高血压大鼠骶髓内含氧化－氮合酶神经元的研究

高血压大鼠骶髓内含氧化－氮合酶神经元的研究（北京医科大学解剖学教研室，北京１０００８３，于恩华，沈丽，杨磊，许鹿希）近期研究证实，在某些病理条件下，氧化一氮合酶（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ，ＮＯＳ）阳性神经元会有变化。本研究用ＮＤＰ染色法...     

大鼠小肠肌间神经丛一氧化氮合酶阳性神经元的发育研究

大鼠小肠肌间神经丛一氧化氮合酶阳性神经元的发育研究（第三军医大学组织学与胚胎学教研室，重庆６３００３８肖岚，蔡文琴）近年来的研究提示，一氧化氮为一类特殊的神经递质，并且认为神经系统的一氧化氮合酶（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ，ＮＯＳ）就是Ｎ...     

一氧化氮合酶在人吞噬细胞的表达上调TNF—α生成

本研究用鼠巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶（ｉｎｄｕｃｉｂｌｅｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ，ｉＮＯＳ）ｃＤＮＡ构建质粒表达载体，由电钻孔方法导入人单核细胞样细胞Ｕ９３７，经抗性标记筛选获得ｉＮＯＳ稳定表达细胞，蛋白印迹法证实，ｉＮＯＳ基因转当细胞表达了鼠巨噬细胞一氧化氮合酶，该细胞可随培养时间延长测得一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ，ＮＯ）的稳定代谢产物硝酸盐和亚硝酸盐含量积累增加，这种积累增     

左型精氨酸减轻心肌缺血再灌注损伤的实验研究

以往实验证实，心肌缺血再灌注损伤（ｍｙｏｃａｒｄｉａｌｉｓｃｈｅｍｉａ－ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｉｎｊｕｒｙ，ＭＩＲＩ）与内源性一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ，ＮＯ）水平下降有关。本研究观察左型精氨酸（Ｌ－ａｒｇｉｎｉｎｅ，Ｌ－Ａｒｇ）对ＭＩＲＩ时血...     

诱导型一氧化氮合酶(iNOS)与动脉血压的调节

一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ,ＮＯ）具有强大的扩血管作用,体内ＮＯ的合成由一氧化氮合酶（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ,ＮＯＳ）催化底物精氨酸（Ｌ－ａｒｇｉｎｉｎｅ,Ｌ－Ａｒｇ）的氨基上的Ｎ与分子氧（Ｏ２）结合生成。目前已经证明至少存在三种ＮＯＳ,即内皮型ＮＯＳ（ｅＮＯＳ）、诱导型ＮＯＳ（ｉＮＯＳ）及神经型ＮＯＳ（ｎＮＯＳ）。虽然大量的研究表明ｅＮＯＳ在血液动力学中具有极其重要的调节作用,但有关ｉＮＯＳ在血液动力学中的作用却知之甚少。我们以前的工作表明,高盐能刺激ＳＤ大鼠ＮＯ的生成及…     

内源性一氧化氮的研究进展

内源性一氧化氮的研究进展广州暨南大学医学院病理生理教研室（５１０６３２）王华东，李楚杰从传统概念来看，结构简单、高毒性的小分子化合物一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ）似乎不可能成为哺乳动物体内的生物信使分子（ｍｅｓｓｅｎｇｅｒｍｏｌｅｃｕｌｅ）。然而...     

一氧化氮与前列环素对内皮素—1生物学效应的调节作用

目的和方法：应用肝脏原位灌注模型，观察内皮素－１（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ－１，ＥＴ－１）对肝脏的损伤作用，以及一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ，ＮＯ）和前列环素（ｐｒｏｓｔａｃｙｃｌｉｎ，ＰＧＩ２）对ＥＴ－１生物学效应的调节作用。结果：ＥＴ－１能使肝细胞浊肿变性，增加脂质过氧化物生成和酶的漏出。ＮＯ合成抑制剂能使ＥＴ－１的肝损伤作用加重，ＰＧＩ２和消炎痛能部分减轻ＥＴ－１的肝损伤作用。结论：ＮＯ、ＰＧＩ２对ＥＴ－１的生物学效应并有一定的调节作用     

L—精氨酸对高脂血症大鼠内皮素分沁的影响

Ｌ－精氨酸对高脂血症大鼠内皮素分沁的影响皖南医学院弋矶山医院（芜湖市２４１００１）王安才王春雷俞国华杨尚印在大鼠高脂血症实验中，Ｌ－精氨酸（Ｌ－ａｒｇｉｎｉｎｅ，Ｌ－Ａｒｇ）于逆转一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ，ＮＯ）减少的同时，对血管内皮分泌内皮...     

