HIV-gp160、HIV-1 Env CTL表位肽(E7)与粘膜佐剂LT(R192G)联合鼻腔免疫的效果

大肠杆菌不耐热肠毒素 ( LT)是良好的粘膜佐剂。作者以人类免疫缺陷病毒 ( HIV)gp1 6 0及 E7为抗原与 LT突变体 R1 92 G联合投递 ,测定了对相关抗原的免疫应答及佐剂的效力。　　 2 0 μg gp1 6 0加或不加 R1 92 G5 μg,间隔1周鼻腔接种雌性 BAL B/c小鼠 ,共 3次。末次免疫后 1周采集小鼠支气管肺泡灌洗液及阴道洗液 ,以 EL ISA测定抗原特异性抗体应答。心脏穿刺采血并收集脾脏进行体外抗原再刺激试验。免疫 E7的小鼠 ,间隔 1周鼻腔接种 1 0 0 μg E7(加或不加 R1 92 G5 μg) ,共 4次。于末次免疫后 9天或 82天收获脾细胞进行铬释…     

大肠杆菌LT及LTB在免疫预防小鼠幽门螺杆菌感染中的佐剂性

在抗幽门螺杆菌 ( Hp)感染的保护性免疫中 ,大肠杆菌不耐热肠毒素 ( LT)是一种良好的粘膜佐剂。为了解重组 LT及其 B亚单位 ( L TB)在肠道外免疫中的佐剂性 ,作者用脲酶加 L T和 LTB免疫无特定病原体的 6～8周龄雌性 Swiss- Webster小鼠 ,共 3次 ,每次间隔 2周。口服免疫是用吸管将 2 5 μl含2 5μg脲酶和 1μg L T的混合液滴入小鼠口中 ;皮下免疫采用后背皮下注射 1 0 0 μl加或不加 L T、L TB或氢氧化铝 ( alum)佐剂的脲酶 ( 1 0μg) ;皮内免疫采用背部皮内注射 5 0μl含 1 0 μg脲酶和 L T或 LTB的混合液。末次免疫后 1周收…     

小鼠鼻内接种含有16型HPV次要核壳蛋白L2交叉中和表位的多肽可诱生全身和粘膜抗体

人乳头状瘤病毒 ( HPV)结构蛋白 L 1 (主要 )和 L2 (次要 )具有中和表位 ,抗 L1抗体为型特异性 ,抗 L 2抗体则有交叉中和作用 ,可识别推定的共同中和表位。已知 1 6型 HPV次要核壳蛋白 L2的 1 0 8～ 1 2 0位氨基酸 ( aa)区存在着 6和 1 6型 HPV的共同交叉中和表位 ,提示含该表位的 L2多肽有可能作为预防不同生殖器 HPV的广谱疫苗。　　作者用含 1 6型 HPV L2的 1 3个 ( 1 0 8～1 2 0 ) aa序列的合成肽 ( P- 1 0 8/ 1 2 0 )、加或不加霍乱毒素 ( CT) ,分为三组 ( 50 μg肽 ,5μg肽+ 5μg CT,50 μg肽 + 5μg CT)鼻内接种 6周龄雌…     

用CpG ODN使有Th2型免疫背景的小鼠对缺失gp120的HIV-1灭活病毒产生Th1型免疫应答

作者用血吸虫感染预先存在 Th2型免疫背景的小鼠 ,证实共同使用含有胞苷酸鸟苷 ( Cp G)免疫刺激序列的寡脱氧核苷酸( ODN)和缺失 gp1 2 0的 1型人类免疫缺陷病毒 ( HIV- 1 )灭活病毒颗粒 ( HIV- 1免疫原 ) ,能诱生强的 Th1型抗 - HIV- 1免疫应答 ,并克服 Th2型应答的倾向。　　试验分两组 ,第一组 :所有小鼠感染曼氏血吸虫尾蚴后 5周 ,经皮内注射 IFA或含0 .1、1或 1 0 μg HIV- 1抗原的 IFA(不加或加2 5μg或 50 μg ODN1 82 6 ) ,每组 5只小鼠。 2周后 ,用相同方法加强免疫一次 ;再过 2周 ,杀死小鼠 ,检测寄生虫感染、细胞因…     

