大肠黏膜癌变过程中COX-2,Bcl-2及Bax表达的相关性

[目的]探讨COX-2,Bcl-2及Bax在大肠黏膜癌变过程中表达相关性。[方法]采用免疫组织化学法检测了正常结肠黏膜15例、慢性结肠炎20例、大肠癌旁组织50例、腺瘤30例及大肠癌组织50例中COX-2,Bcl-2及Bax蛋白的表达。分析COX-2、Bcl-2及Bax的表达与各种临床病理特征的关系及三者的相关性。[结果]COX-2在正常结肠黏膜,慢性结肠炎,大肠癌旁组织,腺瘤及大肠癌组织中的表达阳性率分别是6.7%,10.0%,40.0%,56.7%,90.0%,呈递增趋势。Bcl-2在5组中的表达阳性率分别为6.7%,10.0%,38.0%,46.7%,76.0%,呈递增趋势。Bax在5组中的表达阳性率分别为86.67%,75.0%,78.0%,76.7%,82.0%,五组之间阳性率比较均无显著性差异（P〉0.05）,但其阳性表达程度在正常组织,腺瘤样息肉,大肠癌三组之间呈递减趋势（P〈0.05）。3者在大肠癌中的表达与患者性别、年龄、肿块大小无明显差异（P〉0.05）。COX-2和Bcl-2在大肠癌组织中阳性反应呈显著正相关（P〈0.05,r=0.653）。COX-2、Bcl-2及Bax在大肠癌高、中分化组中的表达率分别为100%,88.9%,85.2%,明显高于低分化组中的79.3%、60.9%、78.3%;在大肠癌Duke＇s A,B期中Bcl-2表达却显著高于C,D期。[结论]COX-2及Bcl-2在正常结肠黏膜、慢性结肠炎、大肠腺瘤、大肠癌组织中的表达均呈递增趋势,而Bax在正常结肠黏膜、大肠腺瘤、大肠癌组织中的阳性表达程度呈递减趋势,提示COX-2及Bcl-2表达上调和Bax表达下调与大肠黏膜癌变过程有关。COX-2在大肠癌中的表达与肿瘤分化程度有关,Bcl-2在大肠癌中的表达与肿瘤分化程度、Duke＇s分期有关。COX-2与Bcl-2的表达呈正相关。     

丙泊酚抑制失血性休克复苏后大鼠肠道黏膜细胞凋亡

目的:研究失血性休克复苏后应用丙泊酚对肠道黏膜的保护作用。方法:将24只Wistar大鼠随机分为3组,分别为丙泊酚组(P组)、失血性-休克复苏组(HS-R组)、假手术组(C组),每组8只。P组、HS-R组在复苏后分别持续泵入丙泊酚10mg/(kg·h)、生理盐水1ml/(kg·h),持续泵入2h后开腹取小肠组织约2cm做石蜡切片,采用免疫组织化学法测肠道组织中凋亡蛋白/抗凋亡蛋白(Bcl-2/Bax)表达水平,采用TUNELL法检测肠道组织细胞凋亡水平。结果:HS-R组和P组的Bax表达水平显著高于C组,P组的Bax表达水平显著低于HS-R组(P0.01);HS-R组和P组的Bcl-2表达水平显著低于C组,P组Bcl-2表达水平显著高于HS-R组(P0.01);P组和HS-R组凋亡指数均显著高于C组,P组凋亡指数显著低于HS-R组(P0.01)。结论:失血性休克复苏后观察肠道黏膜有明显损伤,丙泊酚可通过调节Bcl-2/Bax表达水平来减轻肠黏膜损伤。     

