作用,并探讨其信号通路调控机制。方法取50只SD大鼠,其中40只采用腹腔注射卵清蛋白激发和雾化吸入的方法建立哮喘大鼠模型,将其随机分为哮喘组、低、中、高剂量组。其余10只大鼠用生理盐水代替激发和雾化液,设为对照组。末次雾化后6 h,低、中、高剂量组大鼠分别给予25mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg的茶多酚灌胃,模型组和对照组均给予生理盐水溶液灌胃,连续7 d。处死大鼠取肺泡灌洗液(BALF),检测并比较各组大鼠BALF中白介素-6(IL-6)、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;观察各组肺组织病理学变化,并比较支气管壁厚度(Wat)、平滑肌厚度(Wam);比较肺组织中核转录因子κB(NF-κB)p65、转化生长因子-β1(TGF-β1)、结蹄组织生长因子(CTGF) mRNA和蛋白相对表达量。结果肺组织病理学观察,对照组无明显异常;哮喘组支气管黏膜皱襞增多,气道壁及平滑肌明显增厚,黏膜下层大量炎性细胞浸润,管腔黏液堵塞; 3剂量组上述变化均较哮喘组减轻,其中中剂量组减轻最为明显。Wat、Wam组间比较,对照组最薄、中剂量组其次、低、高剂量稍厚、哮喘组最厚,除低、高剂量组比较差异无显著性外(P 0. 05),每两组间比较差异均有显著性(P 0. 05); BALF中IL-6、IFN-γ、TNF-α水平、肺组织NF-κB p65、TGF-β1、CTGF mRNA和蛋白相对表达量组间比较,对照组最低、中剂量组其次、低、高剂量组稍高、哮喘组最高,除低、高剂量组比较差异无显著性外(P 0. 05),每两组间比较差异均有显著性(P 0. 05)。结论茶多酚可显著缓解哮喘大鼠气道炎症及气道重塑,其中50 mg/kg的茶多酚效果最佳,其机制可能与抑制NF-κB p65/TGF-β1/CTGF信号通路有关。     

下呼吸道流感嗜血杆菌定植对哮喘小鼠气道炎症的影响及信号通路的研究

目的:观察下呼吸道流感嗜血杆菌定植对哮喘小鼠气道炎症的影响,并研究其信号通路。方法:采用C57/B6和TLR4-/-小鼠,分别用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏和激发制备慢性哮喘小鼠模型,用流感嗜血杆菌琼脂菌珠制作气道定植模型(注菌组为2组,注菌后第7天和第21天组),同时设置对应时间(第7天和第21天)的0.9%NaCl溶液注射组及单纯流感定植组、单纯哮喘组,每种小鼠各8组,共16组。在哮喘小鼠气道注菌之后的第7、21天处死小鼠,检测血清中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)含量,采用免疫组织化学法检测小鼠肺组织髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88, MyD88)和核因子κB(nuclear factorκB, NF-κB)的表达,并分别与相同时间的单纯流感定植及0.9%NaCl溶液注射、单纯哮喘对照小鼠相比较;再将C57/B6与TLR4-/-小鼠的实验结果进行比较,同时比较各组小鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中的细胞总数。结果:与相同时间的单纯流感定植及0.9%NaCl溶液注射的对照小鼠相比,有流感嗜血杆菌呼吸道定植的C57/B6和TLR4-/-哮喘小鼠血清中TNF-α含量、肺组织中MyD88和NF-κB的表达以及BALF中的细胞总数均升高(P均0.05);与同时间对应组C57/B6小鼠相比,合并流感嗜血杆菌呼吸道定植的TLR4-/-哮喘小鼠血清中TNF-α含量、肺组织中MyD88和NF-κB的表达以及BALF中的细胞总数均降低P均0.05)。结论:流感嗜血杆菌在下呼吸道定植可以通过激活TLR4-MyD88通路,促进转录因子NF-κB的表达,加重哮喘的气道炎症,这可能是哮喘发病的重要机制之一。     

