基因扩增技术诊断隐原性肝硬化中HCV和HBV感染

应用聚合酶链反应检测35例隐原性肝硬化的血清HCV RNA和HBV DNA,结果两项标志共检出27例,总阳性率77.1％。其中,单项HCV RNA阳性占28.6％(10/35);单项HBV DNA阳性占25.7％(9/25);HCV RNA和HBV DNA双阳性占22.9％(8/35)。表明本地区隐原性肝硬化的发生多与HCV和/或隐匿性HBV感染有关。     

Relationship of hepatitis C virus infection with primary hepatic carcinoma: an investigation of serum HCV RNA in different population groups

A preliminary study on the serum hepatitis C virus(HCV)RNA in 182 pa-tients with different chronic liver diseases and 35 blood donors was carried out with“nested”polymerase chain reaction.It was found that serum HCV RNA was detected in36.6%(34/93)cases of primary hepatic carcinoma(PHC),31.7%(20/63)liver cirrhosis,15.4%(4/26)chronic hepatitis and 2.9%(1/35)blood donors;most of the HCV RNA pos-itive cases(41/58)were complicated with HBV replicating markers;the rate of single posi-tive for HCV RNA was 15.1%(14/93)in PHC,3.2%(2/63)in liver cirrhosis,and 3.8%(1/26)in chronic hepatitis.These findings imply that about 20% of PHC cases appear tobe related to the coinfection of HCV and HBV and 15% of PHC cases are related to sin-gle HCV infection.     

应用巢式PCR检测原发性肝癌患者血清中HCV—RNA

为了探讨原发性肝癌的发生是否与丙型肝炎病毒有关,应用巢式PCR技术和ELISA检测40例原发性肝癌患者及50例除外肝病患者血清中HCV—RNA及抗HCV抗体和乙肝二对半。结果:原发性肝癌组中,乙肝二对半阳性37例(92.5％),抗HCV阳性8例(20％),HCV—RNA阳性13例(32.5％),HCV总感染率为35.0％(14例);对照组分别为16例(40.0％),2例(4.0％)及3例(6.0％)。在3例HBV—M阴性PHC患者中,HCV—RNA阳性2例。结论:在我国PHC的发生不仅与乙肝病毒感染有关,还与丙型肝炎病毒有关。     

原发性肝癌和职业献血员中庚肝病毒感染和核酸序列测定

目的为了解本地区原发性肝癌(PHC)中HGV感染状况和与输血的关系。方法采用逆转录-套式聚合酸链反应法(RT-nPCR)对20例PHC和44例职业献血员进行了HGV-RNA检测，并对3例阳性产物纯化克隆后，采用ABI Pism 377 DNA自动测序仪，对其5＇非编码区基因序列(115～467nt)进行了测定。结果20例PHC中，2例(10.0％)HGV-RNA阳性，该2例分别为HBV、HCV三重感染和HBV三重感染和HBV、HGV重叠感染，且均有输血史；44例职业献血员中，1例(2.3％)HGV-RNA阳性。该3株HGV核苷酸序列同源性为97.3％～98.8％，与GBV-C(U36380)、HGV(U44402)和HGV3型(D90601)的核苷酸同源性分别为88.3％～89.4％、88.4％～89.7％和95.2％～96.3％。结论PHC中HGV感染与输血有关；HGV可能与PHC的发生无关。本地区HGV感染株属基因3型。     

慢性肝病中丙型肝炎病毒感染分析

<正> 自1989年美国成功地建立了血清丙型肝炎病毒抗体(抗HCV)检测以来,不仅发现输血后肝炎患者血清中60％～80％抗HCV阳性,而且近年来文献报道丙型肝炎约有50％～80％演变为慢性肝炎,20％最终成为肝硬化和肝癌。我国是乙型肝炎高发病率国家,HCV感染在我国慢性肝病(CLD)中所占此例及作用尚不了解,本文对99例CLD患者检测了抗HCV,并结合部分临床资料进行分析,现将结果报道如下:     

