大黄素补骨脂素对辐射损伤小鼠造血功能的影响

目的通过观察大黄素、补骨脂素对辐射损伤模型小鼠的外周血有形成分、造血干/祖细胞和CD34+细胞表达的影响,探讨益髓生血颗粒治疗地中海贫血的药效物质基础。方法采用60Coγ射线3.5 Gy全身一次性照射,造成小鼠骨髓造血抑制、外周血象有形成分减少,致小鼠肾虚髓损。照射前大黄素、补骨脂素(60mg·kg-1,ig)预防给药2 d,造模后再连续给药14 d。在照射前及照射后的1,3,5,7,11,13,15,17,21 d检测外周血象;并在照后7d分别进行骨髓造血干/祖细胞集落培养(CFU-GM,CFU-E,BFU-E,CFU-Meg)及CD34+细胞检测。结果与照射对照组比较,从造模后第5天开始,G-CSF、大黄素、补骨脂素均表现出明显的促白细胞和血红蛋白升高的作用,但对红细胞均无明显的作用;在照射后7天,G-CSF、大黄素、补骨脂素均表现出显著促进CFU-GM,CFU-E的增殖的作用(P0.001),而对CFU-GM,CFU-E均表现出轻微的抑制作用;此外,三组药物对照射后7 d的小鼠骨髓CD34+细胞均有促进增殖的作用,其中G-CSF(P0.01)和大黄素(P0.05)的作用具有统计学意义。结论大黄素、补骨脂素可一定程度的提高照射损伤小鼠外周血白细胞和血红蛋白的含量,可提高照射后小鼠骨髓造血干/祖细胞及骨髓CD34+细胞的增殖。研究结果提示,大黄素、补骨脂素是益髓生血颗粒的部分有效活性组分,具有提高小鼠造血功能的作用。     

肉苁蓉多糖对骨髓抑制性贫血小鼠造血调控的实验研究

目的：观察肉苁蓉多糖对骨髓抑制贫血小鼠造血功能的影响,探讨其造血调控作用机制。方法：采用Co^60照射和注射环磷酰胺复合制备贫血小鼠模型。应用流式细胞术（FCM）检测肉苁蓉多糖对骨髓抑制贫血小鼠骨髓细胞周期的影响,采用造血祖细胞培养术观察三系造血祖细胞集落数。结果：低剂量和高剂量肉苁蓉多糖能明显促进骨髓G0/G1期细胞向S期细胞以及S期细胞向G2/M期细胞的转化,G2/M期细胞比例明显升高,增殖指数（PI）也明显升高。给药组CFU-E,BFU-E,CFU-MeG与贫血对照组集落数有显著差异。结论：肉苁蓉多糖可能通过促使骨髓抑制贫血小鼠骨髓细胞细胞周期的转化,促进骨髓造血功能的恢复,并促进红系巨核系造血。     

阿胶补血活性组分对环磷酰胺所致贫血小鼠骨髓造血微环境的影响

目的研究阿胶活性组分A、B对环磷酰胺所致贫血小鼠骨髓造血微环境的保护作用。方法细胞计数法检测小鼠单核细胞数,集落形成检测小鼠骨髓中造血干/祖细胞相对数量,流式细胞仪测定小鼠骨髓细胞CD34含量和细胞周期分布,切片观察小鼠骨髓组织形态。结果阿胶活性组分能够明显的增加环磷酰胺所致贫血小鼠骨髓单核细胞数、增加骨髓细胞中CFU-GM、BFU-E,CFU-E和CD34含量,增加骨髓细胞中S期细胞比率。结论阿胶活性组分能够有效地保护骨髓造血微环境,减轻环磷酰胺对骨髓组织的损伤,保护造血组织。     

针灸对化疗后骨髓抑制及白细胞的影响(英文)

目的:观察针刺及艾灸疗法对化疗骨髓抑制及白细胞计数的影响, 并探讨其作用机制。方法:采用动物实验和临床研究相结合的方法, 观察针灸对化疗中骨髓及白细胞的影响, 用生物培养法检测造血干/祖细胞数量、血清集落刺激因子的活性。结果:与模型组比较, 针刺及艾灸组外周血白细胞提前1 d开始回升。针灸促进中性粒细胞分裂增殖最明显。结论:针灸抗化疗骨髓抑制, 提升白细胞计数的效应可能与促进骨髓细胞向外周血中释放、延长白细胞寿命, 提高血清集落刺激因子的活性, 促使造血干/祖细胞尽快增殖, 减轻化疗药物对造血干/祖细胞的损伤等有关。     

