视网膜母细胞瘤中p53蛋白表达的研究

视网膜母细胞瘤中ｐ５３蛋白表达的研究郭浩轶宋绣雯刘政国张成关键词视网膜母细胞瘤蛋白质ｐ５３／分析免疫细胞化学视网膜母细胞瘤（ｒｅｔｉｎｏｂｌａｓｔｏｍａ，ＲＢ）的发生与位于染色体１３ｑ１４的Ｒｂ抗癌基因的失活有关。以往对ＲＢ的研究多集中于对Ｒｂ基因的...     

Rb1基因在双眼视网膜母细胞瘤病人体细胞中杂合性突变的检测

目的对５０例眼视网膜母细胞瘤（ｒｅｔｉｎｏｂｌａｓｔｏｍａ，ＲＢ）病人进行外周血体细胞Ｒｂ１基因杂合性突变的检测工作。方法ＰＣＲ－ＳＳＣＰ（单链构像多态分析）直接测序技术。结果改进的方法可以检测出Ｒｂ１基因１～１０个碱基的多种类型的微小突变。结论可将此快速、敏感、有效的方法用于阐明Ｒｂ１基因突变机制并可以对此类病人及家系在分子水平上进行ＲＢ的产前诊断、产后早期诊断及遗传咨询。     

Rb1基因第16内含子21个碱基缺失1例

目的 研究双眼视网膜母细胞瘤患者Ｒｂ１基因杂合性突变的分子生物学特性。方法 应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ直接测序技术检测双眼视网膜母细胞瘤患者白细胞ＤＮＡ中Ｒｂ１基因杂合性突变。结果５０例证实用Ｒｂ１基因杂合性突变的病例中有１例发生于第１６内含子可以用３种定位方法解释，具有相同序列的２１个碱基缺失。结论 这种极为少见的Ｒｂ１基因突变方式可能是由于破坏了正常拼接位点的结构而激活了“隐蔽拼接位点”导致异常的Ｒ     

视网膜母细胞瘤细胞系HXO—Rb44抑癌基因的表达

目的检测视网膜母细胞瘤（ＲＢ）细胞系ＨＸＯＲｂ４４中抑癌基因Ｒｂ的表达状况,为进一步研究ＲＢ的发病机制,利用抑癌基因Ｒｂ进行ＲＢ的基因治疗提供实验依据。方法用ＳＰ免疫组织化学（ＩＨＣ）及流式细胞术（ＦＣＭ）间接免疫荧光法对Ｒｂ基因的表达进行定性、形态学定位及定量检测。结果ＩＨＣ法检测显示：正常视网膜组织中Ｒｂ蛋白呈阳性反应,位于细胞核呈棕黄色;ＨＸＯＲｂ４４中Ｒｂ蛋白表达阴性。ＦＣＭ检测显示：正常人淋巴细胞Ｒｂ蛋白表达量是ＨＸＯＲｂ４４细胞的３．７１倍,ＨＸＯＲｂ４４中Ｒｂ蛋白表达量极低。结论ＲＢ细胞系ＨＸＯＲｂ４４中存在野生型Ｒｂ基因的功能失活,Ｒｂ基因的突变失活与ＲＢ的发生密切相关。     

非缺失性RB1基因突变的研究

使用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ联合序列分析法，对视网膜母细胞瘤ＲＢ１基因的存在状态进行检测。分析发现ＲＢ１基因第６外显子Ｔ至Ｇ杂合突变，第１０外显子上游１ｂｐ处Ｇ至Ｃ杂合突变，第１６外显子中ＡＴ插入改变，第２３外是业子中Ｇ至Ｔ杂合突变。这些非缺失性ＲＢ１基因的突变似乎是随机分布基因组内，改变了ＲＢ１基因的遗传信息，致使异常的ＲＢ１的蛋白产生，弱导致视网膜母细胞瘤的发生。     

简便基因诊断在视网膜母细胞瘤风险预测的临床应用

本文为了在视网膜母细胞瘤（ＲＢ）基因生殖细胞性突变筛查的基础上，了解一种简便实用基因突变检测方法在ＲＢ临床基因诊断的应用情况。根据家族中ＲＢ患者生殖细胞性突变的位置，用ＰＣＲ方法选择性扩增待检个体ＲＢ基因特定外显子，然后应用异源双链（ｈｅｔｅｒｏｄｕ－ｐｌｅｘ）—单链构象多态（ＳＳＣＰ）法分析ＰＣＲ产物，检测有无相突变。结果：对４个遗传性ＲＢ家系的同胞或子女作出症状前基因诊断。经１５—３３个月的随访确认了基因诊断的可靠性。结论：ＲＢ基因生殖细胞性突变检测是大多数视网膜母细胞瘤产前与症状前基因诊断的前提。在一个家系中一旦确定ＲＢ基因生殖细胞性突变，则很容易对患者同胞及子女作出明确基因诊断与风险预测。异源双链—ＳＳＣＰ法是简便实用的ＲＢ基因诊断方法。     