丙型肝炎病毒核心抗原检测的临床应用探讨

[目的]探讨HCV核心抗原在HCV感染诊断和治疗中的作用。[方法]对173例HCV感染患者血清和82例健康对照者血清,使用ELISA法分别检测抗-HCV、总的HCV核心抗原,使用荧光定量RT-PCR检测HCV RNA。[结果]173例HCV感染者抗-HCV均为阳性。HCV RNA阳性率为49.7%(86/173);HCV核心抗原阳性率为36.4%(63/173)。二者差异有统计学意义(P<0.05)。86例HCV RNA阳性标本中,HCV核心抗原阳性60例(69.8%);HCV核心抗原阴性26例(30.2%)。82例健康对照者抗-HCV、HCV核心抗原、HCV RNA均为阴性。[结论]在没有HCV RNA检测资格的实验室,HCV核心抗原检测可作为病毒存在和复制的一个指标,作为抗-HCV检测的补充试验。     

基因芯片技术检测乙、丙型肝炎病毒临床研究

探讨基因芯片技术在乙、丙型病毒检测的作用。方法 用迈科锐HBV、HCV联合基因芯片检测血清HBV—DNA和HCV—RNA。结果 基因芯片检测42例HBV—DNA的检出率为86％(26／30)，符合率为88％(37／42)，假阳性为8％(1／12)。检测HCV—RNA检出率为71％(5／7)。符合率为92％(39／42)，假阳性为2％(1／35)。结论 HBV、HCV联合基因芯片检测HBV—DNA和HCV—RNA有较好的敏感性和特异性。     

聚合酶链反应检测血清及肝脏中丙型肝炎病毒核糖核酸的研究

本文报道了简便快速检测血清及肝脏中丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)的聚合酶链反应(PCR)方法。检测单浆献血员61例,其中抗-HCV阳性30例,检出血清HCV RNA阳性者17例;抗-HCV阴性31例,检出血清HCV RNA阳性者9例。检测6例血清HCV RNA阴性、抗-HCV阳性丙型肝炎患者的肝穿标本,发现4例HCV RNA阳性。说明本文所建立的PCR方法是诊断HCV感染的特异性强、敏感度高的一种新方法。检测肝组织内的HCV RNA可提高HCV RNA的检出率。本文还对标本的处理及如何避免假阳性等问题进行了讨论。     

慢性乙型肝炎患者的HCV重叠感染

研究45例慢性乙型肝炎患者的HCV重叠感染。病例均为后发抗HCV阳性的慢性HBsAg携带者,无先抗HCV阳性而后HBsAg阳性的个案,这可能反映HBV和HCV两种病毒感染的先后次序、不同传播方式及HBV对HCV易感性的增进作用。用RT-PCR检出30/45例血浆HCV RNA阳性,不仅确证HCV重叠感染诊断,还证实HCV复制及传染性。23/30例HCVRNA阳性者有输血史,提示输血是其获得HCV重叠感染的主要途迳。用PCR检出25/45例血清HBV DNA阳性,其中抗HBe阳性者的HBV DNA检出率为42.9％(12/18),明显低于(P<0.001)我们前文报道,提示重叠HCV感染对HBV复制有抑制作用。此外有9例抗HBe阳性者,其HBV DNA阴性但HCV RNA阳性,反映HCV可能已取代HBV成为致肝损害的主要病因。     

