细胞周期素A与白血病

细胞周期的调控是极其复杂的,现已知在细胞周期中存在着许多检测点,这些检测点受控于细胞周期素(cyclins)、细胞周期素依赖性激酶(cyclin dependent kinase,CDK)、细胞周期素依赖性激酶抑制剂(cyclin dependent kinase inhibitor,CDI)、某些癌基因及抑癌基因的表达,其中cyclins是正性调节因子,必须与相应的CDK结合形成cyclins-CDK复合物,并经磷酸化/脱磷酸化修饰后方具有生物活性,促进与细胞周期有关的蛋白基因表达,从而对DNA合成、有丝分裂活动等进行调控.     

细胞周期素D与白血病

细胞周期的调控是极其复杂的 ,现已知在细胞周期中存在着许多检测点 ,这些检测点受控于细胞周期素 (ｃｙｃｌｉｎｓ)、细胞周期素依赖性激酶 (ｃｙｃｌｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｋｉｎａｓｅ ,ＣＤＫ)、细胞周期素依赖性激酶抑制剂 (ｃｙｃｌｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｋｉｎａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒ,ＣＤＩ)、某些癌基因及抑癌基因的表达 ,其中ｃｙｃｌｉｎｓ是正性调节因子 ,必须与相应的ＣＤＫ结合形成ｃｙｃｌｉｎｓ ＣＤＫ复合物 ,并经磷酸化 /脱磷酸化修饰后方具有生物活性 ,促进与细胞周期有关的蛋白基因表达 ,从而对ＤＮＡ合成、有丝分…     

细胞周期素依赖性激酶与缺血性卒中

细胞周期是细胞生命活动的基本过程 ,受细胞周期素依赖性激酶 (cyclin dependentkinase ,CDK)调节。CDK与细胞周期素 (cyclin)结合后活化 ,其中周期素作为调节亚基 ,CDK作为催化亚基 ,周期素 /CDK复合物对细胞周期具有正性调节作用 ,促进细胞分裂。周期素 /CDK复合物的抑制因子细胞周期素依赖激酶抑制剂 (cyclin dependkinaseinhibitor ,CD KI)通过与周期素 /CDK复合物结合形成稳定的复合物 ,抑制CDK的活性而发挥负性调节作用 ,阻止细胞分裂。这些蛋白表达因子精确而有序地调节细胞周期 ,以确保机体正常生长发育。一旦功能失调就…     

细胞周期素依赖性激酶7及细胞周期素H在人结直肠癌组织中的表达

细胞周期素依赖性激酶致活激酶 (ＣＡＫ)在催化已知的各种细胞周期素依赖性激酶 (ＣＤＫ)分子活化的过程中起着至关重要的作用 ,ＣＡＫ的本质是细胞周期素Ｈ与ＣＤＫ7结合形成的复合体 ,目前已在多种人体和动物实验模型的恶性肿瘤组织中发现ＣＡＫ的异常表达[1,2 ] 。本实验检测了ＣＤＫ7与细胞周期素Ｈ在结直肠癌组织及正常黏膜中的表达 ,分析了它们的表达与结直肠癌临床病理特征的关系。一、材料与方法1.研究对象 :连续收集北京大学人民医院外科 1999年2月至 2 0 0 0年 2月经手术切除的结直肠癌标本 45例 ,所有标本均经病理证实 ,标本均于…     

乙型和丙型肝炎病毒蛋白对于细胞周期素A的调节研究

0 引言细胞周期(cell cycle)是细胞分裂增生的经典概念,过去的研究主要集中在细胞周期的形态学描述上。随着细胞周期素(cyclin)和细胞周期素依赖性激酶(cyclin dependentkinase,CDK)的发现及其作用机制的研究进展,使得我们对于细胞周期调节有了分子生物学水平上的深入     

细胞周期素依赖性激酶、细胞周期调控与肝纤维化

肝纤维化是多种肝脏疾病的共同病理学结局.在肝纤维化过程中,肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)发生活化,表型发生改变,使其具有收缩性、再生性,并能生成胶原成分.肝纤维化的发生发展与活化的HSCs的增殖情况有关;而细胞增殖情况则与细胞周期素依赖性激酶、细胞周期调控密切相关.但是,目前对与此相关的分子机制尚未明确.此综述就近年来与肝纤维化过程中细胞周期素依赖性激酶及细胞周期调控方面的研究加以总结,以揭示可能存在的引起肝纤维化的部分机制.     

