表没食子儿茶素没食子酸酯对慢性粒细胞白血病模型小鼠的治疗作用及可能机制

目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对慢性粒细胞白血病(CML)模型小鼠的治疗作用,并分析可能机制。方法将CML小鼠随机分为对照组及EGCG治疗组(EGCG组)。EGCG组小鼠接受EGCG治疗,具体为:EGCG15 mg/kg,腹腔注射,每周2次,共治疗4周。对照组接受等量的生理盐水腹腔注射。观察小鼠体重变化及肿瘤大小。采用免疫组化及Western bolt法检测并比较两组小鼠肿瘤组织中Bcr/abl融合基因蛋白(BCR-ABL)、肿瘤组织中含SH2结构域的蛋白质酪氨酸磷酸酶1(SHP-1)的表达。采用Western bolt法检测两组小鼠SHP-1、STAT3、半胱天冬酶-3(Caspse-3)、半胱天冬酶-6(Caspase-6)及半胱天冬酶-9(Caspase-9)的表达。结果治疗结束后,EGCG组小鼠体重显著高于对照组(P 0. 05,且肿瘤重量显著低于对照组(P 0. 05)。EGCG组小鼠肿瘤组织BCR-ABL表达量显著低于对照组(P 0. 05)。EGCG组小鼠肿瘤组织内SHP-1表达量显著高于对照组(P 0. 05)。EGCG组小鼠肿瘤组织内p-STAT3水平显著低于对照组小鼠(P 0. 05)。EGCG组小鼠肿瘤组织内Caspase-3及Caspase-9水平显著高于对照组小鼠(P 0. 05)。两组Caspase-6水平比较差异无统计学意义(P 0. 05)。结论 EGCG可抑制CML模型小鼠的肿瘤生长,该作用可能是通过激活SHP-1/STAT3信号通路实现的。     

负载表没食子儿茶素没食子酸酯对血小板功能与凋亡等影响

本研究探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)负载后对血小板生理生化功能的影响.将血小板用不同浓度EGCG(浓度分别为:0、2.5、5、7.5、10、12.5、15、20、30 mmol/L)的负载液处理,通过比对回收率和聚集活性,将实验分为2.5、5、10 mmo1/...     

表没食子儿茶素没食子酸酯对人急性单核细胞白血病细胞株U937的作用及机制研究

本研究探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人急性单核细胞白血病细胞株U937的作用。采用磺酰罗丹明B(SRB)法检测EGCG对U937细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测EGCG对U937细胞周期的影响;采用RT-PCR、Westren blot法分别检测p16mRNA、蛋白的表达;采用nMSP法检测U937细胞p16甲基化状态变化;采用RT-PCR法检测DNA甲基转移酶1(DNMT1)、DNMT3A、DNMT3B基因mRNA的表达。结果表明:EGCG可以剂量依赖性和时间依赖性地抑制U937细胞增殖(r=0.71),且呈剂量依赖性诱导G0/G1期细胞阻滞;EGCG可以呈剂量依赖性上调U937细胞p16mRNA、蛋白的表达;EGCG可以呈剂量依赖性减弱U937细胞p16甲基化程度;EGCG可以剂量依赖性地下调U937细胞DNMT3A、DNMT3B mRNA表达,而对DNMT1mRNA的表达无影响。结论:EGCG在体外通过抑制DNMT3A、DNMT3B和(或)直接使异常高甲基化的p16启动子CpG岛DNA去甲基化,恢复p16mRNA水平和蛋白水平的表达,调控U937细胞阻滞于G0/G1期,抑制U937细胞的增长。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对哮喘小鼠呼吸道变应性炎症作用的研究

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对尘螨卵清蛋白(OVA)致敏/激发小鼠呼吸道变应性炎症的作用。方法 C57BL/6小鼠以OVA致敏/激发,在其每日供水时加入EGCG;在最后一次激发24 h后,留取标本,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中的细胞计数和分类,测定BALF、血浆中细胞因子水平以及外周血和BALF中Foxp3+CD4+T细胞的比例。结果哮喘小鼠可见明显炎性细胞浸润,经EGCG治疗后肺部炎性细胞浸润显著减少;BALF中炎性细胞,特别是嗜酸性粒细胞计数较对照组明显升高(P<0.01);白细胞介素(IL)-4、IL-5水平较对照组明显升高(P<0.01),Foxp3+T细胞比例显著下降(P<0.01),Th1细胞因子干扰素-γ(IFNγ-)无显著变化,治疗组与模型组相比细胞计数、IL-4和IL-5水平、Foxp3+T细胞比例显著增加,与对照组相比无显著差异;IL-10水平显著升高。结论 EGCG可有效抑制哮喘模型小鼠呼吸道变应性炎症,其作用途径可能是通过诱导Foxp3+T细胞的产生和IL-10的分泌,进而抑制Th2型免疫反应,这提示EGCG也许可以应用于哮喘的辅助治疗。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对寒潮诱发高血压大鼠脑卒中的作用影响