口腔扁平苔藓及口腔鳞癌患者口腔黏膜组织中微小RNA-590的表达及临床价值探讨

目的探究微小RNA-590(miR-590)在口腔扁平苔藓(OLP)及口腔鳞癌(OSCC)患者口腔黏膜组织中的表达及相关临床价值。方法前瞻性研究,采用随机数字表法随机抽取2013年3月至2018年4月于河北省衡水市哈励逊国际和平医院治疗的OLP患者91例(OLP组),OSCC患者83例(OSCC组),另外收集42名健康志愿者的正常口腔黏膜组织作为对照组。采用实时荧光定量PCR(q PCR)比较OLP、OSCC组患者治疗前、后的口腔黏膜内的miR-590相对表达量与对照组间的差异。结果治疗前,miR-590在对照组、OLP组以及OSCC组中的相对表达量存在显著性差异(P 0. 05),其中OLP组患者miR-590相对表达量为1. 95±0. 43,显著高于对照组的0. 84±0. 32,OSCC组患者miR-590相对表达量为2. 84±0. 61,显著高于OLP组与对照组(P 0. 05);经治疗后,OLP、OSCC组患者miR-590相对表达量分别下降至0. 89±0. 35、0. 94±0. 28,与对照组无显著性差异(P 0. 05)。结论在OLP患者口腔黏膜组织中,miR-590呈现高水平表达,并且在OSCC患者口腔黏膜组织中,miR-590呈现更高水平的表达,提示以miR-590的表达水平为依据作为临床上OLP癌变的早期诊断标准具有极高的可行性。     

右美托咪定对心肌缺血再灌注大鼠模型心肌梗死面积、心肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响

目的分析右美托咪定对心肌缺血再灌注(MIR)大鼠模型心肌梗死面积、心肌细胞凋亡及凋亡蛋白表达的影响。方法取30只SD大鼠,随机分为对照组(仅穿线而不结扎)、MIR组(建立MIR模型)、干预组(建立MIR模型前给予右美托咪定预处理),三组各10只。比较干预组与MIR组大鼠心肌梗死面积、危险区面积和心肌细胞凋亡率的差异,并比较三组大鼠心肌组织中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及补体3蛋白表达水平的差异。结果相比MIR组,干预组大鼠心肌梗死面积和危险区面积明显缩小,心肌细胞凋亡率显著降低(P 0. 01)。相比对照组,MIR组和干预组大鼠Bcl-2和Bax蛋白表达水平均显著升高(P 0. 01);相比MIR组,干预组大鼠Bcl-2蛋白表达水平显著升高,而Bax蛋白表达水平显著降低(P 0. 01)。相比对照组,MIR组和干预组大鼠补体3蛋白表达水平均显著升高(P 0. 01);相比MIR组,干预组大鼠补体3蛋白表达水平显著降低(P 0. 01)。结论通过右美托咪定预处理可提高MIR大鼠模型心肌Bcl-2蛋白表达,降低Bax和补体3蛋白表达,减少心肌梗死面积,缓解大鼠心肌损伤,减少心肌细胞凋亡。     

子宫内膜异位症中Bax与Bcl-2的表达及其意义研究

目的探讨凋亡调节基因Bcl-2和Bax在子宫内膜异位症发生发展中的作用。方法SP法检测子宫内膜异位症61例异位内膜、51例在位内膜和58例正常子宫内膜组织中Bcl-2和Bax的表达。结果Bcl-2蛋白表达强于在异位内膜和对照组，分泌期差异有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）；异住内膜组Bax蛋白表达低于在位内膜组和对照组，增生期和分泌期，异位内膜组染色强度均低于在位内膜组和对照组，分泌期差异有统计学意义（P〈0．05）；Bcl-2和Bax在对照组及在位内膜组均呈周期性变化，Bcl-2增生期强于分泌期，Bax分泌期强于增生期，异位内膜组失去周期性变化；增生期3组Bcl-2表达均强于Bax，在位内膜组、异位内膜组差异有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）；而分泌期对照组和在位内膜组Bax强于Bcl-2，异位内膜组Bax表达较Bcl-2弱，差异均有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。结论Bcl-2和Bax在子宫内膜异位症发生发展中发挥重要作用。     

