蝎毒多肽提取物联合雷帕霉素增强H22肝癌细胞自噬作用的机制研究

目的观察蝎毒多肽提取物(polypeptide extract from scorpion venom,PESV)联合雷帕霉素(Rapamycin)对H22肝癌肿瘤细胞自噬的增强作用并探讨其作用机制。方法 40只昆明小鼠,采用皮下接种H22肝癌肿瘤细胞悬液法建立荷瘤模型,随机分为荷瘤对照组、PESV高剂量组、PESV低剂量组及联合组(PESV高剂量加雷帕霉素),每组10只。PESV高、低剂量组分别予20 mg/kg、10 mg/kg的PESV灌胃,联合组予雷帕霉素(2 mg/kg)及PESV(20 mg/kg)灌胃,连续给药干预14天,隔日测量肿瘤体积,记录肿瘤生长曲线,计算抑瘤率。HE染色观察各组肿瘤组织病理变化。免疫组织化学法检测各组肿瘤组织哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammal target of rapamycin,m TOR)、UNC51样激酶1(UNC-51-like kinase-1,ULK1)、微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,MAP1LC3A)及B淋巴细胞瘤蛋白质-2-相互作用蛋白质-1(Beclin1)蛋白表达水平。结果与荷瘤对照组比较,PESV高、低剂量组及联合组肿瘤生长受到明显抑制(P0.05);与PESV高、低剂量组比较,联合组瘤重及体积明显减小(P0.05),PESV高、低剂量组比较,差异无统计学意义(P0.05)。免疫组织化学法显示,与荷瘤对照组比较,PESV高、低剂量组及联合组m TOR表达水平降低(P0.05),ULK1、MAP1LC3A及Beclin1蛋白表达水平升高(P0.05,P0.01)。与PESV高剂量组比较,联合组ULK1、MAP1LC3A及Beclin1蛋白表达水平明显降低(P0.05)。结论蝎毒多肽提取物联合化疗可能是通过抑制m TOR的活性,增强自噬相关蛋白ULK1、MAP1LC3A及Beclin1的表达,促进细胞自噬从而抑制肿瘤的发展。     

淫羊藿、女贞子含药血清联合糖皮质激素影响雷帕霉素诱导ASMCs自噬激活的机制研究

目的 研究淫羊藿女贞子含药血清合用地塞米松对自噬激活剂雷帕霉素（Rap）诱导的气道平滑肌细胞（ASMCs）自噬、凋亡及增殖活性的影响。方法 培养大鼠原代ASMCs,随机分为5组,即正常组（正常大鼠血清）、Rap组（正常大鼠血清+Rap）、激素组（正常大鼠血清+地塞米松+Rap）、中药组（Rap+淫羊藿、女贞子含药血清）、合用组（Rap+淫羊藿、女贞子含药血清+地塞米松）。根据分组分别加入正常大鼠血清或含药大鼠血清;除正常组外,其余各组同时加入Rap刺激ASMCs,48 h后进行检测。电镜观察细胞超微结构;MTT法检测细胞活力;免疫细胞化学法检测增殖蛋白Ki-67蛋白表达并评价细胞增殖活性;Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡活性;Western blotting检测LC3蛋白相对表达;细胞免疫荧光法检测Bax、Bcl-2、Beclin-1、P53、Caspase-3、mTOR、p-mTOR蛋白表达。结果 激素可协同Rap诱导ASMCs自噬活性增加,使LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白比值进一步增加,下调p-mTOR表达,但对Beclin-1及m TOR表达无影响,抑制ASMCs细胞活力及增殖...     