点突变对RB1基因拚接区的影响

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ联合序列分析对视网膜母细胞瘤肿瘤组织ＲＢ１基因存在状态进行检测，以掌握视网膜母细胞瘤发生时确切的ＲＢ１基因突变类型及发生位置。除发现编码区内ＲＢ１基因点突变、缺失和插入改变处，尚发现成熟ｍＲ－ＮＡ拚接位点特有序列的点突变，ＲＢ１基因此种改变尚属少见。     

视网膜母细胞瘤抑制基因分子生物学研究进展

视网膜母细胞瘤（ＲＢ）由于仅发生在婴幼儿，又有遗传与非遗传二种形式，一直被认为是研究肿瘤遗传学及肿瘤发病机理的理想模式。有关肿瘤发生的“二次突变论”、“隐形调节基因假说”及“抗癌基因理论”都是在研究ＲＢ的基础上建立并完善的。目前Ｒｂ基因研究是当今国际上肿瘤学、细胞生物学及分子生物学的前沿课题，因为Ｒｂ基因除参与ＲＢ肿瘤的形成外，在正常细胞周期的调控及多种不同组织学来源的恶性肿瘤发生发展中也起重要作     

点突变对RB1基因拚接区的影响

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ（聚合酶链反应－单链构象多态）联合序列分析对视网膜母细胞瘤肿瘤组织ＲＢ１基因存在状态进行检测，以掌握视网膜母细胞瘤发生时确切的ＲＢ１基因突变类型及发生位置。除发现编码区内ＲＢ１基因点突变、缺失和插入改变外，尚发现成熟ｍＲ－ＮＡ拚接位点（ｓｐｌｉｃｅｄｏｎｏｒ）特有序列的点突变，ＲＢ１基因此种改变尚属少见。     

视网膜母细胞瘤抑制基因分子生物学研究进展

视网膜母细胞瘤（ＲＢ）由于仅发生在婴幼儿，又有遗传与非遗传二种形式，一直被认为是研究肿瘤遗传学及肿瘤发病机理的理想模式。有关肿瘤发生的“二次突变论”、“隐性调节基因假说”及“抗癌基因理论”都是在研究ＲＢ的基础上建立并完善的。目前Ｒｂ基因研究是当今国际上肿瘤学、细胞生物学及分子生物学的前沿课题，因为Ｒｂ基因除参与ＲＢ肿瘤的形成外，在正常细胞周期的调控及多种不同组织学来源的恶性肿瘤发生发展中也起重要作用。本文着重对Ｒｂ基因的克隆、Ｒｂ基因产物的结构、性质与功能，特别是Ｒｂ基因在细胞周期调控及恶性肿瘤发病中的作用等方面的新发现、新成就作一比较全面详细的综述。旨在让更多的眼科同道们了解Ｒｂ基因的重要性，以及ＲＢ研究的发展动向。     

Rb基因诱导视网膜母细胞瘤移植瘤细胞凋亡的实验研究

目的观察外源性Ｒｂ基因对视网膜母细胞瘤（ＲＢ）细胞凋亡的影响。方法建立裸鼠眼玻璃体腔ＲＢ移植瘤模型及构建Ｒｂ基因的逆转录病毒表达载体Ｐｂａｂｅ－Ｒｂ，用脂质体Ｄｏｓｐｅｒ介导法将Ｒｂ基因导入裸鼠ＲＢ移植瘤，采用流式细胞术（ＦＣＭ），光镜、电镜及ＴＵＮＥＬ细胞凋亡原位末端标记法进行ＲＢ细胞凋亡的检测。结果Ｒｂ基因在ＲＢ移植瘤内表达至少持续７天。ＦＣＭ检测发现在Ｒｂ基因转染后第４天，各实验组治疗眼ＲＢ中均可检测到凋亡细胞峰，凋亡细胞百分率高于对照眼；第２０天，各实验组治疗眼细胞凋亡百分率与对照眼比无差异（Ｐ＞０．０５）。透射电镜下可见到典型的早期凋亡细胞及晚期凋亡小体形成。ＴＵＮＥＬ方法可在荧光显微镜下见到发黄绿色荧光的凋亡细胞，光镜下可见到紫红色的被标记的凋亡细胞。结论Ｒｂ基因可诱导ＲＢ移植瘤细胞凋亡，这可能是Ｒｂ基因体内抗癌的又一作用机制。     

运用PCR－VNTR技术结合银染色检测Rb基因的缺失

运用ＰＣＲ－ＶＮＴＲ技术结合银染色对视网膜母细胞瘤、肝癌组织Ｒｂ基因进行了检测，发现９例视网膜母细胞瘤组织中有４例（４４．４％），４２例肝癌组织中有８例（１９．０４％）存在Ｒｂ基因的缺失。认为ＰＣＲ－ＶＮＴＲ技术结合银染色是一种快速灵敏检出Ｒｂ基因缺失的方法，适于在临床运用。     

