益生菌对炎性肠病小鼠肠屏障功能的影响

目的 研究益生菌植物乳杆菌(LP)对炎症状态下肠屏障的修复机理.方法 以白介素-10基因敲除(IL-10-/-)小鼠为炎性肠病模型,采用简单随机法(随机表)将空白对照(WT)小鼠和IL-10-/-小鼠分成4组:WT组、WT+ LP组、IL-10-/-组和IL-10-/-+ LP组,每组10只.分别灌饲Ringer液或LP溶液,持续4周.每周记录小鼠肠炎的临床表现,实验结束后收集小鼠结肠组织,进行病理评分和形态观察,ELISA法检测结肠组织促炎细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ)浓度,利用Ussing Chamber技术对小鼠结肠通透性及电生理变化进行分析,并用Western blot和免疫荧光分析法对结肠上皮细胞紧密连接蛋白进行定量和定位研究.结果 与WT组相比,IL-10-/-组小鼠腹泻、直肠脱垂和体重丧失较明显(P＜0.01);TNF-α和IFN-γ浓度明显升高(P＜0.01);病理表现为大量炎性细胞浸润,偶见透壁性溃疡和隐窝脓肿形成;超微电镜提示紧密连接结构破坏;紧密连接蛋白( ZO-1、occludin、claudin-1)表达明显降低(P＜0.01)且伴有异常分布;结肠上皮细胞甘露醇通透性升高(P＜0.001),跨膜电阻值降低(P＜0.001).LP干预4周后,与IL-10-/-组相比,LP能显著改善肠道炎症的临床和病理表现,阻止紧密连接超微结构破坏,促进紧密连接蛋白的表达(P＜0.01),降低结肠上皮细胞甘露醇通透性(P＜0.001),升高跨膜电阻值(P＜0.001),降低了TNF-α和IFN-γ的浓度(P＜0.01),减轻了肠道炎症.结论 LP能通过促进肠上皮细胞间紧密连接蛋白的表达修复受损肠屏障功能,从而减轻肠道炎症.     

血吸虫病门脉高压小鼠肠系膜血管病变与肠源性内毒素血症的关系

目的 探讨血吸虫病门脉高压小鼠肠系膜血管病变，及其与肠源性内毒素血症之间的相互关系。方法 将40只健康小鼠随机分成正常对照组（N组）20只与模型组（M组）20只，M组采用腹部敷贴法制作血吸虫病模型，造模150d后处死动物，鲎试验法测定血清内毒素水平；3色染色和超微电镜观察肠系膜静脉血管形态学改变；逆转录聚合酶链反应和Western blot方法检测肠系膜静脉血管中TLR-4、MD-2的表达。结果M组血清内毒素水平高于N组（P〈0．01）；形态学上M组肠系膜静脉血管出现明显的构型改变；M组小鼠肠系膜静脉血管TLR-4／MD-2表达水平高于N组（P〈0．01）。结论 血吸虫病门脉高压时可发生明显的肠系膜血管病变；肠源性内毒素易位、TLR-4／MD-2信号通路的激活是导致肠系膜血管病变产生的原因之一。     

肠外肠内营养对腹腔感染大鼠肠上皮紧密连接和屏障功能的影响

目的　探讨肠外肠内营养对腹腔感染大鼠肠上皮紧密连接和屏障功能的影响。方法　14只存活6d的腹腔感染SD大鼠分别给予肠外营养(PN组)、肠外营养 肠内营养(PN EN组)。两组动物供给等热、等氮量。第6天处死动物,取末段回肠和结肠采用免疫组化法测定其跨膜结合蛋白(occludin)表达及肠上皮浆细胞IgA表达并定量;取腔静脉血及肺、肝、肠系膜淋巴组织匀浆后作细菌培养测细菌易位率;取门静脉血经鲎试剂法检测内毒素含量。结果　PN EN组小肠和大肠occludin及IgA表达明显优于PN组(P <0 .0 5及P <0 .0 1) ;血、肺、肝、肠系膜淋巴组织的细菌易位率和内毒素水平均低于PN组(P <0 .0 5 )。结论　肠内营养提高了肠上皮occludin表达,增加了肠道IgA的分泌,改善机械及免疫屏障,从而减少细菌易位。     