接种编码乙型脑炎病毒E糖蛋白的质粒DNA可提供显著保护作用

作者构建了单独编码乙型脑炎病毒(JEV)包膜 (E)糖蛋白的 DNA质粒 p CMX-ENV,该质粒转染 Vero细胞后可在细胞内表达 E蛋白。作者就其在小鼠肌内 (im)和鼻内 (in)接种对脑内 (ic) JEV攻击的防御作用进行了研究。　　对 4～ 6周龄异系交配瑞士雄性小鼠间隔两周在四头肌 im接种 5 0 μg DNA质粒 ;或间隔 1周共五次 in接种 2 0 μg DNA质粒。末次接种后两周 ,用 JEV P2 0 788株作 ic攻击(1 0 0 pfu/鼠 ) ,每日观察至攻击后 1 5天。　　经 im免疫 p CMXENV的小鼠的存活率为 33%～ 70 % ,总体存活率为 5 1± 1 2 %。经 in免疫 p CMX…     

通过电穿孔增加白喉类毒素及HBV肽疫苗经皮送递的非针刺无佐剂皮肤免疫法

本文首次介绍采用电穿孔 (EP)技术对C3H/He J小鼠完整皮肤进行免疫接种的研究情况。作者使用两种分子量与亲脂性各不相同的抗原 :白喉类毒素 (DT)及由 HBs Ag衍生的含 2 3个氨基酸的十四酰肽 (MYR) ,比较了皮内 (id) ,腹腔 (ip)及电穿孔皮肤免疫 (EP)的效果。 ip组的 DT剂量为 1μg;MYR为 1 0 μg,id和 EP组均分别为 1 0 μg和2 0μg。免疫程序为 :ip组第 1剂加弗氏完全佐剂 ,3周后第 2剂加弗氏不完全佐剂 ;id和EP组均免疫 3剂 ,均不加佐剂 ,间隔时间为2周。　　采用直接 EL ISA法分别于免疫后 0、2、3、4、6周检测动物的抗 DT…     

C群脑膜炎球菌多糖与B群外膜囊结合菌苗作为候选二价脑膜炎球菌菌苗

作者将 C群脑膜炎球菌荚膜多糖 (PSC)与 B群外膜囊 (OMV)偶联 ,得到一种多糖蛋白结合菌苗 (PS C- OMV) ,其中 OMV由巴西 B群 N44/89流行株提纯获得 ,PS由C群 IMC2 1 35株提纯获得。作者将雄性C3H/Hepas小鼠随机分为五组 ,每组 1 0只 ,分别于 0、1 4和 2 8天腹腔注射 0 .5 ml以 2 5μg Al(OH) 3为佐剂的下列制剂盐溶液 :2 .5 μg PS-OMV结合物、2 .5μg PS加 1 0μg OMV、2 5μgPS、1 0 μg OMV或生理盐水。在首剂注射后0、1 4、2 8、42天经后眼眶血管丛采血 ,血清贮存于 - 2 0℃。用 EL ISA检测抗 PS C和OMV抗体 ,用…     

霍乱毒素单克隆抗体与大肠杆菌不耐热肠毒素的交叉反应

作者用纯化霍乱毒素(CT)以两种方案分别免疫纯系8～14周龄BALB/c雄性或雌性小鼠:(1)首先用1μg CT静脉注射,然后每次间隔2周,用2、5、5、5和10μgCT注射,再隔3周,用5μg CT连续2天作静脉加强免疫。2天后杀鼠取脾,制备脾细胞悬液;(2)首先腹腔内注射CT 2μg(含于0.5ml弗氏完全佐剂中),3周后,腹腔注射     

猴免疫缺陷病毒样颗粒鼻内免疫诱导全身及粘膜免疫应答

作者利用 Sf9昆虫细胞同时表达了猴免疫缺陷病毒 ( SIV)的核心蛋白 ( Gag)和包膜蛋白 ( Env) ,并形成了病毒样颗粒 ( VLP) ,采用连续蔗糖梯度离心法纯化出 SIV VLP。为研究 SIV VL P通过粘膜免疫途径能否诱导全身及粘膜免疫应答 ,作者选用 2 0 μg和2 0 0 μg两种免疫剂量、分别通过鼻内 ( i.n.)滴入和腹腔 ( i.p.)注射两种途径免疫BALB/c小鼠。 i.n.途径又分为用和不用佐剂组 ,佐剂为霍乱毒素 ( CT,每只小鼠每次免疫 1 0 μg)。采集各组小鼠的血液、唾液、阴道冲洗液 ,用 EL ISA法测定各类标本中特异性抗体水平。 SIV VLP2…     

