海生素对K562/ADM细胞增殖和凋亡基因表达的影响

目的 探讨海生素(HSS)抗白血病作用及其机制.方法 分别以不同质量浓度(.1～1 000.0 μg/ml)HSS处理白血病耐药细胞K562/ADM,采用MTT法测定细胞增殖情况,免疫细胞化学法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达,流式细胞仪(FCM)测定凋亡率,Western blot法检测caspase-3表达.结果 HSS在较高质量浓度时可抑制K562/ADM细胞生长,且具有时效和量效性;经HSS处理的K562/ADM细胞呈现凋亡特有的亚G1峰,凋亡比率随HSS质量浓度和时间延长而增高;HSS处理后,K562/ADM细胞中Bcl-2呈阴性表达,Bax呈强阳性表达;caspase-3表达上调.结论 HSS在体外可明显抑制K562/ADM细胞增殖;可能通过下调Bcl-2表达、上调Bax及caspase-3表达诱导K562/ADM细胞凋亡.     

海生素对小鼠Lewis肺癌的抑制作用

目的探讨海生素抗Lewis肺癌的作用。方法采用Lewis肺癌细胞株接种C57BIM6小鼠建立Lewis肺癌模型,尾静脉给予不同剂量的海生素,观察荷瘤小鼠生命延长率（ILS）及肺重指数变化。结果海生素高、中、低剂量组ILS分别为92．8％、75．1％、46．6％,其中高、中剂量组与空白对照组比较,P均〈0．05;各用药组肺重指数均明显降低（P〈0．01）。结论海生素对Lewis肺癌有明显的抑瘤作用。     

硒诱导红白血病K562细胞凋亡机制的探讨

目的 探讨微量元素硒对人红白血病细胞株（K562细胞株）诱导凋亡的机制。方法 采用免疫光技术检测加硒培养组（实验组）K562细胞的凋亡细胞核变化和凋亡小体的数量,同时还应用化学检测与细胞凋亡有关的酶。结果 实验组凋亡细胞明显增多,且呈剂量依赖性,实验组细胞内谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px)的活性及环磷酸苷（cAMP)的含量也明显高于对照（P＜0．01）。结论 硒能够诱导K562细胞凋亡,可提高该细胞内GSH－Px的活性及cAMP的含量。     

白藜芦醇对白血病K562细胞增殖、凋亡的影响及机制探讨

目的 探讨白藜芦醇对白血病K562细胞生长的影响及相关作用机制.方法 用不同浓度白藜芦醇作用于K562细胞,CCK-8法观察白藜芦醇对K562细胞生长增殖的影响,AnnexinV-FITC/PI双染法观察白藜芦醇对K562细胞凋亡的影响,PI染色法观察白藜芦醇对K562细胞周期的影响,Western blot法检测K562细胞中的Bcl-2、Bcl-xl、Bax、Cyclin D1蛋白.结果 白藜芦醇作用后的K562细胞的增殖被抑制并且凋亡增加,呈时间-剂量依赖性;同时,凋亡相关分子Bcl-2、Bcl-xl表达下调,Bax表达上调;白藜芦醇作用K562细胞后,G1期细胞增多,S期细胞减少,细胞周期调节蛋白Cyclin D1表达下降.结论 白藜芦醇可抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与下调细胞内Bcl-2、Bcl-xl、Cyclin D1表达并上调Bax的表达有关.     

旋毛虫培养液对人白血病细胞K562凋亡和坏死的影响

在对旋毛虫的研究过程中，有研究者曾对旋毛虫与肿瘤的关系进行了探讨。发现感染旋毛虫的小鼠再接种某些肿瘤细胞后，肿瘤细胞生长缓慢，甚至完全不生长，提示旋毛虫感染可以提高小鼠对肿瘤的防御机能。为了解旋毛虫致死肿瘤细胞的相关机制，本实验观察旋毛虫培养液对K562细胞凋亡和坏死的影响，现将结果报告如下。     

