金属硫蛋白3对快速老化痴呆模型小鼠海马锌和铜含量的影响

目的研究快速老化痴呆模型小鼠(SAMP8)海马锌和铜含量的变化及外源性金属硫蛋白3(MT3)对SAMP8海马锌和铜含量变化的影响,并与MT1进行比较。方法将SAMP8 60只随机分为痴呆组、低浓度MT3组、中浓度MT3组、高浓度MT3组、MT1对照组和空白对照组;每组10只,SAMP1 10只为正常对照组。连续腹腔注射不同浓度MT3等4周后处死小鼠,应用原子吸收分光光度计检测各组小鼠海马锌和铜的含量,并观察其与低、中、高3种浓度MT3的量效关系。结果与正常对照组比较,痴呆组小鼠海马锌含量明显下降(P<0.05);与低浓度MT3组和高浓度MT3组比较,中浓度MT3组小鼠海马锌含量明显升高(P<0.05);与空白对照组比较,中浓度MT3组小鼠海马锌含量明显升高(P<0.05);MT1对照组与低、中、高浓度MT3组比较,小鼠海马锌含量差异无统计学意义。各组小鼠海马铜含量差异无统计学意义。结论 SAMP8海马锌含量降低。MT3可以增加SAMP8海马锌含量,但锌含量不随MT3浓度增加而增加。而对铜含量影响不大。     

β-淀粉样蛋白对大鼠海马S100β表达及学习记忆的影响

目的　探讨 β-淀粉样蛋白 (Aβ)沉积与大鼠海马 S1 0 0 β表达的相关性及其在大鼠学习记忆中的作用。方法　采用不同浓度的 Aβ2 5-35选择大鼠海马 CA1区进行定位注射 ,通过行为学测试、光镜形态学观察 ,免疫组化染色的方法 ,观测大鼠学习记忆、海马 CA1区神经元和 S1 0 0β阳性细胞形态、数目的变化。结果　术后 7d,随着 Aβ2 5- 35脑内注射浓度的增加 ,实验组较对照组大鼠的学习记忆能力明显下降 (P<0 .0 5) ,海马CA1区神经元数目明显减少 (P<0 .0 5) ,而 S1 0 0β阳性细胞数则显著增多 (P<0 .0 5)。结论　 Aβ2 5- 35可以明显上调 S1 0 0β的表达 ,两者之间存在剂量效应关系 ;Aβ2 5- 35具有神经毒性作用 ,可以引起海马神经元丢失 ,造成大鼠学习记忆下降 ;S1 0 0 β的高水平表达可能与海马 CA1区神经元丢失以及大鼠的学习记忆下降有密切关系。     

侧脑室注射β-淀粉样蛋白制作阿尔茨海默病样大鼠模型

目的 研究侧脑室注射β-淀粉样蛋白(amyloid-beta protein,Aβ)对大鼠学习记忆功能及海马区病理改变的影响,探讨侧脑室注射β-淀粉样蛋白建立阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)样动物模型的可行性.方法 将20只雄性SD大鼠随机分为2组:空白对照组和AD模型组,每组10只.采用侧脑室立体定向注射β淀粉样蛋白(amyloid-beta protein, Aβ)25-35的方法,建立AD的动物模型,通过Morris水迷宫检测大鼠学习、记忆能力,通过HE染色、刚果红染色观察大鼠海马区的病理改变.结果 大鼠经侧脑室立体定向注射10 μmol/L Aβ25-35 5 μl后,(1)AD模型组大鼠Morris水迷宫检测逃避潜伏期第1～3天分别为(42.19±12.29)s、(31.28±20.59)s、(23.91±8.05)s较对照组[分别为(27.35±14.96)s、(13.17±6.79)s、(13.01±6.83)s]明显延长(P＜0.05或P＜0.01);(2)HE染色见对照组大鼠海马神经元排列规则、紧密,形态完整,AD模型组海马区神经元明显疏松,排列紊乱,出现胶质细胞增生;(3)刚果红染色各组未见明显淀粉样斑块沉积,AD模型组于血管壁上见淀粉样物质沉积,这在国内损伤型AD动物模型中少见报道.结论 应用侧脑室内微量注射Aβ的方法建立AD动物模型,在行为学、病理学上均符合AD表现,可以作为一种简易而又经济的AD动物模型.     

