姜属植物Zingiber aromaticum中的倍半萜与黄酮醇苷及其对CYP3A4和CYP2D6的抑制活性

姜属植物Z.aromaticum Vahl是印度尼西亚广泛使用的传统药用植物之一。作者发现该植物乙酸乙酯部位对CYP3A4介导的代谢具强抑制活性。对该提取物进一步分离,得到3个新的倍半萜(1～3)和2个新的黄酮醇苷(4和5),以及13个已知化合物。     

黄芩苷对Chang Liver细胞CYP3A4、CYP2C9和CYP2C19表达的影响

目的 在Chang Liver细胞中观察黄芩苷处理对CYP3A4、CYP2C9和CYP2C19表达的影响.方法 在Chang Liver细胞中分别加入DMSO 0.1% (v/v) (溶剂对照) 和不同浓度的黄芩苷 (0.01、0.1和1 μM) 24、36和48h后,用半定量RT-PCR的方法分别检测CYP3A4、CYP2C9和CYP2C19表达量的改变.结果 用不同浓度黄芩苷分别处理Chang Liver细胞24和36 h,CYP3A4、CYP2C9和CYP2C19的表达均呈现出增强的趋势;但是黄芩苷处理48 h后各浓度对CYP3A4和CYP2C9的表达产生显著的抑制效应 (P<0.01) . 结论黄芩苷对细胞中CYP3A4、CYP2C9和CYP2C19的表达具有影响作用,这种影响作用随药物处理时间不同而表现出双向效应.     

荜澄茄中具CYP3A4强抑制作用的成分

作者从产于印尼的荜澄茄Piper cubeba L．水提取物的乙酸乙酯溶部位中分离出2个新的木脂素、2个新的倍半萜内酯及16个已知化合物，研究了它们对CYP3A4的抑制作用。     

CYP2C19和CYP2C9基因型与苯妥英血药浓度关系的研究

目的　探讨细胞色素氧化酶P4 5 0 2C19(CYP2C19)和CYP2C9基因型对癫痫患者苯妥英血药浓度的影响。方法　对 32例癫痫患者应用变性高效液相技术分析中国人常见的 2个CYP2C19和 1个CYP2C9等位基因变异 ,应用荧光偏振免疫法测定患者苯妥英的血药浓度 ,在进行标准化以排除剂量和体重对血药浓度的影响后 ,分析CYP2C19和CYP2C9基因型和苯妥英血药浓度的关系。结果　服用单一苯妥英药物的 32例患者中 ,CYP2C19 2、CYP2C19 3和CYP2C9 3等位基因频率分别为 31%、8%和 6 %。根据携带CYP2C19和CYP2C9突变等位基因的数量 ,将患者分为基因型为CYP2C19 1/ 1合并CYP2C9 1/ 1的野生型纯合子强代谢者 (EM) ,基因型为CYP2C19 1/ 2或CYP2C19 1/ 3的杂合中间代谢者 (IM) ,基因型为CYP2C19 2 / 2或CYP2C19 2 / 3或CYP2C19 1/ 2合并CYP2C9 1/ 3的突变型纯合子弱代谢者 (PM)。 3组频率分别为 34%、4 4 %、和 2 2 %。并且突变基因携带数量与标准化血药浓度呈正相关。PM患者服用同等剂量苯妥英时血药浓度比EM患者高 34% (P <0 0 1)。结论　苯妥英代谢受CYP2C9和CYP2C19基因调控。根据患者CYP2C19和CYP2C9基因型可以预测患者的药物浓度 ,有利于临床选择适宜的苯妥英初始剂量     

