人外周血DNA提取方法比较

分子生物学技术已经广泛应用于生物学、基础医学、临床医学和预防医学等多个学科领域,人外周血DNA的提取是分子生物学的一项基础研究技术,从全血中提取高浓度、高纯度和高质量的DNA在实验研究中尤为重要[1～3].张宁等[4]提出的酚抽提法、甲酰胺裂解法以及异丙醇沉淀法是提取DNA最为经典的实验方法,但其操作繁琐,耗时较长,且所用试剂具有一定的毒性.目前,很多学者针对不同实验样品的传统DNA提取方法都提出了改良方法[5-7],应用试剂盒提取人外周血DNA被广泛应用于现在的实验研究,本文针对试剂盒提取人外周血DNA方法的操作过程以及其注意事项等展开讨论,以期为其他研究者提供参考.     

川芎DNA提取方法的研究

目的 以伞形科蒿本属植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.叶为材料,研究川芎DNA的提取方法 .方法 分别采取CTAB法、高盐低pH法、木本植物DNA提取法、改良高盐低pH法提取基因组DNA,并对4种方法进行了改进.通过0.9%琼脂糖凝胶电泳和RAPD两种方法检测所提取的DNA样品.结果 比较DNA产量、质量等,确定了木本植物DNA提取法最佳.结论 木本植物DNA提取法为最佳方法.     

快速曲霉菌基因组DNA的提取方法

随着骨髓移植、器官移植的广泛应用,侵袭性曲霉感染逐渐增多。研究曲霉致病的分子机制以及进行临床快速基因诊断已成为研究的热点。而这些工作的前提就是获得足量、高质、稳定的供分析用的DNA分子。我们经过反复摸索、比较找出一个较为简便、经济、可靠的方法,报告如下。     

不同种类中药材的DNA提取方法

目的　根据不同种类中药材来选择DNA提取方法。方法　根据作者对各种药材鉴定的实践经验,结合国内外有关代表性的论文,进行归纳和整理。结果　分析了不同DNA提取方法适用范围和局限性。结论　根据药材种类、贮存时间,选取合适的提取方法和适当的样品量。     

“一步法”提取DNA方法的改进

文献报道的组织提取DNA的方法,大多操作步骤复杂,花费时间长。我们介绍一种“一步法”提取DNA,可明显提高从石蜡切片中提取DNA量,且不需要额外试剂或特殊仪器,花费时间短。1材料和方法1.1组织标本58份病理档案石蜡包埋组织块,在室温中保存直至被选用。1.2主要试剂、仪器DNA提取液“一步法”:变性缓冲液终浓度:1×PCR缓冲液,0.45%NP40,0.45%Tween20,100μg/ml PK。酚-氯仿提取法:10%SDS,10mg/ml PK,饱和酚,氯仿,醋酸钠等。Tag DNA聚合酶为上海生物工程技术有限公司产品,三磷酸去氧核糖核苷(dNTP)为北京TaQGENE公司产品,DNA…     

植物基因组DNA提取方法学评析与验证

分子生物学实验多以提取研究对象的基因组DNA作为研究的起点,由于材料的来源、部位、形态等外在性质的不同,以及化学成分、组织结构等内在特点的差异,常会需要在提取基因组DNA时选择不同的方法,或作一些特殊的处理,如有的植物组织含有较多的多糖及酚、酯、萜等次生代谢产物,从而会影响到所提DNA的纯度及随后的实验分析。因而选择一种简单、快速而高效提取基因组DNA的方法常常成为实验中关键的一步。近几年来已有不少关于通用提取方法的报道,另外一些专属性的方法也有了较大进展。本文拟对这些方法加以总结、比较,以期对它们各自的特点作一剖析,并加以实验改进验证,以期能够在今后的实验中更好地应用。     

植物类药材基因组DNA提取与纯化的方法学研究

本文探讨了菊科9种植物和地胆草的4种对口商品药材基因组DNA提取与纯化的原理、方法，通过对3种常用植物基因组DNA提取方法（CsC1梯度超速离心法、CTAB／CsC1梯度超速离心法和DTAB微量提取法）的条件摸索，在DNA产率、纯度以及提取纯化过程中影响PCR扩增因子方面进行比较，认为CTAB微量提取法是植物类药材基因组DNA一种比较省时、有效、经济的提取方法。     

常用外周血DNA提取方法的比较

目的比较目前常用的外周血DNA提取的三种方法。方法用三种方法提取全血DNA,通过吸光度检测、PCR扩增分析各自优缺点。结果三种方法提取的DNA纯度和作为模板PCR扩增无显著差别,只是操作时间和成本不同。结论天根离心柱型试剂盒应用比较广泛,Promega试剂盒操作时间最短,Chelex-100方法最经济,适合微量提取。     

芋螺基因组DNA提取方法的优化

热带药用海洋生物芋螺产生的芋螺毒素(Conotoxin),已成为神经科学研究的有力工具药和新药开发的新来源。近来出现了从芋螺基因组DNA中克隆新型芋螺毒素基因的新方法．因而快速获得芋螺基因组DNA是分离多样性毒素基因、建立基因库及药用芋螺基因资源开发的前提。本研究采用不同的DNA提取方法．从6种芋螺的不同组织和器官中分离总DNA，经综合比较，建立了简便快速的提取芋螺总DNA的改良苯酚-SDS优化方法。     