灯盏花素减轻顺铂对大鼠肾损害及肾细胞凋亡机制的研究

目的探讨应用灯盏花素减轻顺铂对大鼠肾损害及肾细胞凋亡的作用机制。方法48只SD大鼠分为对照组、模型组、25mg／kg灯盏花素组（灯盏花素1组）和50mg／kg灯盏花素组（灯盏花素2组）各12只。对照组给予羧甲基纤维素钠溶液灌胃,模型组、灯盏花素1组和2组均腹腔注射顺铂8mg／kg造模。灯盏花素1组和2组分别以25mg／kg和50mg／kg灯盏花素灌胃,给药7d后计算4组肾脏指数,采用原位缺15末端标记法检测肾细胞凋亡情况,左肾采用蛋白质印迹法检测肾皮质Bax、Bcl-2表达水平,右肾采用免疫组织化学法检测肾组织凋亡蛋白Bax和Bcl-2表达水平。结果模型组、灯盏花素1组和2组肾脏指数、凋亡指数及Bax、Bcl-2表达水平高于对照组（P〈0．05）;灯盏花素2组肾脏指数、凋亡指数、Bax表达水平及Bax／Bcl-2比值低于模型组、Bcl-2表达水平高于模型组（P〈0．05）;灯盏花素1组肾脏指数和凋亡指数高于2组（P〈0．05）。结论灯盏花素可增强凋亡蛋白Bcl-2表达、降低Bax表达,影响线粒体凋亡通路,从而减轻顺铂对肾损害大鼠肾细胞的凋亡。     

Bcl-2、Bax、Caspase-3表达与颞叶癫痫发病的相关性研究

目的：探讨神经元凋亡与颞叶癫痫患者海马硬化的关系。方法：取15例颞叶癫痫患者手术切除标本（癫痫组）和5例无癫痫发作的患者正常脑组织标本（对照组）,用原位末端标记（TUNEL）方法检测神经元凋亡,免疫组化染色检测细胞凋亡相关基因表达产物Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白的表达。结果：癫痫组和对照组的TUNEL阳性细胞平均百分率分别为（52．2±3．2）％、（4．0±1．8）％,差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫组化染色结果表明,对照组患者脑组织内Bcl-2蛋白无表达,癫痫组患者脑内Bcl-2蛋白表达明显增强（P〈0．05）;Bax蛋白在癫痫组与对照组中均微弱表达,差异无统计学意义;Caspase-3在对照组中有轻微表达,在癫痫组表达明显增强,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：神经元凋亡部分参与癫痫患者海马硬化的形成,Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白在这一过程中可能发挥作用。     

嚼槟榔与口腔黏膜下纤维化癌变之间的关系

目的观察嚼槟榔与口腔黏膜下纤维化癌变之间的关系。方法选取2019年1月—12月于本院就诊且行手术治疗的160例口腔黏膜下纤维化(oral submucous fibrosis, OSF)癌变患者作为病例组,选取本院同期门诊就诊的OSF但无口腔鳞状细胞癌的患者160例作为对照组,采用调查问卷形式展开,调查内容主要包括:(1)OSF相关信息:患者何时开始使用槟榔、咀嚼槟榔持续时间(年)、每天咀嚼槟榔量(颗/d);(2)OSF专科检查:病理诊断分期;(3)口腔癌相关信息:发病时间、手术后病理分级。采用单因素分析、Mantel-Haenszel分层分析,多因素分析采用非条件logistic回归分析咀嚼槟榔及其与口腔癌间的关系。结果研究结果显示,咀嚼槟榔时间与OSF癌变呈现明显的正相关关系(P0.001),每日咀嚼槟榔量与OSF癌变呈现明显的正相关关系(P0.001),Mantel-Haenszel分层分析结果显示不同年龄的每日嚼槟榔量对口腔黏膜下癌变差异无统计学意义;每日咀嚼槟榔量OR_(MH)值明显未调整时OR_C,提示年龄对每日咀嚼槟榔量具有缩小作用。非条件logistic回归分析结果显示年龄(OR 95%CI:1.087～4.498)、咀嚼槟榔时间(OR 95%CI:1.267～4.212)和日咀嚼槟榔颗数(OR 95%CI:1.526～3.202)为OSF癌变的独立危险因素。结论年龄越大、咀嚼槟榔时间越长、每日咀嚼槟榔数量越多是OSF癌变的独立危险因素,且咀嚼槟榔的时间和量与OSF癌变呈明显的正相关关系。     