一氧化氮和内皮素在高血压发病中的作用

高血压发病机理尚未阐明，目前认为高血压是由多种因素致使血压调节功能失调所致。本实验探讨一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ，ＮＯ）、内皮素（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎｅ，ＥＴ）在原发性高血压（ｅｓｅｎｔｉａｌｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ，ＥＨ）发病中作用。材料与方...     

高盐对SD大鼠肾组织一氧化氮合酶(NOS)表达的影响

肾脏作为调节水盐代谢的主要器官,对血流动力学具有极为重要的调控作用。一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ,ＮＯ）是近来所发现的最重要的血管活性物质。我们以前的工作表明肾组织是机体ＮＯ的重要来源之一,肾髓质局部输入一氧化氮合酶（ＮＯＳ）抑制剂ａｍｎｏｇｕａｎｉｄｉｎｅ（ＡＧ）、Ｎω－ｍｏｎｏｍｅｔｈｙｌ－Ｌ－ａｒｇｉｎｉｎｅ（Ｌ－ＮＭＭＡ）等能明显放大高盐所致的ＳＤ大鼠血压升高效应初步证明了肾源性ＮＯ参与了血流动力学的调控。为进一步验证肾源性ＮＯ的这一作用,我们应用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ方法检测了给…     

大鼠下丘脑室旁核的神经支配

本文应用ＨＲＰ追踪、免疫细胞化学与电镜方法研究了大鼠下丘脑室旁核的神经支配。结果显示，中缝背核向室旁核投射的神经元中，部分为５－ＨＴ免疫反应阳性；被盖背外侧核的部分５－ＨＴ神经元也发出纤维投射至室旁核。将ＣＢ－ＨＲＰ注入第三脑室后，电镜下发现室旁核内ＥＶＫ免疫反应阳性树突接受ＨＲＰ反应阳性轴突形成突触，ＨＲＰ免疫反应阳性的树突与阴性轴突的传入形成突触，提示室旁核内ＥＮＫ神经元受触液神经元的突触调控，同时触液神经元又受到其他神经元的突触调控。     

大鼠弓状核内神经紧张素能和P物质能阳性结构的免疫电镜双标记研究

用包埋前免疫电镜双标记技术研究大鼠下丘脑内的神经紧张素(NT)和P物质(SP)分布的超微结构。证实在弓状核内存在NT样和SP样免疫反应阳性的胞体、树突和轴突。NT样和SP样免疫反应阳性的树突和轴突均可接受免疫反应阴性结构的非对称性传入突触。SP样免疫反应阳性轴突终末除可与免疫反应阴性的树突和胞体形成对称性传出突触外, 还可与NT样免疫反应阳性胞体形成对称性轴-体突触。本研究首次直接证实大鼠弓状核内的NT能神经元接受SP能神经的支配。     

下丘脑弓状核内GABA神经元与P物质神经元相互关系的免疫电镜双标研究

为了探讨下丘脑神经内分泌功能的突触调控机制和Ｐ物质（ＳＰ）神经元与γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）神经元之间的相互关系，我们用包埋前免疫电镜ＰＡＰ双标技术，研究了大鼠弓状核内ＳＰ和ＧＡＢＡ神经元的超微结构分布。先以ＤＡＢ为呈色剂显示ＳＰ的免疫反应，然后用钢酸铵－ＴＭＢ法显示ＧＡＢＡ免疫反应，再经ＤＡＢ－氧化钴稳定后作免疫电镜研究。结果观察到，在弓状核内有大量含ＤＡＢ和ＴＭＢ免疫反应产物的神经元结构，ＤＡＢ反应产物为颗粒状或絮状沉淀，电子密度高，弥漫分布；ＴＭＢ反应产物呈针状或块状，散在分布。含ＤＡＢ免疫反应的结构有ＳＰ神经元的胞体、树突和轴突。含ＴＭＢ免疫反应的结构有ＧＡＢＡ神经元的胞体、树突和轴突。两种神经元均为中、小型细胞，在弓状核内混杂分布。含ＳＰ的轴突接受免疫反应阴性轴突的非对称性突触连接；含ＳＰ的树突与含ＧＡＢＡ的轴突形成对称性的轴一树突触。含ＧＡＢＡ的树突接受免疫反应用性轴突的非对称性突触连接，也接受含ＳＰ轴突的非对称性突触连接。本研究不仅在超微水平进一步证实了大鼠弓状核内存在着ＳＰ和ＧＡＢＡ神经元及其末梢，而且首次在形态学上为下丘脑氨基酸能神经元与肽能神经元之间的相互调控提供了超微结构依据。     