六味地黄丸对老年小鼠造血干细胞影响的实验研究

目的观察六味地黄丸对老年小鼠骨髓造血干细胞的数量、表型、细胞周期和集落形成能力的影响.方法老年昆明种小鼠随机分为生理盐水对照组及六味地黄丸高、中、低剂量组,灌胃给药7 d后,分离骨髓造血干细胞,进行细胞计数;流式细胞仪检测细胞表型和细胞周期;并采用甲基半固体培养基检测集落的形成.结果各组小鼠骨髓单核细胞和悬浮细胞数量以及集落产率无显著差异,但低、中剂量组Sca-1和CD34的表达提高,说明较低剂量的药物能提高骨髓中造血干细胞的数量,而且药物还具有提高细胞增殖能力的作用.结论六味地黄丸激活造血干细胞,通过升高骨髓中造血干细胞的数量和增殖能力提高造血机能,以达到提高免疫功能的作用.     

四物汤及其单药对血虚证小鼠造血的改善作用及其机制初探

目的 :研究四物汤及各单药对γ射线照射致血虚小鼠造血系统的影响 ,探讨四物汤补血作用的机理及配伍机制。方法 :采用 3 5Gy60 Coγ射线全身一次照射制作小鼠血虚证模型 ,进行外周血象检测及造血祖细胞集落培养 ;MTT法检测四物汤及各单药诱生Peyer’sPatch细胞、NIH3T3细胞上清的活性。结果 :①血虚小鼠骨髓中的CFU GM、BFU E、CFU E、CFU mix较正常组明显减少 ,四物汤及各单药对模型组造血祖细胞集落增殖的作用强度不同 ,四物汤最为明显。②四物汤及各单药能够诱导Peyer’sPatch产生细胞因子刺激骨髓细胞的增殖。③四物汤、当归、白芍诱生NIH3T3细胞上清能显著促进NFS 6 0细胞的增殖。结论 :四物汤及各单药对血虚小鼠造血系统的作用机制 ,可能通过刺激Peyer’sPatch细胞、成纤维细胞或产生造血生长因子 ,或与造血因子协同作用 ,促进骨髓干祖细胞增殖分化来实现的 ;四物汤及各单药作用的靶点和强度不同 ,符合中药复方组方的规律。     

四物汤对γ射线照射致血虚证小鼠造血细胞作用的研究

探讨四物汤预防和治疗血虚证的作用,用60 Coγ射线身全照射小鼠造成血虚证模型;荧光标记并用流式细胞仪测定CD34＋细胞在骨髓有核细胞中的比例,细胞固定后PI染色测定细胞周期,Annexin V-FITC试剂盒和DNA凝胶电泳检测骨髓细胞的凋亡,结果：四物汤对小鼠骨髓造 血干祖细胞,外周血细胞的恢复有明显促进作用,有保护骨髓和促进骨髓细胞由G1期进入S期的效应,四物汤可减轻射线引起的细胞凋亡,促进骨髓造血干祖细胞的增殖,抑制骨髓造血干祖细胞的凋亡是四物汤预防和治疗血虚证的机制之一。     

制首乌总多糖对贫血小鼠造血祖细胞增殖的影响

目的观察制首乌总多糖(PPS)对放化疗所致骨髓抑制贫血小鼠造血祖细胞增殖的影响。方法建立骨髓抑制贫血小鼠模型,采用造血祖细胞培养技术,观察PPS体内ip给药和细胞培养直接用药对造血祖细胞增殖和骨髓有核细胞(BMC)数目的影响。结果体内用药能显著增加BMC数目,提高BFU-E、CFU-E和CFU-Meg集落数产率(P<0.01),能增加CFU-GM集落数产率(P<0.05);在一定浓度下,体外直接用药,能增加CFU-Meg集落数产率(P<0.01)。结论PPS能通过间接作用促进红系和粒系祖细胞的增殖,能通过间接和直接作用刺激巨核系祖细胞的增殖。     

针灸抗化疗骨髓抑制提升白细胞机制

目的：肯定针灸抗化疗骨髓抑制，提升白细胞的疗效，揭示其作用机制。方法：采用动物实验和临床研究相结合的方法，动态观察针灸对化疗中骨髓及白细胞的影响，用生物培养法检测造血干祖细胞数量、血清集落刺激因子的活性。结果和结论：针灸抗化疗骨髓抑制，提升白细胞的机制在于促进骨髓细胞向外周血中释放、延长白细胞寿命、通过提高血清集落刺激因子的活性，促使造血干祖细胞尽快增殖、减轻造血干祖细胞受化疗药物的损伤，；实验有迹象表明针灸还可能作用于造血微环境。     

