骨折延迟愈合患者血清TGF-β1、BMP-2、ALP及血液流变学指标研究

目的探讨骨折延迟愈合患者血转化生长因子-β1(transforming growth factor,TGF-β1)、骨形态发生蛋白-2(Bone morphogenetic protein-2,BMP-2)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)及血液流变学指标变化。方法:选取67例骨折延迟愈合患者(观察组)和67例骨折正常愈合患者(对照组)为研究对象,比较两组患者年龄、性别构成、骨折严重情况、骨折固定、感染及患者功能活动情况。检测两组患者骨折后12周血浆黏度、红细胞聚集指数、红细胞刚性指数、全血黏度及血清TGF-β1、BMP-2、ALP水平,并进行对比分析。结果 :观察组中60岁以上患者43例(64.18%),严重骨折41例(61.19%),内固定不稳9例(13.43%),感染11例(16.42%),功能活动不合理15例(19.40%),各项指标发生比例均大于对照组(P0.05)。观察组各血液流变学指标均明显高于对照组,差异具有显著性(P0.05)。观察组患者血清TGF-β1、BMP-2、ALP水平均明显低于对照组患者,差异具有显著性(P0.05)。结论:骨折延迟愈合与患者年龄、骨折严重程度、内固定、感染以及功能活动情况有关,且患者血清TGF-β1、BMP-2、ALP明显降低,血液微循环状态也较差。     

转移生长因子-β1、碱性成纤维细胞生长因子、骨形态发生蛋白-2在大鼠骨质疏松骨折愈合骨痂中的表达

目的 观察去卵巢大鼠骨折愈合早期骨痂组织学变化以及转移生长因子β1(transforming growth factor beta，TGF-β1)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)、骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic proteins-2，BMP-2)的表达与分布，探讨骨质疏松对大鼠骨折早期修复的影响与TGF—β1、bFGF、BMP-2对其起的作用。方法 雌性SD大鼠去除双侧卵巢3个月后造成股骨干骨折，并与伤后不同阶段处死，分别进行组织学以及TGF-β1、bFGF、BMP-2免疫组化染色方法观察。结果 (1)骨折后4—6周，去卵巢组形成的骨痂中含有的软骨痂比例高于假手术组。(2)骨折后2周，去卵巢组与对照组中各因子的表达均达到高峰，4—6周时回落到极低水平。(3)骨折后2周，去卵巢组中表随达TGF-β1的成骨细胞数目少于对照组。结论 (1)骨质疏松大鼠骨折早期愈合形成的骨痂质量较差。(2)BMP-2、bFGF、TGF-β1在骨折愈合过程中存在的为期4周的“释放恒定时期”导致了骨质疏松骨折愈合的进一步延缓。(3)TGF-β1在成骨细胞中的表达减少是骨质疏松和骨折愈合质量下降的可能因素之一。     

和胃接骨胶囊对家兔骨折愈合中转化生长因子-β1表达的影响

目的:观察和胃接骨胶囊对家兔骨折愈合过程中转化生长因子-β1(TGF-β1)表达变化的影响,探讨其促进骨折愈合的机制.方法:将48只家兔制成单侧桡骨中上1/3标准骨折模型,随机分为3组:实验用药组给予和胃接骨胶囊1粒;阳性对照组给予麝香接骨丹1粒;空白对照组给予安慰剂1粒;均连用14 d.分别于术后7、14和28 d行X线摄片、骨折处组织学观察,免疫组化染色观察TGF-β1的表达.结果:7、14和28 d时实验用药组与空白对照组的TGF-β1表达差异均有显著性(P均＜0.01).7 d和14d时实验用药组与阳性对照组比较TGF-β1表达差异有显著性(P＜0.01和P＜0.05),28 d时实验用药组与阳性对照组比较差异无显著性(P＞0.05).X线骨骼片和组织学观察均显示实验用药组和阳性对照组效果优于空白对照组.结论:和胃接骨胶囊能明显促进骨折愈合过程中TGF-β1的表达.     