乳果糖对门静脉高压鼠肠道屏障功能的影响

目的:研究乳果糖对门静脉高压大鼠肠上皮细胞紧密连接蛋白的表达、细菌易位及内毒素血症的影响。方法:用50只雄性SD大鼠建立CCl4橄榄油复合法门静脉高压模型,并行影像学检验。造模后大鼠随机分为治疗组、对照组和单纯模型组。治疗组即乳果糖组,灌服乳果糖每次5mL/kg,每日2次,直至大鼠排稀便(共7d);对照组仅灌服相同浓度的葡萄糖水。8d后处死大鼠,取血、肝、脾、肾和肠系膜淋巴结组织匀浆后作细菌培养,测细菌易位率;取小肠组织行HE、Masson染色和超微病理的观察研究;测定血内毒素;用免疫组织化学方法测定小肠紧密连接蛋白表达水平。结果:与对照组及模型组比较,治疗组细菌易位发生率明显降低(P0.05),其肝功能得到显著改善(P0.01),血清内毒素水平(0.18±0.09)EU/mL亦有明显降低(P0.01),紧密连接蛋白表达亦有显著差异(P0.01)。结论:乳果糖灌胃可增加门静脉高压大鼠肠上皮细胞紧密连接蛋白的表达,维持肠上皮紧密连接,减少肠道细菌易位,减轻内毒素血症,并在一定程度上改善肝功能。为临床门静脉高压病人的治疗提供新的思路和理论基础。     

麝香配伍乳香对大鼠前列腺上皮细胞紧密连接结构相关蛋白表达的影响

目的:探讨麝香-乳香配伍处理对正常及慢性前列腺炎模型大鼠前列腺上皮细胞紧密连接结构相关蛋白表达的影响。方法:80只雄性SD大鼠随机分为8组:正常空白对照组、正常麝香-乳香组、正常麝香组、正常乳香组、模型空白组、模型麝香-乳香组、模型麝香组、模型乳香组。制备慢性前列腺炎大鼠模型,造模60 d时根据组别分别给予麝香0.021 g/(kg·d)、乳香1.05 g/(kg·d)剂量灌胃,麝香-乳香组给予联合剂量,空白组给予生理盐水灌胃。各组别连续灌胃3 d,处死大鼠,取前列腺组织,固定后以免疫组化法检测大鼠前列腺上皮屏障紧密连接功能相关蛋白紧密连接蛋白1、紧密连接蛋白3、闭锁蛋白、胞质附着蛋白1(ZO-1)的表达情况。结果:在病理状态下,仅紧密连接蛋白1的表达增高有统计学意义。麝香、乳香处理后,在生理/病理状态下对4种蛋白的调节作用不同:生理状态下,单用麝香(824.6±393.3)、乳香(982.0±334.0)或配伍处理(1 088.1±640.2)均可大幅度增高紧密连接蛋白1的表达(P0.05,P0.01);对于紧密连接蛋白3,单用乳香表达上调(1 009.5±243.6,P0.05),单用麝香(597.5±80.7)差异无统计学意义,配伍麝香(678.4±255.1)可降低乳香上调表达作用;单用麝香(693.0±424.8)、乳香(732.1±302.0)或配伍处理(560.2±202.3)对闭锁蛋白表达影响差异无统计学意义;单用麝香(290.0±166.8)、乳香(419.7±108.1)对ZO-1表达影响差异无统计学意义,配伍处理后表达明显下调(197.7±98.2,P0.05)。慢性前列腺炎病理状态下,大鼠前列腺组织紧密连接蛋白1(823.0±100.1)、闭锁蛋白(1 160.0±32.2)表达显著增高(P0.01,P0.05);单用麝香(764.9±179.0)、乳香(468.4±220.4)或配伍(335.1±204.0)使用可下调紧密连接蛋白1表达(P0.05);单用麝香(700.1±223.7)或乳香(744.6±94.5)可上调紧密连接蛋白3表达(P0.05);单用麝香(749.6±321.7)、乳香(615.0±221.0)或配伍处理(505.8±523.7)均可下调闭锁蛋白表达;单用乳香可上调ZO-1表达(443.2±144.9),与麝香配伍处理后表达下调(213.5±24.9),与单用乳香组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:麝香、乳香对生理/病理状态下前列腺上皮屏障结构紧密连接相关蛋白的调节作用具有选择性和双向性,主要通过ZO-1蛋白的下调实现促通透性作用,而通过调节紧密连接蛋白1、紧密连接蛋白3、闭锁蛋白表达以维持结构稳定性。     

