白花丹参根制剂对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究白花丹参根制剂对体外培养的人胃癌细胞BGC823增殖和凋亡的影响.方法:用不同浓度白花丹参根制剂处理胃癌细胞BGC823后,噻唑蓝(MTT)检测细胞的相对存活率,流式细胞仪Annexin V/PI双染法检测BGC823细胞凋亡,激光扫描共聚焦显微镜检测细胞形态.对结果进行统计分析,均数比较用t检验.结果:不同浓度白花丹参根制剂作用于BGC823细胞后,细胞的存活率明显下降且呈剂量依赖性(0.4 g/L:91.7%±10.6%;0.8g/L:66.8%±5.1%;1 g/L:57.5%±9.6%;1.5g/L:32.6%±7.3%;2 g/L:29.4%±9.4%).镜下可见凋亡细胞典型形态,流式细胞术分析表明经过白花丹参根制剂处理后早期凋亡细胞数和晚期凋亡细胞数与对照组相比均显著增加(2.950%±1.575% vs 4.105%±2.393%,P＜0.05;3.848%±2.264% vs 21.465%±6.474%,P＜0.05).结论:白花丹参根制剂能有效地抑制胃癌细胞增生和诱导细胞凋亡.     

依达拉奉对局灶性脑缺血再灌注大鼠大脑皮层细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

目的探讨依达拉奉对局灶性脑缺血再灌注大鼠大脑皮层细胞凋亡及相关蛋白表达的影响。方法 Wistar大鼠随机分为:假手术组、缺血再灌注模型组(模型组)、依达拉奉治疗组(依达拉奉组)。采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,观察不同组大鼠的神经功能症状评分。分别于缺血后2 h进行再灌注。依达拉奉组于缺血再灌注后1 h及1.5 h在腹腔内注射依达拉奉注射液(按照3 mg/kg)2次,在缺血再灌注后6、12、48 h处死大鼠。TUNEL法原位检测凋亡细胞,免疫组化法检测脑组织Caspase-3表达的阳性细胞数。结果模型组在再灌注48 h梗死体积最大,12 h凋亡细胞数最多。缺血再灌注后6 h在大脑额叶和海马即可见到Caspase-3蛋白表达的阳性细胞,12 h组最高。依达拉奉组各时间点脑梗死体积、Caspase-3表达水平较模型组明显降低(P<0.01)。结论依达拉奉对缺血再灌注大鼠皮层脑细胞具有保护作用,其机制可能与抑制Caspase-3表达,从而抑制皮层细胞凋亡有关。     

雷公藤多甙对局灶性脑缺血再灌注大鼠细胞凋亡的影响

雷公藤多甙(TWP)为中药雷公藤的主要成分,具有免疫抑制作用,有报道其能减少神经元迟发性损伤,降低脑梗死体积,对脑缺血有改善作用。本实验观察TWP对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤神经功能缺损程度及细胞凋亡的影响。1材料与方法选择健康Wistar大鼠60只,体重250~300 g,雌雄不拘,由河南省实验动物中心提供。TWP由上海医科大学红旗制药厂提供;尼莫地平(Nim)由山东新华制药股份有限公司出品;细胞凋亡检测试剂盒购自华美生物制品公司;其余试剂为市售,纯度为AR。将大鼠随机分为6组:(1)假手术组,(2)缺血再灌注模型(IR)组,(3)Nim组(10 mg/kg),(…     

加味孔圣枕中丹对局灶性脑缺血模型大鼠神经细胞凋亡的影响

目的研究加味孔圣枕中丹对局灶性脑缺血模型大鼠神经细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2、P53表达的影响。方法线栓法建立局灶性脑缺血大鼠模型,随机分为模型组、银杏叶组及加味孔圣枕中丹组,另设假手术组(n=10)。灌胃给药,连续14 d。观察大鼠神经功能症状评分,荧光TUNEL法检测神经细胞凋亡,免疫组织化学法测定Bcl-2、P53表达。结果与模型组比较,加味孔圣枕中丹能显著降低局灶性脑缺血大鼠Zea Longa和网屏实验评分,降低神经细胞凋亡率和P53蛋白表达,增强Bcl-2蛋白表达(P均0.05)。结论加味孔圣枕中丹能改善脑缺血引起的神经功能损伤,其机制可能与调控凋亡相关蛋白表达、抑制脑缺血引起的神经细胞凋亡相关。     