合并脑损伤大鼠骨折愈合过程中转化生长因子β1血清含量及在骨折位点的表达

目的:观察合并脑损伤的骨折愈合过程转化生长因子β1的血清含量变化及骨折位点转化生长因子β1的表达。方法:实验于2003-10/2005-02在河北医科大学生化实验室完成。选择清洁级成年雄性SD大鼠84只,随机数字表法分为4组:正常对照组6只,脑损伤组6只,骨折组36只,脑损伤 骨折组36只。脑损伤组按Gruner改良法制作中度脑损伤模型(将400g砝码于100cm高处通过导向管坠落,撞击置于人字缝与失状缝之间的圆锥上,致中度脑损伤)。骨折组充分显露一侧胫骨后,在胫骨结节下1cm处横断胫骨,以直径1mm的克氏针作髓内固定。正常对照组不作任何处理。正常对照组于实验开始后第3天,其他3组分别于术后3d,1,2,3,4,5周采用ABC-ELISA法测定血清中转化生长因子β1含量。脑损伤组与骨折组分别于术后3d,1,2,3,4,5周取骨折标本进行免疫组织化学染色及图像分析,观察转化生长因子β1在骨折位点局部的表达。结果:纳入动物84只,均进入结果分析。①脑损伤组术后第3天血清转化生长因子β1含量高于正常对照组,为正常对照组的4倍[分别为(17.80±11.75),(4.42±2.10)μg/L,P<0.01],2周以后降至正常。骨折组术后1周血清转化生长因子β1含量高于正常对照组[分别为(11.70±4.56),(4.42±2.10)μg/L,P<0.05],第5周降至正常。脑损伤 骨折组术后第3天血清转化生长因子β1含量明显高于正常对照组,为正常对照组的7倍,术后第1周时达到8倍,术后第3天及第1周时脑损伤 骨折组血清转化生长因子β1含量高于骨折组,差异均有显著性意义[分别为(29.30±20.96),(5.93±3.34)μg/L,P<0.05;(31.73±21.57),(11.70±4.56)μg/L,P<0.01],术后2周两组比较差异无显著性意义(P>0.05)。②在图像分析中,术后3d,1,2,3,4周脑损伤 骨折组骨折位点转化生长因子β1染色的吸光度始终高于骨折组,且差异有显著性意义(分别为0.206±0.055,0.135±0.029;0.271±0.043,0.181±0.035;0.234±0.059,0.188±0.036;0.209±0.057,0.166±0.033;0.187±0.037,0.169±0.031,P<0.05)。术后第5周两组比较差异无显著性意义。结论:血浆和骨折位点中转化生长因子β1的表达在合并脑损伤骨折时增高,可能是合并脑损伤时骨折愈合加速的体液因子之一。     

低强度脉冲超声对骨折愈合过程中转化生长因子-β表达的影响

目的：观察兔骨折模型应用低强度脉冲超声治疗后骨折愈合过程中，转化生长因子-β（TGF-β）的表达变化，以进一步探讨其促进骨折愈合的机制。方法：将36只成年新西兰兔随机分成6个时间组，每组6只，均造成双侧桡骨骨折的模型，并于术后24h即开始超声治疗，左前肢为治疗侧，右前肢作为对照侧。各实验兔分别于术后第1、2、3、4、5、6周拍x线片并取双侧桡骨骨缺损处骨痂，制成切片，利用免疫组化染色及图像分析测定TGF-β表达强度。结果：X线片观察，治疗侧的愈合程度优于对照侧（P〈0.01）。组织学观察，术后4周，治疗侧骨、软骨组织内TGF-β染色达最高，且持续时间较对照侧长。结论：低强度脉冲超声通过影响骨折不同时期TGF-β的表达及含量的变化．促进骨、软骨组织的损伤修复．有效促进骨折愈合．     