中医药通过mTOR途径调节细胞凋亡与自噬的研究进展

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)是一种进化保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,其生物学功能主要是参与细胞的增殖、生长及分化,从而调节机体的代谢过程。诸多国内外研究表明,mTOR是细胞凋亡及自噬信号转导通路的交汇点,营养、药物及氧化应激等多种刺激均可通过mTOR介导的信号通路对细胞的凋亡和自噬起到关键性的调控作用。目前,诸多研究已经证明,mTOR信号通路的改变与多种人类疾病的发病机制密切相关,如癌症、代谢紊乱(肥胖和2型糖尿病)、心血管和神经退行性疾病、与年龄有关的疾病和卵泡发育障碍等。近年来,越来越多的医家以该通路为切入点,以细胞凋亡和自噬为研究载体,研究了中医药对细胞凋亡和自噬的调节。其中包括中药单体、中成药、中药复方以及针灸等药物及物理疗法调控凋亡及自噬的实验研究。本文从mTOR信号通路入手,探讨了mTOR与细胞凋亡及自噬的关系,综述了中医药经mTOR途径调节细胞凋亡与自噬的最新进展,为中医药在该领域的深入研究提供了思路与参考。今后,中医药领域仍可以mTOR信号通路为依托,在中医基础理论的指导下对细胞凋亡和自噬的时效关系进行探索,为中医药在机体的作用机制提供新的现代医学的理论支持和作用靶点。     

姜黄素诱导人神经母细胞瘤细胞凋亡的机制研究

目的:探讨姜黄素诱导人神经母细胞瘤细胞凋亡的机制。方法:选取SK-N-SH、SH-SY5Y细胞为研究对象,以不同浓度姜黄素(0、1.25、2.5、5、10、15μmol/L)作用于细胞,采用CCK-8法检测其增殖抑制率并计算半数抑制浓度(IC₅₀);并以1/2 IC₅₀姜黄素、IC₅₀姜黄素、2 IC₅₀姜黄素、NAC(5 mmol/L)、姜黄素+NAC(IC₅₀+5 mmol/L)作用于细胞,用CCK-8法检测抑制率;采用流式细胞术检测细胞凋亡、ROS荧光强度;采用蛋白质印迹法(Western Blot)检测细胞Caspase-3、Cleaved Caspase-3、Grp78、CHOP、Beclin-1、LC3Ⅱ、LC3Ⅰ蛋白表达。结果:姜黄素以浓度依赖性抑制SK-N-SH、SH-SY5Y细胞的增殖,其IC₅₀分别为13.251、12.387μmol/L;与空白对照组比较,1/2 IC₅₀、IC₅₀、2 IC₅₀姜黄素组SK-N-SH、SH-SY5Y细胞凋亡及ROS荧光强度显著升高,IC₅₀、2 IC₅₀姜黄素组SK-N-SH、SH-SY5Y细胞Cleaved Caspase-3、Grp78、CHOP、Beclin-1、LC3Ⅱ蛋白表达显著升高,LC3Ⅰ蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。与姜黄素组比较,姜黄素+NAC组SK-N-SH、SH-SY5Y细胞增殖抑制率、凋亡率显著降低,SK-N-SH细胞Grp78、CHOP蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:姜黄素能抑制SK-N-SH、SH-SY5Y细胞增殖,其机制可能与靶向ROS影响细胞内质网应激及自噬从而诱导细胞凋亡有关。     

苦参碱诱导人白血病耐药细胞K562/IM自噬和凋亡的研究

目的观察苦参碱对人白血病耐药细胞K562/IM自噬和凋亡的影响。方法 (1)苦参碱及伊马替尼对细胞增殖及自噬情况检测:分别设空白对照组、不同浓度(0.25、0.50、1.00、2.00、5.00mg/mL)苦参碱组和(0.05、0.25、0.50、5.00、20.00μmol/L)伊马替尼组,MTT检测K562细胞和K562/IM细胞抑制率。分别设置空白对照组、0.4 mg/mL苦参碱组和0.5μmol/L伊马替尼组,免疫荧光激光共聚焦检测K562细胞和K562/IM细胞自噬现象,Western Blot检测细胞中自噬标志蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ/Ⅰ、P62的表达。(2)苦参碱联合3-甲基腺嘌呤(3-MA)或雷帕霉素(rapamycin,Rapa)诱导K562/IM细胞自噬及凋亡情况变化的检测:实验分6组,空白对照组、苦参碱组(0.4mg/mL苦参碱处理)、3-MA组(5mmol/L 3-MA处理)、Rapa组(0.5μmol/L Rapa处理)、苦参碱+3-MA组(0.4mg/mL苦参碱+5mmol/L3-MA处理)、苦参碱+Rapa组(0.4mg/mL苦参碱+0.5μmol/L Rapa处理),采用MTT检测细胞的抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡水平;Western Blot检测细胞自噬标志蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ/Ⅰ、P62及凋亡相关蛋白Caspase-3表达。结果 (1)苦参碱和伊马替尼作用K562、K562/IM细胞,细胞增殖受抑制明显(P0.05),LC3-Ⅱ/Ⅰ的聚集明显增加,Beclin-1及LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达升高,P62蛋白表达减少(P0.05),以K562/IM细胞更明显(P0.05)。(2)苦参碱组K562/IM细胞增殖抑制率(36.32±2.21)%,凋亡率(15.35±0.39)%。苦参碱+3-MA组K562/IM细胞增殖抑制率升高[(65.25±2.06)%,P0.01)],凋亡率升高[(21.70±0.48)%,P0.05],同时Beclin-1及LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达下降,P62蛋白表达增强,Caspase-3表达增强(P0.05);而苦参碱+Rapa组作用则相反。结论苦参碱和伊马替尼均可抑制K562、K562/IM细胞增殖的同时可诱导自噬,以耐药K562/IM细胞株自噬明显。通过3-MA抑制自噬可增强苦参碱对细胞K562/IM作用的敏感性,而雷帕霉素减弱苦参碱作用。     