吲哚美辛对β-淀粉样蛋白诱导脑内炎症损伤的保护作用

目的　建立大鼠Alzheimer病 (AD)炎症病理模型 ,探讨吲哚美辛在AD中的防治作用。　方法　在大鼠双侧海马CA1区定向注射 β 淀粉样蛋白 (Aβ)作为模型组 ,注射生理盐水作为对照组 ,吲哚美辛灌胃治疗模型大鼠 ,以蒸馏水作治疗对照。 2周后各组大鼠均作Y型迷宫测试 ,然后对大鼠海马进行HE、刚果红、尼氏染色及免疫组化检测等病理学观察。采用方差分析对量化指标行统计分析。　结果　吲哚美辛显著抑制Aβ诱导的大鼠海马胶质细胞增生 ,具有白细胞介素 1β(IL 1β)高表达、神经元丧失以及空间学习记忆能力减退等效应 ;检测各组大鼠海马CA1区锥体细胞带损伤长度显示模型组和生理盐水对照组分别为 (1 80 8± 0 2 89)和 (0 378± 0 0 6 2 )mm ,吲哚美辛治疗组和治疗对照组分别为 (0 76 2± 0 15 3)和 (1 82 2± 0 2 78)mm ,(P <0 0 1)。　结论　在体条件下吲哚美辛显著抑制Aβ诱导的海马炎症损伤效应 ,支持AD的抗炎治疗假说     

长期应用不同剂量左旋多巴对帕金森病大鼠模型学习记忆能力和血浆同型半胱氨酸的影响

目的 观察长期应用不同剂量左旋多巴(L-dopa)对帕金森病(PD)模型大鼠的学习记忆能力和血浆同型半胱氨酸(Hcy)的影响.方法 应用6-羟多巴胺(6-OHDA)制作PD大鼠模型.将288只成功PD模型大鼠分为对照组及实验组.实验组再分为3个不同剂量组,分别用不同剂量的L-dopa腹腔注射(10 mg/kg/d,20 mg/kg/d,30 mg/ kg/d)连续28 d,分别于不同时点(1、3、5、7、14和28 d)作行为学测定,并抽血测定Hcy、叶酸;同时分离大鼠海马区制作冰冻切片,进行刚果红染色并测定海马区β淀粉样蛋白阳性斑块的积分吸光度.结果 随着应用L-dopa剂量的增大、时间的增加可使PD模型大鼠学习记忆能力明显下降(P<0.05);海马区β淀粉样蛋白阳性斑块增多(P<0.05).血浆Hcy浓度变化不一,随L-dopa剂量增大而升高,随L-dopa应用时间增长而波动,叶酸浓度降低(P<0.05).结论 长期大量使用L-dopa能使PD模型大鼠学习记忆能力明显下降,血浆Hcy浓度升高,引起β淀粉样蛋白阳性斑块增多,推测PD痴呆(PDD)可能与Hcy升高有关.     