大鼠下丘脑弓状核神经元的神经支配

用ＨＲＰ逆行追踪和免疫细胞化学与电镜结合法研究了下丘脑弓状核神经元的神经支配。结果表明，室旁核向弓状核投射的神经元中，有一部分为催产素免疫反应阳性，一部分为后叶加压素免疫反应阳性，视上核也有部分ＯＴ免疫反应阳性神经元发出纤维投射至弓状核。将零乱毒素Ｂ亚单位结合ＨＲＰ注入第三脑室后，可见弓状核内有逆行标记细胞，电镜观察发现弓状核内的脑啡肽免疫反应阳性的树突接受ＨＲＰ反应阳性的触液神经元的轴突形成突触     

正中隆起内NT能神经元的SP能神经支配的免疫电镜双标研究

应用包埋前免疫电镜PAP双标技术,对大鼠下丘脑正中隆起内的神经紧张素(neurotensin,NT)和P物质(substance P,SP)的分布进行了超微结构研究。先用DAB法显示SP免疫反应,然后用钼酸-TMB法显示NT免疫反应,再经DAB-氯化钴稳定后作免疫电镜包埋。电镜观察发现:在正中隆起内SP免疫反应呈电子密度高的颗粒状或絮状沉淀,广泛分布于轴突内的小清亮囊泡周围和基质内;NT免疫反应产物则为电子密度高的针状或块状,散在分布于胞体、树突和轴突内。含SP的轴突可接受免疫反应阴性轴突的传入性突触,也可与阴性树突形成传出性轴-树突触;含NT的树突和胞体均可接受阴性轴突的传入性突触。此外,SP阳性轴突末梢还可与NT阳性神经元的树突棘形成对称性轴-棘突触及与NT阳性轴突形成对称性轴-轴突触。实验结果表明:大鼠正中隆起内的NT能神经元接受SP能神经的支配,为下丘脑神经内分泌的突触调控提供了新的超微结构依据。     

家兔脊髓长下行固有束与坐骨神经运动神经元之间的突触联系

本实验采用成年家兔12只,在上颈髓单侧往入海人酸后,将HRP注入同侧的坐骨神经内,应用HRP逆行追踪结合顺行溃变技术的电镜方法,首次在电镜水平对脊髓长下行固有束终末与坐骨神经运动神经元之间的突触联系进行了研究,结果表明,在坐骨神经运动神经元的胞体及近侧树突表面发现有少量的溃变终扣.根据溃变终扣的外形可分为圆形和长形,根据溃变终扣内突触小泡的形状可分为圆形和椭圆形.突触联系包括:(1)溃变终扣与标记胞体及树突形成轴一体、轴一树突触;(2)溃变终扣与非标记胞体及树突形成轴一体、轴一树突触;(3)正常轴突终末与标记胞体及树突形成轴一体、轴一树突触.本文首次报道,起源于上颈髓的脊髓长下行固有束终末与坐骨神经运动神经元之间存在着直接的突触关系.     

猫三叉神经尾侧脊束核—丘脑—皮质通路在丘脑水平的突触联系

本文采用HRP逆行追踪与顺行溃变结合法对猫三叉神经尾侧脊束核-丘脑-皮质通路在丘脑腹后内侧核内的突触联系型式进行了研究。在电镜下发现,丘脑腹后内侧核內有五种突触联系形式:(1)溃变轴突终末与HRP标记树突形成轴-树突触;(2)溃变轴突终末与HRP标记的胞体形成轴-体突触,上述两类突触型式为该通路在丘脑水平的直接突触联系方式,此外尚有(3)溃变轴突终末与非HRP标记的树突形成的轴-树突触;(4)HRP标记树突与非溃变轴突终末形成轴一树突触;(5)HRP标记树突与非HRP标记的含有突触小泡的突触前树突形成的树-树突触。本文首次报道了三叉丘系纤维与丘脑皮质投射神经元间的直接突触联系方式为轴-树和轴-体突触。同时也发现了以树突为中心的突触复合体,它是该通路在丘脑水平的一个显著特点。     