结直肠癌患者粪便细菌DNA提取方法的比较研究

摘要：目的比较结直肠癌患者粪便细菌DNA提取方法的优缺点及获得DNA的质与量,有利于结直肠癌患者肠道相关分子微生态的研究。方法采用传统法,化学裂解法和TIANamp bacteria DNA Kit试剂盒法,提取粪便中细菌DNA,比较其作为模板,用于细菌16SrRNA基因PCR扩增后凝胶电泳的优缺点及用核酸蛋白检测仪Biophotmeter测定提取DNA的质与量。结果传统法提取DNA的量及纯度均较低（22．37±2．45,3．24±0．22）,化学裂解法和试剂盒方法提取的量及纯度均较高,（分别为33．87±2．06,2．18±0．44;38．60±9．00,1．70±0．09）;传统法与化学裂解法、试剂盒法相比差异有统计学意义（P〈0．05）,化学裂解法与试剂盒法相比差异无统计学意义（P〉0．05）,但以试剂盒法为佳。结论3种方法各具优缺点,不同的DNA提取方法会影响结直肠癌患者肠道相关分子微生态的研究结果。与传统法和化学裂解法比较,试剂盒提取法的效率更高,能够检测到更多种类的细菌,更合适肠道相关分子微生态的研究。     

MSP扩增中3种石蜡包埋组织DNA提取方法的比较

目的比较福尔马林固定石蜡包埋组织(FFPET)中3种DNA提取方法,研究哪种方法更简便,更适合做DNA甲基化特异性PCR(MSP)。方法分别用二甲苯脱蜡法,改良TES水浴法和试剂盒法提取乳腺癌组织中的DNA,PCR扩增进行比较。结果二甲苯脱蜡法和试剂盒法提取的DNA电泳条带清晰可见,改良TES脱蜡法未见条带。结论二甲苯脱蜡法和试剂盒法提取的DNA均可用于做甲基化特异性PCR。     

海洋生物中抗氧化活性成分的研究进展

近30年来，从海洋生物中分离到许多具有抗氧化活性的物质，本文按这些抗氧化活性物质的种类。综述了来自海洋生物的抗氧化活性物质的研究进展。     

海洋微生物抗肿瘤代谢产物的研究进展

近10年来,从海洋微生物中分离到许多结构新颖的抗肿瘤代谢产物。本文按微生物种类,综述了近十年海洋细菌、海洋真菌抗肿瘤代谢产物的研究进展。     

发菜基因组DNA提取方法比较与分子鉴定研究

目的 以发菜为研究对象比较不同的提取DNA方法,筛选出了一种适合快速提取发菜DNA的方法。方法 分别利用自主研发的硅珠DNA纯化技术、细菌试DNA提取试剂盒和植物DNA提取试剂盒提取发菜基因组DNA。结果 本实验室开发的硅珠DNA提取纯化技术具有快速、无毒以及获得的发菜DNA纯度高等优势。通过PCR扩增和测序得到16S rRNA基因,利用Blast软件进行序列比对,与发菜同源性为99%。结论 本研究研制的发菜基因组DNA提取方法可用于发菜源性的分子鉴定。     

海洋来源多肽生物活性及提纯方法研究进展

海洋生物来源的多肽,种类丰富,结构新颖,副作用小,是近年来研究的热点.本文主要对海洋生物来源的具有血管紧张素转化酶(ACE)抑制、抗氧化、抗菌、抗肿瘤的多功能活性肽进行综述,并对多肽的提取分离方法进行介绍,为进一步研究海洋生物活性肽提供参考.     

甲醛固定的不同组织中DNA提取的比较

目的研究运用改良酚-氯仿法从甲醛固定组织中提取DNA的方法,对比心、肝、肺、脑4种脏器DNA提取质量的优劣．从而了解哪种经甲醛固定后的组织易于得到质量较为可靠的DNA,以达到对DNA扩增及后续研究的目的。方法选取甲醛固定标本脏器各14例,以蛋白酶K消化和酚-氯仿法提取检材中DNA,对所得DNA质量以紫外分光光度计、PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳分析进行结果判断。结果心、肝、肺、脑4种组织所提DNA的OD260／0D280比值分别为（1．842±0．380）、（1．861±0．076）、（1．387±0．113）、（1．428±0．087）。每100毫克组织中DNA含量（P,g）分别为（0．944±0．530）、（1．096±0．544）、（0．348±0．273）、（0．601±0．238）。PCR扩增后经琼脂糖凝胶电泳分析显示．心肌和肝脏组织的条带清晰度高于肺脏和脑组织。结论经甲醛浸泡固定的心肌组织和肝脏组织．运用改良酚-氯仿法所得DNA质量较为可靠,可以用于后续研究。     

具有抗肿瘤活性的DNA小沟区结合剂的研究新进展

随着近年来基因工程基础研究的迅速发展以及小分子配体与DNA相互作用的机制研究的逐步深入,DNA已成为抗肿瘤药物研究的一个重要的药理学作用靶点,DNA小沟区结合剂成为抗肿瘤药物研究的重要方向。目前已开发了大量结构新颖、靶点单一、高效低毒的有效药物,多种已处于临床研究阶段。该文对近5年来DNA小沟区结合剂的研究新进展进行简要综述。