TT病毒与原发性肝细胞癌发病的关系

目的探讨TT病毒(TTV)感染与原发性肝细胞癌(HCC)之间的关系.方法使用第二代TTV PCR引物,从112例HCC患者、95例无HCC的慢性肝病(CLD)患者及30例健康志愿者血清中检测TTV,每份DNA样本均取自50μl血清.记录各组患者的临床特点(性别、年龄、肝功能、肿瘤特性、其他肝炎病毒指标和输血史),并分析其与TTV感染的关系.结果 (1)TTV DNA在HCC患者的阳性检出率为17.86%(20/112),与在无HCC的CLD患者中的阳性检出率15.78%(15/95)相比,差异无显著性,但均较正常对照组有显著差异(P＜0.05);(2)在输血史这一临床特征上,HCC和CLD组内,TTV DNA阳性与阴性组之间差异有显著性,分别为80.00%vs 35.87%(P＜0.05)和73.33% vs 27.50%(P＜0.05);(3)在HCC患者中,TTV DNA阳性组丙氨酸氨基转移酶(ALT)较阴性组有显著升高,[(93±27)IU/L vs (68±31)IU/L](P＜0.05),且TTV DNA的存在造成同时合并HBV和/或HCV感染的HCC患者ALT的显著升高(P＜0.05);(4)在CLD患者中,有无TTV DNA的存在,对HBV和/或HCV所致的肝功能损伤并无显著性影响.结论 TTV这种可能经过血液传播的肝炎病毒可造成HCC患者的肝功能损伤,但在CLD向HCC的转化中,似乎不起主导作用.     

乙肝病毒X基因与人肝细胞癌关系的研究

目的 探讨乙肝病毒（ＨＢＶ）Ｘ基因与肝癌发病的关系，为从分子水平上研究肝癌病因提供有关信息。方法 采用ＰＣＲ技术对ＨＢＶ不同状态的１０２例原发性肝细胞癌（ＰＨＣ）、３６例肝硬化（ＬＣ）及２８例慢性肝炎（ＣＨ）血清中ＨＢＶＸ基因进行了检测。结果 在ＨＢＶ５项标志均阴性的５３例ＰＨＣ检出Ｘ基因２０例（３７．７％），３１例ＬＣ中检出５例（１６．１％），１１例ＣＨ中检出２例（１８．２％）。所有ＨＢＶ Ｘ基     

肝细胞癌和其它慢性肝病HCV HBV感染比较分析

对１２８例有病理诊断依据的肝细胞场（ＨＣＣ）、４７例慢迁肝（ＣＰＨ）、１０５例慢活肝（ＣＡＨ）、４６例肝硬化（ＬＣ）．采用嵌套式ＰＣＲ技术检测其血标本中的丙型肝炎病毒（ＨＣｖ）ＲＮＡ和乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＩＩＡ，对这两种病毒的血清学标志也进行了研究。结果：在ＨＣＣ组。ＨＣＶＲＮＡ１４．１％阳性，ＨＢＶＤＮＡ７ｉ．３％阳性。ＣＰＨ，ＣＡＨ，ＬＣ和ＨＣＣ的ＨＢＶ感染率均在９０％左右，而ＨＣＶ感染率则分别为８．５％、９．５％、１７．４％和１９．５％，显示ＨＣＶ感染率随肝病严重程度的增加而有增加的趋势；晚期肝病组的ＨＣＶ感染率（１９．０％）显著高于慢性肝炎组（９．２％，Ｐ＜０．０５）。提示ＨＣＶ感染后经过慢性肝炎、肝硬化发展为ＨＣＣ可能是一个逐渐演进的病理过程。ＨＣＶ，ＨＢＶ重叠感染率。ＨＣＣ组高于ＣＰＨ，ＣＡＨ，而与ＬＣ相近，显示ＨＣＶ重叠感染在原有ＨＢＶ感染的基础上促进病变向着迁延化、慢性化，进而向着肝硬化、ＨＣＣ方向发展。     

PCR检测丙型肝炎病毒感染各高危人群

用ＰＣＲ方法克隆了中国丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染者的５’端非编码区（５’－ｎｏｎｃｏｄｉｎｇｒｅｇｉｏｎ，５’－ＮＣＲ）序列，并根据此序列合成引物检测我国ＨＣＶ各高危感染人群的病毒复制情况，结果显示ＨＣＶＲＮＡ在慢性丙型肝炎患者的血清标中的阳性率为８１．８％（９／１１），在ＨＣＶ抗体阳性的血液透析患者血清标本中的阳性率为６３．６％（７／１１），在ＨＣＶ抗体阳性的献血员血清标中的阳性率为２０％（４／     

