基于药效理化表征的当归补血汤质量控制模式初探

目的 研究当归补血汤不同体系与其理化参数的关系,探讨利用药效理化参数来表征中药汤剂质量的可行性.方法 以水为分散介质,参照不同分散体系的研究方法,对黄芪甲苷、阿魏酸、黄芪皂苷、黄芪多糖等当归补血汤的代表性组分及当归补血汤单味药、复方提取液的理化特征进行表征,建立包括表面特性、电性质、流变性、热力学等性质的表征方法,并进行参数与处理因素的多项式回归分析.结果 随着阿魏酸质量浓度增大,阿魏酸水溶液、当归水提液、复方水提液的pH值降低、电导率增大;随着黄芪甲苷与黄芪皂苷质量浓度的增大,黄芪甲苷水溶液、黄芪皂苷水溶液、黄芪水提液、复方水提液的表面张力降低;随着多糖质量浓度的增大,复方水提液的渗透压增大.在整个当归补血汤体系中影响pH值和电导率的主导成分是阿魏酸,影响表面张力的主导组分是黄芪皂苷,影响渗透压的主导组分为多糖,且不同工艺制备的汤剂的理化参数大小趋势与药效强弱也有较强的相关性.结论 初步表明表面张力、pH值、电导率、渗透压4个参数能反映当归补血汤的内在质量,在一定程度上可以作为当归补血汤制备工艺与汤剂质量控制的参考指标.     

基于有效组分检测与理化表征相结合的蜣螂有效部位制备工艺研究

目的:优选蜣螂有效部位的制备工艺,探索通过提取液理化表征来进行过程控制的可行性.方法:采用单因素试验法,主要以有效组分多肽与氨基酸的含量为指标,结合流变学、表面化学、电学等方面的表征,系统考察影响蜣螂有效部位制备相关的提取、浓缩、分离、纯化、干燥各环节的各因素.结果:确定了蜣螂有效部位的制备工艺条件,即:取蜣螂药材粉碎为粗粉,用3倍量的85%乙醇浸泡48 h,加85%乙醇10倍量,以4 mL·min-1·kg-1的速度渗漉,收集漉液,滤过,滤液在50～55℃浓缩至1:1,冷藏除脂后,通过DA201-C大孔树脂柱,先后用1 BV水与4 BV 70%乙醇为洗脱剂进行洗脱,分别收集洗脱液.水洗脱液浓缩,干燥,加85%乙醇洗涤2次,取洗液,与70%乙醇洗脱液合并,浓缩,干燥,即得.同时,本实验对有效部位制备各环节的液相体系进行表征,发现与有效物质多肽相关的表面张力基本未变,而与无效物质盐密切相关的电导率降低了约90%,最大限度地保留了药物治病的有效信息,去除了无效信息.结论:筛选的蜣螂有效部位制备工艺条件稳定可靠,通过提取液理化表征来进行过程控制切实可行.     

当归补血汤皂苷类成分HPLC指纹图谱研究

目的：建立当归补血汤汤剂中皂苷成分的指纹图谱。方法：采用HLPC方法分析。色谱柱为Nucleodur，C18 Gravity；流动相为乙腈-水（梯度洗脱）；检测波长为203nm；流速为1ml／min。结果：当归补血汤汤剂主要有15个特征峰，其中黄芪有15个特征峰，当归有7个特征峰。结论：该指纹图谱可作为当归补血汤汤剂中皂苷类成分稳定性的参考。     

当归补血汤补血功效及其物质基础研究(二)

目的：以血红蛋白含量为指标，探讨当归补血汤发挥补血功效的有效部分。方法：用极性由小到大的四种有机溶剂依次萃取全方水煎液，所得各供试部分给急性失血性血虚模型小鼠灌胃。结果：未发现某一供试部位对Hb恢复作用强度等同全方；正丁醇部分与乙酸乙酯部分组合与全方比较无显性差异。结论：全方补血药效物质基础主要存在正丁醇与乙酸乙酯的极性区间。     