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯对寒潮诱发高血压大鼠脑卒中的作用影响.方法 健康雄性SD大鼠分为3组,将其中的寒潮诱发高血压大鼠脑卒中模型分为-模型组与药物组,每组各15只.模型组给予双蒸水灌胃,药物组给予表没食子儿茶素没食子酸酯灌胃.正常组16只不建模,给予双蒸水灌胃.治疗2周与4周后,记录3组大鼠的逃避潜伏期、神...     

表没食子儿茶素没食子酸酯对MPTP致多巴胺能神经元损伤的保护作用

目的研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)致帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用。方法32只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组：假手术组腹腔注射等量生理盐水,模型组腹腔注射4次MPTP(16 mg/kg,间隔2 h),EGCG治疗组为MPTP+EGCG(5 mg/kg)组,EGCG正常给药组不做任何处理,每日给予5 mg/kg EGCG。连续给药3周后检测行为学指标,黑质酪氨酸羟化酶(TH)免疫组化染色及高效液相色谱-电化学法测定纹状体内多巴胺及其代谢产物浓度。结果模型组5 min内的自发运动次数(71.4±14.0)下降,而EGCG治疗组自发运动次数(87.9±10.7)提高(P<0.05)。与模型组转杆停留时间(73.5±24.9) s相比,EGCG治疗组转杆停留时间(118.6±31.2) s延长(P<0.05)。形态学结果显示,EGCG治疗组黑质TH阳性神经元与模型组相比,数量明显增多。模型组纹状体内多巴胺(DA)及其代谢产物3,4-双羟苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)浓度显著降低,而EGCG治疗组DA、DOPAC和HVA浓度虽有一定程度升高,但无统计学差异。结论EGCG改善MPTP致帕金森病模型小鼠的运动能力下降,对黑质多巴胺神经元有保护作用。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对病毒性心肌炎小鼠的心肌保护作用

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对病毒性心肌炎小鼠的心肌保护作用。方法将45只雄性BALA/C小鼠随机分为正常组、对照组及EGCG组,每组15只。对照组、EGCG组小鼠腹腔注射0.1 m L CVB3病毒液。接种成功后,EGCG组予以EGCG 100 mg/(kg·d)灌胃处理,对照组予以等量的生理盐水灌胃。正常组小鼠腹腔注射等量的生理盐水。饲养1周后,摘除眼球取血检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白T(c TnT)的活性,然后处死动物取出心脏,HE染色观察心肌细胞形态学改变。结果 EGCG组小鼠的生存率显著高于对照组;对照组血清CK-MB、c Tn T的活性及心肌病理评分显著高于EGCG组。结论 EGCG对病毒性心肌炎具有一定的保护作用。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对大鼠创伤性脑水肿保护作用的研究

目的：观察表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对大鼠创伤性脑损伤继发脑水肿的抑制作用及其机制。方法选择Wistar大鼠200只,按随机数字表法分为假手术组（20只）、模型组（90只）和EGCG组（90只）,采用Feeney自由落体坠击法制备大鼠创伤性脑损伤模型;EGCG组于制模后即刻腹腔注射EGCG生理盐水溶液100 mg/kg（10 mL/kg）;模型组给予等量生理盐水;均每24 h注射1次,连用2 d。于给药后24、48、72 h测定各组大鼠脑组织含水量、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的变化,根据脑组织中伊文思蓝（EB）含量评价脑血管通透性,采用免疫组化法和蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）测定大鼠脑组织水通道蛋白-4（AQP4）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达的变化,并观察各组大鼠脑组织病理学改变。结果与假手术组比较,模型组给药后各时间点脑组织含水量、MDA水平均明显增加,SOD水平明显降低,脑血管通透性增加;模型组制模后24 h、72 h AQP4、GFAP阳性细胞表达评分（IHC评分）均明显升高;AQP4和GFAP蛋白表达水平〔积分吸光度（IA）〕明显升高,以制模后72 h变化更显著〔脑组织含水量：（89.71±0.94）%比（78.34±0.87）%, EB的含量（μg/g）：9.13±0.66比2.71±0.72,SOD（U/mg）：63.53±12.57比130.85±9.91,MDA（nmol/mg）：10.19±1.47比4.57±0.74,AQP4 IHC评分（分）：8.81±1.75比2.76±0.82,GFAP的IHC评分（分）：9.47±1.32比6.71±0.52,AQP4蛋白表达（IA值）：1.53±0.05比0.42±0.05,GFAP蛋白表达（IA值）：1.45±0.05比0.62±0.04,均P＜0.01〕。与模型组比较,EGCG组大鼠脑组织含水量、MDA水平和AQP4、GFAP的IHC评分及蛋白表达均显著下降,SOD水平显著提高,血管通透性明显下降,以制模后72 h变化更显著〔脑组织含水量：（86.59±0.89）%, EB的含量（μg/g）：7.82±0.32,SOD（U/mg）：107.58±10.87,MDA（nmol/mg）：5.61±1.64,AQP4 IHC评分（分）：6.92±0.71,GFAP的IHC评分（分）：6.71±0.52,AQP4蛋白表达（IA值）：1.14±0.06,GFAP蛋白表达（IA值）：1.21±0.07,均P＜0.01〕;免疫组化法检测EGCG组大鼠AQP4和GFAP的阳性细胞数减少,颜色变浅。结论 EGCG对大鼠创伤性脑损伤继发脑水肿的抑制作用与降低血管通透性、增加SOD水平,降低MDA水平及AQP4和GFAP的表达有关。     

