白香丹胶囊对愤怒情绪模型大鼠海马GABABR和KIR表达的影响

目的检测愤怒情绪模型大鼠海马γ-氨基丁酸B受体两个亚基GABABR1、GABABR2和内向整流型钾通道(KIR)表达的变化,初步探讨白香丹胶囊对肝气逆证的中枢干预机制。方法大鼠随机分为正常对照组、模型组、白香丹胶囊组(0.2 g·kg-1)、巴氯芬组(0.008 g·kg-1),采用"社会隔离结合居住入侵"方法制备愤怒情绪大鼠模型,药物组按相应剂量灌胃给药7 d,每日1次。通过糖水偏好实验、旷场实验和高架十字迷宫实验进行模型评价,用免疫荧光化学法检测各组大鼠海马GABABR1、GABABR2和KIR的表达。结果与正常对照组比较,模型组糖水偏好系数降低,旷场实验得分增高,高架十字迷宫实验进入开放臂次数百分数(OE%)和开放臂停留时间的百分数(OT%)降低,海马GABABR1、GABABR2和KIR表达水平降低P<0.05;与模型组比较,白香丹胶囊组和巴氯芬组旷场实验得分降低,OE%和OT%值升高,海马GABABR1、GABABR2和KIR表达水平升高(P<0.05)。结论大鼠愤怒情绪的产生可能与海马GABABR1、GABABR2和KIR表达降低有关,白香丹胶囊平肝理气的中枢机制可能与其激活海马GABABR及其G蛋白偶联的KIR有关。     

白香丹胶囊对焦虑情绪模型大鼠额区皮层γ-氨基丁酸B受体和腺苷酸环化酶表达的影响

目的:检测焦虑情绪模型大鼠额区皮层γ-氨基丁酸(GABA)B受体两个亚基GABABR1,GABABR2和腺苷酸环化酶(AC)表达的变化,初步探讨白香丹胶囊对焦虑情绪的干预机制.方法:白香丹胶囊由芍药苷、香附挥发油和丹皮酚配伍组成.大鼠随机分为正常组、模型组、白香丹胶囊组(200 mg·kg-1)、巴氯芬组(8 mg·kg-1),采用“孤养加异种大鼠入侵”方法,大鼠孤养2周,然后异种大鼠居住入侵刺激2周,制备焦虑情绪大鼠模型.从居住入侵第2周开始,药物组按相应剂量ig给药7d,每日1次.通过糖水偏好实验、旷场实验和高架十字迷宫实验进行模型评价,用免疫荧光技术检测各组大鼠额区皮层GABABR1,CABABR2和AC的表达变化.结果:与正常组比较,模型组糖水偏好系数降低,旷场实验得分增高(P＜0.05),高架十字迷宫实验进入开放臂次数百分数(OE％)和开放臂停留时间的百分数(OT％)降低(P＜0.05),额区皮层GABABR1,GABABR2,AC表达水平降低(P＜0.05).与模型组比较,白香丹胶囊组和巴氯芬组旷场实验得分降低(P＜0.05),OE％和OT％值升高(P＜0.05),额区皮层GABABR1,GABABR2,AC表达水平升高(P＜0.05).结论:大鼠额区皮层GABABR1,GABABR2,AC表达下凋可能与焦虑情绪的产生有关,白香丹胶囊抗焦虑作用的中枢机制可能与其恢复额区皮层的GABABR的表达和功能有关.     

白香丹对PMS肝气逆证模型大鼠GABA_BR亚基分布及表达的影响

目的观察白香丹对经前期综合征(PMS)肝气逆证模型大鼠额区和下丘脑中γ-氨基丁酸(GABA)B1受体(GBR1)、γ-氨基丁酸B2受体(GBR2)分布及表达的影响,探讨白香丹对PMS肝气逆证的干预机制。方法通过旷场实验和阴道涂片法筛选健康雌性Wistar大鼠进入实验,采用电刺激法复制PMS肝气逆证大鼠模型,用免疫荧光双标记技术检测GBR1和GBR2在额区和下丘脑中的表达。结果与正常对照组大鼠比较,模型组大鼠垂直得分、水平得分和总分均显著增加(P<0.01),GBR1和GBR2蛋白在额区和下丘脑中的表达水平降低(P<0.01);与模型组大鼠比较,白香丹组和巴氯芬组大鼠旷场得分显著降低(P<0.01,P<0.05),GBR1和GBR2蛋白在额区和下丘脑中的表达水平明显上升(P<0.01,P<0.05),但两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 GABABR亚基(GBR1和GBR2)表达的下调可能与PMS肝气逆证的发生密切相关;白香丹可对GBR1、GBR2的表达起到调节作用。     