正交实验法优选当归补血汤提取工艺的研究

目的优选当归补血汤的最佳提取工艺条件。方法以当归补血汤中阿魏酸含量为指标,对影响提取的重要因素A提取时间,B加水量,C提取次数进行L9(34)正交实验设计。结果最佳提取工艺为药材加12倍量水,提取两次,提取2 h/次。结论优选得到的提取工艺稳定可行。     

当归补血汤颗粒中黄芪甲苷和黄芪多糖的含量测定

目的:探讨当归补血汤颗粒中黄芪甲苷和黄芪多糖的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法测定黄芪甲苷的含量,采用苯酚-硫酸比色法测定黄芪多糖的含量,旨在为自制的当归补血汤颗粒质量评价奠定基础。结果:黄芪甲苷和黄芪多糖的平均回收率分别为97.64%,97.61%,RSD分别为2.10%,3.20%。结论:采用高效液相色谱法测定黄芪甲苷的含量,高效液相色谱法能实现黄芪甲苷与有关物质的有效分离,黄芪甲苷峰形好,含量测定结果重复性好;所用测定黄芪多糖含量的苯酚-硫酸比色法,具有准确可靠、灵敏度高、重现性好等优点,可用于评价当归补血汤颗粒质量的有效方法。     

当归补血汤表征参数与其益气补血功效的关系初探

目的:研究当归补血汤理化表征参数与其益气补血功效的关系,探索利用理化参数表征中药汤剂质量的可行性。方法:采用4种提取工艺(8倍量水提取1次,每次1 h;8倍量水提取3次,每次2 h;10倍量水提取3次,每次1.5 h;12倍量水提取3次,每次1 h)制备当归补血汤,测定其25℃时的表面张力,pH,电导率和渗透压;将77只小鼠随机分为正常组、模型组、阳性组和当归补血汤1,2,3,4号组,每组11只,给药8 d(10 g.kg-1.d-1),第5天开始ip环磷酰胺40 mg.kg-1.d-1,连续3 d,第8天ip环磷酰胺80 mg.kg-1,末次给药1.5 h后测定小鼠体温和外周血象;将55只小鼠随机分为正常组、模型组和当归补血汤高中低剂量组,研究高中低剂量(20,10,5 g.kg-1.d-1)对环磷酰胺所致血虚小鼠的体温和外周血象的影响;最后,关联理化参数、药效和主要活性组分含量,并对试验数据进行统计和回归分析。结果:经过多项式回归分析,理化参数值与组分含量和药效的综合评分之和、药效综合评分的相关系数均大于0.920 0,说明当归补血汤的理化表征参数、组分含量和益气补血药效3者的相关性显著。结论:当归补血汤理化参数与其益气补血功效相关性强,初步表明可利用上述特征参数来表征当归补血汤体系的内在质量。     

当归补血汤表征参数与其补气功效的关系初探

目的:研究当归补血汤理化表征参数与其补气功效的关系,探索利用理化参数表征中药汤剂质量的可行性.方法:采用4种提取工艺(8倍量水提取1次,每次1 h;8倍量水提取3次,每次2 h;10倍量水提取3次,每次1.5 h;12倍量水提取3次,每次1h)制备当归补血汤,测定其25℃时的表面张力、pH、电导率和渗透压;将224只小鼠随机分为正常组、模型组、阳性组和当归补血汤1,2,3,4号组,每组32只;模型组、阳性组、当归补血汤组每天上午ig施以100％大黄煎剂0.5 mL/只,下午强制游泳5 min,造模持续8d;于第9天开始给药,当归补血汤各组小鼠ig给予当归补血汤10 g·kg-1·d-1,阳性组给予等量的复方阿胶浆,正常组与模型组小鼠给予等容量生理盐水,连续给药7d.于末次给药1.5h后测定小鼠的体温,抗疲劳、耐缺氧、耐寒时间和肝脏、脾脏、胸腺指数;最后,关联理化参数、药效和主要活性组分含量,并对试验数据进行统计和回归分析.结果:经多项式回归分析,表面张力、pH、电导率、渗透压与组分含量和药效的综合评分之和的相关系数分别为0.864 8,0.9994,0.973 8,0.937 0,说明当归补血汤的理化表征参数、组分含量和补气药效三者的相关性较为显著.结论:当归补血汤理化参数与其补气功效相关性较强,初步表明可利用上述特征参数来表征当归补血汤体系的内在质量.     