南通市几类人群TTV、HGV、HCMV感染状况的初步调查

目的　调查南通市几类人群中输血传播病毒 (TTV)、庚型肝炎病毒 (HGV)和人巨细胞病毒 (HCMV)的感染状况。方法　选择献血员、非肝病人群、急性病毒性肝炎 (AH)与慢性病毒性肝炎 (CH)患者、肝炎肝硬化 (LC)以及原发性肝癌 (PHC)患者为调查对象。采用半巢式聚合酶链反应检测TTVDNA、巢式聚合酶链反应检测HGVRNA、核酸斑点杂交法检测HCMVDNA。采用微量细胞毒试验方法检测人外周血T细胞亚群。结果　义务献血员、非肝病人群、AH、CH、LC和PHC人群的TTV感染率分别为 9 2 %、2 4 0 %、4 6 6 %、4 1 6 %和 6 3 6 % ,后三种人群的感染率显著高于义务献血员 (P <0 0 1 )。HGV感染率在有偿献血员、AH、CH和LC人群中分别为 2 9%、9 6 %、1 7 6 %和 1 3 8% ,但各组之间无统计学差异 (P >0 0 5 )。HCMV在非肝病人群、AH、CH和LC人群中的感染率各为 2 6 7%、38 9%、6 5 8%和 77 8% ,CH组与LC组的感染率显著高于非肝病人群 (P <0 0 1 )。结论　HGV、TTV、HCMV在南通市人群包括献血员中有一定的感染率 ,在筛选献血员时有必要对此三种病毒进行检测 ,以防止其经输血途径传播     

人肝癌组织中黄曲霉毒素和肝炎病毒基因检测分析

以肝细胞场（ＨＣＣ）患者手术切除标本为研究材料，采用高效液相色谱荧光法检测组织中的黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１），嵌套式多聚酶链反应技术检测组织中的ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ。在６９．２％（１８／２６例）的ＨＣＣ患者中检出了３．６５－８９．０６ｎｇ不等的ＡＦＢ１／ｇ肝组织；ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ检出率分别为９０．５％（５７／６３例）和１２．７％（８／６３例）。其中，ＡＦＢ１和ＨＢＶＤＮＡ重叠检出率为６１．５％（１６／２６例），ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ重叠检出率为７．９％（５／６３例），４例ＨＣＣ患者重叠检出了ＡＦＢ１、ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ；同步检测对照组５例，无１例出现这种情况。结果表明，上述３种因素均与人类肝癌密切相关，并且可能存在协同致癌效应。     

慢性肝病和肝癌中HCV核心区三种寡肽抗原的抗体检测

检测１４８例慢性肝病和肝癌患者血清中丙型肝炎病毒核心区３种寡肽抗原的抗体，结果显示其阳性率在慢性迁延型肝炎、慢性活动型肝炎、肝炎肝硬化和原发性肝癌患者分别为７．７％，２３．１％，，２３．５％和１６．３％。在抗体阳性者中８０％以上有乙型肝炎病毒感染证据，提示我国ＨＢＶ和ＨＶＣ重叠感染较为常见。     

