七叶皂苷钠抑制人白血病Jurkat细胞增殖的机制研究

目的研究七叶皂苷钠抑制人白血病Jurkat细胞增殖的作用及其机制。方法 MTT法分析七叶皂苷钠对Jurkat细胞增殖的抑制作用,Hoechst 33258染色、FITC-Annexin V/PI双染、DNA Ladder、流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,Western blotting法分析凋亡相关蛋白变化。结果七叶皂苷钠呈质量浓度和时间相关方式抑制Jurkat细胞增殖;经七叶皂苷钠处理后的Jurkat细胞出现凋亡的形态学特征、DNA条带,Annexin V+/PI细胞(早期凋亡细胞)显著增加;七叶皂苷钠可活化Jurkat细胞中Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3,引起PARP的切割,并减少Bcl-2蛋白的表达。结论七叶皂苷钠能有效地通过诱导细胞凋亡抑制Jurkat细胞增殖。     

人参皂苷CK抑制STAT3诱导人肝癌细胞凋亡的内质网应激作用机制的研究

目的探讨人参皂苷CK (ginsenoside, CK)通过抑制STAT3诱导人肝癌细胞凋亡的内质网应激作用机制。方法利用MTT法检测人参皂苷CK对人肝癌HepG2细胞增殖的影响;应用流式细胞术检测细胞凋亡;CRISPR/Cas9技术敲除STAT3基因;Western blot技术检测人参皂苷CK作用后STAT3、p-STAT3及细胞凋亡、内质网应激相关蛋白的表达。结果人参皂苷CK对人肝癌细胞的增殖有抑制作用,且能诱导细胞凋亡;下调p-STAT3的表达,上调Cleaved caspase3,Cleaved PARP和GRP78、CHOP、Cleaved caspase 4、p-PERK、p-IRE1、p-JNK、p-eIF2α的表达。结论人参皂苷CK能够通过抑制STAT3的磷酸化调控人肝癌细胞凋亡,其作用机制与内质网应激有关。     

基于IRE1α/CREB/NLRP1通路探讨青蒿琥酯抑制慢性粒细胞白血病细胞生长的作用机制

目的:基于内质网应激相关的跨膜蛋白激酶1α(IRE1α)/环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)/NOD样受体1(NLRP1)通路探讨青蒿琥酯(ART)促进慢性粒细胞白血病(CML)细胞生长抑制、诱导凋亡的作用。方法:分别用浓度为0μg/mL、12.5μg/mL、25.0μg/mL、50.0μg/mL的ART干预K562细胞后,观察细胞生存情况和增殖活性,细胞凋亡后周期分布,谷胱甘肽(GSH)与活性氧(ROS)含量变化及IRE1α/CREB/NLRP1的表达量。结果:与对照组比较,12.5～50μg/mL浓度的ART可以显著抑制K562细胞的增殖、生长,诱导细胞凋亡(P0.01);还可以使K562细胞内总GSH、GSH水平,谷胱甘肽还原酶(GSH-Rd)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力降低(P0.05),ROS含量增加(P0.05),IRE1α、p-CREB mRNA和蛋白表达下降(P0.05),25.0μg/mL组、50.0μg/mL组CREB mRNA和蛋白表达增加(P0.05),但对NLRP1 mRNA和蛋白表达均无显著影响。与12.5μg/mL的ART比较,50.0μg/mL的ART可使K562细胞内总GSH、GSH水平,GSH-Rd、GSH-Px活力,IRE1α、p-CREB mRNA和蛋白表达降低(P0.05),25.0μg/mL组、50.0μg/mL组CREB mRNA和蛋白表达增加(P0.05)。结论:ART可显著抑制K562细胞的活力和增殖,诱导其凋亡,并显著降低细胞中GSH含量,升高ROS含量,且可能是通过IRE1α/CREB/NLRP1通路实现的。     