当归补血汤药理研究

概述了宋代名方当归补血汤近年来国内研究概况，介绍了国内对该方的药理作用，作用机理探讨、组方配伍的合理性等多方面研究内容，表明其有耐缺氧、保护心肌细胞、补血、免疫促进等广泛的药理作用，对其补血的作用机理也有较深入的探讨，并对其当归、黄芪1：5配伍的合理性进行了充分的证明。     

当归补血汤配伍比例的比较研究

采用反相高效液相色谱法测定不同比例配伍的当归补血汤中阿魏酸的煎出率，并进一步观察了它们对小鼠吞噬功能和免疫器官的影响。结果表明：当归补血汤按经典的当归一黄芪（1：5）配伍时，阿魏酸的煎出率最高；并且当归一黄芪按1：5和5：1配伍时其阿魏酸的煎出率均明显高于按1：1配伍者。药理实验亦表明：当归一黄芪（1：5）配伍的当归补血汤提高小鼠廓清指数（K）和吞噬指数（α）的作用明显强于其它比例配伍者。     

高效液相色谱法测定当归补血汤中阿魏酸的含量

以高效液相色谱法对当归补血汤中阿魏酸进行了含量测定，同时对阿魏酸在汤剂中的稳定条件及提取分离方法进行了比较研究。     

经典名方当归补血汤物质基准量值传递分析

为阐明当归补血汤物质基准的关键质量属性,通过制备21批物质基准,分别建立2套当归补血汤物质基准指纹图谱及其含量测定的检测方法,明确其指纹图谱的峰归属,相似度范围,浸出物范围,指标性成分阿魏酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和黄芪甲苷的含量以及转移率范围.结果 表明,不同批次物质基准的指标性成分含量和转移率如下:当归中指标性成分阿魏...     

当归补血汤中4种成分在大鼠血浆中的药动学研究

目的考察当归补血汤中阿魏酸、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素、黄芪甲苷在大鼠血浆中的药动学。方法 UPLC-MS/MS法测定4种成分含有量,分析采用Waters BHE C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相0.1%甲酸-乙腈,梯度洗脱;体积流量0.4 mL/min;柱温30℃。大鼠灌胃给予药物冻干粉溶液,于不同时间点采血,DAS 3.0软件拟合血药浓度-时间曲线,计算药动学参数。结果阿魏酸、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素、黄芪甲苷在各自范围内线性关系良好(r≥0.995 1),提取回收率91.42%～124.83%。四者C_max分别为312.30、799.39、149.19、120.46 ng/mL,T_max分别为19.29、21.43、53.57、70.71 min,t_1/2分别为192.37、173.95、185.34、408.77 min,AUC_0～t分别为19 220.97、111 546.04、29 073.89、18 401.73μg/(L·min),AUC...     

经典名方当归补血汤物质基准的质量标准研究

目的：建立经典名方当归补血汤的质量标准。方法：应用薄层色谱鉴别方法,以对照药材、阿魏酸、藁本内酯以及黄芪甲苷为对照,建立当归补血汤物质基准的定性鉴别方法。采用高效液相色谱法测定当归补血汤中阿魏酸以及毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量,采用NewmateTM C18(250 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱,以乙腈-0.2%甲酸为流动相进行洗脱,流速0.5 mL/min,检测波长分别为316 nm和260 nm。结果：薄层色谱鉴别方法专属性良好,斑点清晰。阿魏酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷分别在进样量为10～200μg、5～50μg范围内线性关系良好,相关系数均>0.999;平均加样回收率分别为100.64%和92.62%,相对标准偏差(RSD)均<3%。15批样品中阿魏酸和毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量分别在0.068%～0.109%和0.057%～0.092%范围内。结论：建立的方法准确可靠,可作为当归补血汤的质量控制标准。     