四物汤及其提取物对辐射致血虚证小鼠造血作用的研究

【目的】探讨四物汤及其提取物治疗辐射致血虚证小鼠的作用机制和有效物质基础。【方法】γ射线全身照射小鼠制成血虚证模型,观察四物汤对其外周血和造血祖细胞集落的影响,基因芯片检测有效单体芍药苷的分子作用机制。【结果】四物汤、正丁醇提取物、水溶提取物对血虚证小鼠外周的白细胞的恢复有明显促进作用;四物汤和芍药苷增强血虚证小鼠骨髓造血干祖细胞的集落形成能力;芍药苷可促进骨髓基质细胞分泌造血因子(G—CSF,GM—CSF,PDGF—α)等,抑制造血抑制因子(M—CIP)的分泌。【结论】四物汤补血的物质基础可能是芍药苷,促进骨髓基质细胞分泌G—CSF,GM—CSF,PDGF-α等造血因子可能是四物汤补血的作用机制之一。     

左归丸对骨髓抑制小鼠造血调控的影响

目的 观察左归丸对骨髓抑制小鼠外周血、造血干细胞增殖能力、骨髓细胞周期和凋亡的影响,并探讨其可能的造血调控机制.方法 将48只大鼠随机分为6组,即正常对照组、模型组、阳性对照组和左归丸低、中、高剂量组,各8只,除正常对照组外,其余各组采用60Coγ射线和环磷酰胺联合制作骨髓抑制大鼠模型,于造模结束后第2 d开始给药,模型组、正常对照组予0.9%氯化钠注射液,左归丸低、中、高剂量组予相应浓度左归丸,阳性对照组予重组人粒细胞集落刺激因子注射液.各组均给药7 d.用全自动血细胞分析仪、白细胞计数法、造血祖细胞培养和流式细胞术分别检测左归丸对骨髓抑制小鼠外周血、骨髓有核细胞数、体外培养各系造血祖细胞的集落数以及骨髓细胞周期和调亡的影响.结果 左归丸中、高剂量均能明显升高外周血红细胞、血红蛋白、骨髓有核细胞(P＜0.05,P＜0.01),左归丸中剂量对血小板和左归丸高剂量对白细胞有明显升高作用(P＜0.05).左归丸中剂量组和阳性对照组能提高体外培养各系造血祖细胞的集落数(P＜0.05,P＜0.01),左归丸高剂量组粒单系细胞集落生成单位、红系细胞集落生成单位和爆增型红细胞集落生成单位数提高显著(P＜0.05,P＜0.01).左归丸各剂量组均能促进骨髓G0/G1 期细胞向S期细胞以及S期细胞向G2/M期细胞的转化,从而导致G2/M期细胞比例和增殖指数(PI)明显升高(P＜0.05,P＜0.01).左归丸各剂量组的骨髓细胞凋亡比例与模型组比较均显著下降(P＜0.01),与阳性对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 左归丸可能通过促进G0期造血干细胞进入细胞周期,进行增殖;加速骨髓细胞修复受损的DNA,通过G1/S和S期监测点;抑制造血细胞的凋亡等机制,从而促进损伤骨髓造血功能恢复.     

沙棘汁对再生障碍性贫血小鼠骨髓红系祖细胞、粒单系祖细胞的影响

目的：研究沙棘汁对再生障碍性贫血小鼠模型骨髓造血祖细胞体外增殖水平的影响。方法：采用免疫介导法制作再生障碍性贫血小鼠模型，采集其骨髓有核细胞进行培养。将Balb／c小鼠随机分为正常组、模型组、沙棘汁组、四物汤组，比较观察各组小鼠骨髓细胞体外培养红系祖细胞(CFU-E、BFU-E)、粒单系祖细胞(CFU-GM)集落的形成水平。结果：除正常组外，各组再生障碍性贫血小鼠的CFU-E、BFU-E、CFU-GM集落形成均有显著下降；而沙棘汁组则可促进骨髓细胞的增殖，但与正常组比较仍存在一定的差距。结论：沙棘汁可以促进再生障碍性贫血小鼠骨髓CFU-E、BFU-E、CFU-GM集落的形成。     