慢性癫痫模型动物海马内GABA能神经元的超微结构改变

用马桑内酯诱发小鼠性性癫痫模型，借助免疫电镜方法对海马的ＧＡＢＡ能神经元的超微结构进行观察，可见小鼠海马内ＧＡＢＡ免疫反应阳性神经元弥散分布于除锥体细胞层和颗粒细胞层外的各部。慢性癫痫上鼠海马内的ＧＡＢＡ免疫反应性神经元胞体和末梢均呈现程度不同的结构损伤，包括线粒体肿胀，细胞器崩解和神经末梢变性，ＧＡＢＡ样轴突末梢可与免疫反应阴性的树突构成传出性轴－树突触，也可接受免疫反应阴性轴末梢的传入性轴－轴     

大鼠脊髓背角的GABA能神经末梢来源及其突触联系──HRP追踪与免疫细胞化学结合法研究及免疫电镜观察

本文用ＨＲＰ追踪与免疫细胞化学结合法和免疫电镜技术研究了脊髓背角的ＧＡＢＡ神经元的分布、ＧＡＢＡ能末梢的来源及其超微结构联系。结果表明：在脊髓背角Ⅰ～Ⅵ层内均有ＧＡＢＡ神经元胞体和纤维分布，其中Ⅰ～Ⅲ层较为密集，在后外侧束内也存在ＧＡＢＡ能纤维及胞体。脊髓背角的ＧＡＢＡ能神经末梢有３个来源：①延髓的大缝核、隐缝核、苍白缝核及腹侧网状结构的ＧＡＢＡ能神经元；②脊髓固有的ＧＡＢＡ能神经元；③脊神经节的ＧＡＢＡ能神经元。ＧＡＢＡ能末梢可作为突触前成分或突触后成分与未标记末梢形成轴－树突触，也可同时作为突触前、后成分而形成轴－树型自调节突触。结果提示突触前的ＧＡＢＡ能末梢可能对脊髓背角内的其它神经元起抑制和脱抑制作用；同时背角内ＧＡＢＡ能神经元还接受其它神经元的调控。     

GABAergic innervation of corticotropin-releasing hormone (CRH)-secreting parvocellular neurons and its plasticity as demonstrated by quantitative immunoelectron microscopy

GABA has been identified as an important neurotransmitter in stress-related circuitry mediating inhibitory effects on neurosecretory neurons that comprise the central limb of the hypothalamo-pituitary-adrenocortical axis. Using combinations of pre-embedding immunostaining and postembedding immunogold methods at the ultrastructural level, direct synaptic contacts were revealed between GABA-containing terminals and neurosecretory cells that were immunoreactive for corticotropin-releasing hormone (CRH) in the hypothalamic paraventricular nucleus (PVN). The vast majority of axo-dendritic GABA synapses was symmetric (inhibitory) type, and 46% of all synaptic boutons in the medial parvocellular subdivision of the PVN were immunoreactive to GABA. Using the disector method, an unbiased stereological method on serial ultrathin sections, the total calculated number of synaptic contacts within the medial parvocellular subdivision of the PVN was 55.4 x 10(6)/mm(3). On CRH-positive profiles 20.1 x 10(6) GABAergic synaptic boutons were detected per mm(3) in control, colchicine-treated rats. In the medial parvocellular subdivision, 79% of GABAergic boutons terminated on CRH neurons. Following adrenalectomy, which increases the synthetic and secretory activities of CRH neurons, the number of GABAergic synapses that terminate on CRH-positive profiles was increased by 55%. GABA-containing boutons appeared to be swollen, while the contact surfaces of cellular membranes between GABAergic boutons and CRH-positive profiles were shorter in adrenalectomized animals than in controls.Our data provide ultrastructural evidence for direct inhibitory GABAergic control of stress-related CRH neurons and suggest a pivotal role of GABA-containing inputs in the functional plasticity of parvocellular neurosecretory neurons seen in response to adrenalectomy.