脊髓康通过IRE1-XBP1通路抑制内质网应激诱导的PC12细胞凋亡

目的基于IRE1-XBP1通路探究脊髓康(JSK)抑制内质网应激(ERS)诱导的PC12细胞凋亡的作用及机制。方法利用神经生长因子(NGF)诱导PC12细胞为神经元样细胞并通过流式细胞技术鉴定;诱导后细胞分为空白组(无干预措施)、模型组[2μmol/L毒胡萝卜素(TG)]、脊髓康组(2μmol/L TG及0.0521 g/mL JSK水提物冻干粉,合生药0.625 g/mL);CCK8法检测各组细胞24、48、72 h增殖活性,流式细胞技术检测各组细胞凋亡状态,Western Blot与q-PCR检测1型内质网转膜蛋白激酶(IRE1)、X盒结合蛋白1(XBP1)、葡萄糖调节蛋白78(Grp78)及C/EBP同源蛋白(CHOP)的蛋白及mRNA表达情况,透射电镜扫描各组细胞观察细胞及内质网形态学特征。结果与空白组比较,模型组NGF诱导的神经元样PC12细胞增殖活性显著降低(P0.05),晚期凋亡明显增高(P0.01),电镜扫描显示其细胞粗面内质网结构肿胀,囊泡化,呈典型的细胞凋亡形态;Grp78、CHOP蛋白表达显著升高(P0.05),XBP1及IRE1蛋白表达也有微微上调,但差异无统计学意义(P0.05);Grp78、CHOP、XBP1及IRE1 mRNA表达明显升高(P0.05,P0.01)。与模型组比较,JSK组24、48、72 h PC12细胞增殖活性升高(P0.05),晚期凋亡及早期凋亡均明显降低(P0.05,P0.01);Grp78、CHOP的蛋白及mRNA表达均降低(P0.05),XBP1及IRE1蛋白及mRNA表达明显上调(P0.05)。透射电镜观察JSK组内质网结构仍存在,存在完整的外膜,内质网膜破损较轻,可见部分凋亡形态学改变。结论 JSK可能通过活化IRE1-XBP1途径改善TG诱导的内质网应激状态,从而抑制ERS导致的神经元样PC12细胞凋亡,这可能是其有效改善脊髓损伤后神经元功能修复的机制。     

蛇葡萄素介导乳腺癌细胞凋亡的机制

目的探讨蛇葡萄素(AMP)体外诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡作用及可能作用机制。方法 0、5、25、50μmol/L AMP处理乳腺癌MDA-MB-231细胞24 h,MTT法检测细胞活性,Brd U法检测细胞增殖水平,流式细胞术检测细胞凋亡水平,DCFH-DA检测细胞内活性氧簇(ROS)生成,Western blot法检测细胞凋亡、Nrf-2以及内质网应激相关蛋白的变化水平。结果 AMP可抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的活性和增殖水平,促进细胞活性氧簇生成并诱导细胞凋亡。此外,AMP刺激可明显下调抗氧化蛋白Nfr-2在细胞质和细胞核内的表达水平,并上调内质网应激信号通路ERK蛋白的磷酸化水平以及ATF4、CHOP蛋白的表达水平。结论 AMP通过抑制Nrf-2依赖的抗氧化保护机制和激活PERK/ATF4/CHOP内质网应激反应信号通路诱导乳腺癌细胞凋亡。     

紫草素对白血病细胞HL-60增殖及凋亡作用的影响

目的研究紫草素诱导人早幼粒白血病HL-60细胞凋亡的作用机制。方法 MTT比色法检测紫草素对HL-60细胞增殖的影响;Annexin V/PI分析凋亡率;半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测bcl-2基因水平,分析白血病HL-60细胞凋亡作用与bcl-2表达水平关系。结果紫草素在1～8μg/mL浓度范围内能抑制HL-60细胞的增殖,具有时间和浓度的依赖性。2μg/mL紫草素能够诱导HL-60细胞凋亡,凋亡呈时间依赖性。在2μg/mL紫草素作用下,HL-60细胞bcl-2表达明显下调。结论紫草素能够诱导HL-60细胞凋亡,其作用机制与下调bcl-2表达有关。     

大黄素诱导人肾上皮HK-2细胞凋亡及内质网应激的介导作用

目的 研究大黄素诱导人肾小管上皮HK-2细胞凋亡的作用及其机制是否与内质网应激有关.方法 不同浓度大黄素处理HK-2细胞不同时间.MTT法检测细胞存活率,实时荧光定量PCR (RT-PCR)检测葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、转录激活因子3(ATF3)和X盒结合蛋白1(XBP1)的基因表达,Western blotting 法检测caspase-3、GRP78、CHOP、真核生物启动因子2α (eIF2α)的蛋白表达.结果 大黄素以浓度相关方式降低HK-2细胞存活率,诱导caspase-3剪切.RT-PCR检测表明,大黄素能诱导内质网相关基因GRP78、CHOP、ATF3基因表达,Westernblottinh检测结果进一步证实大黄素能诱导GRP78、CHOP的蛋白表达.大黄素还明显诱导eIF2α磷酸化和XBP1 mRNA剪切.在大黄素给药之前给予内质网应激干扰药4-苯基丁酸和salubrinal,能增加HK-2细胞的存活率.结论 大黄素能诱导HK-2凋亡,内质网应激参与了大黄素诱导HK-2细胞凋亡的作用.     