四物汤对γ射线照射致血虚证小鼠造血细胞作用的研究

探讨四物汤预防和治疗血虚证的作用机理。用⁶⁰Coγ射线全身照射小鼠造成血虚证模型;荧光标记并用流式细胞仪测定CD34⁺细胞在骨髓有核细胞中的比例;细胞固定后PI染色测定细胞周期;Annexin V-FITC试剂盒和DNA凝胶电泳检测骨髓细胞的凋亡。结果:四物汤对小鼠骨髓造血干祖细胞、外周血细胞的恢复有明显促进作用;有保护骨髓和促进骨髓细胞由G₁期进入S期的效应;四物汤可减轻射线引起的细胞凋亡;促进骨髓造血干祖细胞的增殖,抑制骨髓造血干祖细胞的凋亡是四物汤预防和治疗血虚证的机制之一     

参附汤对移植小鼠造血干细胞归巢干预作用的研究

目的:观察参附汤对移植后小鼠造血干细胞归巢的影响。方法:以转GFP基因的Balb/c荧光小鼠作为供鼠,以普通Balb/c小鼠为受鼠,进行造血干细胞移植,移植后抽取4只小鼠作为单纯照射组以观察照射剂量是否充足外,其余小鼠随机分为参附组和空白组,参附组给予参附汤,空白组给予0.9%生理盐水灌胃,分别于移植后+3、+7、+14天随机抽取骨髓标本,用激光共聚焦显微镜观察荧光细胞的归巢数量,流式细胞仪检测骨髓单个核细胞的sca-1+细胞的表达率。结果:激光共聚焦显微镜检测显示,参附组小鼠造血干细胞归巢的数量较空白组增多,并随移植时间的推移,呈逐渐增多的趋势。流式检测显示,骨髓单个核细胞的sca-1+细胞+3、+7、+14天的表达率分别为(5.36±1.27)%、(5.77±1.14)%、(5.42±1.14)%,与空白组相比,二者间有显著性差异(P<0.05)。结论:具有温阳补肾作用的参附汤能促进自体移植小鼠造血干细胞的归巢。     

人参皂甙对CD_(34)~ 造血干/祖细胞的增殖和分化作用

目的 :探索人参皂甙 (GS)对CD34 造血干 /祖细胞的刺激增殖和诱导分化作用。方法 :采用免疫磁珠法 (MACS)分离纯化脐血CD34 细胞 ,在造血细胞半固体和液体培养体系中加入不同浓度的GS ,检测对CD34 造血干 /祖细胞增殖 ,形成祖细胞集落的提高率 ,并用流式细胞仪检测液体培养后细胞表面标记的变化。结果 :GS( 5～ 50 μg/ml)能提高BFU E、CFU E、CFU GM、CFU GEMM集落产率 ( % ) ,分别为87 6± 2 6、63 3± 2 8、58 0± 3 1和 96 3± 5 5(均P <0 0 1)。GS 2 5μg/ml是液体培养刺激CD34 细胞体外增殖的最佳浓度。GS诱导细胞 14天后 ,细胞表面表达CD33 细胞随GS的浓度升高而增加 ,在GS 50 μg/ml时以CD15 细胞数最高 ,CD71 细胞和G A 细胞数仅在 2 5μg/ml时高于未加GS的对照组。结论 :GS不但能促进CD34 造血干 /祖细胞的增殖 ,并且能诱导定向分化 ,具有类生长因子和协同生长因子的作用。     

复方参鹿颗粒含药血清对较低危骨髓增生异常综合征p38MAPK磷酸化的抑制作用

目的观察复方参鹿颗粒(CSG)含药血清对较低危骨髓增生异常综合征(lower-risk MDS)骨髓单个核细胞(BMMNC)p38MAPK磷酸化、CD34~+细胞凋亡和正常造血干/祖细胞集落(CFU-HSPC)形成的影响。方法 16只清洁级Wistar大鼠,随机分为空白血清组、CSG组,每组8只,制备空白血清和CSG含药血清。体外骨髓细胞培养分为空白血清组、CSG组、SB203580组和SB202474组。分离lower-risk MDS患者BMMNC,与10%各组血清或p38抑制剂共培养,Annexin V/PI双染流式细胞术检测CD34~+细胞凋亡率, Western Blot检测p38、p-p38蛋白表达。MACS分离骨髓CD34~+细胞,用半固体甲基纤维素与10%各组血清或p38抑制剂共培养,观察CFU-HSPC形成,FISH检测集落中异常克隆细胞群体的比例。结果与空白血清和SB202474组比较,CSG、SB203580组的凋亡率、p-p38蛋白表达减少(P0.05);CFU-HSPC形成数增加(P0.01);形成的集落中异常克隆细胞比例降低(P0.05)。CSG和SB203580组的p-p38蛋白表达和异常克隆细胞比例呈正相关(P0.01)。结论 CSG含药血清能改善lower-risk MDS骨髓无效造血,其机制可能与抑制p38蛋白磷酸化,减少骨髓CD34~+细胞凋亡,并恢复骨髓正常造血细胞的优势生长有关。     