经前平和经前舒颗粒对愤怒郁怒情绪模型大鼠下丘脑γ氨基丁酸B2受体表达的影响

目的 探索愤怒、郁怒情绪与γ氨基丁酸B2受体(GABABR2)的关系,以及调肝方药经前平颗粒和经前舒颗粒的中枢干预机制.方法采用居住入侵和社会隔离的方法复制愤怒、郁怒情绪大鼠模型,用RT-PCR和Western Blot的方法检测GABARR2 mRNA和蛋白的表达差异.结果与正常对照组相比,愤怒、郁怒情绪模型大鼠下丘脑GABABR2 mRNA水平和蛋白水平均明显下降(P＜0.01～0.05),而且愤怒模型组的降低程度明显大于郁怒模型组.与各模型组相比,各给药组GABABR2 mRNA水平和蛋白水平均有不同程度的升高.结论大鼠下丘脑GABABR2表达降低可能是影响大鼠愤怒和郁怒情绪的重要共性机制之一;中药经前平和经前舒颗粒对GABABR2表达异常变化具有调节作用.     

舒郁胶囊含药血清对大鼠海马神经元 γ氨基丁酸B2受体蛋白表达的影响

目的:观察抑郁情绪大鼠模型给药血清对离体海马神经元γ氨基丁酸B2受体( GABAB R2)蛋白表达的影响,初步探讨舒郁胶囊及其君药柴胡对抑郁情绪的干预作用和机制.方法:35只Wistar大鼠随机分为5组:正常组、模型组、舒郁组(0.51 g·kg-1)、柴胡组(0.4 g·kg-1)和氟西汀组(0.002 g·kg-1),采用28 d慢性温和刺激(CMS)制备抑郁情绪大鼠模型,治疗组造模的同时灌胃给药,通过大鼠体重、糖水摄入量、旷场实验对模型进行评价,评定模型复制成功后,制备各组大鼠血清,采用血清药理学方法,通过抑郁情绪模型大鼠各组血清干预大鼠原代海马神经元,应用蛋白免疫印迹技术,检测海马神经元GABABR2的蛋白表达.结果:与正常组大鼠相比,模型组体质量、糖水实验的糖水摄入、旷场实验总分均显著减少(P＜0.01);而造模并分别给予舒郁、柴胡和氟西汀的大鼠较模型组大鼠体质量、糖水实验的糖水摄入、旷场实验总分显著增加(P ＜0.05,P＜0.01).蛋白免疫印迹结果显示,与正常组血清干预的海马神经元相比,模型血清组海马神经元GABABR2蛋白表达显著升高(P＜0.01);造模并给予舒郁胶囊血清组和氟西汀血清组干预的大鼠海马神经元GABA8 R2蛋白表达较模型血清组显著降低(P＜0.05),柴胡组有改善的趋势,但无显著性差异.结论:抑郁情绪模型大鼠血清可诱导大鼠海马神经元GABABR2蛋白表达上调,舒郁胶囊可能是通过降低海马神经元GABA8R2蛋白表达发挥抗抑郁作用.     

舒郁胶囊对抑郁情绪模型大鼠海马和下丘脑内5-羟色胺3B受体分布与表达的影响

目的:检测抑郁情绪模型大鼠海马、下丘脑内5-羟色胺3B受体(5-HT3BR)蛋白分布、表达的变化,初步探讨舒郁胶囊对抑郁情绪的干预机制。方法:筛选大鼠进入实验,分为正常组、模型组、舒郁胶囊组(0.4 g.kg-1)、氟西汀组(0.002 g.kg-1),采用慢性温和性刺激法(chronic mild stress,CMS)制备抑郁情绪大鼠模型,以造模前后体重及糖水偏好值评价模型,采用免疫荧光技术检测大鼠海马和下丘脑内5-HT3B R的表达分布,以平均荧光强度(MFI)为指标对各组大鼠海马和下丘脑内5-HT3BR进行定量。结果:与正常组大鼠相比,模型组大鼠体重显著减轻(P<0.01),糖水摄入量也显著减少(P<0.01),5-HT3BR蛋白在海马和下丘脑中的表达水平显著升高(P<0.01);与模型组相比,舒郁胶囊组和氟西汀组大鼠体重增长显著(P<0.01),糖水摄入量显著增加(P<0.01),5-HT3BR蛋白在海马和下丘脑中的表达水平明显降低(P<0.01),但两组之间没有显著性差异。结论:5-HT3BR表达水平的上调可能与抑郁情绪的产生关系密切;舒郁胶囊可对抑郁情绪模型大鼠海马、下丘脑5-HT3BR表达水平的变化起到纠正作用。     