运动诱导金属硫蛋白对大鼠心肌组织的保护作用

目的：通过长期的中等强度运动对大鼠金属硫蛋白（MT）含量的影响,来探讨MT对心肌的保护作用及其机制。方法：选用健康雄性SD大鼠30只,体重220～250g,随机分为安静对照组（C组）;中等强度（90rain）运动训练组（B组）;一次性力竭运动组（A组）;每组10只。B组大鼠进行为期8周的中等强度运动。测定大鼠心肌组织中的MT、组织中钙、丙二醛（MDA）、硫基（-SH）含量以及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）和Na^-K^＋-ATP酶的活性。结果：中等强度运动组较对照组大鼠心肌组织中MT的含量、GSH—px活性和Na^＋-K^＋-ATP酶的活性显著增高（P〈0．05）,MDA含量和总钙量显著降低（P〈0．05）;-SH含量没有显著性差异;但-SH含量有升高趋势。力竭运动组大鼠心肌组织中MT和-SH含量,GSH-px和Na^＋-K^＋-ATP酶的活性较对照组显著降低（P〈0．05）．MDA含量和总钙量显著升高（P〈0．05）。结论：长期中等强度的运动可提高心肌的抗氧化能力,其机制可能与心肌中MT增加有关。     

维药鹰嘴豆中金属硫蛋白提取液对肿瘤细胞的抑制作用

目的 研究鹰嘴豆金属硫蛋白(MT)体外抑制肿瘤的效果.方法 将人肺癌细胞株(A549)、人胃癌细胞株(MGC-803)、人乳腺癌细胞株(Bcap-37)进行传代培养,将提取的鹰嘴豆MT配制成5个浓度组:0.010 0、0.005 0、0.001 0、0.000 5、0.000 1 g/ml,空白对照组和本底对照组.观察肿瘤细胞的抑制率和凋亡率.结果 与空白对照组比较,0.010 0、0.005 0、0.001 0 g/ml三个浓度组的肿瘤抑制率和细胞凋亡率均增加.结论 鹰嘴豆MT可抑制肿瘤细胞增长,促进肿瘤细胞凋亡.     

金属硫蛋白3对快速老化痴呆小鼠海马胶原纤维酸性蛋白表达的影响

目的 研究金属硫蛋白3(MT3)对快速老化痴呆模型小鼠(SAMP8)海马结构的胶原纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响.方法 给小鼠不同浓度MT3及盐水腹腔注射28 d,处死小鼠后应用免疫组化和免疫印迹方法检测海马结构GFAP的表达.结果 8月龄的SAMP8小鼠海马结构内可见大量浓染的GFAP阳性星形胶质细胞,GFAP含量最多.随着给予MT3浓度的增加,SAMP8小鼠海马结构内的GFAP阳性细胞减少,GFAP含量减少.结论 SAMP8小鼠海马结构星形胶质细胞增生,GFAP表达增多.MT3有减低GFAP表达的作用,随着浓度增加作用增强.     

金属硫蛋白3对快速老化痴呆模型小鼠行为学变化的影响

目的研究金属硫蛋白(MT)3对快速老化痴呆模型小鼠(SAMP8)水迷宫行为学变化的影响。方法给小鼠不同浓度MT3及盐水腹腔注射28 d,进行Morris水迷宫检测。结果与快速老化小鼠对照系(SAMR1)小鼠相比,SAMP8逃避潜伏期明显延长(P<0.01),跨越原平台次数明显减少(P<0.05);3种浓度MT3组当中高浓度MT3组逃避潜伏期最短,跨越原平台次数最多(P<0.05);高浓度MT3组与SAMR1相比,逃避潜伏期仍延长,跨越原平台次数减少(P<0.05)。结论高浓度MT3可以提高SAMP8小鼠的学习能力和记忆能力,其作用效果与浓度有关。     