血清MIP-1β、TRACP-5b和FGF-23检测对绝经后骨质疏松患者发生骨折的预测价值

目的 探讨血清巨噬细胞炎症蛋白-1β(MIP-1β)、抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)和成纤维细胞生长因子23(FGF-23)检测对绝经后骨质疏松患者发生骨折的预测价值。方法 选择2019年1月至2021年12月该院收治的绝经后骨质疏松患者121例纳入骨质疏松组,根据患者是否发生骨折分为骨折组(54例)和非骨折组(67例)。选择同期在该院诊断为骨量下降和骨量正常的绝经后女性分别纳入骨量下降组(82例)和对照组(65例)。比较各组血清MIP-1β、TRACP-5b和FGF-23水平,对骨质疏松患者发生骨折的影响因素进行单因素和多因素分析,评价血清MIP-1β、TRACP-5b和FGF-23检测对绝经后骨质疏松患者发生骨折的预测价值,以及分析血清MIP-1β、TRACP-5b和FGF-23水平与骨折严重程度的关系。结果 骨质疏松组血清MIP-1β、TRACP-5b和FGF-23水平明显高于骨量下降组和对照组(P<0.01),骨量下降组血清MIP-1β、TRACP-5b和FGF-23水平明显高于对照组(P<0.01)。骨折组的血清MIP-1β、TRACP-5b、FGF-...     

活血化瘀汤对大鼠骨折愈合中转化生长因子β1 mRNA与蛋白表达及软骨内成骨的作用

目的:观察活血化瘀汤对实验性大鼠骨折愈合过程中转化生长因子β1表达的影响。方法:实验于2005-04/12在福建中医学院骨伤研究所实验室完成。选择健康3个月龄雄性SD大鼠60只,建立闭合骨折髓内固定动物模型后随机数字表法分为活血化瘀汤组(n=30)、生理盐水组(n=30)。每组又分为骨折后3,5,7,14,21d5个时相点,每个时相点6只。在大鼠麻醉苏醒后开始灌服活血化瘀汤(由蒲黄9g,姜黄4.5g,当归9g,泽兰6g,茜草9g,三七6g,红花1.5g,莪术6g,生地9g,赤芍9g,紫苏9g,甘草3g等组成,由福建中医学院屏山制药厂协作制备)15mL/(kg·d)(按l0倍成人剂量换算),分两次,生理盐水组在相同条件下灌服等体积生理盐水,分别于骨折后3,5,7,14,21d取骨折区组织,通过反转录-聚合酶链反应,酶联免疫吸附法进行分析转化生长因子β1的表达。结果:纳入大鼠60只,均进入结果分析。①转化生长因子β1的表达在骨折后第3天有一个初期峰值;在第7天会出现一个低谷;而在骨折后第2周,转化生长因子β1的表达会再次升高,达到第2个峰值,也是最高表达期;其后的表达逐渐降低。②骨折后3,5,7,14,21d活血化瘀汤组转化生长因子β1mRNA的表达高于生理盐水组(分别为0.437±0.073,0.292±0.103;0.368±0.099,0.245±0.052;0.360±0.082,0.281±0.076;0.783±0.289,0.461±0.163;0.526±0.120,0.453±0.085,P<0.01)。③骨折后3,5,7,14,21d活血化瘀汤组转化生长因子β1蛋白的表达高于生理盐水组(分别为36.033±2.244,32.879±3.423;34.442±2.197,32.691±1.243;33.383±1.688,32.073±1.109;40.918±4.102,38.287±2.694;34.688±3.746,33.381±0.499,P<0.01)。结论:活血化瘀汤使转化生长因子β1的表达增强,促进了骨折愈合。     