CYP3A4内含子10对CYP3A4基因表达的增强子作用

目的 探讨CYP3A4内含子10及其内SNP CYP3A4*1G对CYP3A4基因表达的调控作用.方法构建CYP3A4启动子启动转录的CYP3A4真核表达质粒, 将CYP3A4内含子10 (CYP3A4*1G野生型/突变型) 正向或反向插入该质粒的启动子上游, 从而构建出不同基因型、不同方向的CYP3A4内含子10调控的CYP3A4真核表达质粒.将构建好的各质粒分别转染入Hep G2细胞, 应用实时荧光定量PCR方法检测CYP3A4 m RNA表达水平.结果 构建的重组质粒经酶切验证与测序鉴定, 插入片段的序列和方向与预期完全一致.无论CYP3A4*1G野生型还是突变型, 反向组CYP3A4 m RNA表达水平均高于正向组 (P<0.01) ;而CYP3A4内含子10无论是正向还是反向, CYP3A4*1G野生型组CYP3A4 m RNA表达水平均高于突变型组 (P<0.01) .此外, 正向突变组CYP3A4 m RNA表达水平低于阳性对照组, 不但没有增强CYP3A4启动子的转录作用反而有所减弱.结论CYP3A4内含子10有类似于增强子的功能, 能够影响CYP3A4启动子对CYP3A4基因的转录, 且具有方向性和CYP3A4*1G等位基因依赖性.     

CYP3A4和CYP286药物诱导剂体外筛选体系的建立

目的构建CYP酶药物诱导剂的体外筛选技术平台。方法利用双荧光素酶报告基因系统，将包含hPXR蛋白识别和结合调控元件的CYP3A4和286启动子序列插入报告基因上游，将表达载体和报告载体共转染HepG2细胞，用含有利福平或DMSO培养基培养48h后裂解进行双荧光素酶活性检测。结果经利福平处理的细胞裂解物荧光素酶比活性值与阴性对照组和溶剂组差异显著。结论本研究构建的CYP3A4和286体外筛选平台，可以有效地用于体外诱导剂的筛选。     

CYP4F2和CYP24A1基因多态性与肺结核并糖尿病的相关性

目的：探讨CYP4F2和CYP24A1基因单核苷酸多态性(SNP)与肺结核并糖尿病的关系。方法：选取230例肺结核并糖尿病患者作为肺结核并糖尿病(Case)组,同期212例体检健康者作为对照(Control)组。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测CYP4F2和CYP24A基因多态性,采用Logistic回归分析两组间各SNP位点等位基因频率和基因型频率的分布差异,并按不同遗传模型对rs1 570 669位点基因型分布进行分析。结果：CYP4F2 rs2 108 622和rs3 093 106位点、CYP24A1 rs2 296 241位点的基因型和等位基因频率在Case组和Control组中无均统计学差异。CYP24A1 rs2 762 934位点AG基因型频率Case组高于Control组,GG和AA基因型频率Case组低于Control组,组间差异具有统计学意义。rs2 762 934位点A等位基因的频率Case组高于Control组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：CYP4F2 rs2 108 622和rs3 093 106位点、CYP24A1 rs2...     

普鲁泊福对原代培养人肝细胞CYP3A4同工酶的影响

目的：观察不同浓度普鲁泊福对原代培养肝细胞中CYP3SA4同工酶活性及蛋白表达的影响，并进一步探讨其临床药理学意义。方法：取肝血管瘤患者的瘤旁正常肝组织标本，胶原酶消化制备原代培养肝细胞，不同浓度普鲁泊福孵育24h后，Nash法测定CYP3A4同工酶比活性，Western印迹法测定CYP3A4蛋白表达，结果：临床剂量（0．01mmol/L)的普鲁泊福即可抑制CYP3A4同工酶的活性，且酶的活性与普鲁泊福的浓度呈负相关，临床剂量的普鲁泊福对该同工酶蛋白的表达并无显著影响，直至浓度为0．5mmol/L时才轻度抑制CYP3A4蛋白表达，结论：麻醉药普鲁泊福对CYP3A4产生明显的抑制作用，可能是一种潜在的P450抑制剂，会导致CYP3A4底物的生物转化速率的下降，其作用主要在表达后水平。     