柿叶提取物通过MAPK/ERK1/2通路减轻心肌缺血再灌注损伤

目的探讨柿叶提取物(PEL)减轻心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用机制。方法健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、心肌缺血再灌注损伤组(MIRI组)、柿叶提取物组(PEL组)、MAPK抑制剂组、MAPK抑制剂+PEL组。采用结扎大鼠冠状动脉左前降支30 min后再灌注60 min建立心肌缺血再灌注模型。PEL组大鼠灌胃50 mg/(kg·d)柿叶提取物,MAPK抑制剂组大鼠尾静脉注射PD0325901; MAPK抑制剂+PEL组大鼠灌胃50 mg/(kg·d)柿叶提取物前30 min尾静脉注射PD0325901。假手术组和MIRI组灌胃等量生理盐水。每天相同时间给药1次,连续给药21 d。全自动生化分析仪检测血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)水平,试剂盒检测心肌组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,TUNEL法检测心肌细胞凋亡率,采用1%氯化三苯基四氯唑测定心肌梗死面积,Western Blot检测心肌组织中Bcl-2、Bax和p-ERK1/2蛋白表达。结果与假手术组比,MIRI组大鼠血清AST和CK含量、心肌细胞凋亡率、心肌梗死面积,心肌组织MDA和LDH含量、Bax蛋白表达均显著升高(P 0. 05),心肌组织SOD和GSH-Px活力、Bcl-2和p-ERK1/2蛋白表达显著降低(P0. 05)。与MIRI组比,PEL组和MAPK抑制剂+PEL组大鼠血清AST和CK含量、心肌细胞凋亡率、心肌梗死面积、心肌组织MDA和LDH含量、Bax蛋白表达均显著降低(P 0. 05),心肌组织SOD和GSH-Px活力、Bcl-2和pERK1/2蛋白表达均显著升高(P 0. 05); MAPK抑制剂组无显著差异(P 0. 05)。与MAPK抑制剂组比,MAPK抑制剂+PEL组血清AST和CK含量、心肌细胞凋亡率、心肌梗死面积、心肌组织MDA和LDH含量、Bax蛋白表达均显著降低(P 0. 05),心肌组织SOD和GSH-Px活力、Bcl-2和p-ERK1/2蛋白表达显著升高(P 0. 05)。结论 PEL可能通过激活MAPK/ERK1/2信号通路减轻心肌缺血再灌注损伤。     

Caspase-3及P53蛋白在口腔扁平苔藓及口腔鳞癌中表达意义

目的探讨Caspase-3及P53蛋白在口腔扁平苔藓及鳞癌癌变过程中的作用。方法采用免疫组织化学方法检测45例口腔扁平苔藓（扁平苔藓组）和46例口腔鳞癌（鳞癌组）和15例正常口腔黏膜组织（对照组）中Caspase-3及P53蛋白的表达情况并进行比较。结果Caspase-3蛋白表达在扁平苔藓组（71．11％）高于鳞癌组（47．83％）（P〈0．05）、但低于对照组（93．33％）（P〈0．05）;P53蛋白在鳞癌组中阳性表达率（78．26％）明显高于对照组（0）和扁平苔藓组（28．89％）（P均〈0．05）;Caspase-3蛋白与P53蛋白呈负相关（r=0．339,P=0．021）。结论Caspase-3蛋白可抑制口腔扁平苔藓和鳞癌的发展,P53蛋白则在其发展中起促进作用。     

槲皮素对高糖培养海马神经元凋亡及Akt、p-Akt、Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的探讨槲皮素对高糖培养海马神经元凋亡影响的可能作用机制。方法新生24 h Sprague-Dawley大鼠,取海马神经元原代培养,分为正常对照组、高糖组、槲皮素组、槲皮素+Akt抑制剂组和Akt激动剂组。各组在不同条件培养基中培养72 h后流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blotting检测各组神经元p-Akt、Akt、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果与正常对照组相比,高糖组细胞凋亡率明显升高(P0.01),p-Akt/Akt和Bcl-2/Bax均明显减少(P0.01);与高糖组比较,槲皮素组、Akt激动剂组细胞凋亡率明显下降(P0.01),p-Akt/Akt和Bcl-2/Bax均明显升高(P0.01)。与槲皮素+Akt抑制剂组比较,槲皮素组细胞凋亡率明显下降(P0.01),p-Akt/Akt和Bcl-2/Bax均明显升高(P0.01)。结论槲皮素能够减少高糖培养下海马神经元的凋亡,其作用机制与增加Akt信号通路中Akt蛋白磷酸化的程度,进而增加Bcl-2蛋白的表达、抑制Bax蛋白的表达有关。     