IL-7拮抗TGF-β-1对成纤维细胞的刺激作用

目的 明确白细胞介素-7(IL-7)是否能够下调转化生长因子-β-1(TGF-β-1)刺激后所造成的肺成纤维细胞向肌成纤维细胞的转化,成纤维细胞的增殖以及胶原的产生,为肺纤维化的治疗提供一个新手段.方法 成纤维细胞复苏后,用浓度10 ng/ml TGF-β-1刺激,动态观察(24 h、48 h、72 h)其细胞增殖情况(MTT评估),胶原产生(羟脯氨酸消化法检测)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达(Western blotting检测).在此基础上,对每个观察时间点加以不同浓度(50 ng/ml、100 ng/ml、150 ng/ml)的IL-7干扰24 h后,再检测上述三个指标.结果 ①不同浓度(50 ng/ml、100 ng/ml、150ng/ml)的IL-7在不同时间点(24 h、48 h、72h)均对10 ng/ml TGF-β-1引起的细胞增殖有抑制作用.②50 ng/ml IL-7对10 ng/ml TGF-β-1刺激成纤维细胞后的胶原产生无明显影响.100 ng/ml IL-7对10 ng/ml TGF-β-1刺激成纤维细胞后的胶原产生有影响,有抑制胶原产生的作用.150 ng/ml IL-7对10 ng/ml TGF-β-1刺激成纤维细胞后的胶原产生有显著影响,有显著抑制胶原产生的作用.③不同浓度(50 ng/ml、100 ng/ml、150 ng/ml)的IL-7均有降低TGF-β-1刺激成纤维细胞表达α-SMA的作用,其抑制作用呈浓度依赖性.结论 体外实验证实了不同浓度(50 ng/ml、100 ng/ml、150 ng/ml)的IL-7均降低了TGF-β-1刺激成纤维细胞后的细胞增殖及α-SMA的表达(100 ng/ml、150 ng/ml)的IL-7降低了TGF-β-1刺激成纤维细胞后的胶原形成.     

淫羊藿对家兔骨折愈合过程中VEGF及TGF-β1表达的影响

目的 探讨淫羊藿对家兔骨折愈合的作用及机制。方法 手术制作成年雄性家兔双前肢桡骨中段骨折动物模型40例。术后分为两组，实验组（20例）除每日给予淫羊藿煎液口服外，其他饲养条件完全与对照组（20例）相同。分别于术后14、24、34、42天处死动物，取骨折标本作连续硬组织切片（厚5μm），作常规甲苯胺蓝染色及Masson三色染色。并作TGF-β1及VEGF免疫组化染色。结果 实验组较对照组在软骨细胞及破骨细胞形成，软骨内成骨和膜内成骨、骨痂形成及改建以及髓腔再通等方面均明显更早；TGF-β1及VEGF免疫组化染色在骨折后14天及24天实验组明显深于对照组；骨折后34天及42天，TGF—β1及VEGF免疫组化显色两组无明显差异。结论 淫羊藿通过促进家兔骨折局部VEGF及TGF-β1的表达。而促进血管的再生、间充质细胞的募集与分化、成骨细胞及软骨细胞的增殖和分化，促进破骨细胞的形成，从而促进了骨痂的形成与改建、髓腔的再通，最终促进骨折愈合。     

转化生长因子-β、碱性成纤维生长因子和血小板衍生生长因子在骨折愈合中的表达

目的:观察转化生长因子-β(TGF-β)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和血小板衍生生长因子(PDGF)在骨折愈合中的表达和分布情况,进而探讨其作用机制。方法:选用SD大鼠制作胫骨骨折愈合模型,伤后不同时期处死取材,分别进行组织学和TGF-β、bFGF和PDGF免疫组化染色观察。结果:(1)伤后3d开始形成原始骨痂。1周时肉芽组织中的间质细胞开始分化为软骨细胞,软骨形成后再进行软骨内化骨。4周时形成连接骨折端的桥接骨痂。(2)伤后早期血肿中炎性细胞表达bFGF、PDGF。伤后1周骨膜增殖细胞、肉芽组织中的成纤维细胞、内皮细胞、骨端骨细胞以及原始骨痂成骨细胞表达TGF-β、bFGF和PDGF。伤后2周软骨细胞表达TGF-β、bFGF和PDGF。结论:TGF-β、bFGF和PDGF有着各自的表达和分布特点,并共同调解骨原细胞的增殖和成骨细胞、软骨细胞的分化,最终完成骨折愈合。     