CYP3 A4和CYP2 D6基因多态性对阿片类药物术后镇痛效应影响的研究进展

阿片类药物作为术后镇痛常用药物,其缓解术后疼痛的效果呈现较大的个体差异。国内外多个研究发现,基因多态性是影响阿片类药物术后镇痛效果的重要因素之一。研究表明,细胞色素P450(CYP)是体内参与药物生物转化的主要酶系,其家族中CYP3A4和CYP2D6基因对多种镇痛药的代谢均有关键性作用,CYP3A4和CYP2D6基因多态性通过影响阿片类镇痛药物的代谢速率和活性药物的血药浓度而影响其镇痛效果甚至毒性不良反应作用,因此,本文就CYP3A4和CYP2D6基因多态性对常用镇痛药物的药代动力学和药物效应动力学影响进行总结和介绍,为进一步探索基因多态性对术后镇痛用药的指导意义提供一定的研究方向。     

注射用盐酸头孢他美对大鼠肝微粒体CYP1A2、CYP3A4和CYP2E1活性的影响

目的 研究注射用盐酸头孢他美对大鼠肝微粒体细胞色素P450(CYP450)酶系CYP1A2、CYP3A4和CYP2E1活性的影响。方法 将SD大鼠分成盐酸头孢他美给药组和生理盐水空白组,每组6只,雌雄各半,给药组尾静脉注射盐酸头孢他美50 mg/(kg·d),连续给药7 d,每天2次。HPLC法同时测定CYP450的3种同工酶特异性探针底物在SD大鼠肝微粒体内代谢产物生成量和原型探针底物降解量,判断酶亚型活性变化。分析柱Diamonsil C₁₈ (150 mm×4.6 mm,5 μm),流速1.0 mL/min。CYP1A2代谢样品测定条件为甲醇(0.1%甲酸)(A)-水(0.1%甲酸)(B),0~5 min: 18%A,5~10 min: 18%~60%A,10~15 min: 60%A,检测波长为247 nm;CYP3A4代谢样品测定条件为甲醇(A)-水(0.02%甲酸)(B),0~11 min: 40%~60%A,检测波长为223 nm;CYP2E1代谢样品测定条件为甲醇(A)-水(B),0~10 min: 37%~75%A,检测波长为287 nm。结果 探针底物及其代谢产物在测定浓度范围内线性关系良好(r≥0.999 7),精密度RSD<6％(n=5),提取回收率83.2%～97.5%。SD大鼠连续注射给予盐酸头孢他美后,CYP3A4的活性与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),可能存在诱导作用;CYP1A2和CYP2E1的活性与对照组比较差异无统计学意义 (P>0.05)。结论 静注给予盐酸头孢他美能诱导SD大鼠肝微粒体CYP3A4,对CYP1A2和CYP2E1没有诱导或抑制作用。提示经CYP3A4 代谢的药物在临床上与注射用盐酸头孢他美合用时,可能存在潜在药物-药物相互作用。     

药物代谢酶CYP3A在中国肾移植人群的遗传多态性

目的：建立药物代谢酶CYP3A4、CYP3A5的多个等位基因分型方法，为进一步从基因水平研究CYP3A与机体对药物反应的个体差异本质及其与药物代谢的相关性提供分子生物学实验方法；探讨药物代谢酶CYP3A在中国肾移植人群的遗传多态性。方法：用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性(PCR—RFLP)法及特异性等位基因扩增(PCR—ASA)法分别建立了CYP3A的CYP3A4亚型三个新突变点(CYP3A4*4、*5、*6)及CYP3A5亚型的CYP3A5*3基因分型方法，并对中国肾移植人群进行基因分型。结果：CYP3A4*4、*5、*6、CYP3A5*3在中国肾移植人群的基因频率分别为0．75％、0．76％、0．75％和27．83％；个体突变率分别为2／133、3／197、3／200和55／115。结论：研究结果提示，中国肾移植人群中CYP3A4*4、*5、*6、CYP3A5*3的存在可能使其表达的药物代谢酶活性改变，从而影响药物在体内的代谢过程。     