β-淀粉样蛋白致大鼠行为学改变及对海马核因子-κB和一氧化氮合酶表达的影响

目的研究β-淀粉样蛋白(amyloid-beta protein,Aβ)对大鼠学习记忆功能及海马区内核因子kB(NF-kB)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达的影响及其相互关系。探讨NF-kB在阿尔茨海默病(AD)发病中的可能作用。方法采用大鼠侧脑室立体定向注射Aβ25-35的方法建立AD的动物模型,通过Morris水迷宫检测大鼠学习、记忆能力,通过免疫组化的方法观察Aβ25-35对大鼠海马区内NF-kB及iNOS蛋白表达的影响,并分析NF-kB与iNOS表达的关系。结果大鼠经侧脑室立体定向注射10μmol／L Aβ25-35 5μl后,(1)模型组大鼠Morris水迷宫检测逃避潜伏期(3 d分别为42．19±12．29,31．28±20．59,23．91±8．05)较对照组(3 d分别为27．35±14．96,13．17±6．79,13．01±6．38)明显延长(P<0．05或P<0．01);(2)模型组大鼠海马区内NF-kB蛋白表达(29．40±4．01)及iNOS蛋白表达(34．42±5．99)较空白对照组(分别为23．36±2．31和11．56±4．09)均有明显升高(P<0．01),(3)NF-kB与iNOS阳性细胞密度具有显著相关性(r=0．453,P< 0．05)。结论Aβ能够明显降低大鼠短期学习记忆能力,并诱导大鼠海马区内NF-kB和iNOS的蛋白表达增强,同时NF-kB与iNOS的表达呈正相关关系。提示NF-kB和iNOS均参与了由Aβ诱导的炎性反应过程,NF-kB可能是iNOS表达的介导因子之一。     

金属硫蛋白3对快速老化痴呆模型小鼠海马CA1区神经元细胞凋亡的影响

目的 研究金属硫蛋白3(MT3)对快速老化痴呆模型小鼠(SAMP8)海马CA1区神经元细胞凋亡的影响及其机制.方法 将7月龄SAMP8小鼠随机分成6组,分为痴呆组、3种浓度的MT3组、MT1组、空白对照组.快速老化小鼠对照(SAMR1)小鼠为正常对照组.连续腹腔注射28 d后灌注取脑,进行海马CA1区原位末端标记(Tunel)试剂盒和免疫组化(SP)试剂盒染色.结果 痴呆组海马CA区神经元细胞凋亡指数明显高于正常对照组.高浓度MT3组凋亡指数最低,Bcl-2蛋白表达增强,Bax蛋白表达最低(P＜0.01,P＜0.05).MT3组对Bax蛋白表达的抑制作用强于MT1对照组,而二组对Bcl-2蛋白表达的差异不显著.结论 SAMP8小鼠海马结构存在大量神经元细胞凋亡,MT3通过减少Bax表达和增加Bcl-2表达,减少细胞凋亡,并有浓度依赖关系;且作用强于MT1.     

Zn2+诱导金属硫蛋白表达对离体大鼠缺血再灌注损伤心肌的保护作用

金属硫蛋白 (metallothionein ,MT)是近年来研究的热门课题之一。本研究在离体大鼠缺血再灌注损伤心脏模型上 ,观察Zn2 +诱导MT合成对缺血再灌注损伤心肌的保护作用 ,为临床提供心脏保护的新途径。1 材料与方法 :( 1)分组及方法 :3月龄Sprague Dawley大鼠 32只 ,雌雄不拘 ,体重 2 5 0～ 32 0g,随机分为 4组 ,每组 8只。对照组 :腹腔注射 0 3ml蒸馏水 2 4h后常规建立Langendorff灌注模型 ,平衡灌注 2 0min ,夹闭灌注管全心停灌45min ,再灌注 1h ,其中再灌注 15min时取冠状窦流出液 2ml,冷冻储存。工作末 ,取心肌标本吸干水渍后迅速置于…     

西红花苷基于Wnt/β-catenin信号通路改善阿尔茨海默病大鼠的空间记忆

目的 观察西红花苷对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马突触小泡蛋白(SYP)和Wnt/β-catenin信号通路的影响.方法 SD大鼠随机分为正常对照组、AD模型组、西红花苷组.侧脑室注射 β 淀粉样蛋白(Aβ25～35)建立AD大鼠模型,西红花苷组从次日开始腹腔注射西红花苷(40 mg/kg),连续注射14 d.Morri...     

