人参多糖体外抑制人非小细胞肺癌A549细胞作用研究

目的探讨人参多糖体外抑制人非小细胞肺癌A549细胞的作用。方法应用MTT法检测药物对非小细胞肺癌A549细胞增殖的影响,应用流式细胞技术检测细胞周期变化,Hoechst33258／PI双染色法观察细胞凋亡形态的变化。结果人参多糖在体外可抑制人非小细胞肺癌A549细胞增殖,促进细胞凋亡,阻滞细胞周期在G2／M期;荧光染色可见,随药物浓度增加细胞凋亡率增加,表现为染色质凝集、细胞核碎裂等典型的细胞凋亡形态变化。结论人参多糖在体外可抑制人非小细胞肺癌A549细胞增殖,诱导细胞凋亡。     

灯盏花素对肺癌A549细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的灯盏花素对肺癌A549细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法利用MTT法研究不同浓度(0 mM、1 mM、3. 125 mM、6. 25 mM、12. 5 mM、25 mM、50 mM、100 mM)灯盏花素对肺癌A549细胞的生长抑制作用并计算半数抑制浓度(IC50)值;用半数抑制浓度的灯盏花素处理肺癌A549细胞12 h、24 h、48 h后,通过Annexin V-FITC形态学染色法和流式细胞术分析细胞死亡类型和细胞周期变化; Western blot方法检测细胞内p-53/p53、p21、cyclin B1、p-cdc2/cdc2、Bcl-2/Bad和cleaved-caspase-3蛋白表达变化。结果 MTT检测发现灯盏花素处理后的A549细胞生长受到显著抑制(IC50为25. 03 mM),且表现出明显的剂量依赖性(P 0. 05);形态学染色和流式细胞术表明灯盏花素能够诱导肺癌A549细胞时间依赖性凋亡(P 0. 05),并发生G2/M细胞周期阻滞; Western blot结果显示与细胞周期相关蛋白p-p53、p21、p-pcdc2随着灯盏花素作用时间的增加,表达量显著提高(P 0. 05),而cyclin B1的表达明显受到抑制(P0. 05);凋亡相关蛋白分析发现:促凋亡蛋白Bad和cleaved-caspase-3的表达显著增加,抑凋亡蛋白Bcl-2的表达明显降低(P 0. 05)。结论灯盏花素能够使肺癌A549细胞发生G2/M期阻滞,上调细胞周期相关蛋白表达,改变细胞周期,抑制细胞增殖;同时通过调控Bcl-2和caspase家族蛋白诱导并执行肺癌A549细胞凋亡。     

重组人凋亡素2配体联合NP方案在晚期非小细胞肺癌患者治疗中的应用

目的:探讨重组人凋亡素2配体联合NP方案在晚期非小细胞肺癌患者治疗中的应用.方法:将48例晚期非小细胞肺癌患者随机分为实验组36例和对照组12例,对照组给予安慰剂联合NP方案治疗,实验组给予rh-Apo2L联合NP方案治疗.严格做好药物和患者的全程管理,协助医生及督导员做好患者的心理工作,严格遵循用药方法,密切观察用药后毒副反应,及时处理,定时随访.结果:本组48例患者研究过程中脱落2例,未评价1例.余45例治疗2个周期疗效:PR 16例,SD 23例,PD 6例;6例PD患者更换治疗方案,退出本研究,余39例治疗4个周期疗效:PR 12例,SD 12例,PD 10例,未评价5例;10例PD患者更换治疗方案,退出本研究,余29例治疗6个周期疗效:PR 6例,SD 5例,PD 8例,未评价10例;8例PD患者更换治疗方案,退出本研究,余21例治疗8个周期疗效:SD 2例,PD 7例,12例未评价.患者用药后产生食欲下降、恶心、呕吐、呃逆胃部不适、骨髓抑制、发热反应、睡眠障碍、便秘、血栓等不良反应,其中21例治疗期间出现恶心、呕吐,36例出现食欲下降,32例出现不同程度的骨髓抑制,3例出现血栓,5例出现发热反应,经对症治疗及护理不良反应明显改善或恢复正常.结论:积极有效的药物及患者全程管理,可确保药物使用的准确性,保证患者安全.     