CYP4A11基因单核苷酸多态性与高血压的相关性研究

目的:研究CYP4A11基因单核苷酸多态性与高血压的相关性。方法:收集304例日本高血压患者(高血压组)和207例年龄匹配、血压正常的日本人(对照组),选择CYP4A11基因的3个单核苷酸多态性(SNPs,rs2269231,rs9333025,rs1126742),应用TaqMan SNP基因分型的方法进行基因分型,分析并比较不同性别高血压组和对照组3个SNPs基因型频率和等位基因频率的分布,并应用Logistic回归分析方法分析高血压主要危险因素对结果的影响,分析CYP4A11基因与高血压的相关性。结果:全体,高血压组和对照组rs1126742的基因型分布差异有统计学意义(P=0.005);对于全体、男性、女性,高血压组和对照组的rs1126742的隐性模型分布(CCversus CT TT)存在差异(P分别为0.007、0.043、0.045);Logistic回归分析显示,对于全体和男性,rs1126742的CT TT基因型更常见于高血压患者(P分别为0.015、0.048)。结论:CYP4A11基因的rs1126742可作为日本男性高血压标志,其CT TT基因型与日本男性高血压有关。     

美丽山竹子树皮和茎中具抗HIV-1活性的原萜烷型三萜与二香叶基二苯酮

美丽山竹子(拟)Garcinia speciosa广泛分布于印度、缅甸和泰国。作者从具抗HIV-1活性的该植物树皮甲醇粗提物的乙酸乙酯部位分得3个新的原萜烷型三萜garciosater-pene A(1).B(2),C(3)和1个新的二香叶基二苯酮garciosaphenone A (4)以及4个已知化合物，并对它们进行了抗HIV-1试验。     

CYP4F2基因多态性与云南汉族人群冠心病的相关性研究

目的:研究CYP4F2基因多态性与中国云南汉族人群冠心病(CHD)的相关性.方法:采用Sequenom MassARRAY 对云南汉族人群198名正常人(对照组)和514例CHD病人(CHD组)CYP4F2基因rs2108622、rs3093135两个单核苷酸多肽位点的多态性进行基因分型,分析该基因多态性与CHD的相关性.结果:对照组和CHD组两个等位基因频率分布差异有统计学意义(P<0.01);校正年龄、性别、体质量指数等因素后logistic回归分析显示rs2108622位点携带T等位基因者患CHD的风险降低(P<0.05);rs3093135位点携带A等位基因者患CHD风险降低(P<0.05).结论:CYP4F2基因多态性与云南汉族人群CHD发生风险相关.     

贲门癌组织CYP1A1和CYP2E1基因多态变化

目的：对河南贲门癌高发区林州市贲门癌组织代谢酶基因CYP1Al与CYP2E1的多态性进行检测，更深入了解该地区贲门癌变易感性分子机制。方法：利用“病例—对照”设计，采用PCR—RFLP和PCR—SSCP方法对19例贲门腺癌和72例正常对照组织中代谢酶基因CYP1Al、CYP2N的多态型进行检测。结果：贲门腺癌与正常对照组织中，CYP2E1在5’侧翼区域的RsaI基因多态(c2)分别占26％和36％，c2基因变体能够降低个体对贲门癌的易感性(0R＝0．51)；CYP2E1的DC和CC基因型合并在一起分别为32％和48％，C基因变体也能够降低个体对贲门癌的易感性(0R＝0．50)；CYP1Al的TC和CC合并在一起分别占53％和67％，C等位基因并未影响个体对贲门癌的易感性(0R＝0．80)；2种组织中均未在CYNAl基因第7内含子内检测出IIe／Val基因多态。结论：CYP1Al基因多态对贲门癌易感性无明显影响，而CYP2E1的基因多态改变与其门癌易感性有关。     

CYPⅡE1基因多态性与药物性肝损害

目的 :研究细胞色素P4 5 0ⅡE1 (CYPⅡE1 )基因多态性与药物性肝损害发生发展的关系。方法 :从 4 3例药物性肝病患者及 5 0例正常人 (对照组 )外周血单个核细胞抽提基因组DNA ,采用PCR RFLP方法对CYPⅡE1基因分型。结果 :CYPⅡE1可分为A型 (c1纯合子 )、B型 (c1 /c2杂合子 )和C型 (c2纯合子 )。 5 0例正常人中c1基因频率 93% ,c2基因频率 7% ;4 3例药物性肝损害患者中c1基因频率 5 2 .3% ,c2基因频率 4 7.7% ,两组间差异显著 (P <0 .0 1 )。结论 :药物毒性反应的个体差异可能与CYPⅡE1等位基因的突变有关。     