迷迭香酸抑制自噬诱导HepG2细胞凋亡的作用研究

目的:观察迷迭香酸(RA)对HepG2细胞凋亡和自噬的作用,探讨自噬与凋亡之间的相互作用。方法:用不同浓度迷迭香酸作用于HepG2细胞24h、48h、72h。MTT法检测细胞存活率,观察迷迭香酸对HepG2细胞核形态的影响,流式细胞术检测细胞凋亡变化,台盼蓝染色法观察细胞自噬泡情况,透射电镜观察HepG2细胞的自噬变化,蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Cleaved Caspase-3、Bcl-2和自噬相关蛋白(LC3)、p62的表达水平。采用迷迭香酸+3-甲基腺嘌呤(3-MA,自噬抑制剂)或迷迭香酸+雷帕霉素(RAP,自噬诱导剂)分别培养处理HepG2细胞,观察细胞增殖、细胞凋亡情况及相关蛋白表达变化。结果:与对照组相比,迷迭香酸(6.25、12.5、25、50、100、200μmol/L)均能降低HepG2细胞的存活率,诱导HepG2细胞发生凋亡,具有量效和时效关系,减少细胞内自噬泡和自噬小体,降低LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值,减少Bcl-2的表达,增加Cleaved Caspase-3、p62蛋白的表达。与迷迭香酸25μmol/L处理组相比,迷迭香酸25μmol/L+3-MA 1.0μM/mL应用可诱导HepG2细胞凋亡增加,可进一步减少细胞内自噬泡和自噬小体数目,降低LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值,进一步抑制HepG2细胞的自噬水平,减少Bcl-2的表达,增加Cleaved Caspase-3和p62表达;迷迭香酸25μmol/L+RAP 1.0μM/mL处理HepG2细胞,增加细胞内自噬泡和自噬小体数目,升高LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值,可以抑制和逆转迷迭香酸诱导的细胞自噬水平下降,增加Bcl-2的表达,减少Cleaved Caspase-3和p62表达,细胞凋亡水平下降,这说明抑制或增强自噬时,迷迭香酸能改变对HepG2细胞的凋亡影响作用。结论:迷迭香酸可通过抑制自噬促进HepG2细胞的凋亡。     

