miR-433在子痫前期患者中的表达及对滋养层细胞迁移和侵袭的影响研究

目的 探讨微小RNA-433(miR-433)在子痫前期(PE)患者中的表达水平及其潜在的生物学功能.方法 收集25例健康者和23例子痫前期患者的胎盘组织.采用qRT-PCR检测miR-433在PE患者胎盘组织和正常胎盘组织中的表达差异.在滋养层细胞HTR-8/SVneo中过表达或抑制miR-433构建稳定细胞系,通过...     

妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中VEGF与MMP-9表达水平与子痫前期病情的相关性

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达及其与子痫前期发病的相关性。方法选取晚孕期正常孕妇53例(对照组)、轻度子痫前期患者61例(观察组Ⅰ)和重度子痫前期患者45例(观察组Ⅱ),比较3组VEGF、MMP-9的表达水平。结果对照组、观察组Ⅰ和观察组Ⅱ孕妇的胎盘组织中VEGF阳性表达率分别为86.79%、68.85%、40.00%,MMP-9阳性表达率分别为79.25%、67.21%、37.78%,差异均有统计学意义(P0.05)。结论正常妊娠孕妇和子痫前期患者胎盘组织中均有VEGF及MMP-9表达,但是子痫前期患者VEGF及MMP-9表达水平均显著下降。子痫前期病情严重程度与VEGF及MMP-9表达水平有相关性。     

miR-517在子痫前期患者胎盘外泌体中的表达及其对滋养层细胞侵袭与T细胞增殖的影响

目的 探讨在子痫前期(PE)患者的胎盘组织与胎盘外泌体中微小RNA-517(miR-517)的表达及其对滋养层细胞侵袭与T细胞增殖的影响。方法 收集2020年5月至2021年5月于海南医学院第二附属医院确诊为PE的患者50例(PE组)和50例健康孕产妇(NP组)的胎盘绒毛组织和外周血,采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测两组胎盘绒毛组织中miR-517的表达差异;分离外周血中的胎盘外泌体,采用透射电子显微镜(TEM)与纳米示踪技术(NTA)分析外泌体形态、大小分布及浓度,蛋白质印记法(Western blot)检测外泌体标志性蛋白CD63、肿瘤易感基101(TSG101)和胎盘特异性蛋白胎盘碱性磷酸酶(PLAP)的表达;体外培养人绒毛滋养层细胞HTR-8与人T细胞系Jurkat T细胞,将过表达miR-517的miR-517 mimic与阴性对照序列miR-NC转染至上述细胞中,并按细胞处理方式的不同将HTR-8与Jurkat T细胞各分为5组：对照组、miR-517 mimic组、miR-NC组、NP-外泌体组、PE-外泌体组;qPCR检测各组HTR-8或Jurkat T细胞中mi...     

miR-488-3p在子痫前期胎盘滋养层细胞侵袭和迁移中的作用研究

目的 探讨miR-488-3p在子痫前期胎盘滋养层细胞侵袭和迁移中的作用.方法 qRT-PCR检测胎盘组织中miR-488-3p的表达;并与子痫前期患者的临床特征进行相关性分析;同时,体外培养人绒毛膜滋养层细胞,并转染miR-488-3p mimic和inhibitor;Transwell观察miR-488-3p对滋养...     

hsa_circ_0006220对子痫前期滋养细胞的增殖和迁移的影响

目的 探讨hsa_circ_0006220通过miR-203a-3p/SOCS3轴在子痫前期滋养细胞增殖、侵袭、迁移中发挥的作用.方法 收集2018年9月至2019年8月海南省妇女儿童医学中心妇产科单胎剖宫产分娩的子痫前期(PE)患者和正常妊娠胎盘组织(NC)各8例.qPCR检测hsa_circ_0006220在子痫前...     