阻断缝隙连接通讯对局灶性脑缺血后海马迟发性神经元死亡及脑梗死体积的影响

目的:探讨阻断缝隙连接通讯对大鼠局灶性脑缺血后海马迟发性神经元死亡及脑梗死体积的影响.方法:大鼠左侧脑室注射缝隙连接阻断剂甘珀酸,对照组左侧脑室注射生理盐水,2h后颈内动脉插线法制备大脑中动脉缺血再灌注模型,采用DNA原位末端标记TUNEL技术及红四氮唑(TTC)染色,观察阻断缝隙连接通讯对大鼠局灶性脑缺血3d后海马迟发性神经元死亡及脑梗死体积的影响.结果:不给予缝隙连接阻断剂,大脑中动脉缺血模型大鼠有45%在术后3 d出现海马迟发性神经元死亡;用甘珀酸阻断缝隙连接后30%的大鼠出现海马迟发性神经元死亡,几率明显减小(P＜0.01);与对照组相比,干预组的脑梗死体积明显减少(P＜0.01).结论:阻断缝隙连接通讯,局灶性脑缺血后海马迟发性神经元死亡的发生率降低,脑梗死体积减小.     

脑缺血再灌注后热休克蛋白70的表达及与细胞凋亡关系的实验研究

目的　研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后热休克蛋白70(Hsp70)的表达及与细胞凋亡的关系。方法　用线栓法制备MCAO模型,用免疫组化法测定Hsp70阳性细胞及用TUNEL法测定凋亡细胞。结果　缺血2h即有Hsp70阳性细胞,6～24h明显,3d消失。TUNEL阳性细胞于再灌注后2h出现,24～48h达高峰,72h减弱。结论　脑缺血再灌注后早期即有Hsp70表达及细胞凋亡发生。     

局灶性脑梗死治疗时间窗的影响因素

局灶性脑梗死的治疗时间窗并非是固定的、统一的,而是一个个体化的、动态的过程。其影响因素众多,主要包括侧支循环、血压、卒中类型、年龄和并发症等。在治疗中,把具体患者的治疗时窗个体化,针对缺血病理生理各个环节综合治疗将给脑梗死患者带来更大的益处。     

川芎嗪抑制大鼠局灶性脑缺血损伤神经元凋亡的作用

目的 研究川芎嗪抑制大鼠局灶性脑缺血损伤神经凋亡作用的机制.方法 采用线栓法制作大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血模型,通过TUNEL染色及免疫组化染色动态观察川芎嗪对脑缺血再灌注大鼠神经元凋亡及bcl-2、p53蛋白表达的影响.结果 再灌注各时间点,与缺血再灌注组相比,川芎嗪治疗组凋亡细胞数明显减少(P<0.01),而 bcl-2 蛋白阳性细胞数明显增多(P<0.05).结论 川芎嗪能抑制脑缺血再灌注损伤神经元凋亡,其机制可能与上调bcl-2蛋白表达有关.     

三七治疗局灶性缺血性脑梗死模型小鼠的疗效及机制

目的观察三七对脑梗死模型小鼠的影响,探讨作用机制。方法将50只SD小鼠随机分成正常组、模型组、三七高剂量组、三七低剂量组和西药组。通过线栓法构建小鼠脑梗死模型。成模后,治疗组开始三七溶液灌胃给药12 w。N组和CT组给予等体积的生理盐水溶液。给药结束后观察空腹血糖、肝、肾脏器系数、血清中白细胞介素(IL)-18、肿瘤坏死因子(TNF)-α以及脑组织中超氧化酶歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)等相关指标的含量,并通过实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测Bcl-2、Bax mRNA水平。结果三七高剂量组及西药组空腹血糖比模型组有显著下降,而且三七治疗组及西药组均可升高Bcl-2的表达、下调Bax mRNA的表达(P<0.05,P<0.01)。结论三七可能通过升高Bcl-2的表达、下调Bax mRNA的表达,从而减轻局灶性缺血性小鼠脑梗死。     