成骨细胞移植促进骨质疏松性骨折愈合过程中相关因子的动态表达

目的:探讨在幼龄成骨细胞移植促进骨质疏松性骨折愈合过程中,生长因子TGF-β1,VEGF,bFGF动态表达的生物学意义,研究幼龄成骨细胞移植对促进SD老龄鼠骨质疏松性骨折愈合的作用机制。方法将SD乳鼠颅骨体外培养的成骨细胞移植到SD鼠骨质疏松性骨折部位,用原位杂交及免疫组化检测骨折愈合不同时相的标本:bFGFVEGF,TGF-β1及bFGFmRNA,VEGFmRNA,TGF-β1mRNA的动态表达。结果:实验组:成骨细胞移植后可在受体骨折部位局部生存,生长繁殖,bFGF、bFGFmRNA及VEGF、VEGFmRNA均在7d左右可见有阳性表达的细胞,14d有分泌高峰,TGF-β1,TGF-β1mRNA在3d左右可见阳性细胞,7～10d有分泌高峰,而对照组未见明显分泌高峰。结论:成骨细胞移植到老年大鼠骨质疏松性骨折部位TGF-β1,VEGF,bFGF的动态表达对促进老年骨质疏松性骨折愈合具有重要意义。     

转化生长因子-β1对瘢痕疙瘩成纤维细胞Smad3,7mRNA表达的影响

目的探讨转化生长因子-β 1( TGF β 1)对瘢痕疙瘩成纤维细胞 (KFB)Smad3,7 mRNA表达的影响,以进一步明确 TGF β 1在瘢痕疙瘩的发生、发展过程中的重要作用.方法用 RT-PCR法分别检测 TGF β 1 不同含量( 0, 5, 50, 500 pmol/L;Smad3 mRNA 24 h, Smad7 mRNA 90 min)和 TGF β 1( 500 pmol/L)作用不同时间( Smad3 mRNA 1, 2, 4, 24, 48 h; Smad7 mRNA 0.5,1,1.5,2,4,24 h)对 Smad3,7mRNA表达的影响.结果不同含量 TGF β 1刺激 KFB后 ,随 TGF β 1含量的增加 ,Smad3 mRNA水平逐渐下降,并呈含量依赖性.与 Smad3相反, 5 pmol/L TGF β 1就能使 Smad7 mRNA水平明显升高 2.6倍( 46± 7, 对照组 13± 7, t=6.150, P=0.0005),并随 TGF β 1剂量加大而略有改变,说明 KFB的 Smad7 mRNA表达对 TGF β 1的刺激非常敏感.用 TGF β 1刺激细胞后, Smad3 mRNA水平随作用时间延长而逐渐下降,到作用 48 h后下降到最低( 53± 9,对照组 18± 8, t=6.011, P=0.0005),显示出时间依赖性;而 Smad7 mRNA在细胞受到 TGF β 1刺激后 120 min即达到对照组的 2.5倍( 73± 11,对照组 53± 9, t=5.215, P=0.003) ,24 h后回落到正常对照水平.结论 TGF β 1能使 KFB细胞 Smad3 mRNA发生配体依赖性的下调,而使 Smad7 mRNA表达迅速增加.     

PTA患者关节液中IL-1、TGF-β及TNF-α的表达及临床意义

目的 分析创伤性关节炎(PTA)患者关节液中白细胞介素-1(IL-1)、转化生长因子-β(TGF-β)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达及临床意义.方法 选取2017年8月至2020年8月本院收治的192例PTA患者作为研究对象,根据膝骨性关节炎严重性指数(index of severity for knee jo...     