子痫前期胎盘中第10号染色体缺失性磷酸酶和张力蛋白同源物基因、Syncytin-1与母体内皮损伤、滋养细胞损伤的相关性

目的研究子痫前期胎盘中第10号染色体缺失性磷酸酶和张力蛋白同源物基因(phosphatase and tensin homologue-deleted chromosome ten gene,PTEN)、Syncytin-1与母体内皮损伤、滋养细胞损伤的相关性。方法选择2015年2月至2017年12月在南方医科大学附属小榄医院诊断为子痫前期并分娩的46例患者及同期正常分娩的的80名孕妇,分娩前留取母体外周血并测定内皮损伤标志物的含量,分娩后留取胎盘并测定PTEN、Syncytin-1、细胞凋亡基因的表达量以及氧化应激标志物的含量。结果子痫前期胎盘组织中PTEN的mRNA表达量显著高于正常胎盘组织(t=32.797、P<0.000),Syncytin-1的mRNA表达量显著低于正常胎盘组织(t=28.506、P<0.000);子痫前期患者母体血液循环中内皮素-1(endothelin-1,ET-1)、可溶性血管内皮生长因子受体-1(soluble fms-like tyrosine kinase receptor 1,sFlt-1)的含量显著高于正常妊娠孕妇(t值分别为39.884、40.243、P均<0.001),且与胎盘组织中PTEN的mRNA表达量呈正相关(相关系数分别为0.674、0.596,P分别为0.004、0.007),与Syncytin-1的mRNA表达量呈负相关(相关系数分别为-0.615、-0.637,P分别为0.009、0.008),一氧化氮(nitric oxide,NO)、前列腺素I 2(prostaglandin I2,PGI2)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、胎盘生长因子(Placental growth factor,PLGF)的含量显著低于正常妊娠孕妇(t值分别为30.944、27.404、32.827、26.644、P均<0.001),且与胎盘组织中PTEN的mRNA表达量呈负相关(相关系数分别为-0.648、-0.592、-0.537、-0.613,P分别为0.006、0.009、0.013、0.007),与Syncytin-1的mRNA表达量呈正相关(相关系数分别为0.632、0.572、0.537、0.654,P值分别为0.010、0.013、0.015、0.009);子痫前期胎盘组织中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-reduced oxidase 4,NOX4)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、8-羟基脱氧鸟苷酸(8-hydroxydeoxyguanosine,8-OHdG)的含量以及自杀相关因子(factors associated suicide,Fas)、Fas配体(fas ligand,FasL)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cysteine-containing aspartic acid proteolytic enzymes-3,Caspase-3)的mRNA表达量显著高于正常胎盘组织(t值分别为27.714、27.704、26.786、22.622、27.964、25.496、25.893、30.837、28.975、P均<0.001),且与胎盘组织中PTEN的mRNA表达量呈正相关(相关系数分别为0.703、0.651、0.593、0.628、0.449、0.552、0.612、0.569、0.502,P值分别为0.003、0.007、0.004、0.006、0.016、0.010、0.006、0.012、0.018),gn Syncytin-1的mRNA表达量呈负相关(相关系数分别为-0.615、-0.714、-0.577、-0.548、-0.512、-0.585、-0.619、-0.495、-0.662,P值分别为0.009、0.001、0.013、0.015、0.018、0.011、0.009、0.023、0.003),Peroxiredoxin-Ⅱ蛋白(PrxⅡ)、PrxⅢ、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的含量以及B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)的mRNA表达量显著低于正常胎盘组织(t值分别为26.115、23.502、21.439、17.194、P均<0.001),且与胎盘组织中PTEN的mRNA表达量呈负相关(相关系数分别为-0.713、-0.657、-0.591、-0.642,P值分别为<0.001、0.006、0.009、0.007),与Syncytin-1的mRNA表达量呈正相关(相关系数分别为0.562、0.711、0.682、0.608,P值分别为0.013、<0.001、0.002、0.008)。结论子痫前期胎盘中PTEN的高表达以及Syncytin-1的低表达能够加重母体内皮损伤以及胎盘滋养细胞损伤。     