吗啡预处理对小鼠海马脑片氧糖缺失/复氧复糖时PKCε膜转位的影响

目的 探讨吗啡预处理对小鼠海马脑片氧糖缺失/复氧复糖(OGD/R)时蛋白激酶Cε(PKCε)膜转位的影响.方法 成年近交系BALB/C小鼠40只,体重18～22 g,雌雄不拘,制备海马脑片,将脑片置入无糖无氧的人工脑脊液中,培养20 min后再置于正常人工脑脊液(nACSF)中培养(复氧复糖)2h,以建立小鼠海马脑片OGD/R模型.脑片随机分为5组(n=40),对照组(C组):在nACSF中培养4 h;吗啡预处理组(M组):在含吗啡3μmol/L的nACSF中孵育30 min后用nACSF洗脱,随后制备OGD/R模型;纳洛酮+吗啡预处理组(N+M组):在含纳洛酮50 μmol/L的nACSF中孵育30 min后,加入吗啡至3 μmol/L,孵育30 min,随后制备OGD/R模型;纳洛酮组(N组):在含纳洛酮50μmol/L的nACSF中孵育1h,随后制备OGD/R模型;OGD/R组:制备OGD/R模型.于脑片OGD/R期间测定PKCε膜转位情况和神经元存活情况.结果 与C组比较,其余各组神经元存活率降低,膜相关蛋白中PKCε表达上调,胞溶蛋白中PKCε表达下调(P＜0.05或0.01);与OGD/R组比较,M组神经元存活率升高,膜相关蛋白中PKCε表达下调,胞溶蛋白中PKCε表达上调(P＜0.05),N+M组和N组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05);与M组比较,N+M组神经元存活率降低,膜相关蛋白中PKCε表达上调,胞溶蛋白中PKCε表达下调(P＜0.05).结论 吗啡预处理诱导小鼠海马脑片缺血耐受的机制可能与抑制PKCε膜转位有关.     

大鼠血-前列腺屏障中occludin蛋白的表达数量与Ⅲ型前列腺炎的相关性研究

目的:检测Ⅲ型前列腺炎大鼠血-前列腺屏障中紧密连接蛋白(occludin蛋白)的表达数量,探讨其表达数量与Ⅲ型前列腺炎的相关性。方法:将30只雄性3月龄SD大鼠随机分成三组(n=10):对照组(A组),假手术组(B组),Ⅲ型前列腺炎模型组(C组)。A组正常饲养不做特殊处理,B组在大鼠前列腺内注入20μl生理盐水,C组在大鼠前列腺内注入20μl完全弗氏佐剂。7天后处死大鼠,取前列腺组织。用免疫组织化学法测定三组大鼠前列腺组织中occludin蛋白的表达量。结果:A组与B组大鼠前列腺腺管上皮中occludin蛋白的表达数量均高于C组(P0.05),但A、B两组间差异无统计学意义(P0.05)。结论:血-前列腺屏障中occludin蛋白的表达数量与Ⅲ型前列腺炎的发生具有相关性;Ⅲ型前列腺炎中血-前列腺屏障中occludin蛋白的表达数量降低。     