环孢菌素A联合表没食子儿茶素没食子酸酯逆转白血病多药耐药的体外研究

大量实验证实环孢菌素A(CsA)能够抑制P糖蛋白(P-gp)的ATP酶活性，逆转多药耐药(MDR)效果确切，然而由于其剂量限制性毒性作用，临床应用受到制约，表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)epigallocatechin-3-gallate，EGCG]是绿茶提取物中茶多酚的主要成分之一，我们的前期研究表明，EGCG能够逆转人白血病MDR细胞系K562／A02的耐药性。     

表没食子儿茶素-3-没食子酸酯抑制骨肉瘤细胞增殖及其机制

目的：研究表没食子儿茶素-3-没食子酸酯（epigallocatechin-3 gallate,EGCG）对人骨肉瘤细胞增殖的影响及机制。方法：培养骨肉瘤细胞SOSP9607,加入EGCG制作细胞生长曲线;EGCG作用于人骨肉瘤SOSP9607细胞株,Hoechst染色检测细胞凋亡。RT-PCR及Western印迹法研究survivin的mRNA及蛋白表达的变化。结果：EGCG可明显抑制SOSP9607细胞的增殖,60μg/mL EGCG作用48h后,细胞出现明显的凋亡,凋亡率达到16.3%。同时骨肉瘤细胞中survivin mRNA和蛋白表达减少。结论：EGCG可抑制乳腺癌细胞的增殖,这可能与EGCG抑制了survivin表达有关。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对同型半胱氨酸促血管平滑肌细胞增殖的保护作用

目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)在同型半胱氨酸(Hcy)促血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖中的保护作用。方法采用不同的实验试剂培养人主动脉平滑肌细胞(HASMCs),分为对照组(control)、Hcy组(Hcy 100、200、500、1 000μmol/L)、EGCG组(EGCG 5、10、20μmol/L)、Hcy+EGCG组(Hcy 500μmol/L+EGCG 5μmol/L、Hcy 500μmol/L+EGCG 10μmol/L、Hcy 500μmol/L+EGCG 20μmol/L),在培养的24 h,采用CCK-8法、5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)标记法观察细胞增殖情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血管紧张素Ⅱ(Ang II)浓度,Western印迹法测定Ang II受体1(AT-1R)蛋白表达水平。结果干预24 h后,与对照组相比,Hcy各组细胞增殖均显著增加(P0.05),EGCG 10、20μmol/L组细胞增殖显著减少(P0.05);与Hcy 500μmol/L组相比,加入EGCG 10、20μmol/L干预后细胞增殖显著减少(P0.01),Ang II浓度及AT-1R蛋白表达水平显著降低(P0.01)。结论 EGCG可抑制Hcy诱导的VSMCs增殖。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对慢性间歇性缺氧大鼠的心肌保护作用