鞘内注射6-羟多巴胺、α_1受体拮抗剂对氯胺酮脊髓镇痛作用的影响

目的　在体探讨脊髓去甲肾上腺素 (NE)能神经元α1受体和氯胺酮 (Ket)脊髓镇痛的关系。方法　用热水甩尾法观察鞘内注射 (ith)氯胺酮 5 0、10 0、2 0 0 μg对小鼠甩尾潜伏期(TFL)的影响。并观察鞘内分别预先注射 6 羟多巴胺 (6 OH DA ,6 μg)、α1受体拮抗剂哌唑嗪 (Pra,5、15 μg)或特拉唑嗪(Ter,5、15 μg )对Ket(10 0 μg ,ith)脊髓镇痛的影响。 结果　Ket(5 0 μg ,ith)对小鼠TFL无影响 (P >0 0 5 ) ,而Ket(10 0、2 0 0μg ,ith)可剂量依赖性地延长小鼠TFL(P <0 0 5 )。鞘内单独注射 6 OHDA、Pra或Ter对小鼠的痛阈无影响 (P >0 0 5 )。ith 5 μgPra或Ter对Ket脊髓镇痛无影响 (P >0 0 5 ) ,而ith 6 OHDA、15 μgPra或Ter则可明显减弱Ket脊髓镇痛 (P <0 0 5 )。结论　脊髓是Ket的镇痛部位之一 ,Ket脊髓镇痛和脊髓NE神经元α1受体有关     

小剂量长间隔阴道放置米索前列醇用于延期妊娠引产

目的 :探讨小剂量长间隔阴道放置米索前列醇用于延期妊娠引产效果及安全性。方法 :选择延期妊娠孕妇 4 0 0例 ,分A ,B两组 ,每组各 2 0 0例 ,2组年龄、孕周、引产前宫颈Bishop评分经统计学处理无差异。A组以米索前列醇 2 5 μg于 0 9时置阴道后穹窿。抬高臀部平卧 30min后随意行动 ,如未临产 ,于d 2 0 9时重复用药 ,如仍未临产 ,于d 30 9时用药 1次 ,15时用药 1次 ,总量 <2 0 0 μg ;B组阴道用药方法同A组 ,剂量为 5 0 μg ,间隔 4h重复给药。结果 :末次用药 15h内 2组引产的成功率相比无明显差异 (P >0 .0 5 )。A组宫缩过强、胎心异常 ,羊水过度污染均低于B组 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。结论 :小量长间隔阴道用米索前列醇用于延期妊娠引产效果肯定 ,不良反应轻 ,是一种安全有效的引产方法。     

CT-2~*作为佐剂诱导的对多肽抗原的黏膜和全身性细胞免疫应答[英]

很多病毒通过吸附黏膜而感染宿主,因此,直接靶向黏膜表面的接种策略将有助于预防病毒感染。黏膜途径免疫的主要问题是免疫效果和/或黏膜的抗原吸附差,甚至引起宿主的免疫耐受。因此,运用与黏膜表面相容的佐剂来加强抗原的免疫原性至关重要。已有很多细菌毒素被用作黏膜佐剂,此项研究检测了2个密码子突变的霍乱毒素(CT-2~*,无ADP核糖基化活性和毒性)的黏膜佐剂作用。研究所用的抗原为已知辅助性T细胞(TH)和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位的合成多肽。Balb/c小鼠间隔5天鼻腔免疫1次或2次加或不加CT-2~*的多肽,以天然CT作为阳性对照。末次…     