复方苦参注射液诱导自噬促进膀胱癌细胞凋亡机制的研究

目的 探究复方苦参注射液对膀胱癌T24细胞增殖、凋亡及自噬的影响,并探究其可能的分子机制,为复方苦参注射液在临床上治疗膀胱癌提供理论依据。方法 CCK-8法检测复方苦参注射液对T24细胞增殖的影响。流式细胞术检测复方苦参注射液对T24细胞凋亡的影响。MDC染色法检测复方苦参注射液对T24细胞自噬的影响。蛋白免疫印迹和免疫荧光实验检测复方苦参注射液对T24细胞凋亡关键蛋白和自噬关键蛋白的影响。结果 复方苦参注射液能有效抑制T24细胞增殖。复方苦参注射液能诱导T24细胞发生凋亡和自噬。蛋白免疫印迹和免疫荧光实验结果表明,随着复方苦参注射液剂量的升高,T24细胞中B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）、自噬选择性底物（P62）的表达逐渐下降,B细胞淋巴瘤2相关X蛋白（Bax）、活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶（cleaved-Caspase 3）、自噬关键分子酵母Atg6同系物（Beclin1）、微管相关蛋白B轻链3-Ⅱ（LC3Ⅱ）的表达逐渐升高（P<0.05）,Bcl-2/Bax比值逐渐减小（P<0.05）。结论 复方苦参注射液能抑制T24细胞的增殖、调节T24细胞自噬,诱导T24细胞凋亡。     

苦参碱诱导人乳腺癌Bcap-37细胞自噬及凋亡作用研究

目的:研究苦参碱诱导人乳腺癌Bcap-37细胞自噬及凋亡的作用,为苦参碱用于乳腺癌治疗提供理论依据。方法:苦参碱(终浓度为0、0.5、1、1.5、2、2.5、3 mg/mL)处理乳腺癌Bcap-37细胞24、48、72 h,采用MTT法检测细胞增殖抑制率;Annexin V-FITC和碘化丙啶(PI)双染、流式细胞仪检测细胞凋亡率;用倒置显微镜和透射电镜观察细胞形态变化;运用Western-blot方法检测Cleaved PARP和Lc3b-Ⅰ/Lc3b-Ⅱ蛋白表达水平。苦参碱联合氯喹(chloroquine)(自噬抑制剂)处理Bcap-37细胞24 h后,运用MTT法检测细胞增殖抑制率的变化。实验数据采用SPSS 17.0软件进行统计,计量资料用均数±标准差(x珋±s)表示,多组均数间比较用方差分析,两组均数比较用T检验,均以P<0.01为差异显著的检验标准。结果:苦参碱可显著抑制乳腺癌Bcap-37细胞增殖,作用呈浓度-时间依赖性;苦参碱诱导细胞凋亡,且凋亡率与苦参碱浓度成正比;经苦参碱处理后,Bcap-37细胞胞浆内出现大量囊性小泡,经透射电镜扫描证实细胞发生自噬;Western-blot法检测到Cleaved PARP和Lc3b-Ⅱ蛋白表达均上调。苦参碱联合氯喹作用于Bcap-37细胞后MTT法检测细胞增殖抑制作用明显加强(P<0.01)。结论:苦参碱可显著抑制Bcap-37细胞增殖;促进细胞凋亡;诱导细胞发生自噬现象;自噬抑制剂氯喹可增强苦参碱抑制细胞增殖的作用,提示自噬现象是一种细胞保护性反应。     

川楝素诱导K562细胞凋亡及其与自噬关系的体外研究

目的 研究川楝素诱导人慢性髓系白血病K562细胞发生凋亡,并探讨凋亡与自噬的关系.方法 采用MTT比色法,检测不同浓度川楝素对K562细胞增殖抑制率的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率,透射电镜观察K562细胞超微结构的改变,免疫细胞化学法检测蛋白Apaf-1、LC3-Ⅱ的表达.结果 川楝素对K562细胞有明显增殖抑制作用,呈时间和浓度依赖性(P＜0.01).50nmol/L川楝素处理细胞72h后,K562细胞早期凋亡率为54.20％,与川楝素处理组相比,3-MlA预处理组,凋亡率为68.30％.透射电镜下可见典型的凋亡小体和自噬体.免疫细胞化学法结果显示,K562细胞Apaf-1、LC3-Ⅱ蛋白表达较对照组增强(P＜0.01).结论 川楝素能够有效诱导K562细胞同时发生凋亡和自噬性死亡,当阻断自噬的发生,加速了凋亡的进程,在此过程中Apaf-1、LC3-Ⅱ蛋白上调.     