c-Src激酶对脂多糖致炎过程中occludin蛋白表达的影响

目的 探讨在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)处理小鼠肺泡上皮细胞(mouse lung epithelial-12,MLE-12)过程中,c-Src激酶对occhdin蛋白表达的影响. 方法 将培养的MLE-12细胞按随机数字表法分3组(每组3孔细胞):对照组(C组)、LPS实验组(L组)、LPS+c-Src激酶抑制剂PP2组(L+P组).C组不做任何处理;L组用LPS(浓度为10 mg/L)处理,处理时间为1、3、6 h;L+P组用PP2(浓度为100 μmol/L)预处理60 min,然后LPS(浓度为10 mg/L)处理6h.Western blot法和免疫荧光染色法分别检测各组不同时间点occludin蛋白的表达. 结果 Western blot发现,与C组比较:L组中6h时点occludin蛋白表达下调明显、c-Src表达明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);与L组6h比较,L+P组occludin蛋白表达上调(P＜0.05).免疫荧光染色显示,occludin蛋白主要表达于细胞膜上,LPS影响occludin蛋白在膜上分布,PP2可以减轻LPS的影响. 结论 LPS导致MLE-12细胞紧密连接蛋白occludin表达下调,c-Src激酶参与其调节.     

肿瘤坏死因子-α对急性肝衰竭小鼠肠黏膜通透性的影响及微生态制剂的保护作用

目的 研究急性肝衰竭小鼠生化指标及肠黏膜通透性改变,并探讨双歧杆菌乳杆菌三联活菌对肠黏膜通透性影响的机制及其对肝脏的保护作用.方法 采用数字表法将30只健康清洁级6～8周龄雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、急性肝衰竭(ALF)组和微生态制剂双歧杆菌乳杆菌三联活菌干预组(干预组),每组各10只.干预组予双歧杆菌乳杆菌三联活菌(900 mg·kg-1·d-1)灌胃,对照组及ALF组予等量等渗盐水灌胃(9 mL·kg-1 ·d-1).2周后ALF组和干预组腹腔注射D-氨基半乳糖(3.0 g/kg),建立肝衰竭模型.注射后9h处死小鼠,留取血清、血浆观察生化指标.采用实时荧光定量PCR检测肝组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA和回肠组织紧密连接蛋白(ZO)-1 mRNA的表达,采用免疫印迹检测回肠组织中ZO-1蛋白的表达.采用单因素方差分析或Kraskal-Wallis秩和检验比较各组间生化指标、TNF-α mRNA、ZO-1 mRNA以及ZO-1蛋白表达的差异,并采用Pearson检验分析ZO-1蛋白与血清TNF-α和血浆内毒素之间的相关性.结果 ALF组小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、TNF-α及血浆内毒素水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);干预组上述指标均较ALF组明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01).ALF组小鼠肝组织TNF-α mRNA表达明显高于对照组,差异有统计学意义(Z =4.038,P＜0.01);干预组表达量较ALF组明显下降,差异有统计学意义(Z =3.780,P＜0.01).ALF组小鼠回肠ZO-1mRNA/蛋白表达均明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);干预组表达量较ALF组明显增加,差异有统计学意义(P＜0.01).各组小鼠回肠ZO-1蛋白与血清TNF-α和血浆内毒素水平均呈负相关(r=-0.946和-0.919,P＜0.01).结论 TNF-α可能是导致肠黏膜通透性升高的原因之一.双歧杆菌乳杆菌三联活菌既能通过减轻内毒素对肝脏的损害而发挥保肝作用,又能上调回肠ZO-1蛋白的表达以改善肠黏膜通透性.     