丹参对小鼠急性肺损伤的保护作用研究

目的:探讨丹参对内毒素(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)保护作用及其机制。方法:通过腹腔注射大肠杆菌LPS(5ml/kg)诱导小鼠ALI。30只雄性C57小鼠随机均分为正常组、模型组和丹参组,每组各10只。丹参组于LPS注射前1h腹腔注射丹参(10mg/kg),模型组和正常组注射等量生理盐水。LPS注射后6h,观察各组血气、肺组织病理形态、肺湿/干比(W/D),支气管肺泡灌洗液、肺组织和血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)的表达,以及IκB-α、TLR-4、MyD88、p-p65和p65蛋白表达。结果:丹参能有效降低LPS所致肺组织血气和病理学改变,减少肺W/D以及TNF-α、IL-1β、IL-6、TLR-4、MyD88和p-p65的表达,增加IκB-α的表达。结论:丹参对ALI小鼠有保护作用,其作用机制与抑制TLR-4/NF-κB介导的炎症相关。     

小窝蛋白-1和NF-κB在机械通气肺损伤大鼠肺组织中的表达

目的通过观察小窝蛋白-l(cav-1)及NF-κB p65、IL-8在大潮气量机械通气大鼠肺组织中的表达变化,探讨cav-1在通过对NF-κB信号转导通路的影响而导致对肺组织的损伤作用。方法将雄性SD大鼠随机分为三组:对照组、大潮气量通气0.5 h组(H-VT0.5h组)和大潮气量通气2 h组(H-VT2h组)。光镜下观察各组大鼠肺组织病理学改变;免疫组织化学染色法检测肺组织中cav-1的蛋白含量;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测NF-κB p65的m RNA表达;计算肺湿/干重比值(W/D);酶联免疫吸附试验(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-8的含量,并对cav-1及NF-κB p65进行相关性分析。结果 H-VT2h组肺组织中肺W/D比值、cav-1的蛋白表达、NF-κB p65 m RNA的表达水平及BALF中IL-8的含量均大于H-VT0.5h组,差异有统计学意义(均P<0.05);H-VT0.5h组肺组织中肺W/D比值、cav-1的蛋白表达、NF-κB p65 m RNA的表达水平以及BALF中IL-8的含量均大于对照组,但差异无统计学意义(均P>0.05)。相关性分析结果显示,各组大鼠肺组织cav-1蛋白表达水平与NF-κB p65 m RNA表达水平之间呈正相关(r=0.820,P<0.01)。结论 cav-1在机械通气导致肺损伤发生中可能起损伤作用。这种损伤作用可能与cav-1经过多种途径激活NF-κB炎症信号通路,使IL-8等细胞因子释放有关,最终导致炎症的加重和肺组织损伤。     

阿奇霉素对单侧输尿管梗阻大鼠NF-κBp65、TGF-β1表达的影响

目的:研究阿奇霉素单侧输尿管梗阻大鼠肾间质核因子-κB(NF-κB)、转化生长因子(TGF-β1)的表达,并探讨其对肾间质纤维化的作用机制.方法:采用单侧输尿管结扎肾间质纤维化模型,将SD大鼠60只随机分为3组:正常组(假手术组),模型组(单侧输尿管结扎组),治疗组(阿奇霉素组).分别于术后第3天、第7天、第14天处死各组大鼠.用HE和MASSON染色法观察肾脏病理改变,用免疫组化方法检测NF-κBp65、TGF-β1表达情况.结果:模型组NF-κBp65、TGF-β1在肾间质表达明显增强,与正常对照组相比差异有显著性(P＜0.05);治疗组各因子的表达下调,与相应时间点模型组相比有统计学意义(P＜0.05).结论:阿奇霉素可降低NF-κBp65、TGF-β1的表达,缓解肾间质纤维化.     

抗氧化剂吡咯烷二硫代氨基甲酸酯对哮喘小鼠模型的作用研究

目的:通过使用抗氧化剂吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)阻断核因子-κB(NF-κB)的激活以观察PDTC在哮喘小鼠发病中的作用.方法:将40只BALB/c小鼠随机分为对照组和PDTC组,采用卵清蛋白(OVA)致敏OVA激发的方法制备小鼠哮喘模型.PDTC组于OVA激发前腹腔注射NF-κB的特异性抑制剂PDTC(100 mg/kg).采用免疫组织化学方法检测两组小鼠肺组织P50蛋白的表达,肺组织病理切片观察两组小鼠炎症细胞浸润情况.结果:对照组P50蛋白的表达明显高于PDTC组[(30.3±3.2)%vs(14.7±2.6)%,P＜0.01],小鼠肺组织病理结果显示PDTC组嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞等炎症细胞浸润较对照组明显减轻.结论:PDTC作为特异性的NF-κB抑制剂,可以显著减轻哮喘小鼠的肺部炎症细胞浸润.但是,抗氧化剂应用于临床哮喘的治疗还需要进一步的研究以寻找副反应小的药物.     