隐丹参酮对细胞色素P450酶CYP3A4和CYP2C9的影响

目的 研究丹参中脂溶性成分隐丹参酮对Chang肝脏细胞细胞色素P450酶（CYP450）CYP3A4、CYP2C9表达的影响,明确丹参主要成分对CYP450酶的作用,以阐明基于CYP450酶隐丹参酮与其他药物间相互作用的分子基础,为临床合理使用含隐丹参酮的丹参制剂提供依据。方法 采用CCK-8法考察隐丹参酮对Chang肝脏细胞活力的影响,以确定药物的给药剂量范围;通过Western bloting法考察隐丹参酮在给药后1、3和7 d对Chang肝脏细胞中CYP3A4和CYP2C9蛋白表达的影响;通过定量RT-PCR法考察隐丹参酮对Chang肝脏细胞中CYP3A4和CYP2C9 mRNA表达的影响。结果 给药1 d,隐丹参酮对CYP3A4蛋白及mRNA表达无显著影响。但随时间延长,给药3 d和7 d,隐丹参酮可抑制CYP3A4蛋白及mRNA的表达（P <0.05）。给药1、3和7 d,隐丹参酮对CYP2C9蛋白及mRNA的表达均无显著影响。结论 连续给予隐丹参酮可抑制CYP3A4 mRNA和蛋白的表达。提示临床在连续使用含隐丹参酮时,需要关注其与CYP3A4底物药物之间可能的相互作用。     

中国汉族人群CYP2D6、CYP3A4 SNP位点基因多态性分析

目的：通过对药物代谢酶CYP2D6和CYP3A4的相关单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）筛选检测,获得其在中国汉族人群中遗传多态性分布的相关数据。方法：筛选11个关于CYP2D6、CYP3A4基因的SNP位点,取192份中国汉族无关个体健康自愿者的血液样本获得基因组DNA,根据单碱基延伸技术通过 GenomeLabTM SNPstreamR 基因分型系统进行SNP分型。结果：本次检测的11个SNP位点在研究人群中全部具有多态性（最小等位基因频率>0.01）,其中7个SNP（RS28624811、RS28670611、RS9623531、RS5758589、RS3735451、RS2246709、RS2404955、RS4646440）位点的等位基因频率在此人群与白种人相比差异具有统计学意义（P<0.01）。结论：汉族人群可能有继承特定的遗传信息,导致与其他人群具有不同药物代谢率。     

银杏叶及其化学成分对CYP3A4和CYP2C9影响的研究进展

银杏叶是临床上使用广泛的中草药之一,主要化学成分包括黄酮类和萜类内酯两大类。近年来,国内外大量的研究表明银杏叶及其化学成分能够影响细胞色素P450酶的表达,并通过细胞色素P450酶影响其他药物的代谢。现从银杏叶及其化学成分对CYP3A4和CYP2C9的影响,及其通过CYP3A4、CYP2C9影响其他药物代谢等方面进行综述。     

合成冰片对大鼠肝CYP450酶含量及CYP3A1 mRNA表达的影响

[目的]研究冰片对大鼠肝脏细胞色素氧化酶(cytochromeP450,CYP450)含量及其亚型CYP3A1m RNA表达的影响。[方法]istar大鼠合成冰片(设0.3gk/g和0.03gk/g剂量组,1次d/,连续7d)灌胃,以溶媒羧甲基纤维素纳(CM C-Na)和苯巴比妥钠为对照组,钙沉积法提取肝微粒体,紫外分光光度法测定CYP450含量,实时定量RT-PCR法检测肝脏CYP3A1m RNA的表达。[结果]0.3gk/g合成冰片口服可诱导大鼠肝脏CYP450酶含量增高(P<0.05),CYP3A1m RNA表达上调(P<0.05)。[结论]高剂量合成冰片口服可能影响肝脏药物代谢。