汉防己甲素对视网膜母细胞瘤细胞系HXO－Rb_（44）放射敏感性的影响

研究汉防己甲素（Ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ，ＴＤＲ）对人视网膜母细胞瘤细胞系ＨＸＯ－Ｒｂ４４放射敏感性的影响，发现ＴＤＲ在低剂量（０．１μｇ／ｍｌ）时，虽对Ｒｂ细胞无直接抑制作用，但可明显增加放射线对Ｒｂ细胞的杀伤作用。随着药物浓度的增加，细胞杀伤率增高。放射前后给药无明显差别。ＴＤＲ主要通过抑制细胞的潜在致死性损伤的修复增加放疗效果。     

增殖细胞核抗原及核仁组成区嗜银蛋白与视网膜母细胞瘤预后的…

探讨视网膜母细胞瘤细胞的增殖活性与患者预后的关系。应用抗增殖细胞核抗原单克隆抗体ＰＣ－１０，采用ＬＳＡＢ免疫组织化学方法及Ｐｌｏｔｏｎ银染技术，对４８例Ｒｂ石蜡标本进行ＰＣＮＡ和核仁组成区嗜银蛋白检测。结果 Ｒｂ组织ＰＣＮＡ标记与其相对应组织切片的ＡｇＮＯＲｓ计数有显著相关性。     

RB遗传学及最新诊断技术

视网膜母细胞瘤（ｒｅｔｉｎｏｂｌａｓｔｏｍａ，ＲＢ）是婴幼儿最多见的眼内恶性肿瘤，分为遗传型和非遗传型。遗传型发病早，多为双眼发病，发生第二肿瘤的危险性较高。遗传学检查可以确诊遗传型病例，预测家系成员发病危险及筛查突变基因携带者。Ｒｂ基因是人类第一个被分离的抑癌基因，于１９８６年分离并克隆成功后，分子生物学技术应用于ＲＢ遗传学的研究，显示了重要作用和广阔前景。本文就ＲＢ遗传学和最新的分子生物学检测技术作一综述。     

视网膜母细胞瘤房水烯醇化酶定量检测的临床研究

视网膜母细胞瘤房水烯醇化酶定量检测的临床研究毛羽翔吴中耀杨华胜潘苏华梁舜薇黄强关键词视网膜母细胞瘤／酶学磷酸丙酮酸水合酶／分析视网膜母细胞瘤（ｒｅｔｉｎｏｂｌａｓｔｏｍａ，ＲＢ）是婴幼儿最常见的眼内恶性肿瘤，临床上少数非典型ＲＢ病例虽经各种检查仍可能...     

视网膜母细胞瘤的基因诊断和遗传咨询

视网膜母细胞瘤的基因诊断和遗传咨询黄倩陶勇浩ＤａｖｉｄＷ．Ｙａｎｄｅｌ１ＲＢ基因诊断的目的意义与基础视网膜母细胞瘤（ｒｅｔｉｎｏｂｌａｓｔｏｍａ，ＲＢ）起源于眼底视网膜神经上皮细胞，恶性程度很高，严重危害患者的视力和生命。但如能早期诊断，及时治疗，预...     

视网膜母细胞瘤的细胞DNA倍体与组织类型和预后的关系

将２７例有随访资料的视网膜母细胞瘤（简称Ｒｂ）手术摘除的标本，按照ＷＨＯ标准，病理形态上分为未分化型Ｒｂ（Ｒ０）和分化型Ｒｂ（Ｒ），采用医学细胞图像处理系统（Ｍｅｄｉｃａｌｌｍａｇｅ Ｓｙｓｔｅｍ）测定瘤细胞中的ＤＮＡ倍体（Ｃ）分布，并与对照组进行比较，结果提示：分化好的Ｒｂ，视神经未受侵的Ｒｂ，ＤＮＡ倍体中〉２Ｃ比率低的Ｒｂ，发病年龄较大的Ｒｂ，发病后就诊早的Ｒｂ，其预后较好，预后与性别无关，放     

视网膜母细胞瘤的彩色多普勒超声诊断分析

视网膜母细胞瘤的彩色多普勒超声诊断分析王兰杨文利胡士敏王景昭【关键词】视网膜母细胞瘤／超声检查超声检查，多普勒，彩色中国图书资料分类法分类号Ｒ７３９．７Ｒ７７０．４２６．４３视网膜母细胞瘤（ｒｅｔｉｎｏｂｌａｓｔｏｍａ，ＲＢ）是婴幼儿常见的眼内恶性肿...     

视网膜母细胞瘤的细胞DNA倍体与组织类型和预后的关系（摘要）

视网膜母细胞瘤的细胞ＤＮＡ倍体与组织类型和预后的关系（摘要）刘安，吴秀红，郑庆旋，盛迎伦，高鹏飞将２７例有随访资料的视网膜母细胞瘤（ｒｅｔｉｎｏｂｌａｓｔｏｍａ，Ｒｂ）手术摘除的标本，按照ＷＨＯ标准，病理形态上分为未分化性视网膜母细胞瘤（Ｒｏ）和分化...