骨肽注射液联合丹参酮注射液对胫骨骨折术后血清sICAM-1、VEGF、TGF-β1、ALP水平及骨折愈合的影响

目的探究骨肽注射液联合丹参酮注射液对胫骨骨折术后血清相关指标及骨折愈合的影响。方法用计算机随机数字法将86例胫骨骨折患者分为观察组和对照组各43例。两组患者均接受切开复位内固定治疗,术后予以常规治疗,在此基础上,对照组患者予以骨肽注射液治疗,观察组患者予以骨肽注射液+丹参酮注射液治疗。比较两组患者骨折愈合程度和愈合时间差异,观察治疗前后血清指标[可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、碱性磷酸酶(ALP)]、骨代谢指标[降钙素(CT)、骨钙素(BGP)、血清Ⅰ型前胶原羧基端肽(PICP)、Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列(β-CTX)]、炎症因子[白细胞介素(IL)-2、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]等变化情况。结果观察组患者骨折愈合总有效率高于对照组,愈合时间短于对照组,差异有统计学意义(P0.05);治疗4周后,两组患者血清sICAM-1、ALP、β-CTX、IL-6、IL-8、TNF-α水平均较治疗前降低,且观察组低于对照组(P0.05),血清VEGF、TGF-β1、CT、BGP、PICP、IL-2水平均较治疗前升高,且观察组高于对照组(P0.05)。结论胫骨骨折患者术后联合使用骨肽注射液和丹参酮注射液能调节血管和骨骼生长,有效促进骨折愈合,缩短康复时间,并可改善骨代谢水平,减轻炎性反应。     

血清NTX、FGF-2、IGF-1及CaM水平预测肱骨干骨折内固定术后骨不愈合的预测价值

目的 探讨血清Ⅰ型胶原氨基端末肽(NTX)、成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及钙调蛋白(CaM)水平对肱骨干骨折内固定术后骨不愈合的预测价值。方法 选取2017年1月至2020年7月该院收治的拟行内固定术治疗的114例肱骨干骨折患者作为研究对象,均于术前及术后1周、4周、8周行血清NTX、FGF-2、IGF-1及CaM水平检测。根据随访术后12个月骨愈合情况将患者分为骨愈合组与骨不愈合组,对比一般资料及血清NTX、FGF-2、IGF-1、CaM水平,采用多因素Logistic回归法分析肱骨干骨折内固定术后骨不愈合的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析上述各指标单项及联合对内固定术后骨不愈合的预测价值。结果 骨不愈合组高能量损伤占比高于骨愈合组,骨不愈合组解剖复位占比低于骨愈合组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组术后1周、4周、8周的血清各指标水平均高于术前,术后4周、8周的血清各指标水平均高于术后1周,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归性分析,结果显示高能量损伤是肱骨干骨折内固定术后骨不愈合的...     

肝细胞生长因子阻抑TGF-β1诱导大鼠韧带成纤维细胞?琢-SMA过表达及其机制

目的：研究肝细胞生长因子（HGF）能否阻抑TGF-β1诱导的大鼠内侧副韧带（MCL）成纤维细胞?琢-SMA过表达及其可能涉及的信号传导通路。方法：采用组织块培养法培养大鼠MCL成纤维细胞,培养液中加入TGF-β1(5ng/ml)及HGF (10—40 ng/ml)。培养72h后,用RT-PCR检测各组?琢-SMA mRNA及Smad3 mRNA的变化;细胞免疫组化检测?琢-SMA蛋白的表达。结果：TGF-β1能显著诱导?琢-SMA及Smad3的表达(P<0.01),而HGF则可以有效地阻抑其表达,其效应呈剂量依赖性(P<0.05)。结论：HGF可以通过下调Smad3的表达来阻抑TGF-β1诱导的?琢-SMA过表达。这为利用HGF预防和治疗MCL损伤后瘢痕及纤维化在细胞和分子水平提供了依据。     