局灶性脑梗死治疗时间窗的影响因素

局灶性脑梗死的治疗时间窗并非是固定的，统一的，而是一个个体化的，动态的过程，其影响因素众多，主要包括侧支循环，血压，卒中类型，年龄和并发症等。在治疗中，把具体患者的治疗时窗个体化，针对缺血病理生理各个环节综合治疗将人脑梗死患者带来更大的益处。     

miR-130b通过调控p53抑制局灶性脑缺血大鼠神经细胞凋亡

目的探讨miR-130b通过调控p53抑制局灶性脑缺血大鼠神经细胞凋亡。方法建立局灶性脑缺血大鼠模型,分为局灶性脑缺血组、miR-130b模拟物(mimics)组、miR-130b抑制剂组,测定脑梗死灶内缘距上矢状线距离、脑梗死体积、TUNEL阳性细胞数、神经细胞凋亡率、神经细胞凋G1期、miR-130b、p53 mRNA表达水平、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)3、caspase6、caspase9蛋白表达水平。结果miR-130b mimics组脑梗死灶内缘距上矢状线距离、G1期、miR-130b mRNA表达水平显著高于局灶性脑缺血组(P<0.05),脑梗死体积、TUNEL阳性细胞数、神经细胞凋亡率、p53 mRNA、caspase3、caspase6、caspase9蛋白表达水平显著低于局灶性脑缺血组(P<0.05);miR-130b抑制剂组脑梗死灶内缘距上矢状线距离、G1期、miR-130b mRNA表达水平显著低于局灶性脑缺血组及miR-130b mimics组(P<0.05),脑梗死体积、TUNEL阳性细胞数、神经细胞凋亡率、p53 mRNA表达水平、caspase3、caspase6、caspase9蛋白表达水平显著高于局灶性脑缺血组及miR-130b mimics组(P<0.05)。miRNA-130b与p53、caspase3、caspase6、caspase9呈显著负相关(P<0.05)。结论miR-130b能明显降低大鼠局灶性脑缺血损伤程度,降低神经细胞凋亡程度;其机制与miR-130b能抑制P53的表达进而抑制局灶性脑缺血大鼠神经细胞凋亡,抑制caspase3、caspase6、caspase9的表达有关。     

大鼠局灶性脑缺血再灌流半暗带神经细胞坏死与凋亡的动态 …

目的 探讨脑缺血半暗带转归过程中神经细胞的死亡机制。方法 采用大量大脑中动脉闭塞及再通模型,ＭＣＡ闭塞时间分别为３０,６０,９０,１２０和１８０分钟,再灌注４８小时,用ＨＥ染色和ＴＵＮＥＬ原位标记法分别对缺血半暗带和缺血中心区细胞坏死和凋亡的动态变化进行定量观察,并计算两种死亡细胞在缺血中心区和半暗带所占的百分比。     