口腔黏膜组织癌变趋势的判别

目的建立口腔黏膜组织癌变趋势的判别方法,为临床肿瘤或疑似癌变组织的早期诊断奠定研究基础。方法采用RT-PCR技术检测口腔正常组织、口腔黏膜白斑病组织（oral leukoplakia,OLK）和口腔鳞状细胞癌（oralsquamous cell carcinoma,OSCC）组织的肿瘤相关基因（NF-1,ACP-2,BCL-2,CLK-3,FKBP-8,SOCS-3,XRCC-1,CTNNB-1,GDF-15）表达水平,采用Fisher判别分析建立口腔黏膜组织癌变趋势大小的基因诊断方法,采用Cross-validated（a）法对本判别方法进行评价。结果 ACP-2,BCL-2及SOCS-3 3个基因的表达水平在3种组织间逐渐降低（P〈0.05）,而NF-1,CLK-3,FKBP-8,XRCC-1,CTNNB-1及GDF-15 6个基因的表达水平在3种组织间逐渐升高（P〈0.05）;口腔黏膜组织癌变趋势的判别公式：Y1=-16.811＋0.477 XNF-1＋0.540 XACP-2-0.543 XCTNNB-1-0.089 XSOCS-3;Y2=-35.832＋0.073 XNF-1-0.074 XACP-2＋0.306 XCTNNB-1＋0.191 XSOCS-3;判别界值〉8.6513可判定为无癌变,0.1117～8.6513为轻度癌变组织,〈0.1117为癌变组织;采用Cross-validated（a）法进行评价,总判别符合率为100%;交互判别符合率为100%,灵敏度为100%,特异度为100%。结论本研究建立了口腔黏膜组织癌变趋势判别公式,有助于其基因诊断方法的建立。     

合欢花黄酮对精神分裂症大鼠学习记忆能力、海马组织c-fos蛋白和基因表达水平的影响分析

目的探讨合欢花黄酮对精神分裂症大鼠学习记忆能力、海马组织c-fos蛋白和基因表达水平的影响。方法将72只SD大鼠随机分为对照组、模型组和合欢花黄酮高、中、低剂量组和氯氮平组各12只。合欢花黄酮高、中、低剂量组分别灌胃5 ml/kg合欢花黄酮(120 mg/kg、60 mg/kg和30 mg/kg),氯氮平组灌胃氯氮平(20 mg/kg),连续28d,在最后一次给药2 h后,模型组、合欢花黄酮高、中、低剂量组和氯氮平组分别给予一次性腹腔注射0. 6 mg/kg地佐环平/地卓西平(MK-801)建立大鼠精神分裂症模型,对照组给予等体积生理盐水。采用Morris水迷宫检测各组大鼠的学习记忆能力; HE染色观察大鼠的海马组织病理变化; TUNEL法检测海马组织神经元细胞的凋亡;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测c-fos的表达; Western Blot检测c-fos、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bax的表达。结果与对照组相比,模型组大鼠学习记忆能力明显下降(P 0. 05),海马组织细胞的凋亡率明显升高(P 0. 05),Bcl-2蛋白的表达明显下调(P 0. 05),c-fos、cleaved Caspase-3和Bax表达明显上调(P 0. 05);与模型组相比,合欢花黄酮高、中剂量组和氯氮平组大鼠学习记忆能力明显升高(P 0. 05),海马组织Bcl-2表达明显上调(P 0. 05),c-fos、cleaved Caspase-3和Bax蛋白的表达明显下调(P 0. 05); HE染色显示,合欢花黄酮高、中剂量组和氯氮平组大鼠海马组织病理变化明显减轻。结论合欢花黄酮可以呈浓度依赖性的下调c-fos的表达,改善精神分裂症大鼠的学习记忆能力,减轻脑组织损伤。     