白香丹胶囊对PMS大鼠皮层神经元细胞相对活力及GABAAR介导氯离子通道的影响

目的:探讨白香丹胶囊(BXD)治疗经前期综合征(premenstrual syndrome,PMS)肝气逆证大鼠的中枢作用机制.方法:筛选合适大鼠,随机分为正常造模组、BXD给药组;采用旷场实验进行大鼠行为学评价,采用MTT法和全细胞膜片钳技术测定大鼠含药血清对离体皮层神经元细胞相对活力和γ-氨基丁酸A受体(GABAAR)介导氯离子通道的影响.结果:旷场实验中,与正常模型组相比,BXD给药组大鼠水平得分、垂直得分及旷场实验总分均明显减少(P＜0.05);MTT实验中,与正常模型组相比,给药24,48 h后,BXD给药组神经元MTT值显著增加(P＜0.05);电生理实验中,离体大鼠皮层神经元细胞经正常模型组大鼠血清和BXD给药组大鼠血清处理后,曲线拟合参数EC50和nH分别为(63.5±8.2)μmol·L-1,(1.04±0.10)和(29.0±4.4)μmol·L-1,(1.07±0.16);其中EC50(正常)＞EC50(BXD),差异有统计学意义(P＜0.01),而nH(BXD)＞nH(正常组),差异无统计学意义.结论:BXD可明显减少大鼠旷场实验得分,可有效提高大鼠皮层神经元细胞活力和GABAAR活性;paeonimetabolins Ⅰ,paeonol可能就是BXD治疗PMS有效物质成分,而paeonol很可能通过作用于GABAAR这一靶点来发挥药效作用.     

白香丹胶囊对经前期综合征肝气逆证模型大鼠下丘脑类固醇激素受体表达的影响

目的 观察白香丹胶囊对模型大鼠下丘脑类固醇激素受体表达的影响,探讨该药治疗经前期综合征（PMS）肝气逆证的中枢作用靶点.方法 以情志刺激多因素法复制PMS肝气逆证大鼠模型,经中药白香丹胶囊干预,采用免疫荧光标记结合激光流式细胞仪、激光共聚焦显微镜检测下丘脑中主要的类固醇激素受体（雌激素受体α、孕酮受体）的蛋白水平表达量及定位分布模式.结果 白香丹胶囊能够显著上调PMS肝气逆证模型大鼠下丘脑中类固醇激素受体（雌激素受体α、孕酮受体）的蛋白表达水平.结论 下丘脑中雌激素受体α、孕酮受体是白香丹胶囊的两个重要作用靶位,该药可能通过上调上述两种受体的蛋白表达水平发挥其疗效.     

白香丹胶囊对PMS肝气逆证模型大鼠海马GABAAR β2亚基蛋白分布模式及表达水平的影响

目的:探讨中药复方白香丹胶囊(BXD)对经前期综合征(premenstrual syndrome,PMS)肝气逆证模型大鼠海马中γ-氨基丁酸A受体(GABAAR)β2亚基蛋白分布模式及表达水平的影响.方法:阴道涂片镜检法和旷场实验筛选合适大鼠,随机分为正常组、肝逆组和肝逆给药组(BXD给药剂量10 g·kg-1·d-1,给药5 d);电刺激法复制PMS肝气逆证模型,同时采用宏观行为学观察和旷场实验来评价模型;免疫荧光技术和蛋白印迹技术(Western Blot)测定大鼠海马神经元中GABAA R β2亚基蛋白分布模式及表达水平.结果:与正常组相比,肝逆组大鼠旷场实验得分明显增加,海马神经元GABAAR较集中分布于组织边缘,β2亚基蛋白表达水平显著升高(P＜0.01);而造模同时给予BXD后,大鼠旷场实验得分明显减少,海马神经元GABAAR分布模式无明显变化,而β2亚基蛋白表达水平显著降低(P＜0.05).结论:大鼠海马神经元GABAA R β2亚基蛋白表达水平上调可能是与PMS肝气逆证密切相关的重要微观机制之一;中药复方BXD可对GABAA R β2亚基蛋白表达水平变化起到纠正作用.     