金属硫蛋白3对快速老化痴呆模型小鼠海马组织学变化的影响

目的研究金属硫蛋白(MT)3对快速老化痴呆模型小鼠(SAMP8)海马结构CA1区神经元组织学变化的影响。方法给小鼠不同浓度MT3及盐水腹腔注射28 d,处死小鼠后应用光镜和电镜观察制备标本海马结构神经元的变化。结果快速老化小鼠对照小鼠(SAMR1)海马CA1区锥体细胞排列较整齐、均匀,胞膜完整,染色质分布均匀,细胞核呈圆形或椭圆形,核仁清楚,细胞器清晰可见。SAMP8组海马CA1区可见锥体细胞稀疏、排列紊乱,大部分神经元肿胀、空化,出现凋亡细胞,很多胞核固缩深染,胶质细胞增多,有较多脂褐素沉积。低、中、高浓度MT3组海马CA1区锥体细胞较空白对照组结构较清晰,排列较整齐均匀。神经元核基质呈轻度空化改变,胞质内都可见线粒体、粗面内质网及脂褐素,胶质细胞减少。高浓度MT3组的超微结构最接近于SAMR1组,但仍处于老化状态。结论 SAMP8海马有组织结构和超微结构的改变。MT3对SAMP8海马锥体细胞有保护的作用。     

金属硫蛋白对D-半乳糖致衰老大鼠学习记忆的影响

目的 观察不同剂量金属硫蛋白(MT)对D-半乳糖致衰老大鼠模型的学习记忆的改善作用.方法 Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、模型组、MT剂量组(低0.46、中1.4和高4.2 mg/kg),每组10只.采用跳台法和Morris水迷宫实验检测大鼠的学习记忆功能,HE染色观察大鼠海马神经元形态变化,生化酶学法检测AChE、MAO-B、ChAT活性,黄嘌呤氧化酶法测定SOD,TBA法测定MDA.结果 D-半乳糖致衰老大鼠学习记忆能力明显下降,海马神经元核固缩;海马AChE、MAO-B活性明显增加(P＜0.01),ChAT活性明显降低(P＜0.01),给予外源性MT能以剂量依赖性的方式改善D-半乳糖致衰老大鼠学习记忆能力的损害、海马神经元损伤,并能明显阻遏D-半乳糖致衰老大鼠的海马AChE与MAO-B活性增加(低剂量组P＜0.05,中、高剂组P＜0.01),以及ChAT活性的降低(低剂量组P＜0.05,中、高剂量组P＜0.01).结论 MT能够改善D-半乳糖致衰老大鼠学习记忆功能,延缓脑组织的衰老.     

溶酶体蛋白酶cathepsin L在阿尔茨海默病模型大鼠海马组织中的表达及意义

目的 观察阿尔茨海默病(AD)大鼠海马组织中溶酶体蛋白酶cathepsin L的表达.方法 采用Aβ-淀粉样肽(Aβ)大鼠海马注射制作AD动物模型.用免疫荧光染色和Western印迹法检测大鼠海马组织cathepsin L的表达.结果 Aβ海马内灌注造成Aβ沉积的AD模型在行为学和病理改变上一定程度地模拟了AD.AD大鼠海马区cathepsin L蛋白表达与正常组大鼠相比显著升高,cathepsin L蛋白荧光检测发现AD大鼠海马区cathepsin L阳性神经元数量明显增加.结论 在AD大鼠海马组织中cathepsin L表达升高.     