紫草素诱导白血病细胞K562凋亡的研究

目的探讨紫草素对人白血病K562细胞的诱导凋亡作用。方法MTT显色法检测紫草素对K562细胞的增殖抑制作用;形态学观察分析DNA琼脂糖凝胶电泳;AnnexinV/PI双标记法检测紫草素对K562细胞的凋亡效应;Caspase检测K562细胞凋亡通路。结果紫草素0.25~8μg/ml浓度即能明显抑制K562细胞的增殖,并具有时间和浓度的依赖性。1μg/ml紫草素作用48h后的K562细胞出现凋亡细胞的特征。1~4μg/ml浓度紫草素诱导K562细胞凋亡具有明显的量效关系,2μg/ml紫草素在0~72h内诱导K562细胞凋亡具有明显的时效关系;DNA凝胶电泳呈现细胞凋亡的典型梯形条带;紫草素诱导K562细胞凋亡经历了Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9的激活。结论紫草素能有效地诱导K562细胞凋亡,并主要通过线粒体凋亡通路。     

凋亡相关基因survivin在非小细胞肺癌中表达及与bcl-2的相关性研究

目的:探讨凋亡相关基因survivin在非小细胞肺癌中表达及其与bcl-2的关系.方法:选取52例非小细胞肺癌患者组织,其中鳞癌26例、腺癌24例、大细胞未分化癌2例.正常肺组织10例,分别应用免疫组织化学法检测survivin及bcl-2蛋白的表达.结果:surwivin表达率在正常肺组织为0,非小细胞肺癌为65.39%,2组比较差异有统计学意义;在高分化癌组织为44.44%,在中-低分化癌组织为76.47%,2组比较差异有统计学意义;在有淋巴结转移组为82.61%,无淋巴结转移组为51.72%,2组比较差异有统计学意义.Survivin的表达与患者年龄、性别、吸烟史及病理分型无关.stirvivin在bcl-2阳性表达组和阴性表达组中的表达率分别为90.00%和37.93%,差异有统计学意义.结论:survivin基因异常表达引起的细胞凋亡抑制在非小细胞肺癌发生中起重要作用,其过度表达提示非小细胞肺癌预后不良;survivin蛋白表达与bcl-2蛋白表达呈正相关,二者在非小细胞肺癌发生中可能起协同作用.联合检测stirvivin蛋白和bcl-2蛋白,可为判断非小细胞肺癌侵袭、转移的能力、预后提供依据.     

吉西他滨对人非小细胞肺癌A549细胞摄取^18F-FDG影响的研究

目的 探讨测定人非小细胞肺癌A549细胞的18F-FDG细胞结合率方法及用吉西他滨化疗后对A549细胞摄取18FFDG的影响.方法 在不同条件下测定A549细胞的18F-FDG细胞结合率,细胞浓度5×104～1×107/瓶;18F-FDG放射性活度1.85～29.6KBq;反应时间20～120min;葡萄糖浓度0～11.1mmol/L.MTT测定加入不同剂量0～120mmol/L吉西他滨24h后细胞抑制率.测定加入不同剂量0～120mmol/L吉西他滨24h后18F-FDG细胞结合率.结果 18F-FDG细胞结合率随细胞数量、反应时间的增加而增高,随葡萄糖浓度的增高而降低,与18F-FDG放射性活度无关;加入不同剂量吉西他滨后,细胞结合率随剂量增加而下降,两者呈负相关（r=-0.78,P＜0.01）.结论吉西他滨作用24h后引起人非小细胞肺癌A549细胞 18F-FDG细胞结合率下降,可用18F-FDG显像早期观测吉西他滨对人非小细胞肺癌疗效.     

Vinculin表达对非小细胞肺癌A549细胞生物学特征的影响

目的通过体外实验探讨非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞系的Vinculin表达对其生物学特征的影响。方法购买人NSCLC A549细胞系,体外培养,分为对照组、空白载体组以及高表达组三组,高表达组A549细胞系转染Vinculin过表达载体,空白载体组A549细胞系转染空白载体。体外培养48 h后,应用RT-PCR检测各组A549细胞系Vinculin mRNA表达情况,应用MTT法检测细胞活性,Ki-67免疫荧光检测细胞增殖能力,Transwell培养体系Hoechst染色观察A549细胞系迁移侵袭能力。结果 RT-PCR检测结果显示,与对照组、空白载体组比较,高表达组Vinculin mRNA表达量明显增高(P<0.01);MTT法检测结果显示,与对照组、空白载体组比较,高表达组的OD值明显降低(P<0.01);Ki-67免疫荧光检测结果显示,与对照组、空白载体组比较,高表达组Ki-67⁺细胞数量明显减少(P<0.01);Transwell培养体系Hoeschst染色结果显示,与对照组、空白载体组比较,高表达组迁移和侵袭的细胞数量明显减少...     