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对慢性间歇性缺氧大鼠心肌的保护作用。方法将24只SD大鼠随机分为4组,每组6只。分为常压常氧组和慢性间歇性缺氧组(A组生理盐灌胃,B组50 mg/kg EGCG灌胃,C组100 mg/kg EGCG灌胃)。分别在常压常氧和慢性间隙缺氧环境下饲养。8周处死动物,检测血清中过氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-PX)活性及乳酸脱氢酶(LDH)含量。结果与慢性间歇性缺氧生理盐水组相比,EGCG组能明显抑制心脏的肥厚,并能升高SOD和GSH-PX的活性,降低LDH的含量,并呈剂量依赖性。结论 EGCG对慢性间隙缺氧性缺氧大鼠心肌具有一定的保护作用,这与其抗氧化作用有关。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对人宫颈癌细胞生长抑制作用及作用途径的探讨

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人乳头瘤病毒(HPV)呈阳性表达的宫颈癌CaSki细胞与HeLa细胞的生长抑制作用及其作用途径。方法在CaSki细胞与HeLa细胞的培养液中添加EGCG后,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测两种宫颈癌细胞的生长曲线;4’,6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)荧光标记法观察细胞凋亡的形态学变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测病毒致癌基因E6(HPV E6)、雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)、芳香化酶等蛋白的表达水平。结果 MTT法显示,培养液内添加EGCG能明显抑制CaSki细胞与HeLa细胞的生长,并且呈浓度和时间依赖性;DAPI荧光标记法显示,25μmol/L EGCG作用CaSki细胞和50μmol/L EGCG作用HeLa细胞24h后均呈典型的细胞凋亡形态学改变;Western blot法显示,25μmol/L EGCG作用CaSki细胞和50μmol/L EGCG作用HeLa细胞12、24、48h后,HPVE6、ERα、芳香化酶的蛋白表达量逐渐减低,ERβ的蛋白表达量增加,与对照组相比有统计学差异(P<0.05)。结论 EGCG在体外能有效抑制人宫颈癌CaSki细胞与HeLa细胞的生长与增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与下调HPVE6、ERα、芳香化酶蛋白的表达量、上调ERβ的蛋白表达量有关。     

绿茶的主要成分表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)抗血液肿瘤血管新生机制的研究

目的 对绿茶的丰要成分表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对血液肿瘤血管新牛抑制作用进行研究,为EGCG用于白血病治疗提供依据.方法 采用MTT法,测定不同浓度的EGCG对白血病细胞株K562细胞增殖的抑制作用,并采用RT-PCR方法检测EGCG处理前后K562细胞血管内皮牛长因子(VEGF)mRNA的表达情况.结果 EGCG可明显抑制K562增殖,IC50值为118.34μM,并可以下调K562细胞VEGF mRNA的表达.结论 EGCG可下调VEGF mRNA的表达,从而减少VEGF的分泌.既可以减少VEGF的旁分泌,减弱其促进内皮细胞增生的作用;又可以减少VEGF的自分泌,削弱其通过白血病细胞细胞表而VEGF受体促进肿瘤细胞的分裂增殖、抑制肿瘤细胞的凋亡的作用.从不同途径发挥其抗血液肿瘤血管新生的作用.     

表没食子儿茶素没食子酸诱导人恶性淋巴瘤CA46细胞系p16基因去甲基化及转录

本研究旨在探讨表没食子儿茶素没食子酯酸（epigallocatechin-3-gallate．EGCG）诱导人恶性淋巴瘤CA46细胞系p16基因去甲基化及转录激活的可能机制。以生长曲线、MTT法检测EGCG对CA46细胞生长和增殖的抑制作用；利用流式细胞仪DNA含量分析法探讨EGCG对CA46细胞周期的影响；采用巢式甲基特异性PCR法（nested—methylation specific PCR，n-MSP）及DNA克隆测序分析法检测EGCG作用前后CA46细胞p16基因甲基化状态；应用RT—PCR检测p16、DNA甲基转移酶（DNMT3A、DNMT3B）基因mRNA的表达。结果表明：与对照组相比，3组不同浓度EGCG均能明显抑制CA46细胞生长，G0／G1期细胞增加；不同浓度EGCG作用48小时后p16基因甲基化程度减弱；未处理组细胞p16基因呈微弱表达，未用药组、不同浓度EGCG（6、12、24）μg／ml处理组条带灰度值与β-actinl比值分别为（0．05±0．01）、（0．19±0．03）、（O．39±0．10）、（0．85±0．09），各处理组p16基因mRNA表达明显高于未用药组，其差异有显著意义（P〈0．05）；与对照组相比，EGCG作用48小时后CA46细胞甲基转移酶DNMT3A、DNMT3B mRNA的表达均下降。结论：EGCG可能通过抑制甲基转移酶DNMT3A、DNMT3B和（或）直接对p16基因去甲基化，使p16基因mRNA表达上调，恢复其活性，从而实现其时细胞周期的调控功能，将细胞阻滞于G0／G1期，抑制CA46细胞的增殖     