麦冬皂苷D对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞损伤的保护作用及靶点初探北大核心CSCD

研究麦冬皂苷D(ophiopogonin D,OPD)对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导大鼠心肌细胞凋亡的干预作用及可能的作用靶点蛋白,为麦冬皂苷类成分的心肌保护作用深入研究提供线索。CCK-8法检测麦冬皂苷D与异丙肾上腺素共处理对细胞存活率的影响;Western blot法检测麦冬皂苷D及ISO对内质网应激相关基因Bip、Bax、Perk、ATF4、caspase-12及CHOP表达的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Hoechst 33258和Tunel染色观察细胞凋亡及形态变化情况;特异性钙离子探针检测细胞内质网钙离子释放;通过构建OPD键合的环氧活化琼脂糖凝胶固相微球作为亲和介质,以捕获H9c2细胞裂解液中OPD所特异性结合的靶点蛋白;对高分辨质谱鉴定获得的OPD靶点蛋白进行信号通路富集分析并探讨OPD心肌细胞保护作用的潜在靶点。实验结果显示,10μmol·L^(-1)的ISO可显著诱导内质网应激相关蛋白的表达,促进细胞发生早期凋亡。不同浓度的麦冬皂苷D可在一定程度上预防异丙肾上腺素引起的心肌细胞损伤。质谱结果显示Fam129a、Pdia6等19个麦冬皂苷D结合的靶点蛋白分别涉及ERN1传感器结合的未折叠蛋白反应、三羧酸循环及Nrf2信号转导途径等多个信号通路。以上结果表明OPD对心肌细胞具有明确的保护作用,可能通过多个靶点蛋白信号通路发挥作用并影响细胞生命进程。     

人参皂苷CK诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的内质网应激作用机制

目的探讨人参皂苷CK对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡作用及其作用机制。方法通过体外培养SMMC-7721细胞,分为空白对照组、阳性对照组(5-Fu)和人参皂苷CK药物组,采用MTT法测定不同浓度人参皂苷CK (20,40,60μmol/L)对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响;通过Hoechst染色观察人参皂苷CK诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的形态学变化;利用流式细胞术检测细胞凋亡比例; Western Blot检测凋亡相关蛋白Cleaved-caspase 3和内质网应激相关蛋白(GRP78、p-JNK、Cleaved-caspase 4和CHOP)的表达情况。结果人参皂苷CK可显著地抑制人肝癌SMMC-7721细胞的增殖,且随着药物浓度的升高,抑制作用逐渐增加。同时,随着药物浓度的增加,典型凋亡形态特征的细胞逐渐增多,凋亡蛋白Cleaved-caspase 3及内质网应激相关蛋白GRP78、p-JNK、Cleaved-caspase 4、CHOP的表达均逐渐升高。结论人参皂苷CK可以抑制人肝癌SMMC-7721细胞生长并诱导细胞凋亡,其作用机制可能与激活内质网应激有关。     

曼宋酮E对白血病K562细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察曼宋酮E对K562细胞增殖的影响,探讨其诱导凋亡作用及可能机制.方法 台盼蓝拒染实验检测曼宋酮E对K562细胞的生长抑制作用;荧光显微镜观察细胞核形态的变化;流式细胞仪测定细胞凋亡率;免疫印迹法测定caspase-3、caspase-8、caspase-9及PARP的活性及Bcl-2、Bax和Bcl-XL的表达.结果 曼宋酮E抑制K562细胞增殖呈时间和浓度相关性;12.5μg/mL的曼宋酮E处理K562细胞0、12、24、48 h细胞凋亡率分别为(2.1±0.8)%、(3.2±1.6)%、(15.3±8.9)%、(25.1±11.4)%;在曼宋酮E诱导K562细胞凋亡过程中,caspase-3和caspase-8以及PARP出现活化断裂,casepase-9表达无明显变化;Bel-2家族蛋白Bcl-2、Bax和Bcl-L表达无显著改变.结论 曼宋酮E可抑制诱导K562细胞增殖,并通过caspase-8途径介导凋亡.     