虫草素调节非小细胞肺癌细胞株细胞周期、凋亡及相关抑癌基因的实验研究

目的 研究虫草素对非小细胞肺癌细胞株H358细胞周期、凋亡及相关抑癌基因的调节作用。方法 培养非小细胞肺癌细胞株H358并分组,空白对照组用不含药物的DMEM处理,虫草素组用含有50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L虫草素的DMEM处理,处理24 h后测定细胞周期分布、细胞凋亡率、抑癌基因表达水平。结果 不同剂量虫草素处理后,H358细胞的S期比率、凋亡率及PTEN、p53、p16及Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的mRNA表达水平明显高于空白对照组,G2/M期比率明显低于对照组(P <0. 05),且200μmol/L虫草素处理后,H358细胞的S期比率、凋亡率及PTEN、p53、p16及Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的mRNA表达水平明显高于其他浓度虫草素处理的细胞,G2/M期比率明显低于其他浓度虫草素处理的细胞(P <0. 05)。结论 虫草素处理非小细胞肺癌细胞株能够使细胞周期停滞、细胞凋亡加剧,增加抑癌基因表达是虫草素发挥以上调节作用的分子途径,并呈剂量依赖性。     

载脂蛋白M在非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭中的作用

目的探讨载脂蛋白M(apo M)对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞系增殖、迁移、侵袭的影响及与基质金属蛋白酶(MMP)-10的关系。方法以转染apo M慢病毒的A549细胞作为实验组(apo M-OE组),转染空慢病毒的A549细胞作为阴性对照组。分别采用CCK-8法、划痕实验和Transwell侵袭实验检测各组细胞的增殖、迁移和侵袭能力。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和免疫印迹法检测各组细胞apo M及MMP-10的表达水平。结果与阴性对照组相比,apo M-OE组apo M表达明显上调(P0.01),表达量约为阴性对照组的28倍。apo M-OE组细胞增殖倍数及侵袭率明显高于阴性对照组(P0.001)。与阴性对照组比较,apo M-OE组空白视野显著减少,闭合速率显著加快,即细胞迁移率更大(P0.001)。apo M-OE组中MMP-10 mRNA及apo M、MMP-10蛋白表达量显著高于阴性对照组(P0.05)。结论过表达apo M可增强A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力,同时使细胞高表达MMP-10。     

重组人血管内皮抑制素治疗晚期非小细胞肺癌的应用

近年，随着现代生物技术的发展，生物治疗日趋重要，已经逐渐成为与手术、化疗和放疗并驾齐驱的治疗肿瘤的有效手段了。尤其是生物靶向治疗，以其针对性强，不良反应小和有效率高等特点已受到越来越多的关注。重组人血管内皮抑制素（恩度）为一种生物制品类抗肿瘤新药，是世界卜首例血管抑制素，它是多靶点药物。其作用机制是通过抑制血管的内皮细胞迁移来达到抑制肿瘤新生血管的形成，阻断了肿瘤细胞的营养供给，从而达到抑制肿瘤增殖或转移目的。     

帕瑞昔布对非小细胞肺癌细胞株A549增殖和迁移的影响

目的 研究帕瑞昔布对非小细胞肺癌A549细胞增殖和迁移的影响,并探讨其可能机制.方法 采用随机数字表法将A549细胞随机分为四组：对照组（C组）,10 μmol/L帕瑞昔布（P1组）、40 μmol/L帕瑞昔布组（P2组）和160 μmol/L帕瑞昔布组（P3组）.C组细胞常规培养,P1、P2和P3组细胞分别用终浓度为10 μmol/L、40 μmol/L和160 μmol/L的帕瑞昔布处理A549细胞24 h.MTT法检测各组细胞的增殖情况,划痕试验检测各组细胞的迁移能力,Western blot法检测各组细胞p-AKT、survivin的表达情况.结果 与C组比较,P1、P2和P3组细胞的增殖抑制率依次增高（P＜0.05）,P1、P2和P3组细胞的迁移距离依次降低（P＜0.05）,P1、P2和P3组细胞p-AKT和survivin的表达水平依次降低（P＜0.05）,且呈剂量依赖性.结论 帕瑞昔布可以抑制A549细胞的增殖和迁移,其机制可能是抑制p-AKT和survivin的表达.     

Survivin与非小细胞肺癌预后的相关性研究

目的 研究非小细胞肺癌（NSCLC）组织中细胞凋亡抑制蛋白存活素（Survivin）的表达与其预后的关系。方法 应用免疫组织化学技术对100例手术标本Survivin的表达状态进行检测。结果 100例NSCLC石蜡标本中Survivin阳性率为63％，在不同TNM分期、淋巴结转移的NSCLC组织中，Survivin阳性率的差异有显著性（P〈0．05），而与组织学类型和分化程度无关。多因素COX回归显示：Survivin是NSCLC患者预后的独立预测因子。Survivin阳性患者手术后死亡的相对危险度是Survivin阴性患者的1．86倍；（似然比检验，P〈0．05）。结论 Survivin表达状态是NSCLC患者预后的独立预测因子，Survivin阳性表达的肺癌患者预后不良。     