白香丹胶囊对PMDD肝气逆证模型大鼠海马NMDAR1亚基蛋白分布及表达的影响

目的：以PMDD肝气逆证模型大鼠为载体,研究PMDD肝气逆证的病机以及白香丹胶囊对本病的干预机制。方法：改进情志刺激为主多因素分段刺激造模法,复制PMDD肝气逆证大鼠模型;用白香丹胶囊和氟西汀分散片予以干预,最后进行旷场实验评价模型;免疫荧光技术和蛋白印迹技术检测大鼠海马CA1、CA3区NMDAR1受体亚基分布情况及表达水平。结果：模型组大鼠与正常组相比较,其旷场实验的运动总距离明显增加（P<0.001）、中央区域的进入次数及停留在中央区域的时间显著减少（P<0.01）,海马CA1、CA3区细胞呈现稀疏杂乱的分布状态,且同氟西汀组一样,其NMDAR1蛋白表达量明显降低;白香丹组大鼠与模型组相比较,其旷场实验的运动总距离明显降低（P<0.05）、中央区域的进入次数和停留在中央区域的时间明显增多（P<0.05）,而氟西汀组与之相比,除了运动总距离明显降低（P<0.05）,其它指标不存在显著性差异,同氟西汀组一样,白香丹组大鼠海马CA1、CA3区细胞分布、排列无显著异常,但其NMDAR1蛋白表达量显著升高（P<0.0001）;氟西汀组大鼠与白香丹组相比较,其NMDAR1蛋白表达量明显降低（P<0.05）。结论：情志刺激为主多因素分段刺激造模法对大鼠学习记忆能力的损伤机制可能与大鼠海马CA1、CA3区神经细胞的减少和NMDAR1亚基的表达量降低有关,白香丹胶囊通过调整NMDAR1蛋白表达量纠正上述异常改变,从而改善大鼠的学习记忆能力。     

白香丹胶囊干预经前期综合征肝气逆证大鼠血清代谢组学研究

目的通过代谢组学方法研究白香丹胶囊(白芍、香附和丹皮)干预经前期综合征肝气逆证大鼠血清内源性代谢物的变化,探索与该病证密切相关的代谢模式及白香丹胶囊的作用途径。方法基于代谢组学理论,以UPLC/Q-TOF-MS为技术平台,建立大鼠血清代谢指纹谱,通过多元统计分析方法研究PMS肝气逆证大鼠血清的代谢差异及白香丹的干预作用。结果模型组、给药组与对照组的血清内源性代谢物发生了明显变化,模型组血清中肾上腺素、四氢脱氧皮质酮、5a-四氢皮质醇、雌酚酮、赖氨酸、5-羟基赖氨酸、乙酰半胱氨酸水平升高,孕二醇水平降低,给药组中显示白香丹胶囊对其有调节作用。白香丹表现出糖皮质激素、雌激素、神经递质及氨基酸等多靶点的作用特点。结论应用代谢组学方法可以从整体出发研究PMS肝气逆证及中药复方干预后的代谢模式差异,为PMS的临床诊断和治疗提供依据。     

白香丹胶囊对经前期综合征肝气逆证模型猕猴表情行为及性激素的影响

目的:研究白香丹胶囊(白芍、香附)对经前期综合征(PMS)肝气逆证模型猕猴表情行为及性激素指标的影响。方法:选择24只高地位处在排卵期猕猴,放入挤压笼中,每天挤压7h,连续挤压造模5d,造模同时口服给药,对照组服用经前平颗粒;采用《雌性实验猕猴情绪评价量表》评定猕猴表情行为的变化,采用放射免疫法测定血清中泌乳素(PRL)、雌二醇(E2)、孕酮(P)含量。结果:造模后猕猴愤怒因子积分显著增加,血清中E2、P含量显著降低,PRL含量明显升高。与对照组相比,白香丹胶囊可明显降低造模猕猴愤怒因子积分,增加血清中P与E2含量,降低PRL含量。结论:白香丹胶囊对PMS肝气逆证猕猴情绪及性激素异常具有较好的调节作用,能够使其恢复或接近正常水平。     