冠心病猝死者心肌细胞凋亡与Bcl-2和Bax 基因蛋白表达及其临床意义

目的：探讨Bcl-2和Bax基因蛋白在冠心病心脏性猝死者心肌细胞凋亡中的作用，为冠心病生物治疗提供理论依据。方法；用凋亡原位末端标记检测（TUNEL）法检测16例冠心病心性猝死者和10例心脏正常其他原因死亡者心肌细胞凋亡，用免疫组化法检测Bcl-2和Bax基因蛋白在心肌细胞中表达水平，并探讨其相互关系。结果：（1）冠心病心性猝死者梗死区心肌细胞凋亡数与Bax蛋白表达阳性细胞数均明显高于正常对照组（P〈0．05）；且于梗死区心肌细胞凋亡数及冠状动脉病变支数成明显正相关性。Bcl-2基因蛋白表达则与之相反，梗死区心肌细胞Bcl-2基因蛋白表达明显低于对照组（P〈0．05），且与梗死心区肌细胞凋亡数、冠状动脉病变支数成明显的负相关性。结论：冠心病心性猝死者梗死心肌细胞存在明显的凋亡现象，且受Bax蛋白与Bcl-2基因蛋白下调影响，Bax蛋白与Bcl-2蛋白共同调节心肌细胞凋亡，诱导心肌细胞表达Bcl-2将可能成为探索心肌生物治疗措施的新途径。     

复方地黄颗粒对阴虚动风证帕金森病大鼠纹状体细胞凋亡及PI3K/Akt信号通路的影响

目的探讨复方地黄颗粒(CRG)对阴虚动风证帕金森病(PD)大鼠纹状体细胞凋亡及对PI3K/Akt信号通路的影响。方法采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)注射损毁黑质法制备阴虚动风证PD大鼠模型,造模成功30只大鼠。随机分为模型组、美多芭(MAD)组、复方地黄颗粒低(L-CRG)、中(M-CRG)、高(H-CRG)剂量组,每组6只。另纳入正常对照组和假手术组各6只。美多芭组予美多芭150 mg/(kg·d)灌胃; L-CRG、M-CRG、H-CRG组予复方地黄颗粒3. 5 g/(kg·d)、7 g/(kg·d)、14 g/(kg·d)灌胃;正常对照组、假手术组及模型组予等量生理盐水灌胃。用药6周后处死大鼠,取纹状体。采用TUNEL法检测纹状体细胞凋亡情况;采用透射电子显微镜观察纹状体细胞超微结构;采用蛋白印迹(WB)法检测Bcl-2、Bax、PI3K、Akt、p-Akt蛋白水平。结果与对照组和假手术组比较,模型组细胞凋亡指数明显升高,差异有统计学意义(P 0. 05),细胞凋亡特征明显,Bax蛋白水平明显升高(P 0. 05),Bcl-2、PI3K、p-Akt蛋白水平降低(P 0. 05);与模型组比较,低中高剂量复方地黄颗粒组细胞凋亡指数显著下降(P 0. 05),细胞形态趋于正常,Bax蛋白水平明显降低(P 0. 05),Bcl-2、PI3K、p-Akt蛋白水平升高(P 0. 05),且呈剂量依赖效应。结论复方地黄颗粒可能通过PI3K/Akt信号通路调节凋亡相关蛋白表达,抑制阴虚动风证PD大鼠纹状体细胞凋亡,呈剂量依赖效应。     