双氢青蒿素诱导前列腺癌PC-细胞凋亡及其机制研究

目的研究双氢青蒿素对前列腺癌PC-3细胞的凋亡诱导作用,并探讨其可能的机制。方法MTT法测定不同浓度双氢青蒿素对PC-3细胞增殖的影响,流式细胞仪(FCM)、透射电镜(TEM)观察双氢青蒿素对PC-3细胞的凋亡诱导作用,免疫组化(SP)检测双氢青蒿素对PC-3细胞内Bax、Bcl-2蛋白阳性表达的影响。结果双氢青蒿素对PC-3细胞有明显增殖抑制效应,能诱导PC-3细胞凋亡且具有浓度-时间依赖性,导致PC-3细胞线粒体肿胀、核碎裂、凋亡小体形成;随着双氢青蒿素浓度的增加,Bcl-2蛋白阳性表达降低,而Bax蛋白阳性表达增加。结论双氢青蒿素可能通过上调Bax,下调Bcl-2蛋白表达诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡。     

姜黄素对UVB辐射诱导HaCaT细胞凋亡的抑制作用

目的:建立中波紫外线(UVB)对体外培养的永生化人角质形成细胞(HaCaT细胞)辐射损伤病理模型,探讨姜黄素(Cur)对其细胞辐射损伤的保护作用。方法:以10、20、30、40和50m J/cm2的UVB辐照其细胞,分别在辐照后6、12、18、24、48和72h,用MTT和流式细胞仪检测细胞活性及其凋亡的变化,建立辐照损伤病理模型;用30m J/cm2的剂量辐照其细胞后,立即分别给予0.625、1.25、2.5和5μg/mL的Cur处理,在处理18h后检测其细胞凋亡。结果:HaCaT细胞经UVB辐照后,以剂量和时间依赖方式抑制其细胞存活,且主要由于细胞凋亡引起;Cur以浓度依赖方式抑制由UVB所致的细胞凋亡。结论:Cur能抑制UVB辐射诱导的HaCaT细胞凋亡,对UVB辐射损伤HaCaT细胞具有保护作用,其作用机制可能与Cur清除体内自由基而增强细胞的抗氧化能力有关。     

中医药治疗去势抵抗性前列腺癌的临床研究进展

中国的前列腺癌发病率不断升高,前列腺癌最终会进展成为去势抵抗性前列腺癌(CRPC).CRPC的治疗有许多问题尚待解决.化疗药物、免疫疫苗及新型内分泌药物等在CRPC的治疗上取得了疗效证据.中医药具有整体调节、扶正祛邪的优势.近年来针对中医药治疗CRPC的病因病机、临床疗效及作用机制开展了卓有成效的研究,中医药为CRPC...     

姜黄素诱导结肠癌LoVo细胞凋亡的作用及机制研究

目的: 探讨姜黄素促人结肠癌LoVo细胞凋亡的生物学作用及其调控机制。 方法: 体外培养人结肠癌LoVo细胞,0~20 mg·L^-1不同浓度姜黄素处理后,采用MTT 比色法测定姜黄素对细胞的增殖抑制作用,利用透射电镜观察细胞的超微结构,采用PI单标流式细胞仪测定细胞周期分布,Annexin V-FITC/PI双标法检测细胞凋亡率; 采用 RT-PCR检测Bax,Bcl-2,Caspase-3,Bcl-xL mRNA表达水平。 结果: MTT检测显示姜黄素能显著抑制人结肠癌LoVo细胞的生长、増殖,呈现浓度和时间效应关系;透射电镜结果显示姜黄素能使LoVo细胞发生形态学改变,呈现典型凋亡细胞特征;流式细胞仪分析显示姜黄素能阻滞细胞周期于S期,诱导细胞发生凋亡。RT-PCR检测显示姜黄素可促进细胞中Bax,Caspase-3 mRNA 表达,抑制Bcl-2,Bcl-xL mRNA 表达。 结论: 姜黄素能显著抑制人结肠癌LoVo细胞的增殖并促进其凋亡,这种生物学效应可能与激活Bax表达、抑制Bcl-2和Bcl-xL表达而活化Caspase-3的信号通路有关。     

Gambogenic acid induces apoptosis and autophagy through ROS-mediated endoplasmic reticulum stress via JNK pathway in prostate cancer cells