弓形虫诱导人白血病细胞K562凋亡的实验观察

目的 探讨弓形虫对体外培养的人白血病细胞K562（简称K562细胞）有无抑制作用和诱导细胞凋亡作用。方法 取培养至对数生长期的K562细胞（浓度为5×10^-4/ml和1×10^-6/ml）分别接种于96孔培养板（100 μl/孔）及50 ml培养瓶（1.5 ml/瓶）中，加入不同浓度的弓形虫速殖子（1×10⁴、2×10⁴、4×10⁴、8×10⁴及16×10⁴个/ml），作用48 h, 用四甲基氮噻唑蓝（MTT）法检测其对K562细胞增殖的抑制作用；荧光显微镜、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪检测细胞凋亡。 结果 上述不同浓度弓形虫速殖子作用48 h，对K562细胞增殖的抑制率依次为17%、28%、48%、50%及55%。各实验组吸光度（A₄₉₀）与对照组比较差异均有统计学意义（t=3.606及5.918， P<0.05； t=9.171、7.841、7.067， P<0.01）。荧光显微镜观察实验组培养的K562细胞，出现细胞核固缩及凋亡小体。琼脂糖凝胶电泳见DNA梯形条带。流式细胞仪检测到细胞凋亡峰（48 h），上述不同浓度弓形虫速殖子诱导K562细胞凋亡数分别占总数的5.53%、7.12%、10.34%、21.14% 及29.68%。对照组未出现凋亡小体。 结论 弓形虫速殖子对体外培养K562细胞增殖有明显的抑制作用，并可诱导K562细胞凋亡。     

青蒿琥酯诱导白血病K562细胞凋亡的临床研究

青蒿素是从菊秋植物黄花蒿中提取的有效单体 ,是一种新的化学结构抗疟药。青蒿琥酯是其衍生物 ,是具有过氧化桥的倍半萜内酯类化合物 ,具有水溶性好、抗疟活性高等特点。近年来 ,有人报道青蒿琥酯具有体内外抗肿瘤作用 ,对人肝癌细胞有诱导凋亡作用 [1]。2 0 0 2年 7月～ 2 0 0 3年 3月 ,我们观察了青蒿琥酯对体外培养的人慢性粒细胞白血病细胞系K5 62细胞的凋亡诱导作用 ,旨在为其治疗肿瘤提供理论依据。1　材料与方法1 .1　材料　注射用青蒿琥酯 ,5 %碳酸氢钠 1 ml,RP-MI1 640培养液 ,4℃保存。1 .2　方法1 .2 .1　细胞系及细胞培养　K…     

防风多糖诱导人白血病K562细胞凋亡的研究

目的:探讨防风多糖对体外培养人白血病K562细胞有无调亡诱导作用.方法:MTT法检测防风多糖对K562细胞的增殖抑制作用;荧光显微镜观察细胞的形态学变化;琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡的DNA断裂;流式细胞术采用Annexin-V/PI双染实验检测细胞凋亡.结果:MTT法检测显示防风多糖对K562细胞具有显著生长抑制作用;荧光显微镜下观察发现防风多糖作用的K562细胞中出现核固缩、凋亡小体;琼脂糖凝胶电泳呈现DNA梯形条带即(DNA ladder);流式细胞仪分析结果显示细胞凋亡百分率随防风多糖浓度增加而增加.结论:防风多糖对体外培养人白血病K562细胞具有增殖抑制及凋亡作用.     

露蜂房蛋白体外诱导K562细胞凋亡的作用及其机制

目的探讨露蜂房蛋白(NVP)体外诱导人红白血病细胞系K562细胞凋亡的作用及其机制。方法将露蜂房蛋白NVP1、NVP2、NVP3及NVP4分别作用于K562细胞,采用细胞培养、Hoechst 33258荧光染色技术观察K562细胞形态变化;采用免疫组织化学方法检测K562细胞天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cas-pase-3)表达。结果NVP1~NVP4作用后K562细胞生长缓慢,数量减少,胞质内颗粒增多,并出现大量空泡,细胞碎片逐渐增多;Hoechst33258荧光染色显著增强,染色质呈致密浓染的块状或粗颗粒状荧光。K562细胞cas-pase-3蛋白表达明显增加,与空白对照组相比有显著性差异(P<0.05)。结论NVP能抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡;其作用机制可能是使caspase-3蛋白表达升高和活化。     