HMGB1对急性坏死性胰腺炎大鼠肠上皮细胞紧密连接相关蛋白表达的影响

目的：观察急性坏死性胰腺炎（ANP）大鼠肠黏膜中高迁移率族蛋白B1（HMG81）的表达对肠黏膜上皮细胞紧密连接功能的影响。方法：24只Wistar大鼠随机分为正常对9帚组、ANP组和丙酮酸乙酯（EP）处理组,分别于建模后24h取材。测定血浆淀粉酶（AMY）、血浆D-乳酸、肠黏膜髓过氧化物酶（MPO）水平变化;应用Westernblot法检测ANP大鼠肠黏膜中HMGBl和occludin蛋白水平的变化。结果：在建模后24h,大鼠AMY、D-乳酸与肠黏膜MPO水平ANP组明显高于正常对照组和EP处理组（P〈0．05）,但EP处理组仍高于正常对照组（P〈0．05）;ANP组大鼠肠黏膜HMGBl表达水平明显高于正常对照组和EP处理组（P〈005）,EP处理组高于正常对照组（P〈0．05）;而肠黏膜上皮细胞紧密连接蛋白occludin的表达ANP组较正常对照组和EP处理组下降（P〈0．05）,EP处理组低于正常对照组（P〈0．05）。结论：ANP大鼠肠黏膜中HMGBl表达增高,可通过降低occludin蛋白表达,增加肠黏膜屏障通透性。EP能显著抑制HMGBl表达,使occludin蛋白表达升高,对ANP肠黏膜损伤有明显保护作用。     

缺氧条件下环磷酸腺苷对肠黏膜屏障功能的调控研究

目的探讨缺氧条件下环磷酸腺苷（cAMP）水平的变化对肠黏膜屏障功能的影响。方法采用人结肠癌Caco．2细胞建立肠上皮细胞缺氧模型,分为常氧组、常氧加Forskolin组、缺氧8h组和缺氧8h加SQ22536（腺苷酸环化酶抑制剂）组。采用cAMP检测试剂盒,检测实验各组cAMP水平的变化;RT-PCR及Westernblot方法分别检测各组肠上皮紧密连接蛋白claudin-1和occludin的mRNA和蛋白表达水平的变化：Millipore电阻抗系统法检测各组肠上皮细胞跨上皮电阻（TER）的变化情况。结果缺氧8h组肠上皮cAMP含量较常氧组明显升高[（6．30±0．50）pmol／L比（2．38±0．18）pmol／L,P〈0．01],而claudin．1和occludin的mRNA及蛋白表达水平均明显降低（均P〈0．05）,TER值下降了6．30±0．64（P〈0．01）。与缺氧8h组相比,缺氧8h加SQ22536组肠上皮cAMP含量明显降低[（2．12±0．23）pmol／L比（6．30±0．50）pmol／L,P〈0．01],claudin-1和occludinmRNA及蛋白表达水平明显升高（P〈0．01）,TER值升高了32．96±2．16（均P〈0．05）。结论缺氧条件下cAMP水平升高,而下调cAMP水平可增加肠道紧密连接蛋白claudin-1及occludinmRNA及蛋白水平的表达,从而减轻缺氧对肠上皮屏障的损伤。     