Prostate cancer (PCa) is the most common malignant tumor in males, which frequently develops into castration-resistant prostate cancer (CRPC) with limited therapies. Gambogenic acid (GNA), a flavonoids compound isolated from Gamboge, exhibits anti-tumor capacity in various cancers. Our results showed that GNA revealed not only antiproliferative and pro-apoptotic activities but also the induction of autophagy in PCa cells. In addition, autophagy inhibitor chloroquine enhanced the pro-apoptosis effect of GNA. Moreover, the activation of JNK pathway and the induction of apoptosis and autophagy triggered by GNA were attenuated by JNK inhibitor SP600125. We also found that GNA significantly promoted reactive oxygen species (ROS) generation and endoplasmic reticulum (ER) stress. Meanwhile, suppressing ER stress with 4-phenylbutyric acid (4-PBA) markedly blocked the activation of JNK pathway induced by GNA. Further research indicated that ROS scavenger N-acetyl-L-cysteine (NAC) effectively abrogated ER stress and JNK pathway activation induced by GNA. Furthermore, NAC and 4-PBA significantly reversed GNA-triggered apoptosis and autophagy. Finally, GNA remarkably suppressed prostate tumor growth with low toxicity in vivo. In conclusion, the present study revealed that GNA induced apoptosis and autophagy through ROS-mediated ER stress via JNK signaling pathway in PCa cells. Thus, GNA might be a promising therapeutic drug against PCa.     

黄芩苷诱导前列腺癌细胞株DU145凋亡的体外研究

目的 :探讨黄芩苷诱导前列腺癌细胞株DU14 5凋亡的作用机制。方法 :采用不同浓度的黄芩苷处理细胞后 ,用流式细胞仪检测前列腺癌细胞DU14 5的凋亡率及细胞周期分布 ;电镜下观察细胞超微结构 ;免疫组织化学染色检测凋亡相关蛋白的表达。结果 :5 0 ,12 5 μmol·L^-1黄芩苷能诱导前列腺癌细胞DU14 5凋亡 ,凋亡率与剂量正相关 ;DU14 5随药物浓度及作用时间变化 ,细胞周期分布呈现G₁期细胞比例逐渐增高 ,并出现典型的凋亡峰 ;电镜下可见特征性的凋亡小体 ;免疫组织化学染色提示bcl 2在药物处理的DU14 5中表达下调 ,Bax表达缺失 ,Fas表达上调。结论 :黄芩苷能诱导前列腺癌细胞凋亡 ,并明显抑制癌细胞增殖 ,具有直接抗肿瘤作用。     

通瘀方预防前列腺癌去势治疗后心脑血管事件的临床观察

目的观察通瘀方对前列腺癌去势治疗后心脑血管事件的预防作用。方法将110例前列腺癌患者随机分为治疗组与对照组,每组55例。对照组予去势治疗,治疗组在对照组治疗措施基础上加服通瘀方。两组疗程均为3个月,随访6个月,观察心脑血管事件及终点事件发生情况,比较心脑血管事件相关指标胰岛素(FINS)、空腹血糖(FBG)、颈总动脉内膜中层厚度(IMT)、高灵敏性C反应蛋白(hs-CRP)的变化情况。结果 (1)研究期间,对照组发生心脑血管事件14人次(脑梗死1人次、脑出血2人次、颅内腔隙性病灶9人次、心肌梗死1人次、心绞痛1人次,其中脑出血和心肌梗死各死亡1例),发生率为25.45%;治疗组发生心脑血管事件4人次(均为颅内腔隙性病灶,无死亡病例),发生率为7.27%。组间心脑血管事件发生率比较,差异有统计学意义(P0.05),治疗组明显低于对照组。(2)治疗前后组内比较,治疗组IMT、hs-CRP、IRI水平差异有统计学意义,均明显降低(P0.05);对照组IMT、hs-CRP水平差异有统计学意义(P0.05),均明显升高。组间治疗后比较,IMT、hs-CRP、IRI水平差异有统计学意义(P0.05),治疗组对上述指标的改善明显优于对照组。结论通瘀方能够明显减少前列腺癌去势治疗后心脑血管事件的发生,与前列腺癌去势治疗起到了很好的协同作用,该作用可能与降低胰岛素抵抗、抑制hs-CRP有关。     