冬凌草甲素通过内质网应激诱导胰腺癌细胞凋亡的研究

目的 探讨冬凌草甲素通过内质网应激诱导胰腺癌细胞凋亡的机制。方法 选取胰腺癌SW1990和Panc-1细胞株作为研究对象。采用细胞计数试剂-8(cell counting kit-8,CCK-8)和流式细胞术分别检测细胞增殖和凋亡情况,蛋白印迹法检测内质网应激相关因子葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78 kD,GRP78)、环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白（C/EBP-homologous protein,CHOP）、裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白水解酶-12(cleaved cystein aspartate specific proteinase-12,cleaved Caspase-12)、活化的（active）Caspase-3、cleaved Caspase-3、cleaved多腺苷二磷酸多聚酶[poly(ADP-ribose) polymerase,PARP]的蛋白表达水平,实时荧光定量RCR检测GRP78、CHOP、Caspase-12的m RNA表达水平。结果 冬凌草甲素浓度和时间相关性抑制SW1990和Panc-1细胞增...     

糖络宁对高糖环境中雪旺细胞内质网应激IRE1通路的影响

目的观察中药复方糖络宁对高糖环境下雪旺细胞的抗凋亡保护作用,探讨糖络宁对于内质网应激IRE1信号通路的调控作用。方法在高糖环境中培养雪旺细胞,设置空白对照组、模型组、糖络宁组、不同阻断剂组。培养12、24小时后,应用流式细胞术检测糖络宁含药血清处理下的细胞凋亡水平,应用免疫印迹法(Western blot,WB)检测内质网应激的IRE1-TRAF2-JNK凋亡通路的标志蛋白肌醇依赖酶1(inositol-requiting enzyme 1,IRE1)、X盒结合蛋白(X-box binding protein 1,XBP1)、肿瘤坏死因子受体相关因子2(TNF receptor-associated factor 2,TRAF2)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)的表达,应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测XBP1、TRAF2、JNK的基因表达。结果高糖孵育雪旺细胞12、24小时可显著诱导其损伤,细胞活力下降;与正常组比较,高糖环境下雪旺细胞凋亡水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,糖络宁含药血清能够改善高糖环境下雪旺细胞的凋亡(P<0.05)。在造模后检测时间点12小时、24小时,与空白组比较,模型组IRE1α、TRAF2和JNK表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,糖络宁组含药血清组TRAF2和JNK蛋白的表达显著降低(P<0.05)。在造模后检测时间点12小时,与空白组、模型组比较,糖络宁组含药血清组XBP1蛋白表达显著升高(P<0.05)。PCR结果显示,糖络宁含药血清能够发挥类似于TRAF2 siRNA阻断剂的作用,抑制IRE1途径下游凋亡通路。结论糖络宁可对抗高糖环境引起的雪旺细胞损伤,作用机制与调控内质网应激IRE1信号通路有关。在IRE1通路被激发的初期,可能激活IRE1-XBP1通路,提高高糖环境下雪旺细胞的存活能力;当内质网应激过载时糖络宁抑制IRE1-TRAF2-JNK通路,减轻高糖环境下的雪旺细胞的凋亡。     

Apoptogenic activity of 2α,3α-dihydroxyurs-12-ene-28-oic acid from Prunella vulgaris var. lilacina is mediated via mitochondria-dependent activation of caspase cascade regulated by Bcl-2 in human acute leukemia Jurkat T cells

Ethnopharmacological relevance

The dried spikes of Prunella vulgaris var. lilacina (Labiatae) have been used for traditional herbal medicine to treat fever, inflammation, dropsy, gonorrhea and cancer in Korea, Japan and China. The present study evaluated the apoptotic effect of 2α,3α-dihydroxyurs-12-en-28-oic acid (DHURS), purified from the dried spikes on human acute leukemia Jurkat T cells.

Materials and methods

Cell viability was assessed by MTT assay. Mitochondrial membrane potential (Δψm) loss, apoptotic change of the cell cycle, and apoptotic cells were measured by flow cytometric analysis. Mitochondrial cytochrome c release and activation of caspase cascade were determined by Western blot analysis. Caspase-12 activity and caspase-3 activity were assayed using the Fluorometric Assay Kit and the Colorimetric Assay Kit, respectively.