白花丹对大鼠肝星状细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的: 观察白花丹含药血清对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖、凋亡细胞周期的影响,探讨白花丹抗肝纤维化的作用及其机制.方法: SD大鼠用白花丹水煎液灌胃(大、中、小剂量),取得含药血清.含药血清按不同浓度(50、100、200 mL/L)分组与大鼠HSC-T6孵育.设立空白对照组,并以秋水仙碱和复方鳖甲软肝片含药血清为阳性对照组.孵育后各组采用MTT比色法检测各组HSC-T6的增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡及各细胞周期DNA含量的百分比.结果: HSC-T6白花丹含药血清各组与空白组比较,增殖抑制率和细胞凋亡率明显增高,有显著性差异( P＜0.01);并且含药血清浓度增高时,HSC-T6的抑制率、凋亡率也逐渐增强;血清高浓度组的增殖抑制率和细胞凋亡率明显高于秋水仙碱组( P＜0.01),与复方鳖甲软肝片组相当;各组的G2/M期细胞百分比无明显变化.HSC-T6白花丹含药血清各组与空白组比较,G0/G1期的细胞百分比明显增高(55.23%±2.83%,52.60%±2.26%,48.75%±1.37%vs 44.08%±1.41%,均P＜0.01)、S期细胞百分比明显降低(31.47%±1.26%,34.14%±1.17%,40.28%±1.62% vs 47.36%±1.35%,均P＜0.01).并且含药血清浓度下降时,G0/G1期的细胞百分比逐渐下降,S期细胞百分比逐渐增高.同一血清浓度下,与秋水仙碱组比较,白花丹组的G0/G1期细胞百分比明显较高( P＜0.01),S期细胞百分比明显较低;而与复方鳖甲软肝片组无显著性差异.结论: 白花丹含药血清可以抑制HSC-T6增殖,诱导其凋亡,且作用具有剂量依赖性.白花丹含药血清抑制HSC-T6增殖的机制可能是使HSC-T6细胞周期停滞于G0/G1期,阻止其通过G1/S关卡.     

脑缺血再灌注后热休克蛋白70的表达与细胞凋亡关系的实验研究

目的 研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后热休克蛋白70（Hsp70)的表达及与细胞凋亡的关系。方法 用线栓法制备MCAO模型,用免疫组化法测定Hsp70阳性细胞及用TUNEL法测定凋亡细胞。结果 缺血2h即有Hsp70阳性细胞,6－24h明显,3d消失。TUNEL阳性细胞于再灌注后2h出现,24－48h达高峰,72h减弱。结论 脑缺血再灌注后早期即有Hsp70表达衣细胞凋亡发生。     

局灶性脑缺血小鼠皮层HSP60、HSP70表达的时序性变化

目的探讨热休克蛋白(HSP)60、HSP70在局灶性脑缺血小鼠脑缺血后不同时间点(1 h、2 h、3 h)皮层缺血核心区和半影区的蛋白表达变化。方法健康雄性BALB/c小鼠,建立脑中动脉阻塞缺血模型(MCAO),利用蛋白印迹技术分析HSP60、HSP70蛋白表达量在脑缺血1、2、3 h的时序性变化。结果与假手术组比较,MCAO小鼠脑皮层HSP60、HSP70的蛋白表达量明显升高(P<0.05),HSP60随缺血时间延长呈持续升高趋势,HSP70在缺血后1 h增加,2 h达高峰,3 h降低。结论 HSP60、HSP70是神经细胞损伤和耐受的敏感标志,局灶性脑缺血能引起HSP60、HSP70表达的时序性变化,为认识局灶性脑缺血损伤提供理论依据。     

小牛血清去蛋白注射液对局灶性脑缺血大鼠脑血管储备能力的影响

目的探讨小牛血清去蛋白注射液对局灶性脑缺血大鼠脑血管储备能力的影响。方法将大鼠随机分为治疗组、缺血组和假手术组,治疗组于造模前3 d腹腔注射小牛血清去蛋白注射液2 m l/kg,1次/d,末次给药时间为术前5 h。缺血组和治疗组分别于造模成功后3、6、24、48、72 h处死,行血管内皮生长因子（VEGF）的免疫组化检测。结果治疗组于缺血3 h后开始出现阳性反应,与假手术组和缺血组比较,治疗组各时间点脑组织VEGF表达明显增多（P〈0.05）。结论小牛血清去蛋白注射液能够提高局灶性脑缺血大鼠脑血管储备能力,对缺血性脑损伤有保护作用。     