香芹芥酚诱导人白血病K562细胞凋亡的研究

目的探讨香芹芥酚对人白血病K562细胞凋亡作用的影响。方法采用不同浓度的香芹芥酚处理体外培养的K562细胞,MTT比色法观察细胞存活率;Hoechst染色法观察细胞凋亡形态学变化,Annexin-V/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡率;Western-blot法检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达水平的改变。结果人白血病K562细胞存活率随着香芹芥酚作用时间延长和浓度增高而降低（P〈0.05）。香芹芥酚处理K562细胞48 h后出现较典型的细胞凋亡特征形态学改变,Annexin-V/PI双染法显示随着香芹芥酚作用浓度增大,凋亡细胞比例增大。West-ern-blot结果表明,香芹芥酚可以浓度依赖性降低凋亡相关基因Bcl-2的表达和增加Bax基因的表达。结论香芹芥酚具有诱导人白血病K562细胞凋亡的作用,其分子机制可能通过调控Bcl-2、Bax的基因及蛋白水平而诱导凋亡。     

叠氮胸苷诱导人类慢性粒细胞白血病细胞株K562凋亡的研究

目的观察叠氮胸苷（AZT）对人类慢性粒细胞白血病细胞株K562增殖的抑制作用,探讨其治疗白血病的可行性。方法以不同浓度AZT处理K562细胞,用四氮甲唑蓝实验测定AZT作用于细胞株48 h的IC50,瑞氏染色观察细胞凋亡形态学变化,流式细胞仪检测细胞周期变化,Annexin-V/PI双染法分析细胞凋亡比例。结果AZT对K562细胞株有明显增殖抑制作用,且抑制作用呈时间与浓度依赖性增长;AZT处理48 h后可见细胞凋亡形态学变化及白血病细胞株S期比例增大;Annexin V/PI双染法显示早期凋亡细胞比例增大。结论AZT有诱导白血病细胞凋亡的作用。     

毒胡萝卜素诱导K562细胞凋亡及其调控机制的研究

目的探讨毒胡萝卜索（TG）对K562细胞凋亡诱导作用及其调控机制。方法Hoechst33258染色荧光显微镜观察凋亡细胞形态改变;Annexin V—FITC／PI双染检测细胞凋亡率变化;RT—PCR检测bcl-2、bax、bcl—XL 、XIAP、survivin基因表达变化并通过免疫组织化学技术检测其在蛋白质水平的表达。结果TG作用后,K562细胞呈典型的凋亡细胞形态;细胞凋亡率均明显升高（P〈0.05）,且在一定范围内呈浓度和时间依赖性;bax、bcl—XL、XIAP mRNA和蛋白质表达上调,survivin mRNA和蛋白质表达下调,bcl-2／bax比率降低。结论TG可诱导K562细胞发生内质网应激反应性凋亡,其机制可能与Bax表达上调、survivin表达下调有关,bcl-XL XIAP表达上调可能发挥拮抗凋亡的作用。     

盐酸肾上腺素对白血病细胞株K562增殖及分化的影响

目的探讨盐酸肾上腺素在白血病发生、发展中的作用。方法采用MTT法集落培养实验观察盐酸肾上腺素对白血病细胞株K562细胞增殖的影响;采用Gimesa染色观察细胞形态学变化,采用流式细胞术检测CD71分化抗原表达。结果盐酸肾上腺素可明显降低K562细胞增殖、集落生长,并呈浓度依赖性;在形态上可诱导细胞趋向红系分化,同时上调K562细胞膜CD71分化抗原的表达。结论盐酸肾上腺素在白血病发生、发展中起重要作用,其机制为抑制K562细胞增殖和诱导其分化。     

herg1基因调控慢性髓细胞白血病细胞的增殖和细胞周期

目的:研究herg1基因在慢性髓细胞白血病(CML)细胞的表达及其对CML细胞增殖和细胞周期的调控作用.方法:应用RT-PCR方法测定33例初治慢性髓细胞白血病患者和10例健康志愿者的骨髓细胞herg1基因的表达,检测特异性抑制剂处理后CML细胞株K562增殖凋亡和细胞周期的变化.结果:①在初发CML病例中,herg1 mRNA的表达率是72.7% (24/33),高于正常对照(20%)(P<0.01).CML加速期和急变期的herg1 mRNA的表达率分别为75%和90.9%,高于正常对照(P<0.01),但是herg1的表达与CML的临床分期并无相关性(P>0.05).②E-4031(1 μmol/L)可呈时间依赖性抑制细胞增殖,不诱导明显凋亡.③E-4031阻滞K562细胞周期于G1期.结论:CML细胞herg1基因表达失调,IHERG抑制剂E-4031对K562细胞的增殖和细胞周期具有调控作用,herg1基因可能与CML发病机制相关.     