地塞米松联合1,25-二羟维生素D3对慢性哮喘小鼠肺组织中NF-κB活性的影响

目的探讨地塞米松联合1,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)2D3]对慢性哮喘小鼠肺组织中核因子κB(NF-κB)活性的影响。方法将40只小鼠随机分为4组,每组10只:空白对照组,哮喘模型组,地塞米松组和地塞米松+1,25-(OH)2D3组。卵清蛋白致敏激发建立小鼠慢性哮喘模型。HE染色法检测各组小鼠肺组织病理学形态,免疫组化法检测小鼠肺组织NF-κB的阳性百分比。结果病理特征表明地塞米松组+1,25-(OH)2D3组的炎性细胞浸润低于地塞米松组;免疫组化结果表明地塞米松组+1,25-(OH)2D3组的NF-κB阳性百分比低于地塞米松组。结论在慢性哮喘小鼠中,1,25-(OH)2D3可以增强地塞米松的效果,降低NF-κB阳性百分率,从而有效地抑制肺部炎症的发生。     

支气管哮喘小鼠支原体感染模型肺组织中T-bet、GATA-3和NF-κB转录因子的变化

目的:检测支气管哮喘支原体肺炎(Mycoplasma pneumonia,MP)感染小鼠模型肺组织的T-box转录因子(T-box expressed in T cells,T-bet)、GATA结合蛋白3(GATA binding protein-3,GATA-3)和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)转录因子的水平,分析支气管哮喘MP感染时这些主要转录因子的变化及其与哮喘发病间的关系。方法:健康雌性BALB/c小鼠,分为卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)致敏合并MP感染组(支气管哮喘MP感染组)和OVA致敏组(支气管哮喘组),另设正常对照组,每组15只。运用荧光半定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测各组小鼠模型肺组织中T-bet、GATA-3和NF-κB的表达。结果:支气管哮喘MP感染组和支气管哮喘组小鼠模型肺组织中GATA-3的表达明显高正常对照组(P<0.01),而2组的T-bet表达明显低于正常对照组(P<0.01)。支气管哮喘MP感染组小鼠模型肺组织中NF-κB的表达高于支气管哮喘组及正常对照组(P均     

咖啡酸苯乙酸酯对丙烯醛雾化诱导的小鼠早期气道重塑的干预作用

目的丙烯醛雾化吸入2周诱导小鼠气道重塑模型,研究NF-κB易位抑制剂咖啡酸苯乙酸酯（CAPE）对小鼠早期气道重塑的干预作用。方法24只C57BL/6小鼠随机分为4组（每组6只）正常对照组、单纯CAPE组（腹腔内注射CAPE30mg/kg,隔日一次）、丙烯醛组（丙烯醛雾化吸入2h×3次/d,共2周）、丙烯醛雾化合并CAPE干预组（雾化吸入丙烯醛同时腹腔内注射CAPE）。于实验第2周采取各组小鼠肺组织和支气管肺泡灌洗液（BALF）。肺组织HE、MASSON染色和羟脯氨酸定量观察气道平滑肌增生、气道上皮下及管周肺组织胶原沉积情况,Ashcroft评分计算HE染色下小鼠气道及管周肺组织的纤维化严重程度;BALF行细胞计数观察气道炎症反应,ELISA测定BALF中TGF-β1含量。结果（1）丙烯醛组气道炎症反应,平滑肌增生及气道上皮下胶原沉积较正常对照组显著增高（P〈0.05）。（2）丙烯醛雾化合并CAPE干预组气道炎症反应及管周肺组织平滑肌增生,上皮下基底膜沉积较丙烯醛组明显减轻（P〈0.05）。结论NF-κB抑制剂CAPE能够减少致纤维化因子TGF-β1的释放,减轻早期气道炎症反应及重塑的进程。     