绿茶的主要成分表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对血小板功能影响的研究

目的对绿茶的主要成分表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对血小板聚集、人富含血小板血浆产生TXB2、P-selectin以及血小板膜糖蛋白P-selectin表达水平的影响进行研究,探讨EGCG对血小板聚集、活化的影响,为进一步开发抗血小板药物提供依据.方法用ADP为诱导剂,采用Born氏法测定血小板聚集率;采用放射免疫测定法测定血小板聚集前后富含血小板血浆中TXB2及P-selectin含量,并以阿司匹林为对照组;采用流式细胞术测定EGCG作用前后血小板膜糖蛋白P-selectin水平变化.结果 EGCG可明显抑制血小板聚集(P<0.01),并呈剂量依赖型;EGCG明显抑制人富含血小板血浆产生TXB2(P<0.01),与阿司匹林相似(P>0.05);EGCG明显抑制人富含血小板血浆产生P-selectin(P<0.01),且作用优于阿司匹林(P<0.01);EGCG可抑制血小板膜糖蛋白P-selectin表达.结论 EGCG可明显抑制血小板聚集,明显抑制人富含血小板血浆产生TXB2、P-selectin,抑制血小板膜糖蛋白P-selectin表达,这可能是共抗血栓作用的机理所在.     

绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯对人肝癌细胞株HepG2裸鼠移植瘤新生血管生成的影响

目的通过复制人肝癌细胞株HepG2裸鼠皮下移植瘤模型,观察绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)干预对HepG2移植瘤新生血管生成的影响。方法瘤体接种复制HepG2移植瘤模型,荷瘤裸鼠20只随机分组,实验组给予EGCG溶液每日20 mg/(kg.只),腹腔注射3周,对照组给予等量灭菌注射用水3周,末次用药24 h,后处死裸鼠,剥离移植瘤。常规病理切片观察移植瘤组织结构;逆转录-聚合酶链式反应和免疫组织化学法检测移植瘤缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA及蛋白表达,并通过检测CD34表达计数瘤组织微血管密度(MVD)。结果组织病理学观察实验组移植瘤见大量坏死区,瘤体内血管数量明显少于对照组;实验组HIF-1α、VEGF mRNA及蛋白表达水平比对照组均明显下调(P<0.05),实验组MVD比对照组明显下降(P<0.05)。结论 EGCG可抑制荷瘤裸鼠HepG2移植瘤新生血管生成。     

iNOS在EGCG促A549细胞凋亡中的作用

目的观察诱导型一氧化氮合酶（iNOs）在表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）促A549细胞凋亡中的作用。方法体外培养A549细胞,随机分为对照组、EGCG组,MTT方法检测筛选EGCG最佳作用浓度,流式细胞仪检测EGCG促A549细胞凋亡作用,免疫组化染色法、蛋白质印迹定量分析法与Real time—PCR方法检测各组中iNOS蛋白和mRNA的表达情况。结果200mg／L的EGCG组细胞增殖活性与其他组比较差异有显著意义（F—1000．35,q=3．43～60．00,P〈0．05）。EGCG组晚期A549细胞凋亡率与对照组比较,差异有显著性（x2 =65．23,P〈0．05）。与对照组比较,EGCG同样可以降低A549细胞中iNOS蛋白与mRNA的表达量,差异有显著性（t=9．4、5．7,P〈0．05）。结论EGCG促A549细胞凋亡可能与下调iNOS蛋白与mRNA的表达量有关。     

EGCG对胰腺癌细胞PANC-1生长的抑制作用及机制

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人胰腺癌细胞株PANC-1生长的影响及可能作用机制。方法采用不同浓度的EGCG处理PANC-1细胞,以四唑氮蓝还原法(MTT)观察处理后细胞的生长情况;流式细胞术(FCM)检测细胞周期变化情况;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测细胞周期调节蛋白p27 mRNA表达水平的变化;Western-Blot检测p27蛋白水平的表达。结果 EGCG处理后PANC-1细胞生长明显抑制,并且呈现时间、剂量依赖性;G0/G1期的细胞比例明显增高,S期的细胞比例则明显降低;细胞周期调节蛋白p27的mRNA水平和蛋白表达水平随着EGCG浓度的增加而升高。结论 EGCG可以明显抑制胰腺癌PANC-1细胞的生长;其可能机制为上调细胞周期调节蛋白p27的表达水平,导致细胞周期阻滞在G0/G1期,抑制细胞周期从G1期向S期的转化,最终影响细胞增殖。