Inhibition of proliferation and induction of apoptosis by melatonin in human myeloid HL-60 cells

Melatonin is an indoleamine that is synthesized in the pineal gland and has an extensive repertoire of biological activities. In the present study, we found that melatonin reduced the growth of the human myeloid leukemia cells HL-60, inhibiting progression from G(1) to S phase of the cell cycle and increasing apoptotic cell death. Furthermore, melatonin treatment elevated cytochrome c release from mitochondria and augmented caspase-3 and caspase-9 activities. Upregulation of Bax and downregulation of Bcl-2 was also observed upon melatonin treatment. The effects of melatonin were found not to be mediated by membrane receptors for the indoleamine. Together, our results suggest that melatonin reduces the viability of HL-60 cells via induction of apoptosis primarily through regulation of Bax/Bcl-2 expression.     

普萘洛尔对急性髓系细胞白血病U937细胞增殖和凋亡的影响

目的:探究普萘洛尔对急性髓系细胞白血病U937细胞的增殖和凋亡的影响及可能的机制。方法:采用CCK8法检测不同药物对U937细胞增殖率的影响,分别为普萘洛尔(0、200、400、800、1000、2 000μmol/L)作用24、48、72 h,阿糖胞苷单用(0、10、50、100、200、400、800 nmol/L)24 h,普萘洛尔(400μmol/L)联合阿糖胞苷(10、50、100、200、400、800 nmol/L)作用24 h。普萘洛尔(0、200、400、800μmol/L)作用U937细胞24 h后,用流式细胞术检测细胞的凋亡和周期、线粒体膜电位的变化,用碱性彗星实验检测DNA的损伤,Caspase-Glo试剂盒检测Caspase-3、8、9相对活性的变化,Western blot法检测Bcl-2、Bax蛋白表达量的变化。结果:普萘洛尔可以有效抑制U937细胞的增殖,其效应具有一定的时间(200、400μmol/L,P0.05)和剂量相关性(0、200、400、800μmol/L,P0.01),普萘洛尔还可协同阿糖胞苷的抗肿瘤效应。流式、彗星、Caspase、Western blot结果分别表明普萘洛尔可增加细胞凋亡率,增加G_0/G_1期和减少G_2/M期细胞比例,降低线粒体膜电位水平,诱导DNA损伤,增强Caspase3、8、9活性,上调Bax的表达、下调Bcl-2的表达,且在实验浓度范围内与剂量呈相关性(P0.05)。结论:普萘洛尔可抑制急性髓系细胞白血病U937的增殖并诱导其凋亡,这一机制可能与其诱导G_0/G_1期细胞阻滞、损伤DNA,激活内、外源性凋亡途径有关。     

多囊肾病囊肿衬里上皮细胞增生与凋亡的研究

目的 :研究多囊肾病囊肿衬里上皮的增生与凋亡及相关蛋白表达。　 方法 :应用原位末端标记(TUNEL)法和免疫组化法 ,对 3例正常肾组织和 12例常染色体显性遗传型多囊肾病 (ADPKD)患者 (2例为终末期肾病患者 ,10例为氮质血症期患者 )肾组织中囊肿衬里上皮细胞的凋亡细胞和增生细胞核抗原 (PCNA)阳性细胞计数 ,并检测c myc、bcl 2、bax、p5 3、Fas蛋白表达。　 结果 :多囊肾病囊肿衬里上皮细胞增生与凋亡均增加 ,增生较凋亡增加显著 ,PCNA阳性细胞 /凋亡细胞为 3 46± 1 6 8。多囊肾组织c myc蛋白和bcl 2蛋白表达显著升高。bax、p5 3和Fas的表达并无改变。　 结论 :多囊肾病中囊肿衬里上皮细胞的增生和凋亡失调 ,调节这些过程的基因异常表达介导了多囊肾病囊肿形成。多囊肾组织c myc蛋白高度表达 ,与囊肿衬里上皮过度增生、凋亡相关。多囊肾囊肿衬里上皮细胞的凋亡不依赖于bcl 2、p5 3和Fas。