小鼠鼻腔接种B群脑膜炎球菌外膜囊可产生强免疫应答

B群脑膜炎球菌引起的疾病仍是世界性主要卫生问题 ,鉴于 B群多糖菌苗对幼儿无效 ,且不能产生加强应答 ,为此人们研制了两种 B群脑膜炎球菌外膜囊 (OMV)菌苗 ,试验证明 OMV制剂在婴儿中具有强免疫原性。作者以小鼠为模型重点测定经鼻腔或直肠途径接种后 OMV的免疫原性 ,以确定作为粘膜菌苗的 OMV制剂的配方及这些制剂是否产生加强应答。　　用自脑膜炎球菌 44/ 76株制备的 OMV经鼻腔或直肠途径接种小鼠 ,每周 1剂 ,共接种 4剂 ,每剂 2 5 0 μg。每组 1 0只动物中半数动物接受 5μg霍乱毒素 (CT)加抗原。小鼠于第 1次免疫后 34周再鼻…     

六价脑膜炎球菌外膜囊菌苗在2～3岁和7～8岁儿童中的免疫原性和安全性

本文报道了六价脑膜炎球菌外膜囊菌苗 (OMV,P1 .7,1 6、P1 .5 ,2、P1 .1 9,1 5和P1 .5 c,1 0、P1 .1 2 ,1 3、P1 .7h,4)在 1 72名 2～ 3岁和 1 6 5岁 7～ 8岁健康儿童中的免疫原性和安全性研究。　　被选的两年龄段儿童均随机分为小剂量组 (每剂菌苗含每个亚型 Por A蛋白各7.5 μg) ,大剂量组 (每剂菌苗含每个亚型Por A蛋白各 1 5μg)和乙型肝炎疫苗 (HBV)对照组 ,每组均于三角肌肌肉接种相应疫苗3次 ,在儿童 2～ 3岁或 7岁时给予第 1次接种 ,第 1次接种后 7～ 1 3周给予第 2次接种 ,第 3次接种于第 2次接种后 5～ 9个月给予。接种后…     

基层医院小肝癌CT误漏诊原因探讨

基层医院 CT机多为普通 CT或二手机 ,且多无高压注射器 ,小肝癌的误、漏诊率较高。笔者从 1993年 6月至 2 0 0 0年6月我院经手术及随访证实的 34例误漏诊小肝癌就其原因进行探讨 ,并提出相应措施 ,现报告如下。1　临床资料1.1　一般资料 :本组 34例 ,男 2 5例 ,女 9例 ;年龄 2 7～ 76岁 ,平均 5 5 .5岁。临床上 B超提示肝占位性病变或肝低回声影 18例 ,肝部体检 6例 ,其它邻近脏器检查 9例 ,急腹症 1例。其中 13例第一次查肝 CT时甲胎蛋白升高为 34～ 116 0 μg/ L(平均 198μg/ L) ,HBs Ag阳性 2 5例。1.2　仪器与检查方法 :本组 2 9…     

HPLC法检查普卢利沙星有关物质

目的 :建立普卢利沙星有关物质检查的HPLC法。方法 :使用C1 8柱 (2 5 0mm× 4 6mm ,5 μm) ,以 0 0 5mol L枸橼酸溶液 (用三乙胺调节pH值 3 0 ) 乙腈 (6 0∶4 0 )为流动相 ,检测波长为 2 72nm ,流速 1 0ml min。结果 :主要降解产物NM394含量在 0 4 9μg ml～ 16 4 μg ml、中间体Ⅸ在 0 2 0 μg ml～ 2 0 0 μg ml、中间体Ⅹ在 0 19μg ml～19 0 μg ml范围内峰面积与浓度的线性关系较好 ,相关系数分别为 0 99998、 0 99999、 0 99999;检测限分别为5 2ng ml、5 9ng ml、6 4ng ml。结论 :本法的准确度、精密度、专属性及耐用性好 ,可用于对普卢利沙星的有关物质检查。     