子痫前期患者胎盘组织中miR-155及CXCR4的表达及意义

目的探讨子痫前期(PE)患者胎盘组织中微小RNA-155(miR-155)及趋化因子受体4(CXCR4)的表达变化及临床意义。方法选取2015年12月至2016年2月在郑州大学第三附属医院产科以剖宫产术分娩的30例重度子痫前期(sPE)孕妇作为sPE组,同期因社会因素行剖宫产术分娩的30例健康孕妇为健康对照组(N组)。采用实时荧光定量PCR技术(RT-PCR)检测2组孕妇胎盘组织中miR-155及CXCR4mRNA表达水平,并对miR-155含量与CXCR4含量的相关性进行分析。采用免疫组化链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)法,检测同课题组前期构建的胎盘绒毛滋养细胞(VCT)组织芯片(正常对照1组42例,PE组56例)和绒毛外滋养细胞(EVCT)组织芯片(正常对照2组29例,PE组47例)中CXCR4蛋白的表达。结果 (1)2组孕妇的年龄、分娩孕周、孕前体质量指数(BMI)分别比较,差异均无统计学意义(P0.05)。2组孕妇血压比较,差异有统计学意义(P0.05)。sPE组新生儿出生体质量明显低于N组,差异有统计学意义(P0.05)。sPE组孕妇尿蛋白明显高于N组,差异有统计学意义(P0.05)。(2)胎盘VCT和EVCT组织芯片中:2组孕妇年龄比较,差异无统计学意义(P0.05);PE组分娩孕周早于N组,PE组孕妇收缩压、舒张压及尿蛋白均高于N组,新生儿出生体质量显著低于N组,差异均具有统计学意义(P0.05)。(3)sPE组胎盘组织中miR-155mRNA表达水平为1.53±0.92,明显高于对照组的0.87±0.73,差异具有统计学意义(P0.05)。(4)N组孕妇胎盘组织中CXCR4mRNA含量为1.51±1.85,sPE组为0.54±0.38,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。(5)sPE组孕妇胎盘组织中miR-155含量与CXCR4含量有显著相关性(r=-0.773,P0.05)。(6)CXCR4蛋白在VCT及EVCT均可见表达;胎盘VCT组织芯片中PE组CXCR4阳性表达率为48.21%(27/56),sPE组阳性表达率为47.92%(23/48),早发型PE组阳性表达率为53.66%(22/41),均显著低于正常对照组的83.33%(35/42),差异均有统计学意义(P0.05)。(7)胎盘EVCT组织芯片中PE组CXCR4阳性表达率为48.94%(23/47),sPE组阳性表达率为50.00%(22/44),早发型PE组阳性表达率为52.63%(20/38),均显著低于正常对照组的79.31%(23/29),差异均有统计学意义(P0.05)。结论 sPE患者胎盘组织中miR-155含量升高,CXCR4含量则明显降低,两者呈负相关关系,可能与PE的发病相关。     

青心酮对子痫前期患者胎盘滋养细胞中一氧化碳水平表达的影响

子痫前期是妊娠期的特有疾病,在我国的发病率为9．4％,是孕产妇和围生儿发病及死亡的重要原因。本次研究探讨中药青心酮治疗子痫前期的作用机理,报道如下。     

miR-141的靶蛋白在子痫前期患者胎盘组织中表达的研究进展

子痫前期是导致孕产妇和围产儿死亡的妊娠期特发性疾病之一,至今具体发病机制尚未阐明,目前认为子痫前期主要与胎盘组织过度氧化应激、细胞凋亡及广泛的血管内皮功能障碍有关。近年研究发现,微小核糖核酸(mi RNA)通过直接或间接影响其靶蛋白的表达参与许多疾病的病理生理过程,主要影响细胞增殖、新陈代谢、分化及凋亡等。研究显示,mi R-141在子痫前期患者外周血和胎盘组织中的表达水平较正常孕妇明显升高,考虑可能与子痫前期的发病机制有关。通过Star Base数据库及Target Scan等软件进行生物信息学分析结果提示mi R-141主要的靶蛋白有丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)、血管内皮生长因子A(VEGF-A)、表皮细胞生长因子受体(EGFR)、Yes相关蛋白-1(YAP1/YAP)、信号转导及转录激活子4(STAT4)等。本文将对mi R-141的靶蛋白在子痫前期患者胎盘组织中表达的研究进展进行综述。     

胃癌组织中MMP-11的表达及其对胃癌细胞转移侵袭的影响研究

目的探讨胃癌组织中基质金属蛋白酶-11(MMP-11)的表达及其对胃癌细胞转移侵袭的影响。方法回顾性选择2010年1月至2013年1月期间在成都医学院第一附属医院住院行手术治疗且术后病检明确为胃癌的120例患者作为研究对象;胃癌组织标本取自癌性溃疡凹陷内侧,癌旁正常组织标本为距离肿瘤病灶边缘5 cm以上的非癌性胃黏膜组织。运用免疫组化法检测胃癌组织及癌旁正常组织的MMP-11表达情况,比较不同病理特征胃癌组织MMP-11的表达情况及MMP-11表达与预后的关系。结果胃癌组织的MMP-11阳性表达率(54.17%)明显高于癌旁正常组织(0)(P<0.05);肿瘤大小、分化程度、Lauren分型、TNM分期、浸润深度及有无脉管侵犯、淋巴结转移、远处转移胃癌组织的MMP-11阳性表达有关(P<0.05),性别、年龄及组织学分型与胃癌组织MMP-11阳性表达无关(P>0.05);TNM分期高,浸润深,发生脉管侵犯、淋巴结转移、远处转移的胃癌组织MMP-11阳性表达率更高;MMP-11阳性表达患者的5年生存率(41.54%)明显低于MMP-11阴性表达患者(65.45%)(P<0.05)。结论MMP-11的阳性表达对于胃癌的发生、发展及转移侵袭过程有着重要的影响,且与胃癌患者的预后密切相关。     