冬凌草甲素联合免疫因子TRAF4对非小细胞肺癌细胞自噬和凋亡的影响及机制研究

[目的] 探讨冬凌草甲素联合免疫因子肿瘤坏死因子受体相关因子4（TRAF4）对非小细胞肺癌细胞自噬和凋亡的影响及机制研究。[方法] 选择不同浓度的冬凌草甲素处理A549细胞,然后采用噻唑蓝（MTT）法检测细胞的活力。体外培养A549细胞,将细胞分为对照组、冬凌草甲素组、si-NC组（转染si-NC）、si-TRAF4组（转染si-TRAF4）、冬凌草甲素+pcDNA组（转染pcDNA后,选择冬凌草甲素浓度为20 μmol/L处理）、冬凌草甲素+TRAF4组（转染TRAF4后,选择冬凌草甲素浓度为20 μmol/L处理）。采用流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、微管相关蛋白1的轻链3（LC3）、Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin 1、自噬相关蛋白7（ATG7）和TRAF4蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测TRAF4 mRNA表达量。[结果] 不同浓度冬凌草甲素明显抑制细胞活力。冬凌草甲素组细胞凋亡率、Bax、Beclin 1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、ATG7蛋白表达明显高于对照组;TRAF4 mRNA和蛋白表达、Bcl-2蛋白表达明显低于对照组。si-TRAF4组TRAF4 mRNA和蛋白表达、Bcl-2蛋白表达明显低于si-NC组;细胞凋亡率、Bax、Beclin 1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和ATG7蛋白表达明显高于si-NC组。冬凌草甲素+TRAF4组TRAF4 mRNA和蛋白表达、Bcl-2蛋白表达明显高于冬凌草甲素+pcDNA组;细胞凋亡率、Bax、Beclin 1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和ATG7蛋白表达明显低于冬凌草甲素+pcDNA组。[结论] 冬凌草甲素通过下调TRAF4的表达抑制非小细胞肺癌细胞的凋亡和自噬。     

A steroid fraction of chloroform extract from bee pollen of Brassica campestris induces apoptosis in human prostate cancer PC-3 cells

Bee pollen of Brassica campestris L. is widely used in China as a natural food supplement and an herbal medicine in strengthening the body's resistance against diseases including cancer. The present study was carried out to investigate the effect of a steroid fraction of chloroform extract from bee pollen of Brassica campestris L. on human cancer cell viability. Our studies show that among nine cancer cell lines of different origin (PC-3, LNCaP, MCF-7, Hela, BEL-7402, BCG-823, KB, A549 and HO8910), this steroid fraction displayed the strongest cytotoxicity in human prostate cancer PC-3 cells. The mode of cell death appeared to be apoptosis in PC-3 cells, as shown by flow-cytometric analysis and fluorescence microscopes. Caspase-3 activity was obviously enhanced after the cells were treated with the fraction. A time-dependent decrease in the expression of anti-apoptotic protein Bcl-2 was also observed by Western blot analysis. It is suggested that the steroid fraction could induce cytotoxicity in prostate cancer PC-3 cells by triggering apoptosis. The studies indicate that the steroid fraction of chloroform extract from bee pollen of Brassica campestris L. may be a promising candidate for the treatment of advanced prostate cancer.     

姜黄素可通过内质网应激途径诱导乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡

目的：探讨姜黄素诱导乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡的可能机制。方法：分别采用0,25,50,100,150,200 μmol·L^-1浓度的姜黄素对乳腺癌细胞MDA-MB-231进行干预,采用MTT法观察其对乳腺癌细胞增殖的影响,采用流式细胞术观察其对乳腺癌细胞凋亡的影响,采用实时定量PCR及Western blot检测乳腺癌细胞内葡萄糖调节蛋白78（GRP78）及C/EBP同源蛋白（CHOP）表达水平。结果：姜黄素可通过诱导乳腺癌细胞MDA-MB-231抑制其增殖能力,并呈现浓度依赖性;姜黄素可显著升高乳腺癌细胞内GRP78及CHOP表达水平。结论：姜黄素可通过内质网应激途径诱导乳腺癌细胞MDA-MB-231的凋亡。