三氧化二砷对哮喘小鼠肺组织IκB-α表达和核因子κB激活的作用

目的研究三氧化二砷(As2O3)对哮喘小鼠肺组织核因子κB(NF-κB)激活和抑制蛋白IκB-α表达的影响,探讨As2O3抗炎作用的可能机制以及哮喘防治的新思路。方法BALB/c小鼠36只随机分为对照组、哮喘组(卵蛋白末次激发后1,4,12和24h)和As2O3治疗组(4mg/kg),每组6只。Diff-Quick染色观察支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolarlavagefluid,BALF)中嗜酸细胞募集特点,电泳迁移率实验和免疫印迹实验分别检测肺组织NF-κB活性和IκB-α表达水平。结果①哮喘组BALF中嗜酸细胞募集[(48.72±5.38)%]较对照组[(0.56±0.21)%]增加(q=33.46,P<0.01),治疗组较哮喘组减少(q=34.65,P<0.01)。②哮喘组肺组织NF-κB活性均较对照组增加(q=41.84,72.75,61.61,16.32,P<0.01或0.05),以4h活性最高,治疗组较哮喘组减少(q=89.48,P<0.01)。③哮喘组肺组织IκB-α表达较对照组减少(q=30.94,P<0.01),治疗组较哮喘组增加(q=23.67,P<0.01)。④BALF中嗜酸细胞募集、肺组织NF-κB活性与IκB-α表达水平均呈负相关(r=-0.82,-0.94,P<0.01)。结论肺组织NF-κB过度激活可能是哮喘慢性气道炎症持续存在的基础;诱导肺组织IκB-α表达和抑制NF-κB激活,可能是As2O3发挥广泛抗炎作用的重要机制。     

白细胞介素-6/糖蛋白130/转录激活因子3通路在百草枯诱导小鼠急性肺损伤中的作用机制

目的基于肺特异性白细胞介素-6(IL-6)敲除小鼠研究IL-6/糖蛋白130(gp130)/转录激活因子3(STAT3)通路在百草枯(PQ)诱导急性肺损伤(ALI)中的作用。方法野生型C57BL/6J小鼠分为IL-6野生型(IL-6 WT)组、IL-6 WT+PQ组,采用Sftpc(肺表面活性蛋白C基因)-Cre⁺小鼠与IL-6^FLOX/FLOX小鼠交配的方式得到肺特异性IL-6敲除小鼠并分为IL-6 KO组、IL-6 KO+PQ组,单次腹腔注射PQ诱导ALI,比较四组小鼠肺组织病理改变、肺泡动脉氧分压差(PA-aO₂)、肺组织湿/干质量比值(W/D)、IL-6/gp130/STAT3通路、核转录因子-κB(NF-κB) p65、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-1β(IL-1β)的差异。结果与IL-6 WT组比较,IL-6 WT+PQ组小鼠肺组织出现了典型的ALI病理改变,肺组织胞浆蛋白中IL-6、gp130、p-STAT3、TNF-α、IL-1β表达水平及胞核蛋白中NF-κB p65的表达水平、PA-aO₂、W/D明显增加(P <0.05);与IL-6 WT+PQ组比较,IL-6 KO+PQ组小鼠肺组织病理改变明显改善,肺组织胞浆蛋白中IL-6、gp130、p-STAT3、TNF-α、IL-1β的表达水平及胞核蛋白中NF-κB p65的表达水平、PA-aO₂、W/D明显降低(P <0.05)。结论 IL-6/gp130/STAT3通路激活与PQ诱导ALI有关。     

miR-27b基因对病毒性心肌炎细胞凋亡的影响研究

目的探讨抑制miR-27b基因表达对病毒性心肌炎心肌细胞凋亡的影响及机制。方法将40只健康BALB/c小鼠随机分为对照组:小鼠一次性腹腔注射0. 1 ml的柯萨奇病毒B3(CVB3); miR-27b抑制剂组(抑制组):小鼠一次性腹腔注射0. 1 ml的CVB3,次日,通过尾静脉注射miR-27b抑制剂(10μg/10 g); miR-27b NC组(NC组):小鼠一次性腹腔注射0. 1 ml的CVB3,次日,通过尾静脉注射miR-27b NC(10μg/10 g)每组10只。于接种CVB3病毒后第7天,采集血清及心脏组织。肌酸激酶(CK)试剂盒检测血清CK含量; qRT-PCR检测心肌组织miR-27b表达;TUNEL试剂盒、超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、髓过氧化物酶(MPO)试剂盒及细胞内活性氧(ROS)试剂盒分别检测心肌细胞凋亡率、心肌组织SOD活力、MPO活性及ROS含量。Western blotting检测NF-κBp65、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果小鼠感染CVB3后第7天体重减轻率及血清CK活性明显高于对照组小鼠(P 0. 05)。与对照组比较,模型组SOD活力、Bcl-2蛋白表达明显降低,miR-27b mRNA表达、细胞凋亡率、MPO活性、ROS含量及NF-κBp65和Bax蛋白表达均明显升高(P 0. 05),与模型组比较,抑制组SOD活力、Bcl-2蛋白表达明显升高,miR-27b mRNA表达、细胞凋亡率、MPO活性、ROS含量及NF-κBp65和Bax蛋白表达均明显降低(P 0. 05)。结论抑制miR-27b基因表达可降低病毒性心肌炎心肌细胞凋亡率及氧化应激反应,其机制可能与抑制NF-κB信号通路有关。     