子痫前期患者胎盘组织NK细胞及其表面KIR受体的配体HLA-G和HLA-E的表达及意义

目的检测子痫前期患者胎盘组织天然杀伤(NK)细胞及其表面KIR受体的配体HLA-G和HLA-E的表达并探讨其临床意义。方法选择2011年7月至2012年12月在东南大学附属中大医院及东南大学附属江阴人民医院妇产科住院分娩的孕妇60例,包括子痫前期及正常妊娠孕妇各30例。采用免疫组化法检测胎盘组织NK细胞分布和数量以及NK细胞表面KIR受体的配体HLA-G和HLA-E蛋白表达情况;采用western blot法定量检测子痫前期患者和正常妊娠孕妇(各10例)胎盘组织HLA-G蛋白表达水平。结果 NK细胞主要分布在胎盘组织的蜕膜层。子痫前期组NK细胞数量显著高于正常妊娠组(P0.05);HLA-G表达水平显著低于正常妊娠组(P0.05);两组间HLA-E表达水平差异无统计学意义。结论子痫前期患者母胎界面NK细胞数量异常增高以及HLA-G的表达降低可能与子痫前期的发病相关。     

上调NDRG1基因表达对人胰腺癌细胞MMP-9、VEGF表达及侵袭和迁移的影响

目的：建立稳定转染含N-myc下游调节基因-1（NDRG1）的SW1990细胞株,探讨NDRG1对 SW1990细胞侵袭与迁移能力的影响及其可能的分子机制。方法经脂质体介导将含有 NDRG1重组表达质粒转染人胰腺癌细胞株 SW1990,用 G418筛选阳性细胞克隆,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot鉴定阳性细胞克隆;采用RT-PCR及Western blot检测阳性细胞克隆MMP-9及VEGF mRNA与蛋白表达;采用Transwell小室侵袭实验与划痕实验分别检测细胞侵袭及迁移能力。结果 N17克隆组、转空载体组及未转染组NDRG1 mRNA表达量分别为0.53±0.25、0.26±0.11、0.25±0.13;相应的MMP-9 mRNA表达量分别为0.33±0.18、0.71±0.45、0.76±0.42;相应的VEGF mRNA表达量分别为0.27±0.16、0.68±0.36、0.69±0.38;相应的NDRG1蛋白表达量分别为0.27±0.13、0.11±0.04、0.12±0.06;相应的MMP-9蛋白表达量分别为0.12±0.04、0.38±0.15、0.36±0.14;相应的VEGF蛋白表达量分别为0.15±0.08、0.39±0.21、0.40±0.25。较其他组,N17克隆组NDRG1 mRNA及蛋白表达量显著增加（P〈0.01）,而MMP-9、VEGF mRNA及蛋白表达量显著降低（P〈0.01）。N17克隆组、转空载体组及未转染组微孔滤膜外侧细胞数分别为31.27±11.54、58.93±17.23、60.26±19.38,N17克隆组较其他组微孔滤膜外侧细胞数显著减少（P〈0.01）。N17克隆组、转空载体组及未转染组细胞迁移距离分别为51.35±18.24、120.68±42.97、124.54±51.66,N17克隆组较其他组细胞迁移距离显著减少（P〈0.01）。结论 SW1990细胞NDRG1表达上调后,细胞侵袭和迁移能力受到显著抑制,其作用机制可能与MMP-9及VEGF表达降低有关。     

5-氮-2'-脱氧胞苷对A431细胞Gadd45α表达及细胞凋亡的影响

目的 探讨去甲基化药物5-氮-2’-脱氧胞苷对体外培养表皮癌细胞株A431细胞Gadd45α表达及细胞凋亡的影响.方法 体外培养A431细胞,采用10 μmol/L 5-氮-2’-脱氧胞苷处理,药物处理前及处理48 h后分别采用RT-PCR、Western印记法及免疫细胞化学法检测A431细胞Gadd45α mRNA和蛋白的表达情况,采用流式细胞仪检测药物处理前、后A431细胞凋亡率.结果 药物处理48 h后,A431细胞Gadd45αmRNA及蛋白表达均高于处理前(P＜0.05);A431细胞早期凋亡率、晚期凋亡率及总凋亡率高于处理前(P＜0.05).结论 DNA甲基化参与调控A431细胞Gadd45α基因的表达,5-氮-2’-脱氧胞苷具有诱导A431细胞凋亡的作用.     