乙酰水杨酸对大鼠局灶性脑梗死周边神经细胞细胞周期素表达的影响

目的:观察成年大鼠局灶性脑梗死后神经元内细胞周期素D1和细胞周期素B1的表达以及乙酰水杨酸对其的影响。方法:线栓法制作大鼠大脑中动脉永久闭塞模型。40只大鼠随机分为假手术组(n=8)、缺血组(n=16)、乙酰水杨酸干预缺血组(n=16)。采用HE染色显示梗死灶,应用免疫组化方法观察各组大鼠脑内细胞周期素D1和细胞周期素B1阳性染色神经细胞的数量和分布。结果:HE染色显示,缺血组大鼠缺血灶侧皮质可见不规则坏死区,乙酰水杨酸干预组坏死灶较缺血组显著缩小。缺血灶周围区有较多细胞周期素D1和细胞周期素B1阳性神经元分布,但细胞周期素B1阳性细胞数显著少于细胞周期素D1阳性细胞数,乙酰水杨酸组显著少于缺血组(P·0.01)。乙酰水杨酸组细胞周期素D1阳性神经元多呈胞质阳性,而缺血组多为胞核阳性。结论:成年大鼠局灶性梗死周边神经元内异常表达细胞周期素D1和细胞周期素B1,乙酰水杨酸可以减少细胞周期素D1和细胞周期素B1表达,进而缩小梗死病灶。乙酰水杨酸还可能抑制细胞周期素D1由胞质向胞核转运。     

番茄红素上调细胞周期素依赖性激酶4和细胞周期素D1的表达促进人外周血内皮祖细胞周期进展

目的探讨番茄红素对人外周血内皮祖细胞活性、周期调控的作用及其分子机制。方法体外原代培养人外周血内皮祖细胞,采用噻唑蓝法、流式细胞仪、逆转录聚合酶链反应、实时聚合酶链反应和Western blot方法检测番茄红素对内皮祖细胞活性、细胞周期分布的影响及细胞周期相关蛋白细胞周期素依赖性激酶4和细胞周期素D1的表达情况。结果噻唑蓝比色实验显示,不同浓度(0.01、0.1、1μmol/L)番茄红素能显著增加内皮祖细胞的生长能力,且呈一定的量效与时效关系;流式细胞仪分析显示,番茄红素呈浓度依赖性使内皮祖细胞的G0/G1期细胞比例减少,S期细胞比例增多;逆转录聚合酶链反应、实时聚合酶链反应和Western blot分析表明,番茄红素呈浓度依赖性使内皮祖细胞中细胞周期素依赖性激酶4和细胞周期素D1表达上调。结论番茄红素对内皮祖细胞的促进生长作用,可能与上调细胞周期素依赖性激酶4、细胞周期素D1的表达,使G0/G1期细胞比例减少有关。     

细胞周期素及CDK抑制蛋白与血管平滑肌细胞增殖

血管平滑肌细胞 ( VSMC)的异常增殖是许多血管增殖性疾病如动脉粥样硬化、经皮腔内冠状动脉成形术 ( PTCA)术后再狭窄、血管移植术后新生内膜形成等发生发展的重要致病机理之一 [1]。对VSMC增殖的分子生物学研究越来越引起人们的重视。细胞周期素 ( Cyclin)及细胞周期素依赖性激酶 ( Cyclin- dependent kinase;CDK)抑制蛋白是调控VSMC增殖周期的重要因素 ,它们作用于细胞周期的不同时相 ,引发或抑制细胞的分裂、增殖 ,加速或延缓细胞周期的进程 [2 ]。因此对 Cyclin及 CDK抑制蛋白在 VSMC增殖中的作用机制的研究 ,将为血管增殖…     

双环醇下调细胞周期素B2基因启动子转录活性研究

目的探讨双环醇对细胞周期素(cyclin)B2启动子转录活性的调节作用.方法根据文献报道的结果确定细胞周期素B2的启动子DNA序列区域,以聚合酶链反应(PCR)扩增细胞周期素启动子(B2p),克隆至真核报告载体pCAT3-Basic中,构建pCAT3-cyclinB2p报告载体;以该质粒转染肝癌细胞系HepG2细胞,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性:并与双环醇共刺激的HepG2细胞,用ELISA法检测CAT的表达活性.结果成功获得细胞周期素B2启动子的止确克隆.pCAT3-cyclinB2p和双环醇(106Mol/L)瞬时转染的HepG2细胞的CAT表达活性是pCAT3-Basic空载体的2.4倍,pCAT3-cyclinB2p的0.35倍.结论细胞周期素B2启动子有顺式激活下游基因的活性,双环醇具有对细胞周期素B2基因有下调作用.     