内毒素性肺损伤外周血中性粒细胞CD11b表达的意义

目的：探讨内毒素血症大鼠外周血中性粒细胞（PMN）表面CD11b表达与内毒素性肺损伤的关系。方法：大肠杆菌E-Coli O111B4 4mg／kg尾静脉注射制备大鼠内毒素血症动物模型。112只大鼠随机分为对照组（静脉注射等量生理盐水）及内毒素注射后1h组、2h组、4h组、8h组、12h组、24h组,每组16只动物。在相应时间点放血处死动物,分别取股静脉血、肺组织及进行支气管肺泡灌洗,测定肺组织湿／干重（W／D）比值、肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性和支气管肺泡灌洗液（BALF）总蛋白定量等肺损伤指标。流式细胞仪测定外周血PMN表面CD11b表达。另取16只大鼠,内毒素注射后2h时测定外周血PMN表面CD11b表达,24h时放血处死,测定上述指标。结果：①大鼠内毒素血症可以造成明显的急性肺损伤,表现为肺组织W／D比值、MPO活性和BALF总蛋白明显增高,分别在2h、8h和2h显著高于对照组（P〈0．05或P〈0．01）,峰值分别出现在内毒素注射后12h、24h和12h;②大鼠内毒素性肺损伤时,外周血PMN表面CD11b表达水平在早期（1h）明显升高（与对照组比较,P〈O．05）,在2h达到峰值,之后逐渐降低;③外周血CD11b表达峰值明显早于肺组织W／D比、MPO和BALF总蛋白等肺损伤指标的峰值出现时间;④同一动物2h时外周血PMN表面CD11b的表达水平与其24h时肺组织W／D比、MPO和BALF总蛋白含量呈显著正相关（r分别为0．78、0．77和0．73,P〈0．05）。结论：内毒素性肺损伤中,外周血CD11b表达升高可能有助于内毒素性肺损伤的早期诊断,并可能预示以后的肺损伤程度。     

法安明对糖尿病大鼠血清及肾组织中P-selectin的作用

目的：探讨P-selectin在糖尿病肾病发病中的作用以及低分子肝素法安明对肾脏保护作用的机制。方法：用链脲佐菌素（STZ60mg/kg体重）构建糖尿病大鼠模型后随机分为糖尿病组（DN组）和法安明治疗组（T组）,并设正常对照组（N组）。于应用法安明前、后第4、8、12周分别测定3组大鼠的体重、24h尿蛋白总量、24h尿白蛋白、Scr,12周测血脂、凝血功能;应用ELISA方法检测各组大鼠血P-selectin水平,用免疫组化方法检测肾组织P-selectin,用real-time PCR法测P-selectin mRNA表达;并观察各组大鼠肾脏组织病理学改变。结果：与N组比较,DN组大鼠肾重/体重指数以及24h尿白蛋白、蛋白定量、Scr均显著上升（P〈0.05）;肾组织P-selectin mRNA和蛋白表达增强（P〈0.01或P〈0.05）。与DN组比较,T组大鼠、肾重/体重指数下降（P〈0.05）、24h尿白蛋白、24h尿蛋白量和Scr均显著下降（P〈0.01）;P-selectin mRNA表达水平显著下降（P〈0.01）。结论：P-selectin可能参与了DN的发病过程,法安明可能通过影响P-selectin的表达从而对肾脏有保护作用。     

FGFR3在大鼠肝硬化模型中的动态表达研究

目的：观察大鼠肝硬化形成过程中成纤维细胞生长因子受体3（Fibroblast growth factor receptor3,FGFR3）的表达变化。方法：70只雄性SD大鼠,随机取10只作为对照组,其余60只作为肝硬化组。采用剂量频次渐变式四氯化碳（CCL）腹腔内注射建立肝硬化大鼠模型。检测2组大鼠的血清ALT、体重、肝体比,病理组织行包括HE和嗜银染色．并采用荧光定量聚合酶链反应（real—timePCR）和蛋白质印迹（Western blot）检测FGFR3基因和相应蛋白在肝硬化形成过程中的表达变化。结果：肝硬化组大鼠的血清ALT、肝体比和死亡率均显著高于对照组（P均〈0．01）;而体重则显著低于对照组（P〈0．01）;肝硬化组大鼠肝组织大体观察、HE染色及嗜银染色均呈明显肝硬化表现,而对照组则无该表现：real-timePCR及Western-blot结果显示,FGFR3在肝硬化形成过程中总体表达逐渐增强。结论：剂量频次渐变式GEl4腹腔内注射法是一种高效、低成本的大鼠肝硬化建模方法。而肝组织FGFR3在肝硬化发生、发展过程中的动态表达在一定程度上反映了肝纤维化及肝硬化程度。     