HPLC法对白香丹胶囊中芍药苷在大鼠体内药时曲线的测定

目的：本研究通过HPLC法对白香丹胶囊大鼠含药血清的检测,确定其主要药效成分芍药苷在体内代谢的药时曲线,并找出最佳采血时间,为后续机制研究奠定基础。方法：通过方法学考察确定所采用HPLC的准确度和精密度;给予白香丹胶囊溶液lmL/100g,连续给药3天,每天2次;给药后在不同时间点对大鼠进行眼眶静脉丛取血,白香丹胶囊组取血时间点分别为：10、20、40、60、90、120、180、240、300、360min,离心15min,3000r·min^-1,取血清;将大鼠血清与甲醇按1?4混合,4℃离心,取上清液,氮气吹干,流动相定容至100μL,过滤后进行测定。结果：方法学考察结果显示,日内精密度和日间精密度RSD<3%,回收率均在98.0%-102.0%;制备药时曲线显示末次给药2h左右含药血清中芍药苷含量达到峰值。结论：通过方法学考察说明所采用HPLC方法日内精密度和日间精密度良好,回收率在标准范围内,符合定量检测要求;采用该方法所得药时曲线说明该复方中主要药效成分芍药苷在2h后血药浓度最大,可作为复方含药血清提取的最佳采血时间,这将为后续该复方治疗机制研究提供科学依据。     

广枣总黄酮对离体大鼠心脏cAMP含量和腺苷酸环化酶活性的影响

为探讨广枣总黄酮（TFC）抗心律失常的作用机制,采用竞争性蛋白结合分析法,测定心肌组织cAMP含量和腺苷酸环化酶（AC）活性,结果表明,TFC50,100,200ug/ml均可明显抑制离体大鼠心肌组织中的AC活性,TF100mg/L可使CAMP含量明显下降。     

通脉活血灵胶囊对实验性高脂血症家兔血脂及动脉粥样硬化的影响

观察通脉活血灵胶囊对实验性高脂血症家兔血脂调节变化和动脉粥样经形成的影响。实验结果表明,高脂饲料喂养家兔可导致高脂血症,并可诱发动脉弱样硬化。     

黄丹益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠的防治作用实验研究

目的:为观察黄丹益肾胶囊(黄芪、丹参)(HDC)对糖尿病肾病(DN)大鼠的治疗作用.方法:采用高糖、高脂、高胆固醇饲料喂养Wistar大鼠致胰岛素抵抗后用链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病肾病大鼠模型,形成高血糖后随机分为5组,连续给药10周,观察用药前后大鼠一般情况、血糖,10周后测定肾功能指标并作病理组织学检查.结果:黄丹益肾胶囊能明显改善Ⅱ型糖尿病肾病大鼠的精神状况,增加大鼠体重,减少大鼠的24 h尿量;降低Ⅱ型糖尿病肾病大鼠血清肌苷和尿素氮的含量,降低尿微量白蛋白的含量;减轻高血糖引起的大鼠肾小球基底膜(GBM)增厚、触突排列紊乱融合、线粒体肿胀变性等病理改变,可较好地保护DN大鼠肾脏的超微组织结构;并有一定的降糖作用;结论:提示黄丹益肾胶囊对Ⅱ型糖尿病肾病有明显的防治作用,同时还有一定的降糖作用.     

复方光明胶囊对光损伤SD大鼠闪光视网膜电图的影响

目的观察复方光明胶囊对SD大鼠视网膜光损伤后闪光视网膜电图(flash electroretinogram,F-ERG)的影响。方法 SD大鼠30只(60只眼),随机分为正常对照组、模型对照组、低剂量治疗组、中剂量治疗组、高剂量治疗组。通过手术显微镜光源持续照射造模,以形成实验性SD大鼠视网膜光损伤模型,治疗组以高、中、低不同剂量的复方光明胶囊混悬液灌胃,空白对照组及模型对照组以生理盐水灌胃,造模后连续灌胃给药2周,并于灌胃前、后行闪光视网膜电图检查,观察闪光视网膜电图a、b波振幅值变化情况。结果正常对照组的视网膜电图a、b波振幅均较模型对照组高,差异有统计学意义(P<0.05);高、中、低剂量组a、b波振幅值均较模型组有不同程度增加,差异有统计学意义(P<0.05)。高剂量组a、b波振幅值较低、中剂量组振幅值高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论复方光明胶囊对视网膜光损伤具有一定的防治作用。     

聪灵胶囊对血管性痴呆模型大鼠脑组织乙酰胆碱酯酶的影响

目的观察聪灵胶囊对血管性痴呆模型大鼠脑组织乙酰胆碱酯酶(AchE)的影响,分析聪灵胶囊改善血管性痴呆学习记忆能力的作用机制。方法采用永久性结扎双侧颈总动脉法复制大鼠血管性痴呆模型,聪灵胶囊大、中、小3个剂量组灌胃给药30d观察学习记忆能力后,测定脑组织AchE活性。结果聪灵胶囊大剂量组可改善AchE活性,与模型组比较显著性降低。结论聪灵胶囊可通过改善AchE活性,从而改善血管性痴呆学习记忆能力。