化瘀克塞胶囊预处理对局灶性脑缺血大鼠神经功能的影响及机制探讨

目的观察化瘀克塞胶囊预处理对局灶性脑缺血大鼠神经功能的影响,并探讨其可能的机制。方法将40只Wistar大鼠随机分为A、B、C、D组,造模前7d开始灌胃。C、D组给予化瘀克塞胶囊12．2、24．4g／kg,2次／d;A、B组则给予等体积的生理盐水。B、C、D组采用线栓法制备大脑中动脉缺血模型,A组只显露大脑中动脉但不栓塞。持续性缺血6h后,行大鼠行神经功能缺损评分,检测血浆中的内皮素（ET）、一氧化氮（NO）。结果A、B、C、D组神经功能缺损评分分别为0、（3．07±0．73）、（1．96±0．64）、（1．22±0．67）分,血浆NO水平分别为（58．03±5．09）、（36．98±9．66）、（47．52±7．88）、（51．87±7．34）μmol／L,血浆ET水平分别为（215．75±23．34）、（326．28±35．5）、（244．85±17．55）、（227．15±23．69）pg／ml;各组间两两比较,P均〈0．05。结论化瘀克塞胶囊可通过提高局灶性脑缺血大鼠血浆NO水平、减少血浆ET的释放,促进神经功能能恢复。     

栓塞性局灶性脑缺血模型的制作及评价

简要介绍线栓法、血凝块栓塞法和聚乙烯硅氧烷栓塞法等栓塞性局灶性脑缺血模型的制作方法 ,并对各种方法制作的模型进行了评价。     

头孢曲松钠对局灶性脑缺血大鼠脑组织Fas和NF-κB表达的影响

目的探讨头孢曲松钠对局灶性脑缺血大鼠脑组织Fas和NF-κB蛋白表达的影响。方法选用健康雄性Sprague-Dawley大鼠24只,体质量(280～320)g,随机分为假手术组、单纯脑缺血组和头孢曲松钠预处理组,头孢曲松钠预处理组于术前7 d腹腔注射头孢曲松钠,200 mg·kg-1·d-1。采用线栓法制备大脑中动脉阻塞(MCAO)的局灶性脑缺血大鼠模型,缺血后24 h后处死大鼠,应用免疫组化法检测大鼠脑组织Fas和NF-κB蛋白的表达。结果与假手术组比较,单纯脑缺血组大鼠脑组织的Fas和NF-κB p65免疫组化阳性细胞数显著增多(P<0.05);与单纯脑缺血组比较,头孢曲松钠预处理组大鼠脑组织的Fas和NF-κB p65免疫组化阳性细胞数明显减少(P<0.05)。结论头孢曲松钠具有抑制局灶性脑缺血大鼠脑组织Fas和NF-κB蛋白表达的作用。     

白花丹醌对人肝星状细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

目的:研究白花丹醌对瘦素(Leptin)刺激体外培养人肝星状细胞株HSC-LX2凋亡及相关蛋白表达的影响,以探讨其抗肝纤维化作用的机制.方法:体外培养HSC-LX2,将其分为以下几组:空白对照组、Leptin对照组、秋水仙碱组、2、8、16μmol/L白花丹醌组.瘦素刺激24h,药物与细胞共孵育24h后,应用流式细胞仪Annexin/PI双染方法检测细胞凋亡,透射电镜观察HSC-LX2凋亡形态学变化,免疫组织化学法检测HSC-LX2凋亡基因p53、Bax、Bcl-2的蛋白表达.结果:细胞流式术结果显示,白花丹醌作用HSC-LX224h,HSC凋亡率明显增加,白花丹醌8、16μmol/L组和秋水仙碱组HSC凋亡率均显著高于空白对照组和Leptin对照组(5.21±0.41,8.10±0.63,10.1±1.08vs1.40±0.13,2.85±0.21,均P<0.01).透射电镜结果,空白对照组细胞形态清晰,细胞膜、核膜完整,胞质内细胞器清晰,染色质均匀,细胞表面微绒毛;药物组可见少量坏死细胞和许多不同程度的凋亡细胞,体积变小,核膜消失,胞质浓缩,胞质内出现大量空泡,细胞核染色质固缩,可见核碎裂,细胞表面微绒毛...