卵巢癌及癌旁组织端粒酶活性与凋亡相关性研究

目的研究端粒酶活性和抗凋亡基因Bel-2及促凋亡基因Bax在卵巢癌发生、发展过程中的变化。方法应用SP免疫组织化学方法，对50例卵巢癌及癌旁正常组织进行hTERT、Bcl-2、Bax基因蛋白的检测。结果hTERT和Bcl-2阳性表达率在卵巢癌组织中高于癌旁组织。而Bax阳性表达率在卵巢癌组织低于癌旁组织，2组间均有明显差异。hTERT蛋白表达阳性率在临床Ⅰ、Ⅱ期和临床Ⅲ、Ⅳ期分别为16／23（69．5696）和26／27（96．30％），差异有显著性（P〈0．05）。高分化组织与低分化组织中阳性率分别为18／23（78．26％）和25／27（92．59％），差异也有显著性（P〈0．05）。对于Bcl-2蛋白表达阳性率在临床Ⅰ、Ⅱ期和Ⅲ、Ⅳ期中分别为8／23（34．78％）和16／27（59．26％），高分化组织和低分化组织阳性率分别为9/23（39．13％）和18／27（66．67％）。差异均有显著性（P〈0．05）。卵巢癌组织凋亡指数明显低于卵巢癌旁组织，差异有显著性（P〈0．05）。结论凋亡调控功能失调与肿瘤的形成有关，hTERT、Bel-2、Bax基因蛋白的异常表达与卵巢癌发生有关；hTERT、Bel-2在卵巢癌的发生发展中可能有协同作用，hTERT、Bel-2与Bax在卵巢癌的发生发展中可能有拮抗作用。hTERT、Bel-2蛋白的表达可能是反映卵巢癌生物学行为的重要参数。     

核糖体蛋白RPL41对人卵巢癌A2780细胞增殖和凋亡的影响及其机制

目的研究核糖体蛋白RPL41对人卵巢癌A2780细胞增殖和凋亡的影响,并分析其潜在凋亡机制。方法不同浓度RPL41(0μM、20μM、50μM、100μM)处理A2780细胞,分为对照组和RPL41低、中、高剂量组。采用MTT法检测人卵巢癌A2780细胞活力变化;采用Hoechst染色法检测A2780细胞凋亡情况;采用流式细胞仪检测A2780细胞周期;采用蛋白印记(Western Blot)法检测A2780细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达;采用RNA干扰技术沉默RPL41,分为NC组和si RPL41组,Western Blot检测沉默RPL41后A2780细胞中Bcl-2和Bax的表达。结果与对照组相比,糖体蛋白RPL41可以抑制人卵巢癌A2780细胞的增殖,具有剂量依赖性(P 0. 05);RPL41剂量依赖性引起A2780细胞凋亡(P 0. 05); RPL41可以显著上调Bax的表达、下调Bcl-2的表达,呈浓度依赖性(P 0. 05);沉默RPL41表达后,A2780细胞中Bcl-2的表达较NC组显著上升,Bax的表达较NC组显著下降(P 0. 05)。结论 RPL41可呈剂量依赖性抑制卵巢癌A2780细胞的增殖,并可能通过上调Bax表达、下调Bcl-2表达,参与细胞程序化死亡机制,导致A2780细胞凋亡。     

磷酸肌酸对大鼠心肺复苏后心肌细胞凋亡的影响

目的 通过观察大鼠心肺复苏(CPR)后心肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2的表达及外源性磷酸肌酸(CP)干预的影响,研究大鼠CPR后心肌损伤机制及外源性CP的保护作用.方法 将32只成年雄性SD大鼠随机分为对照组(A组)、常规复苏组(B组)、常规剂量CP组(C组,胸外按压时首次给药CP 0.5g/kg,2 h后再次给药1.0g/kg)、大剂量CP组(D组,胸外按压时首次给药CP 1.0g/kg,2 h后再次给药2.0g/kg).每组动物8只.建立窒息型大鼠心搏骤停(CA)-CPR模型,ROSC后24 h取心肌标本待测.以脱氧核糖核昔酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测ROSC后24h的心肌细胞凋亡指数(AI);以免疫组化法检测ROSC后24h的心肌细胞Bcl-2,Bax蛋白表达.数据比较采用方差分析.结果 与A组比较,CPR后24h B,C,D各组心肌凋亡指数及Bax,Bcl-2蛋白表达均显著升高(均P＜0.01),Bcl-2/Bax值均明显降低(P＜0.01);与B组比较,C组和D组心肌的凋亡指数及Bax,Bcl-2蛋白表达均明显降低,Bcl-2/Bax值均明显上升(P＜0.01);与C组比较,D组的凋亡指数及Bax,Bcl-2蛋白表达均明显降低,Bcl-2/Bax值明显上升(P＜0.05).结论 外源性磷酸肌酸可明显抑制窒息型大鼠CPR后心肌细胞凋亡,对心肺复苏后心肌损伤具有保护作用,该作用以大剂量时更明显.     