IPL对TGF-β1介导成纤维细胞增殖的影响及ERK抑制剂作用

目的探讨强脉冲光(IPL)照射对TGF-β1介导的成纤维细胞增殖及细胞外ERK表达的影响。方法利用包皮组织(包皮环切获得)体外分离培养原代成纤维细胞。实验分为两个部分:第一部分:使用不同浓度的TGF-β1,即0ng/ml、0.01ng/ml、0.1ng/m1、1.0ng/ml、10.0ng/ml及50.0 ng/ml分别处理成纤维细胞。(2)第二部分:按照下列情况分组:TGF-β11.0ng/ml组、10.0ng/ml组、 PD98059+72J/cm2组、PD98059+TGF-β110.0ng/ml组、PD98059+72J/cm2+TGF-β110.0ng/ml组、IPL72J/cm2组、IPL 72J/cm2+TGF-β110.0ng/ml组、阴性对照组,处理细胞后采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组细胞增殖情况、采用Western Blot法测定p-ERK的变化。结果第一部分:不同浓度的TGF-β1分别处理24及48小时后,与未照射组比较, TGF-β1浓度为10.0ng/ml时,细胞增殖活性显著增高(P<0.05)。第二部分:与阴性对照组相比:IPL 72J/cm2组和72J/cm2+TGF-β110ng/ml组成纤维细胞增殖活性明显增加(P<0.01),但PD98059+TGF-β110ng/ml及PD98059+72J/cm2较对照组细胞增殖活性减少(P<0.05);各组p-ERK表达水平较对照组均有增加,但与72J/cm2组比较,加入PD98059的组其p-ERK表达均有降低。结论体外实验证实强脉冲光及TGF-β1可促进成纤维细胞增殖活性,其机制可能是通过ERK信号通路介导完成。     

青蒿琥酯对人肺成纤维细胞TGF-β1/smad通路的影响

目的:研究青蒿琥酯对人肺成纤维细胞(HFL-I)的TGF-β1/smad通路及其对细胞增殖的影响。方法:使用青蒿琥酯和重组人TGF-β1刺激因子的干预下对HFL-I在体外培养,然后Western bloting(WB)检测TGF-β1、Smad3和Smad7蛋白的表达;并使用流式细胞仪检测细胞周期。结果:青蒿琥酯可抑制TGF-β1及Smad3蛋白的表达(P<0.05),刺激Smad7的磷酸化蛋白的表达(P<0.05);对Smad3非磷酸化蛋白无影响;对青蒿琥酯处理的HELF细胞使用重组人TGF-β1刺激因子可使TGF-β1蛋白的表达升高(P<0.05),磷酸化的Smad3蛋白的表达升高(P<0.05)。HELF细胞经过青蒿琥酯处理后细胞主要停滞于G1期,经过重组人TGF-β1刺激因子处理的细胞主要分布于S期。结论:青蒿琥酯可以通过TGF-β1/smad通路对HFL-I有抑制的作用,抑制的细胞停滞在细胞周期的G1期。     