活性氧在荆花牡荆素诱导人肺癌A549细胞凋亡中的作用

目的 探讨紫花牡荆素(CAS)诱导人肺腺癌A549细胞凋亡及其机制.方法 体外培养A549细胞.MTT法测定CAS对A549细胞增殖的抑制;Annexin V/PI双染色分析细胞凋亡率;H2DCFH-DA探针流式细胞术分析活性氧(ROS)生成.结果 CAS能抑制人肺癌A549细胞增殖,呈浓度依赖性.Annexin V/PI法检测结果显示10 μmol/L的CAS作用A549细胞12 h、24 h、48 h后,其凋亡率分别为22.39%、38.66%、64.82%.H2DCFH-DA探针流式细胞术分析表明,完全培养基组、溶媒(0.1% DMSO)组对A459细胞作用0 h;CAS(10 μmol/L)对A549细胞作用3 h、6 h、12 h;N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC,10 mmol/L)+CAS(10 μmol/L)组对A549细胞作用6 h的ROS生成水平分别为8.47、15.26、66.2、74.1、82.2、67.3,随着CAS作用时间延长,细胞内ROS水平增加.NAC对细胞凋亡有抑制作用.结论 CAS可诱导A549细胞凋亡,其作用机制可能与提高细胞内ROS产生增加有关.     

Wnt信号通路抑制剂XAV939对人小细胞肺癌H446增殖及凋亡的影响

目的 探讨Wnt信号通路抑制剂XAV939对人小细胞肺癌H446细胞增殖和凋亡的影响。方法 采用 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测XAV939、顺铂分别作用及联合用药时H446细胞的生 长抑制率,并探索产生最佳细胞生长抑制作用的药物水平,流式细胞仪检测XAV939对H446细胞凋亡情况。结果 Wnt信号通路抑制剂XAV939抑制H446细胞生长并呈水平依赖性(P <0.01),顺铂抑制H446细胞生长呈水平和 时间依赖性(P <0.01)。两药联合时对细胞生长的抑制作用更明显。流式细胞仪检测结果显示随着XAV939水平 增加,H446凋亡细胞比例明显增加(P <0.05)。结论 XAV939通过抑制Wnt信号通路诱导细胞凋亡抑制人小细 胞肺癌H446细胞的生长,这为小细胞肺癌的治疗提供辅助治疗手段。     

Caspase-3蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其与肿瘤细胞凋亡的关系

目的分析Caspase-3蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况及与肿瘤细胞凋亡的相关性。方法选择2013年3月至2018年3月该院胸外科收治的234例NSCLC患者为研究对象。采用免疫组化法检测肿瘤组织中Caspase-3蛋白和Bcl-2蛋白的表达,并比较不同病理特征患者的表达情况,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法检测细胞凋亡情况。结果 NSCLC组织中Caspase-3蛋白和Bcl-2蛋白阳性表达率分别为58.12%和48.29%,在肿瘤组织中Caspase-3蛋白和Bcl-2蛋白的表达呈显著正相关(r=0.273,P=0.004),但Caspase-3蛋白阳性表达在有淋巴结转移的肿瘤组织中表达较低,而Bcl-2蛋白阳性表达则在无淋巴结转移的肿瘤组织中表达较低,Caspase-3蛋白免疫组化阳性结果评分与肿瘤细胞的凋亡指数呈显著正相关(r=0.749,P=0.000)。结论 NSCLC组织中Caspase-3蛋白阳性表达与肿瘤组织有无淋巴结转移密切相关,且免疫组化法检测结果评分与肿瘤细胞凋亡指数呈正相关,可能与Bcl-2蛋白共同参与肿瘤细胞的凋亡过程。     

重组人血管内皮抑制素对非小细胞肺癌患者临床疗效及对患者P糖蛋白表达的影响

目的 研究分析重组人血管内皮抑制素对非小细胞肺癌治疗效果及对患者P糖蛋白(P-gp)表达的影响.方法 采用回顾性研究方法将2012年5月至2015年9月在山东大学齐鲁医院肿瘤科治疗78例非小细胞癌患者根据其治疗方法分为对照组和观察组各39例.对照组患者采取铂类+吉西他滨治疗,观察组则联合应用重组人血管内皮抑制素治疗.比...     

人非小细胞肺癌药物敏感性的MTT法测定

建立肿瘤药敏检测方法,可提高肿瘤化疗用药的针对性及选择综合疗法的可靠性。本文应用MTT比色法检测了71例手术治疗的非小细胞肺癌（NSCLC）细胞对临床上常用的9种化疗药物的敏感性。报道如下。1材料与方法1．1标本与药物71例NSCLC标本制成单细胞悬液。化疗药物：阿霉素（ADM）,顺铂（DDP）,卡铂（CBDCA）,丝裂霉素（MMC）,5-氟尿嘧啶（5－FU）,足叶乙甙（VP－16）,长春新险（VCR）,平阳霉素（BLM）,甲氨哗哗（MTX）。体外试验药物浓度（μg／ml）C=50×D（临床每日用药剂量）／5000×2×103,试验药物以生理盐水…