褪黑素对Aβ诱导的大鼠脑组织GFAP和S100β蛋白表达的干预作用

目的观察褪黑素(MT)干预β淀粉样蛋白(Aβ)诱导的大鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和S100β蛋白的表达,探讨MT对老年痴呆症(AD)治疗的作用机制。方法 30只大鼠随机分为生理盐水对照组、β淀粉样蛋白(Aβ)诱导AD模型构建组(模型组)和AD模型+MT治疗组(MT组)。动物喂养40d时取大鼠脑组织,用HE染色观察脑组织病理变化,免疫组化染色法检测Aβ标记的脑组织部位以及Aβ对神经细胞毒性作用,同时检测胶质细胞的GFAP和S100-β蛋白的表达水平。结果 HE染色观察脑组织病变在MT组明显轻于模型组;免疫组化结果显示,Aβ的表达水平在模型组和MT组二者间无明显差异,但Aβ对海马CA3区神经元损伤作用在模型组要大于MT组。GFAP和S100β表达水平在模型组则显著高于MT组和正常组(P0.05)。结论用MT干预治疗,可降低AD模型鼠胶质细胞表达GFAP和S100β蛋白的水平,从而起到了减轻大脑神经元细胞的损伤作用。     

金属硫蛋白与糖尿病

氧化应激在糖尿病及其并发症的发病中起重要作用。金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在于生物细胞内的低分子量、富含半胱氨酸的金属结合蛋白,对于抵抗有毒金属的毒性及维持一些必需金属在体内的代谢平衡有重要意义。近年研究发现,MT是潜在的抗氧化剂,具有清除体内自由基,抗氧化应激作用,可能对糖尿病具有保护作用。     

淀粉样蛋白联合L-型谷氨酸诱导类阿尔茨海默病模型

目的采用淀粉样蛋白联合L-型谷氨酸诱导建立类阿尔茨海默病(AD)大鼠模型。方法将β-淀粉样蛋白25～35(Aβ25～35)注射到大鼠双侧CA3区,或联合L-谷氨酸(Glu)分别注射到大鼠双侧CA3区、侧脑室制备类AD模型,用Morris水迷宫和免疫组化方法分别检测大鼠学习记忆力和胆碱乙酰转移酶(ChAT)及NMDAR1脑内表达。结果 Aβ联合Glu诱导的类AD模型大鼠学习记忆力明显降低,与假手术组和单纯Aβ注射组相比,均有统计学差异(P<0.01或P<0.05),同时海马CA3区及顶叶皮质内ChAT及NMDR1表达也降低明显(P<0.01)。结论采用淀粉样蛋白联合L-型谷氨酸诱导建立类AD动物模型比单纯Aβ注射效果好,能模拟出AD学习记忆力减退和相关的主要病理学变化。     

黄芩茎叶总黄酮对阿尔茨海默病大鼠海马神经元Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨黄芩茎叶总黄酮(SSTF)对大鼠海马注射淀粉样蛋白Aβ25~35所致神经元Bax和Bcl-2蛋白表达的影响。方法 40只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、SSTF 50 mg/kg、100 mg/kg组,每组10只。模型组、SSTF组大鼠于灌胃第8天双侧海马注射Aβ10μg,对照组大鼠海马注射生理盐水,大鼠于灌胃20 d后处死。采用TUNEL法观察大鼠海马神经元凋亡;免疫组化、Western印迹检测海马组织中Bax、Bcl-2的表达,采用光密度值(IOD)表示实验结果。结果模型组大鼠海马细胞凋亡IOD较对照组明显升高(P0.01),50、100 mg/kg给药组IOD较模型组明显降低(P0.01);免疫组化及Western印迹结果显示模型组Bax表达较对照组明显升高(P0.01),SSTF 50、100 mg/kg组Bax表达较模型组明显降低(P0.01);模型组Bcl-2较对照组明显降低(P0.01),SSTF 50、100 mg/kg组Bcl-2表达较模型组明显升高(P0.01)。结论大鼠海马注射Aβ25~35可引起海马神经元凋亡,其机制可能与Aβ上调凋亡基因Bax表达、降低抗凋亡基因Bcl-2表达有关。SSTF可减轻Aβ引起的神经元凋亡,其机制可能与其调控Bax、Bcl-2表达有关。