胎盘组织中HIF-1α的表达与血清sFlt-1,sEng水平在子痫前期的作用研究

目的 探讨胎盘组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达和血清中可溶性Endoglin(sEng)、可溶性血管内皮细胞生长因子受体-1(sFlt-1)水平在子痫前期发病机制中的作用.方法 采用免疫组化SABC法检测20例正常晚期妊娠孕妇(对照组)和35例子痫前期患者(子痫前期组,其中轻度16例、重度19例)胎盘组织中HIF-1α的表达;采用酶联免疫吸附实验的方法检测其血清中sEng和sFlt-1水平.结果 ①轻、重度子痫前期组中HIF-1α在合体滋养细胞的表达显著高于对照组(H=19.3,P<0.05;H=23.1,P<0.01).②轻、重度子痫前期组血清sEng,sFlt-1浓度分别为(4.39±0.48) ng/ml,(5.61±0.66) ng/ml;(22.69±5.38) μg/L,(30.15±5.43) μg/L,均显著高于对照组(1.71±0.27) ng/ml,(6.61±2.43) μg/L,差异具有统计学意义(t=21.25,P<0.01;t=24.47,P<0.01);(t=11.96,P<0.01;t=17.63,P<0.01).重度组高于轻度组(t=6.17,P<0.01;t=4.06,P<0.01).③子痫前期胎盘组织中HIF-1α表达与血清sEng,sFlt-1水平呈正相关(r=0.76,P<0.01;r=0.87,P<0.01).结论 HIF-1α和sEng,sFlt-1共同参与子痫前期的病理生理过程,并与病情严重程度有一定关系.     

5-氮-2-脱氧胞苷对A431细胞Gadd45α表达及细胞凋亡的影响

目的探讨去甲基化药物5-氮-2-脱氧胞苷对体外培养表皮癌细胞株A431细胞Gadd45α表达及细胞凋亡的影响。方法体外培养A431细胞,采用10μmol/L 5-氮-2-脱氧胞苷处理,药物处理前及处理48h后分别采用RT-PCR、Western印记法及免疫细胞化学法检测A431细胞Gadd45αmRNA和蛋白的表达情况,采用流式细胞仪检测药物处理前、后A431细胞凋亡率。结果药物处理48h后,A431细胞Gadd45αmRNA及蛋白表达均高于处理前(P<0.05);A431细胞早期凋亡率、晚期凋亡率及总凋亡率高于处理前(P<0.05)。结论 DNA甲基化参与调控A431细胞Gadd45α基因的表达,5-氮-2-脱氧胞苷具有诱导A431细胞凋亡的作用。     

子痫前期孕妇外周血、胎盘组织中信号肽-CUB-表皮生长因子样结构域蛋白2的表达及意义

目的 探讨信号肽-CUB-表皮生长因子样结构域蛋白2(Signal peptide-CUB-EGF-like domaincontaining protein,SCUBE2)在子痫前期孕妇外周血及胎盘组织中的表达及临床意义。方法 选取2021年6月至2022年6月住院分娩的子痫前期患者58例,其中早发型子痫前期30例（发病妊娠周数<34周）,晚发型子痫前期组28例（发病妊娠周数≥34周）;另选取30例足月正常分娩孕妇作为对照组。收集入院治疗前孕妇的血清样本以及分娩时新鲜胎盘组织标本。ELISA检测三组孕妇血清SCUBE2、VEGFR2表达水平,免疫组化检测三组胎盘组织中SCUBE2的定位及表达,Western blot实验及实时荧光定量PCR(RT-qPCR)实验检测三组胎盘组织中SCUBE2、VEGFR2的表达水平。结果 免疫组化法检测显示,SCUBE2主要表达于胎盘合体滋养细胞及胎盘血管内皮细胞中,子痫前期组表达水平低于对照组,早发型子痫前期组表达低于晚发型子痫前期组;Western blot及RT-qPCR实验检测结果显示,三组孕妇胎盘中SCUBE2和VEGFR2蛋白及mR...