核心蛋白多糖对TGF-β1促Tenon囊成纤维细胞增殖的影响

目的:研究转化生长因子β1(TGF-β1)促进Tenon囊成纤维细胞的增殖作用及核心蛋白多糖(decorin)对TGF-β1促Tenon囊成纤维细胞增殖的影响。方法:(1)取青光眼患者的Tenon囊组织,采用组织块贴壁培养法进行原代培养细胞培养,细胞经过冷冻与复苏后,观察细胞形态结构与生物学特性。(2)用不同浓度(0.01、0.1、1、5、10ng/mL)TGF-β1作用于Tenon囊成纤维细胞48h。(3)终浓度为5ng/mL的TGF-β1和不同浓度(0.01、0.1、1、2、5μg/mL)的decorin共同作用于Tenon囊成纤维细胞48h。MTT比色法检测Tenon囊成纤维细胞增殖。结果:(1)体外成功培养Tenon囊成纤维细胞,细胞生长活跃,形状稳定,细胞经过冷冻与复苏后,仍能保持其原来的细胞形态结构与稳定的生物学特性。(2)1～10ng/mLTGF-β1能促进Tenon囊成纤维细胞的增殖,并与浓度成正比。(3)2～5μg/mLdecorin能抑制TGF-β1促Tenon囊成纤维细胞增殖作用,其抑制作用与浓度成正比。结论:TGF-β1可刺激Tenon囊成纤维细胞增殖,Decorin能抑制TGF-β1促进细胞增殖的作用,其机理可能通过与TGF-β1结合抑制青光眼滤过手术后瘢痕形成。     

合并脑损伤大鼠骨折愈合过程中转化生长因子β1血清含量及在骨折位点的表达

目的：观察合并脑损伤的骨折愈合过程转化生长因子β1的血清含量变化及骨折位点转化生长因子β1的表达。 方法：实验于2003-10／2005—02在河北医科大学生化实验室完成。选择清洁级成年雄性SD大鼠84只，随机数字表法分为4组：正常对照组6只，脑损伤组6只，骨折组36只，脑损伤＋骨折组36只。脑损伤组按Gruner改良法制作中度脑损伤模型（将400g砝码于100cm高处通过导向管坠落，撞击置于人字缝与失状缝之间的圆锥上，致中度脑损伤）。骨折组充分显露一侧胫骨后，在胫骨结节下1cm处横断胫骨，以直径1mm的克氏针作髓内固定。正常对照组不作任何处理。正常对照组于实验开始后第3天，其他3组分别于术后3d，1，2，3，4，5周采用ABC—ELISA法测定血清中转化生长因子β1含量。脑损伤组与骨折组分别于术后3d，1，2，3，4，5周取骨折标本进行免疫组织化学染色及图像分析，观察转化生长因子β1在骨折位点局部的表达。 结果：纳入动物84只，均进入结果分析。①脑损伤组术后第3天血清转化生长因子β1含量高于正常对照组，为正常对照组的4倍[分别为（17．80&;#177;11．75），（4．42&;#177;2．10）μg／L，P〈0．011，2周以后降至正常。骨折组术后1周血清转化生长因子β1含量高于正常对照组[分别为（11．70&;#177;4．56），（4．42&;#177;2．10）μg／L，P〈0．05]，第5周降至正常。脑损伤＋骨折组术后第3天血清转化生长因子β1含量明显高于正常对照组，为正常对照组的7倍，术后第1周时达到8倍，术后第3天及第1周时脑损伤＋骨折组血清转化生长因子β1含量高于骨折组，差异均有显著性意义[分别为（29．30&;#177;20．96），（5．93&;#177;3．34）μg／L，P〈0．05；（31．73&;#177;21．57），（11．70&;#177;4．56）μg／L，P〈0．01]，术后2周两组比较差异无显著性意义（P〉0．05）。②在图像分析中，术后3d，1，2，3，4周脑损伤＋骨折组骨折位点转化生长因子β1染色的吸光度始终高于骨折组，且差异有显著性意义（分别为0．206&;#177;0．055，0．135&;#177;0．029；0．271&;#177;0．043，0．181&;#177;0．035；0．234&;#177;0．059，0．188&;#177;0．036；0．209&;#177;0．057，0．166&;#177;0．033；0．187&;#177;0．037，0．169&;#177;0．031，P〈0．05）。术后第5周两组比较差异无显著性意义。 结论：血浆和骨折位点中转化生长因子β1的表达在合并脑损伤骨折时增高，可能是合并脑损伤时骨折愈合加速的体液因子之一。