细胞周期素E及细胞周期依赖性激酶2在甲状腺乳头状癌中的表达

目的探讨细胞周期素E（cyclin E）和细胞周期依赖性激酶2（Cdk2）在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其生物学行为。方法用免疫组织化学S—P法检测细胞周期素E和细胞周期依赖性激酶2在甲状腺乳头状癌组中的表达,并利用HPIAS-2000图像分析系统测定细胞周期素E和细胞周期依赖性激酶2在其中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果癌旁组织中细胞周期素E及细胞周期依赖性激酶2呈阴性表达,甲状腺乳头状癌组织内细胞周期素E细胞周期依赖性激酶2表达呈强阳性,细胞周期素E和细胞周期依赖性激酶2在癌旁组织和甲状腺乳头状癌组织之间平均光密度及阳性面积率比较,差异有显著性（P〈0．05）。结论细胞周期素E和细胞周期依赖性激酶2在甲状腺乳头状癌癌组织中呈高表达,其表达及聚集程度与甲状腺乳头状癌的生物学行为及其发生、发展有关。     

细胞周期素依赖性激酶与缺血性卒中

细胞周期素依赖性激酶(cyclin—dependent kinase，CDK)是与细胞周期相关的网络调控系统的中心环节。近年来的研究表明，脑缺血后CDK调控信号通路被激活，可促进神经元凋亡，CDK抑制剂则对缺血引起的神经元损伤具有保护作用。文章对CDK的生物学特性、作用机制及其与卒中的关系作了综述。     

细胞周期蛋白E和生存素在结直肠癌中表达意义的探讨

目的研究结直肠癌中细胞周期蛋白E和生存素基因的表达,探讨其与结直肠癌的临床病理因素间的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测67例结直肠癌组织石蜡切片中细胞周期蛋白E和生存素蛋白的表达情况。结果①细胞周期蛋白E和生存素蛋白在结直肠癌中阳性表达率分别为44.77%(30/67)和49.25%(33/67);②细胞周期蛋白E和生存素蛋白的表达率及表达强度均分别与结直肠癌的细胞分化和淋巴结转移密切相关(P均<0.05);③结直肠癌中细胞周期蛋白E和生存素蛋白的表达未见明显相关性(P>0.05)。结论①细胞周期蛋白E可能作为一种细胞周期调节蛋白在结直肠癌细胞中特异性表达,其高表达的癌细胞常分化差,进展快且易发生转移,常为TNM晚期,因此细胞周期蛋白E具有癌基因的性质;②生存素作为一种癌蛋白,特异性表达于结直肠癌细胞中,与肿瘤的分化和转移密切相关,其高表达的癌细胞常分化差,易转移,预后差;③结直肠癌形成发展多步骤过程是多因素协同作用的结果,癌基因生存素和细胞周期蛋白E激活并上调蛋白的表达;④生存素和细胞周期蛋白E表达强度间无显著相关性,细胞周期蛋白E过表达导致结直肠癌细胞的细胞周期从G1期转化为S期,DNA合成增加,而生存素过表达则使DNA合成后的细胞从G2期转化为M期,癌细胞分裂活跃,两者的协同作用反映在癌生长和浸润转移的生物学表型特征上。     

新基因NS5ATP4表达产物下调细胞周期素B2基因表达的研究

目的探讨新基因NS5ATP4表达产物对细胞周期素B2(cyclin B2)基因启动子转录的调节作用.方法根据文献确定细胞周期素B2的启动子区域,聚合酶链反应(PCR)扩增细胞周期素基因因启动子(B2p),克隆至真核报告基因表达载体pCAT3-Basic中,构建pCAT3-cyclin B2p报告载体;以该质粒转染肝癌细胞系HepG2细胞系,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测报告基因氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性:并与pcDNA3.1(-)-NS5ATP4共转染HepG2细胞系,用ELISA法检测CAT的表达活性.结果成功获得细胞周期素B2启动子的正确克隆.pCAT3-cyclinB2p和pcDNA3.1(-)-NS5ATP4共转染的HepG2细胞的CAT表达活性是pCAT3-Basic空载体的10倍,pCAT3-cyclin B2p的0.14倍.结论本文克隆的细胞周期素B2启动子有顺式调节下游基因表达的活性,NS5ATP4对细胞周期素B2基因的转录具有下调作用.     