当归补血汤对大鼠肝纤维化与肝脏脂质过氧化的影响

目的观察当归补血汤对大鼠肝纤维化的作用及其影响肝脏脂质过氧化的抗肝纤维化作用机制。方法Wistar雄性大鼠采用四氯化碳（CCl4）皮下注射及高脂低蛋白饮食复合因素诱导复制大鼠肝纤维化模型。模型大鼠随机分为模型组(14只),当归补血汤组(14只);另设正常组(10只)。自造模之日起,当归补血汤组以6 g/kg的大鼠体重剂量灌胃,每日1次,共6周。正常组与模型组灌胃以等量生理盐水。HE染色观察肝组织炎症与脂肪变性,天狼猩红染色观察肝组织胶原沉积。试剂盒法测定血清肝功能指标,包括丙氨酸转氨酶(ALT)与天冬氨酸转氨酶(AST)水平、总胆红素(TBil)与白蛋白(Alb)含量。生化法测定肝组织甘油三脂(TG)与丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性,Jamall氏法测定肝组织羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量,Western印迹法分析肝组织Ⅰ型胶原蛋白表达。结果与正常大鼠比较,模型大鼠血清ALT、AST水平及TBil含量明显升高,Alb含量明显降低;肝组织脂肪变性与胶原沉积明显,TG与MDA含量增加,SOD活性降低（均P<005）。当归补血汤组大鼠肝组织脂肪变性与胶原病理沉积显著改善;血清ALT、AST水平及TBil含量降低,血清Alb含量升高;肝组织Hyp、TG与MDA含量降低,SOD活性提高（均P<005）。结论当归补血汤具有良好的抗实验性大鼠肝纤维化作用,其主要作用机制与抗肝脏脂质过氧化损伤有关。     

当归补血汤对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用研究

目的：研究当归补血汤对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法：采用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞局灶性脑缺血再灌注损伤模型,观察当归补血汤对脑缺血再灌注24h后大鼠行为动作评分、脑梗死面积、脑梗死率和脑含水量等影响。通过当归补血汤原提液与超滤液的对比考察超滤液的脑保护作用是否变化。结果：当归补血汤提取液与超滤液对各因素的影响没有组间差异。结论：当归补血汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有保护作用,减少超滤液服用剂量未对疗效有显著影响,超滤技术可用于当归补血汤提取液的纯化过程。     

当归补血汤补血作用机理的探讨

当归补血汤能显著促进正常小鼠SCM,LCM中,及血虚小鼠SCM中CSFs的产生。当归促进,而黄芪显著抑制正常小鼠SCM中CSFs生成。结果揭示当归补血汤的补血活血作用与其刺激CSFs分泌有关,且系当归的作用所致。     

当归补血汤治疗糖尿病抑郁症的研究进展

近年来,随着经济的迅速发展,人们生活方式、水平的改善,糖尿病发病率呈急剧上升趋势,经流行病学调查,60%-75%的糖尿病患者都伴有抑郁症状,甚至其中10%-35%的患者为重度抑郁,而抑郁患者的糖尿病发病风险是正常人的2倍。糖尿病罹患抑郁症（DD）严重影响患者生活质量,已经引起越来越多的关注。目前治疗DD的药物以化学药物为主,由于其靶点单一、药物依赖性强、副作用明显等原因,故寻找多靶点、低毒、副作用小的治疗药物,是临床亟待解决的棘手问题。课题组研究发现益气养血方当归补血汤（DBD）对DD有较为确切的疗效,现对其研究现状加以综述。