血府逐瘀汤影响小鼠骨髓造血干细胞的实验研究

目的观察血府逐瘀汤对小鼠骨髓造血干细胞的数量、表型、细胞周期和集落形成能力的影响。方法昆明小鼠随机分为对照组及血府逐瘀汤高（13g/kg）、中（6.5g/kg）、低剂量（3.25g/kg）组,灌胃给药7天后,分离骨髓造血干细胞,进行细胞计数,流式细胞仪检测造血干细胞表型Sca和细胞周期,并采用甲基半固体培养基检测集落的形成。结果各组小鼠骨髓单核细胞和悬浮细胞数量以及集落产率差异无显著性（P〉0.05）,但低剂量组CD34和Sca-1的表达提高（P〈0.05）,中剂量组只能明显增加Sca-1的表达（P〈0.05）。结论血府逐瘀汤通过增加较早期造血干细胞的数量和功能,提高造血能力,从而达到去瘀生新的作用。     

复方补脾肾中药对环磷酰胺所致的造血抑制小鼠骨髓有核细胞、CFU-GM、CFU-F生成的影响

观察复方补脾肾中药补肾阴方和补肾阳方对造血抑制小鼠骨髓造血的影响。方法：以环磷酰胺（Ｃｙ）１２０ｍｇ／ｋｇ给昆明种小鼠连续腹腔注射３ｄ，造成骨髓抑制模型。以补肾阴方和补肾阳方连续灌胃１０ｄ。以骨髓有核细胞计数法计数骨髓有核细胞，以骨髓造血祖细胞培养方法培养粒单系祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）和成纤维祖细胞（ＣＦＵ－Ｆ）。结果：两方均能提高骨髓有核细胞数和ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｆ集落形成率，补肾阳方优于补肾阴方。     

补肾解毒活血法与益气补血法对骨髓抑制小鼠造血功能影响的比较研究

目的:比较补肾解毒活血法与益气补血法对环磷酰胺(CTX)所致骨髓抑制小鼠造血功能的影响及其作用机制的不同特点.方法:昆明种小鼠80只,随机分为4组,正常对照组、模型组、补肾解毒活血组(20.55 g·kg -1·d-1)和益气补血组(17.47 g·kg-1·d-1).采用CTX 100 mg·kg-1 ip,连续3d,制成骨髓抑制小鼠模型.各组于造模完成后次日开始ig连续10d.分别于造模前及造模后1,3,5,7,10,14 d动态检测外周血象;于末次给药次日后进行骨髓有核细胞计数(BMNC)及粒-单核系集落形成单位( CFU-GM)、红系集落形成单位(CFU-E)、和红系爆式集落形成单位(BFU-E)集落计数.结果:补肾解毒活血方和益气补血方均可明显升高模型小鼠的WBC,PLT,BMNC,可促进造血祖细胞(HPC)增殖,CFU-GM,CFU-E,BFU-E集落数均显著高于模型组(P＜0.01);补肾解毒活血方对血小板的恢复优于益气补血方.结论:补肾解毒活血方和益气补血方均可促进骨髓造血祖细胞集落生成,具有减轻和改善化疗后骨髓抑制的效果,而前者尤可减轻血小板减少、促进其恢复;其作用机制可能在骨髓细胞分化过程或造血微环境等途径上有不同.     

八珍汤对骨髓抑制小鼠血发生的影响

本研究从外周血细胞、骨髓有核细胞、造血祖细胞及细胞周期等方面探讨八珍汤对骨髓抑制小鼠造血系统的作用及其机制。结果显示：①八珍汤能明显促进骨髓抑制小鼠外周血白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血小板（PLT）、血红蛋白（HB）以及骨髓有核细胞（BMC）的增加;②体内用药能明显促进红系（BFU—E,CFU—E）、粒系（CFU-GM）和巨核系（CFU—Meg）三系造血祖细胞集落形成;③能明显促进骨髓抑制小鼠骨髓细胞进入细胞周期,使G0／G1期细胞比例减少,S期和G2／M期细胞比例增加。