鞘内注射吗啡对切口痛大鼠脊髓兴奋性氨基酸含量的影响

目的　研究在大鼠切口疼痛模型上鞘内注射吗啡对脊髓 (L4～ 5)兴奋性氨基酸 (天门冬氨酸和谷氨酸 )含量的影响。方法　雄性SD大鼠 32只 ,随机分为 4组 ,每组 8只。组Ⅰ为假手术组 ;组Ⅱ术前 30min鞘内注射人工脑脊液 (ACSF) 2 0 μl;组Ⅲ和组Ⅳ分别在术后 30min和术前 30min鞘内注射吗啡 10 μg。按Brennan法制成大鼠足底切口疼痛模型 ,以累计疼痛评分确定疼痛行为。应用邻苯二甲醛柱前衍生高效液相色谱法测定脊髓兴奋性氨基酸含量。结果　组Ⅱ累计疼痛评分 (17± 3)明显高于组Ⅰ (P <0 0 1) ,与组Ⅱ比较 ,组Ⅲ和组Ⅳ累计疼痛评分 (组Ⅲ :3± 2 ,组Ⅳ :2 5± 2 )明显降低 (P <0 0 1)。与组Ⅰ (天门冬氨酸 :1 90±0 2 8μmol/g ,谷氨酸 :3 9± 0 5 1μmol/g)比较 ,组Ⅱ的脊髓天门冬氨酸 (2 36± 0 39μmol/g)和谷氨酸 (4 8±0 89μmol/g)的含量明显升高 ;组Ⅲ和组Ⅳ的脊髓天门冬氨酸含量分别为 2 0 0± 0 34μmol/g和 2 0 2± 0 2 9μmol/g ,均明显低于组Ⅱ (P <0 0 5 ) ;组Ⅲ和组Ⅳ的脊髓谷氨酸含量分别为 3 9± 0 5 9μmol/g和 4 0± 0 5 6μmol/g ,也明显低于组Ⅱ (P <0 0 5 )。而两用药组上述指标比较以及用药组与组Ⅰ比较均无显著差异 (P >0 0 5 )。结论　在大鼠切口疼痛模型中     

铝佐剂或加强剂量对Ⅲ型B群链球菌结合疫苗免疫原性的影响

作者报告了两项 B群链球菌 (GBS)荚膜多糖 (CPS) -蛋白结合疫苗临床试验的结果 :第 1项研究测定了铝佐剂对 型 GBS-破伤风类毒素结合疫苗 (GBS - TT)免疫应答的影响 ;第 2项研究则测定了间隔近 2年加强接种第 2剂 GBS - TT对提高 CPS特异性 Ig G浓度的作用。　　在第 1项研究中 ,6 0名健康成人随机分成 4组 ,分别肌注 5 0 μg GBS - TT、12 .5 μgGBS - TT加铝佐剂、12 .5μg GBS - TT或3.12 5 μg GBS - TT加铝佐剂。接种前与接种后 4周采血 ,并观察接种反应。在第 2项研究中 ,36名受试者首剂单独接种 12 .5μgGBS -…     

米索前列醇不同剂量在足月妊娠引产中的效果及安全性评价

目的 :探讨米索前列醇阴道给药用于足月妊娠引产的临床合理剂量。方法 :2 10例有用药指征的孕妇随机分为 3组 ,均采用米索前列醇阴道给药。 2 5μg组 :2 5μg ,q 4h ;50 μg组 :50 μg ,q 18h ;10 0 μg组 :10 0 μg ,q 2 4h。结果 :10 0 μg组和 50 μg组引产时间显著少于 2 5μg组 (均P <0 .0 5) ,3组宫缩过频的发生率依次为 2 1% ,4 % ,10 % ,(P <0 .0 1)。 3组脐动脉血流速度测定及剖宫产率差别无显著意义 (均P >0 .0 5)。结论 :米索前列醇 50 μg阴道给药 q 18h有较好的引产效果 ,且宫缩过频的发生率相对减少。米索前列醇用于足月妊娠引产在4 8h内不超过 2 0 0 μg对母婴是安全的     

鼻内免疫新型佐剂与多肽疫苗后的抗体应答

毒性是限制人用粘膜接种疫苗有效佐剂研制和应用的主要因素。作者研究了两种新型佐剂大肠杆菌不耐热肠毒素突变体( L TR72 )和含未甲基化 Cp G基序的合成寡脱氧核苷酸 ( Cp G ODN )与含麻疹病毒( MV) F蛋白构象 B细胞表位肽模拟物的多抗原肽结构 ( MAP- M2 )一起鼻内接种的效果。　　将 5～ 8周龄雌性 BAL B/ c小鼠随机分成 5组 ,每组 4只 ,各组均于 0、7、1 4和 2 8天鼻内接种 5 0 μg MAP- M2 ,佐剂分别为 :A组生理盐水 (阴性对照 ) ;B组 1 0 μg L TR72 ;C组 1 0μg Cp G ODN;D组 1 0μg L TR72 +1 0 μg Cp G ODN;E…