Results

Treatment of Jurkat T cells with DHURS (20-25 μg/ml) caused cytotoxicity and apoptotic DNA fragmentation along with Δψm loss, mitochondrial cytochrome c release, activation of caspase-9, -7, -3, and -8, and PARP degradation. However, these apoptotic events were abrogated by overexpression of Bcl-2. Pretreatment of the cells with the pan-caspase inhibitor (z-VAD-fmk), the caspase-9 inhibitor (z-LEHD-fmk) or the caspase-3 inhibitor (z-DEVD-fmk) to prevent DHURS-induced apoptosis could block the activation of caspase-7 and -8, and PARP degradation, but not the Δψm loss, activation of caspase-9 and -3. Both FADD- and caspase-8-positive wild-type Jurkat clone A3, FADD-deficient Jurkat clone I2.1, and caspase-8-deficient Jurkat clone I9.2 exhibited similar susceptibilities to the cytotoxicity of DHURS, excluding an involvement of Fas/FasL system in triggering the apoptosis. The IC₅₀ value for Jurkat T cells was ∼22 μg/ml, whereas that for human peripheral T cells was 25 μg/ml.

Conclusions

These results indicate that DHURS-induced apoptogenic activity in Jurkat T cells, which was less potent in normal peripheral T cells, was mediated by Δψm loss, mitochondrial cytochrome c release, and subsequent activation of caspase-9 and -3, leading to activation of caspase-7 and -8, which could be regulated by Bcl-2.     

c‐Jun N‐terminal Kinase‐Dependent Endoplasmic Reticulum Stress Pathway is Critically Involved in Arjunic Acid Induced Apoptosis in Non‐Small Cell Lung Cancer Cells

Though arjunic acid, a triterpene isolated from Terminalia arjuna, was known to have antioxidant, antiinflammatory, and cytotoxic effects, its underlying antitumor mechanism still remains unclear so far. Thus, in the present study, the molecular antitumor mechanism of arjunic acid was examined in A549 and H460 non‐small cell lung cancer (NSCLC) cells. Arjunic acid exerted cytotoxicity by 3‐[4, 5‐dimethylthiazol‐2‐yl]‐2, 5‐diphenyl tetrazolium bromide (MTT) assay and significantly increased sub‐G1 population in A549 and H460 cells by cell cycle analysis. Consistently, arjunic acid cleaved poly (ADP‐ribose) polymerase (PARP), activated Bax, and phosphorylation of c‐Jun N‐terminal kinases (JNK), and also attenuated the expression of pro‐caspase‐3 and Bcl‐2 in A549 and H460 cells. Furthermore, arjunic acid upregulated the expression of endoplasmic reticulum (ER) stress proteins such as IRE1 α, ATF4, p‐eIF2α, and C/EBP homologous protein (CHOP) in A549 and H460 cells. Conversely, CHOP depletion attenuated the increase of sub‐G1 population by arjunic acid, and also JNK inhibitor SP600125 blocked the cytotoxicity and upregulation of IRE1 α and CHOP induced by arjunic acid in A549 and H460 cells. Overall, our findings suggest that arjunic acid induces apoptosis in NSCLC cells via JNK mediated ER stress pathway as a potent chemotherapeutic agent for NSCLC.     

Obovatol Induces Apoptosis in Non‐small Cell Lung Cancer Cells via C/EBP Homologous Protein Activation

Although obovatol, a phenolic compound from the bark of Magnolia obovata, was known to have antioxidant, neuroprotective, antiinflammatory, antithrombotic and antitumour effects, its underlying antitumour mechanism is poorly understood so far. Thus, in the present study, the antitumour molecular mechanism of obovatol was investigated in non‐small cell lung cancer cells (NSCLCs). Obovatol exerted cytotoxicity in A549 and H460 NSCLCs, but not in BEAS‐2B cells. Also, obovatol increased sub‐G1 accumulation and early and late apoptotic portion in A549 and H460 NSCLCs. Consistently, obovatol cleaved PARP, activated caspase 9/3 and Bax and attenuated the expression of cyclin D1 in A549 and H460 NSCLCs. Interestingly, obovatol upregulated the expression of endoplasmic reticulum stress proteins such as C/EBP homologous protein (CHOP), IRE1α, ATF4 and p‐elF2 in A549 and H460 NSCLCs. Conversely, depletion of CHOP blocked the apoptotic activity of obovatol to increase sub‐G1 accumulation in A549 and H460 NSCLCs. Overall, our findings support scientific evidences that obovatol induces apoptosis via CHOP activation in A549 and H460 NSCLCs. Copyright © 2016 John Wiley & Sons, Ltd.     