三氧化二砷对哮喘小鼠肺组织IκB-α表达和核因子κB激活的作用

目的：研究三氧化二砷(As2O3)对哮喘小鼠肺组织核因子κB(NF-κB)激活和抑制蛋白IKB-α表达的影响，探讨As2O3抗炎作用的可能机制以及哮喘防治的新思路。方法：BALB／c小鼠36只随机分为对照组、哮喘组(卵蛋白末次激发后1，4。12和24h)和As2O3治疗组(4mg／kg)，每组6只。Diff-Quick染色观察支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid，BALF)中嗜酸细胞募集特点，电泳迁移率实验和免疫印迹实验分别检测肺组织NF-κB活性和IκB-α表达水平。结果：①哮喘组BALF中嗜酸细胞募集[(48．72&;#177;5．38)％]较对照组[(0.56&;#177;0．21)％1增加(q=33.46，P&;lt;0.01)，治疗组较哮喘组减少(q=34．65，P&;lt;0．01)。②哮喘组肺组织NF-κB活性均较对照组增加(q=41．84，72．75，61．61，16．32，P&;lt;0．01或0．05)，以4h活性最高，治疗组较哮喘组减少(q=89．48，P&;lt;0.01)。③哮喘组肺组织IκB-α表达较对照组减少(q=30.94，P&;lt;0.01)，治疗组较哮喘组增加(q=23．67，P&;lt;0．01)。④BALF中嗜酸细胞募集、肺组织NF-κB活性与IκB-α表达水平均呈负相关(r=-0．82，-0．94，P&;lt;0．01)。结论：肺组织NF-κB过度激活可能是哮喘慢性气道炎症持续存在的基础；诱导肺组织IκB-α表达和抑制NF-κB激活，可能是As2O3发挥广泛抗炎作用的重要机制。     

不同浓度高氧对大鼠肺组织NF-κB和IL-8表达的影响

目的观察不同浓度高氧对大鼠肺组织NF-κB及IL-8表达的影响,探讨高氧所致肺损伤(HILI)的发生浓度及机制。方法 32只成年雄性SD大鼠随机分为4组,即对照组(吸入空气)、50%O2组、70%O2组和90%O2组,吸氧时间均为96 h。采用RT-PCR法检测肺组织NF-κB p65 m RNA表达水平,采用ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)IL-8含量,测定肺组织湿干重比值(W/D)和BALF中性粒细胞计数,并在光镜下观察各组大鼠肺组织的病理学改变。结果随着吸氧浓度的增加,肺组织NF-κB p65 m RNA表达水平、BALF中IL-8的含量、肺组织W/D比值及BALF中性粒细胞计数均逐渐增加,其中90%O2组增加最明显,与对照组、50%O2组及70%O2组比较差异均有统计学意义(均P<0.05),而对照组、50%O2组和70%O2组之间各项指标比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。相关性分析表明,肺组织NF-κB p65 m RNA与BALF中IL-8含量之间呈正相关(r=0.858,P<0.01)。结论吸入氧浓度超过90%且持续96 h以上,即可导致大鼠肺组织损伤,其发生可能与高氧激活肺组织细胞表达NF-κB,上调IL-8表达,导致中性粒细胞聚集和活化而引起的炎症反应有关。     