miR-27b基因对病毒性心肌炎细胞凋亡的影响研究

目的探讨抑制miR-27b基因表达对病毒性心肌炎心肌细胞凋亡的影响及机制。方法将40只健康BALB/c小鼠随机分为对照组:小鼠一次性腹腔注射0. 1 ml的柯萨奇病毒B3(CVB3); miR-27b抑制剂组(抑制组):小鼠一次性腹腔注射0. 1 ml的CVB3,次日,通过尾静脉注射miR-27b抑制剂(10μg/10 g); miR-27b NC组(NC组):小鼠一次性腹腔注射0. 1 ml的CVB3,次日,通过尾静脉注射miR-27b NC(10μg/10 g)每组10只。于接种CVB3病毒后第7天,采集血清及心脏组织。肌酸激酶(CK)试剂盒检测血清CK含量; qRT-PCR检测心肌组织miR-27b表达;TUNEL试剂盒、超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、髓过氧化物酶(MPO)试剂盒及细胞内活性氧(ROS)试剂盒分别检测心肌细胞凋亡率、心肌组织SOD活力、MPO活性及ROS含量。Western blotting检测NF-κBp65、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果小鼠感染CVB3后第7天体重减轻率及血清CK活性明显高于对照组小鼠(P 0. 05)。与对照组比较,模型组SOD活力、Bcl-2蛋白表达明显降低,miR-27b mRNA表达、细胞凋亡率、MPO活性、ROS含量及NF-κBp65和Bax蛋白表达均明显升高(P 0. 05),与模型组比较,抑制组SOD活力、Bcl-2蛋白表达明显升高,miR-27b mRNA表达、细胞凋亡率、MPO活性、ROS含量及NF-κBp65和Bax蛋白表达均明显降低(P 0. 05)。结论抑制miR-27b基因表达可降低病毒性心肌炎心肌细胞凋亡率及氧化应激反应,其机制可能与抑制NF-κB信号通路有关。     

蛇床子素后处理对大鼠心肌急性缺血/再灌注损伤心肌细胞凋亡的影响及其可能机制

目的观察蛇床子素后处理对大鼠心肌急性缺血/再灌注损伤心肌细胞凋亡的影响,并对其可能的作用机制进行探讨。方法结扎大鼠左冠状动脉前降支30 min后,松开结扎线再灌注120 min制备急性心肌缺血/再灌注损伤模型;将30只Wistar大鼠随机分为以下3组:对照(Sham)组、缺血/再灌注(I/R)组、I/R+蛇床子素后处理(Ost)组。采用TUNEL法原位标记缺血区凋亡心肌细胞并计算凋亡指数,采用Western blot法检测心肌组织中Caspase-3、Bcl-2及Bax三种蛋白的表达。结果与Sham组相比,I/R组心肌细胞凋亡指数、心肌组织Caspase-3蛋白、Bcl-2蛋白和Bax蛋白含量明显增高(均P<0.05);与I/R组相比,Ost组心肌细胞凋亡指数(P<0.05)、心肌组织Caspase-3蛋白(P<0.01)及Bax蛋白表达水平均降低(P<0.05),而Bcl-2蛋白表达水平明显增高(P<0.05)。结论蛇床子素后处理能抑制急性心肌缺血/再灌注损伤所致的大鼠心肌细胞凋亡,同时上调心肌组织中Bcl-2蛋白的表达及下调心肌组织中Bax蛋白的表达,提示上调Bcl-2蛋白及下调Bax蛋白、进而上调Bcl-2/Bax比值可能是其发挥抗心肌细胞凋亡作用的机制。