人肝再生增强因子上调细胞周期素B2基因的表达

目的研究人肝再生增强因子(ALR)转基因表达对细胞周期素B2启动子(cyclin B2p)转录的调节作用,从而进一步探讨ALR的生物学作用及机制。方法根据文献确定细胞周期素B2p区域,聚合酶链反应(PCR)扩增细胞周期素B2p,克隆至报告基因表达载体pCAT3-Basic中,构建pCAT3-cyclin B2p报告载体;以该质粒转染肝癌细胞系HepG2细胞系,同时与ALR的真核表达载体pcDNA3．1(-)-ALR共转染HepG2细胞系,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测报告基因氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性。结果成功构建pCAT3- cyclin B2p报告基因表达载体;pCAT3-cyclin B2p与pcDNA3．1(-)-ALR共转染HepG2细胞系的CAT表达活性是pCAT3-Basic空载体的25．13倍,是pCAT3-cyclin B2p单转染的2．60倍。结论人ALR对细胞周期素B2p基因的转录表达具有反式激活作用。     

细胞周期检测点调控与血液病

细胞周期素依赖性激酶 (Cyclin dependentki-nases,CDK)在特定的时间与其调节亚基细胞周期蛋白 (Cyclins,又称细胞周期素 )形成 CDK/cy-clin复合物 ,磷酸化相应底物蛋白 ,推动细胞通过细胞周期的特定时相 ,即细胞周期检测点 (Cell cy-cle checkpoint)。最近发现的一类小分子蛋白可通过非磷酸化途径抑制 CDK/Cyclin活性 ,称作 CDK抑制物 (CDK inhibitor,CKI)。以 CDK、Cyclin和CKI三者为中心形成检测点复杂而精细的调控网络 ,其与肿瘤的关系一直是基础与临床医学研究的热点。本文拟就细胞周期检测点调控及其在若干血液病研究中的…     

细胞周期素G及细胞周期依赖激酶抑制剂P21WAF1在急性白血病中的表达

细胞周期素G(cyclin G)发现较晚,其功能还没有完全阐明,可能在细胞周期和DNA修复中起作用,并参与细胞凋亡过程,并且在不同的组织细胞中或不同来源的肿瘤细胞中,其表达水平和生物学功能也是不同的[1].迄今尚未见到有关急性白血病(AL)的cyclin G的报道.我们采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测AL患者cyclin G、P 21WAF1的mRNA表达,探讨其白血病的关系.     

冬凌草甲素通过激活ATM蛋白诱导人肝癌HepG2细胞G_2/M细胞周期阻滞

目的研究冬凌草甲素诱导肝癌HepG2细胞G2/M细胞周期阻滞的机制。方法不同浓度的冬凌草甲素(16、32、64μmol/L)处理HepG2细胞48 h后,流式细胞仪检测冬凌草甲素诱导肝癌HepG2细胞的细胞周期。Western印迹检测不同浓度冬凌草甲素作用肝癌HepG2细胞后H2AX蛋白的磷酸化。免疫荧光实验检测Phos-S1981ATM和γ-H2AX焦点。结果彗星实验结果表明不同浓度的冬凌草甲素(16、32、64μmol/L)处理HepG2细胞48 h后,可发生G2/M细胞周期阻滞,并且随浓度增加细胞周期阻滞增加。Western印迹检测不同浓度冬凌草甲素作用肝癌HepG2细胞后,H2AX蛋白发生磷酸化,γ-H2AX随着浓度增加表达增大。免疫荧光实验发现Phos-S1981ATM和γ-H2AX焦点随着浓度增加表达量增加。结论冬凌草甲素可以诱导肝癌HepG2细胞G2/M细胞周期阻滞,H2AX蛋白发生磷酸化,诱导DNA损伤的发生。     

丹参素对胃癌MGC803细胞周期的影响及凋亡诱导作用

目的研究丹参素的体外抗肿瘤细胞增殖作用及其分子机制。方法 MTT法检测丹参素对人肿瘤细胞的抗增殖作用,流式细胞术检测细胞周期分布的改变及细胞凋亡,Western blot检测细胞周期素CyclinB1蛋白的表达,比色法测定Caspase-3和Caspase-6的活性。结果丹参素可诱导MGC803细胞出现G2/M期阻滞并诱导细胞凋亡。细胞中CyclinB1蛋白表达下调,Caspase-3和Caspase-6的活性显著升高。结论丹参素具有抗肿瘤细胞增殖作用,通过抑制细胞周期素CyclinB1表达诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡。     

CIP/KIP族细胞周期蛋白激酶抑制剂与糖尿病肾病

细胞周期素激酶抑制剂(CKIs)是细胞周期的负调控蛋白,其CIP/KIP家族表达异常在糖尿病肾病早期发病中起着重要作用.高糖、血管紧张素-Ⅱ(Ang-Ⅱ)、转化生长因子-β(TGF-β)等均可影响其表达.CKIs通过抑制细胞周期素激酶(CDK)活性使细胞停留于G1期,引起肾脏细胞肥大,与晚期肾小球及肾小管间质纤维化有密切关系.明确CKIs在糖尿病肾病早期发病中的作用将为糖尿病肾病早期防治提供有力的理论依据.