黄芩对大鼠肝硬化内毒素血症肠黏膜损伤的保护性机制研究

目的：探讨黄芩对大鼠肝硬化内毒素血症肠黏膜损伤的保护性机制。方法复合因素造模法建立肝硬化内毒素血症大鼠模型。模型确立后将大鼠随机分为3个实验组,即模型组、黄芩组治疗组和谷氨酰胺治疗组,每组各20只;另设正常对照组大鼠10只。各组大鼠给予灌胃治疗,共2周。实验结束后,采用ELISA法检测大鼠血清内毒素水平,TUNEL法检测各组大鼠肠黏膜细胞凋亡并计算凋亡率,采用RT-PCR检测肠黏膜细胞凋亡相关基因Bcl-2 RNA和Bax RNA的表达水平。结果3个实验组较正常对照组大鼠内毒素组水平均显著升高（F =3.31,P ＜0.05）;其中模型组显著高于黄芩治疗组（q =5.12,P =0.0000）;黄芩治疗组显著低于谷氨酰胺组（q =3.74,P =0.0123）。3个实验组与正常对照组比较,肠黏膜细胞的凋亡率均显著升高（F =4.77,P ＜0.01）;其中模型组显著高于黄芩治疗组和谷氨酰胺组（q =4.56、4.35,P均＜0.01）;黄芩治疗组显著低于谷氨酰胺组（q =3.78,P =0.012）。3个实验组与正常对照组比较,肠黏膜组织Bcl-2 mRNA水平显著下降（F =3.55, P ＜0.05）;其中模型组显著低于黄芩治疗组和谷氨酰胺治疗组（q =3.89、3.40,P ＜0.05）;黄芩治疗组显著高于谷氨酰胺组（q =2.77,P ＜0.05）。3个实验组大鼠肠黏膜Bax mRNA水平则显著高于正常对照组（F =3.67,P ＜0.05）;模型组显著高于黄芩治疗组和谷氨酰胺治疗组（q =3.62、2.91,P ＜0.05）;黄芩治疗组显著低于谷氨酰胺组（q =2.85,P ＜0.05）。结论黄芩能够通过降低肠黏膜细胞的凋亡而减少肝硬化内毒素血症的发生。     

温阳活血方对慢性马兜铃酸肾病大鼠肾损害的干预作用

目的：观察温阳活血方对慢性马兜铃酸肾病肾损害的干预作用。方法：将48只雄性SD大鼠随机分为5组：（1）正常对照组（n=8）：予生理盐水灌胃;（2）模型组（n=10）：按关木通水煎液10ml·kg^-1·d^-1（相当于关木通40g·kg^-1·d^-1,马兜铃酸A2．6mg·kg^-1·d^-1）给大鼠灌胃;（3）中药组（n=10）：在模型组基础上,再予温阳活血方30g·kg^-1·d^-1灌胃;（4）西药组（n=10）：在模型组基础上,再予科素亚33．3mg·kg^-1·d^-1灌胃;（5）中西药结合组（n=10）：在模型组基础上,再予温阳活血方＋科素亚灌胃。20周末,收集大鼠尿液测定24h尿蛋白、NAG、β2-MG,腹主动脉取血用于测定Scr、BUN、RBC、Hb。结果：与正常对照组比较,模型组大鼠24h尿蛋白、NAG、β2-MG、Scr、BUN均明显升高（P〈0．01,P〈0．05）,而血Hb、RBC均明显下降（P〈0．01）;与模型组比较,治疗组大鼠24h尿蛋白、NAG、β2-MG、Scr、BUN均明显下降（P〈0．01,P〈0．05）,而血RBC、Hb均明显升高（P〈0．01,P〈0．05）。结论：温阳活血方对慢性马兜铃酸肾病大鼠肾损害有一定的保护作用,能降低尿蛋白和尿NAG、β2-MG的排泄,改善肾功能和贫血。     