黄芪注射液对急性肺损伤大鼠热休克蛋白70核转录因子-κB表达的影响

目的 探讨黄芪注射液对急性肺损伤血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及肺组织热休克蛋白70(HSP70)、核转录因子-κBp65(NF-κBp65)蛋白表达的影响.方法 54只Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠随机分为对照组、模型组、黄芪组,每组18只,对照组生理盐水5.0 mL/kg尾静脉注射,模型组尾静脉注射脂多糖(LPS)5.0 mg/kg复制急性肺损伤模型,30 min后黄芪组给予黄芪注射液10 g/kg,对照组和模型组给予等量生理盐水,各组分别于制模后2、6、12 h处死大鼠,心脏取血、留取肺组织标本,采用苏木素-伊红(HE)染色、光镜下观察肺组织病理变化,检测肺组织湿干重比(W/D),酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清TNF-α、IL-6浓度,免疫组织化学法检测HSP70和NF-κBp65蛋白表达量.结果 模型组肺间质及肺泡明显充血水肿,大量炎性细胞浸润;黄芪组肺间质及肺泡充血水肿明显减轻,少量炎性细胞浸润.模型组、黄芪组各时间点肺组织W/D明显高于对照组(P<0.01);模型组肺组织W/D 12 h达高峰;黄芪组肺组织W/D 12 h下降程度最大,明显低于模型组各时间点(P<0.01).模型组、黄芪组各时间点血清TNF-α、IL-6浓度明显高于对照组(P<0.01);模型组血清TNF-α、IL-6浓度6 h达高峰;黄芪组血清TNF-α、IL-6浓度12 h降至最低,明显低于模型组各时间点(P<0.01).模型组、黄芪组各时间点HSP70蛋白表达量明显高于对照组(P<0.01);模型组HSP70蛋白表达量6 h达高峰;黄芪组HSP70蛋白表达量12 h达高峰,明显高于模型组各时间点(P<0.01).模型组、黄芪组各时间点NF-κBp65蛋白表达量明显高于对照组(P<0.01);模型组NF-κBp65蛋白表达量6 h达高峰;黄芪组NF-κBp65蛋白表达量12 h降至最低,明显低于模型组各时间点(P<0.01).结论 黄芪注射液可能通过提高HSP70表达,从而抑制NF-κB活性,下调TNF-α、IL-6的合成,减轻炎症反应,发挥肺损伤的保护作用.     

纳洛酮与甲基泼尼松龙联用对急性肺损伤大鼠肺组织核转录因子-κB表达的影响

目的探讨联合应用甲基泼尼松龙和纳洛酮对内毒素(LPS)所致急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织核转录因子κB(NFκB)表达的作用。方法建立大鼠LPS吸入性ALI模型(LPS3mg/kg气管内注射)。85只大鼠随机分为5组:生理盐水对照组,LPS损伤组,甲基泼尼松龙组(LPS+甲基泼尼松龙),纳洛酮组(LPS+纳洛酮),联合用药组(LPS+甲基泼尼松龙+纳洛酮)。采用放射免疫法检测大鼠血清白细胞介素8(IL8)水平,并应用免疫组化法观察肺组织NF-κBp65蛋白表达的变化。结果经气道吸入LPS可致大鼠发生ALI。ALI大鼠肺组织NFκBp65蛋白表达明显升高(P<0.05或P<0.01),IL-8水平亦明显增高(P<0.05或P<0.01),单用甲基泼尼松龙或纳洛酮组肺组织NF-κBp65蛋白表达率及IL-8水平均较LPS损伤组明显降低,以联合用药组更为明显(P<0.05或P<0.01)。结论联合应用甲基泼尼松龙和纳洛酮可降低LPS吸入性ALI大鼠血清IL-8升高,并显著抑制肺组织NF-κBp65蛋白表达。     

星状神经节阻滞对自发性高血压大鼠脑组织NF-κBp65与凋亡调节因子bcl-2/bax表达变化的影响

目的研究自发性高血压大鼠(SHR)脑组织核转录因子(NF-κBp65)与凋亡调节因子Bcl-2和Bax表达的变化,并探讨星状神经节阻滞对这一过程的影响。方法将32只10周龄雄性SHR随机分为四组,每组8只,即左侧星状神经节阻滞组(LS组)、右侧星状节阻滞组(RS组)、药物卡托普利组(D组)、手术对照组(C组)。实验结束后用3%戊巴比妥钠腹腔注射(45 mg/kg)麻醉自发性高血压大鼠,迅速取出脑组织,免疫组化检测脑组织Bcl-2、Bax表达,放射免疫法测定脑组织NF-κBp65的含量。结果 RS组和D组脑组织NF-κBp65的含量显著低于LS组和C组(P0.05),而LS组和C组,RS组和D组比较差异未见统计学意义(P0.05);与LS、D、C组相比,RS组SHR脑组织Bcl-2表达明显增强,Bax表达明显减弱,Bcl-2/Bax比值明显增高(P0.05)。结论右侧星状神经节阻滞可通过影响脑内NF-κBp65和凋亡调节基因的表达而在脑组织保护中发挥一定的作用。