夏枯草提取物诱导B、T淋巴瘤细胞凋亡的实验研究

目的:研究夏枯草提取物对人B淋巴瘤Raji细胞及T淋巴瘤Jurkat细胞增殖的影响及其差异,探讨夏枯草提取物体外抗淋巴瘤的作用机制。方法:不同浓度的夏枯草提取物分别作用于Raji细胞及Jurkat细胞;48 h后分别收集各组细胞,应用MTT法、琼脂糖凝胶电泳法及流式细胞技术分别检测每组细胞的增殖抑制率、细胞凋亡率及细胞凋亡情况;Western blot检测BCL-2及BAX蛋白表达变化。结果:不同浓度的夏枯草提取物对Raji及Jurkat细胞均有明显的增殖抑制作用(P0.01),且对Raji细胞的抑制作用大于Jurkat,其对Raji细胞IC50(18.01±0.92)μg/mL显著低于Jurkat细胞(25.47±0.96)μg/mL(P0.05);凝胶电泳检测结果表明夏枯草提取物处理Raji及Jurkat细胞后均出现凋亡相关DNA Ladder;随夏枯草提取物浓度的增加,Raji及Jurkat细胞的早期凋亡率均显著增加,与空白对照组比较差异显著(P0.01),浓度为15、20、25μg/mL的夏枯草提取物作用于Raji及Jurkat细胞后的早期凋亡率分别为(9.4±0.25)%、(21.68±0.46)%、(35.03±0.35)%和(4.06±0.14)%、(13.59±0.23)%、(22.92±0.20)%,同浓度条件下,Raji细胞的早期凋亡率显著高于Jurkat细胞(P0.01);随夏枯草提取物浓度增加,实验组细胞中BCL-2蛋白的表达逐渐减弱,BAX蛋白的表达逐渐增强,与空白对照组比较均有显著性差异(P0.05),同浓度条件下,Raji细胞内BCL-2蛋白表达的下降程度、BAX蛋白表达的增加程度显著高于Jur-kat细胞(P0.05)。结论:夏枯草提取物具有抑制淋巴瘤细胞增殖的作用,其机制可能与调节BCL-2和Bax蛋白的表达以诱导细胞凋亡有关,且夏枯草提取物对Raji细胞的抑制作用大于Jurkat细胞。     

锯叶棕提取物对RPMI8226细胞凋亡相关蛋白表达的影响

[目的]探讨锯叶棕提取物对RPMI8226细胞凋亡的影响以及对细胞凋亡相关蛋白表达的影响。[方法]①体外培养的RPMI8226细胞加入到不同浓度的锯叶棕提取物(0.5或1.0μL/mL)培养24h,利用流式细胞仪测定位于前G1时期的细胞百分比以检测细胞凋亡;②体外培养的RPMI8226细胞加入到锯叶棕提取物(1.0μL/mL)培养24h,应用Western Blot检测PARP、MCl-1蛋白表达。[结果]①锯叶棕提取物诱导RPMI8226细胞凋亡具有剂量依赖性(P<0.05);②RPMI8226细胞暴露于锯叶棕提取物(1.0μL/mL)培养24h,PARP蛋白水平表达明显增加,但不能调整Mcl-1。[结论]锯叶棕提取物诱导RPMI8226细胞凋亡。     

番荔枝内酯对人淋巴瘤Raji细胞体外增殖和凋亡的影响

目的研究番荔枝内酯对体外人淋巴瘤Raji细胞体外增殖和凋亡的影响及其可能机制。方法将体外培养的Raji细胞分为番荔枝内酯组、阿霉素对照组及未干预组,番荔枝内酯药物浓度按6.25、12.5、25、50μg/mL分级作用于细胞。采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫组化染色检测各组细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9（caspase-9）的表达情况。结果番荔枝内酯组细胞增殖率均低于未干预组,25、50μg/mL药物浓度组细胞增殖率低于阿霉素组,增殖率与浓度及培育时间负相关;番荔枝内酯组细胞凋亡率高于未干预组,25、50μg/mL药物浓度组凋亡率高于阿霉素组,和浓度、时间正相关;与未干预组相比,番荔枝内酯组caspase-9表达量逐步增加,与阿霉素组比较,6.25μg/mL组caspase-9表达低于阿霉素组（P〈0.05）,50μg/mL浓度组表达高于阿霉素组（P〈0.05）。结论番荔枝内酯对体外人淋巴瘤Raji细胞的增殖有抑制作用,并可能通过线粒体途径促进其凋亡。