不同ABO血型肝病患者的免疫功能状态研究

目的分析不同ABO血型的各型肝病患者体液和细胞免疫指标改变状况,为慢性乙型肝炎的发病机理探讨和治疗学与预后判断提供可靠依据。方法应用免疫扩散和APAAP桥联酶标等方法,检测健康对照组(NC)500例、乙肝标志物阳性的各型肝病562例,其中急性肝炎(ASC)140例,慢性肝炎(CH)192例,肝炎后肝硬化(LC)160例,原发性肝癌(PHC)70例,分别测定血清免疫球蛋白IgG、IgM、IgA、IgD、IgE、补体C_3(C_3)、总补体(CH_(50))、循环免疫复合物(CIC)、E-玫瑰花环形成率(E-RFC)及T细胞亚群CD_4、CD_8及CD_4/CD_8的改变情况。结果健康人群ABO血型分布态势为A>O>B>AB,ASC组为B>O>A>AB,CH组为O>B>A>AB,LC组为B>O>AB>A,PHC组为AB>B>O>A,各肝病组与NC组相比,体液免疫指标改变明显,自ASC至PHC,IgE递增显著,IgD、IgG次之,PHC组C_3、CIC明显升高,ERF-C明显降低。AB血型的肝病IgG、IgE、C_3、CIC明显升高,E-RFC显著降低,AB血型的LC和PHC患者CD_4、CD_4/CD_8明显降低,与其他各血型组和NC组相比,有显著性差异(P<0.05)。结论在HBV感染者中,AB血型者易于发生LC和PHC,这一血型的肝病患者易于出现体液免疫功能亢进和细胞免疫功能不足。按ABO血型检测以上指标,对判断预后。合理选择治疗方案具有指导意义。     

经输血传播病毒的前瞻性调查

目的了解我国供血员、受血者中经输血传播病毒（ＴＴＶ）感染率,及经输血传播ＴＴＶ的发生率。方法对１３０例输血者进行ＴＴＶ以及ＨＢＶ和ＨＣＶ血清标志物检测,其相应的供血者也检查ＴＴＶ。结果３４０例供血员中有３６例（１０．６％）可检测到ＴＴＶ－ＤＮＡ。１３０例受血者输血前有１１例（８．５％）ＴＴＶ阳性,其余１１９例输血后有１８例ＴＴＶ转为阳性,在他们的供血中至少可查到一份ＴＴＶ阳性。４６例输血后肝炎病毒感染者中,其中有４５例为ＨＣＶ感染（包括７例与ＴＴＶ混合感染）,２例为ＨＢＶ感染（包括与ＨＣＶ、ＴＴＶ混合感染各１例）。ＴＴＶ与ＨＢＶ混合感染以及７例ＴＴＶ与ＨＣＶ混合感染中有３例的受血者ＡＬＴ＞９０Ｕ／Ｌ,但是１０例单纯ＴＴＶ感染者,仅有２例伴有轻微的ＡＬＴ增高。结论供血员及住院病人中有较高的ＴＴＶ感染率,单纯ＴＴＶ感染与ＡＬＴ显著升高似乎并无关联。     

河北省赵县某农村单采血浆还输血细胞献血员丙型肝炎病毒感染的追踪调查

目的　调查我国输血后丙型肝炎病毒 (HCV)感染的自然史及其影响预后的因素。方法　河北省赵县某农村单采血浆还输血细胞献血员 (简称献浆员 ) ,于 1993年 8月经现场调查及血清学检测被诊断为HCV感染者 172例 ,未进行任何抗病毒治疗 ,2 0 0 2年 7月对其HCV感染 9年后的转归以及影响转归的因素进行调查分析。结果　在 172例HCV感染者中 ,9年后 2例死于晚期肝病 ,4例死于脑出血 ,1例意外死亡 ,9年后实际追踪到 14 2例 ,失访率为 13 9% (2 3/ 16 5 ) ,肝病的病死率为 1 2 % (2 / 172 )。该组HCV感染者的慢性化率为 91 5 % (130 / 14 2 ) ,自然阴转率为 8 4 % (12 /14 2 )。在持续性HCV感染者中 ,经B型超声检查提示 ,肝硬化率为 3 1% (4/ 130 ) ;重度肝炎占 6 9%(9/ 130 ) ;中度肝炎 36 2 % (47/ 130 ) ;轻度 5 3 1% (6 9/ 130 ) ;另有 10 0 % (13/ 130 )诊断为脂肪肝。HCVRNA阳性组的丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、和γ谷氨酸转肽酶的平均水平显著高于阴性组 (P <0 0 0 1)。HCV/HBV混合感染者肝硬化进程显著快于单独HCV感染 (P <0 0 5 )。结论　输血后HCV感染者的慢性化率远远高于乙型肝炎病毒 (HBV)感染者 ,HCV/HBV混合感染者较单一感染者预后差。