来氟米特对糖尿病大鼠葡萄糖转运蛋白-1 mRNA表达及细胞外基质的影响

目的：探讨来氟米特对链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠肾脏葡萄糖转运蛋白-1（GLUT）mRNA表达及细胞外基质的影响及其意义。方法：采用STZ腹腔注射法建立糖尿病动物模型。将大鼠随机分为正常对照组（A组）,糖尿病组（B组）,来氟米特干预组（C组）。第4、8、12周末各组随机选取4只大鼠处死并收集标本,记录体重、右肾重、检测血糖、血肌酐、血尿素氮、血胆固醇、血三酰甘油、24h尿蛋白排泄量。用RT-PCR方法检测肾皮质GLUT-1 mRNA表达水平。肾组织行HE、PAS染色,并用免疫组化法检测肾组织层黏连蛋白及Ⅳ型胶原蛋白的表达情况。结果：（1）与A组相比,B组大鼠造模成功后0周,血糖明显增高（P〈0.01）,但24h尿蛋白排泄量无明显增高（P〉0.05）;4周时体重明显降低（P〈0.01）,肾重指数、尿素氮、肌酐、胆固醇、三酰甘油、24h尿蛋白排泄量、肾皮质GLUT-1 mRNA表达明显增加（P均〈0.01）;C组12周时肾皮质GLUT-1 mRNA表达量,肾重指数、肌酐已无明显增加（P〉0.05）。（2）与B组相比,C组8周时尿素氮、肌酐降低（P均〈0.05）,胆固醇、24h尿蛋白排泄量和肾皮质GLUT-1 mRNA表达量均明显下降（P均〈0.01）;12周时体重增加（P〈0.05）,肾重指数、三酰甘油明显下降（P〈0.01）。肾组织HE、PAS染色病理学观察：B组光镜下肾小球肥大,系膜细胞增生,系膜基质弥漫性的或结节性的增多,肾小球、肾小管基底膜增厚,而C组这些病理改变明显减轻。免疫组织化学染色：B组可见系膜区Ⅳ型胶原蛋白和层黏连蛋白的大量沉积,C组也可见Ⅳ型胶原蛋白和层黏连蛋白的沉积,但较B组明显减轻。结论：来氟米特能减少糖尿病大鼠尿蛋白排泄量,纠正糖尿病大鼠的脂代谢紊乱,抑制肾脏肥大、减轻肾脏的纤维化硬化程度。其机制可能与下调系膜细胞上GLUT-1 mRNA的表达量及功能活性有关,最终延?     

HOXA10基因在多囊卵巢综合征患者子宫内膜的表达

目的了解同源框基因A10（HOXA10）和胰岛素（INS）在多囊卵巢综合征（PCOS）患者子宫内膜的表达,探讨PCOS患者子宫内膜功能异常的机制。方法采集PCOS患者50例（PCOS组）子宫内膜,分为高胰岛素组（bINS,25例）和高睾酮组（hT,25例）;对照组20例取自月经周期规律妇女的增殖期子宫内膜。采用免疫组化、Western-blot和逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测HOXA10、INS蛋白及mRNA在两组子宫内膜的表达。结果（1）免疫组化结果显示,HOXA00在PCOS组的表达较对照组明显减弱（P〈0．01）;而INS表达却均明显增高（P〈0．01）。（2）Western-blot结果也显示,HOXA10在PCOS组（包括hINS组和hT组）的表达显著低于对照组（P均〈0．01）,而INS的表达显著高于对照组（P均〈0．01）。hINS组与hT组比较,HOXA10表达更显著降低（P〈0．05）;而INS的表达水平在两组之间无显著差异（P〉0．05）。（3）RT-PCR结果显示,HOXA10mRNA的表达在PCOS组（包括hINS组和hT组）显著低于对照组（P均〈0．01）,而INSmRNA表达显著高于对照组（P均〈0．05）。结论PCOS患者的子宫内膜呈现HOXA10表达降低和INS表达增高的状态,可能是该类患者子宫内膜功能异常的原因之一。