高分辨率熔解曲线技术检测冠心病患者IL-6及其受体基因单核苷酸多态性

摘要：目的：通过高分辨率熔解曲线(HRM)技术检测IL-6及其受体基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP),探讨IL-6及其受体基因SNP与冠心病(CHD)的相关性。 方法：用HRM曲线技术检测231例CHD患者和275例健康人IL-6及其受体基因6个SNP位点（IL-6-572C/G、IL-6-597A/G、IL-6-174C/G、IL-6-R-183A/G、IL-6-R-exon1C/A和IL-6-R-exon2A/T）,分析其与CHD的相关性。 结果：CHD组和健康人对照组IL-6-572C/G、IL-6-597A/G、IL-6-R-exon1C/A和IL-6-R-exon2A/T基因频率、基因型频率差异有统计学意义(P均＜0.05)。IL-6-572CC、IL-6-597GA和IL-6-R-exon2AT基因型能增加发生CHD的风险（OR值分别为1.935、2.651、1.809）;IL-6-R-exon1CC基因型能降低CHD的发生风险（OR=0.514）。 结论：IL-6-572C/G、IL-6-597A/G、IL-6-R-exon1C/A和IL-6-R-exon2A/T与西北地区人群CHD易感性相关。     

IL-6基因572C/G多态性与江苏宿迁地区汉族人群冠心病的关系

目的分析江苏宿迁地区汉族人群IL-6基因-572C/G多态性与冠心病(CHD)的关系。方法采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测197例CHD患者及202例健康对照者IL-6基因-572C/G多态性,并进行HardyWeinberg平衡检验,选取部分DNA进行测序,以验证其基因型;用AU5400全自动生化分析仪测定其血糖和血脂水平。结果IL-6-572C/G基因频率在CHD组和健康对照组中均具有群体代表性(P0.05);健康对照组和CHD组CC、CG、GG基因型分布分别为53.5%、41.1%、5.4%和36.6%、49.7%、13.7%,C,G等位基因频率则分别为74.0%、26.0%和61.4%,38.6%。与健康对照组比较,CHD组IL-6-572C/G的CG+GG基因型频率显著升高(χ~2=11.53,P=0.007);危险因素分析结果显示,IL-6-572G等位基因增加了CHD患病风险(OR=1.79,95%CI:1.32~2.42,P=0.000)。在CHD组中,血糖血脂水平在IL-6-572CC、CG和GG 3种基因型间的差异无统计学意义(P0.05)。早发冠心病与健康对照组比较结果显示CG+GG基因型频率显著升高(χ~2=5.52,P=0.019),且G等位基因频率显著升高(χ~2=6.01,P=0.014);但早发冠心病与晚发冠心病比较,所有基因型差异均无统计学意义(P0.05)。结论 IL-6-572G等位基因与江苏宿迁地区汉族人群CHD的发病密切相关,与早发CHD易感性亦显著相关。     

白细胞介素6基因启动子区多态性与冠状动脉疾病的相关性研究

目的 探讨白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)基因启动子区-174G/C、-572C/G和-634C/G多态性对冠状动脉疾病(coronary heart disease,CHD)的发病易感性.方法 严格按照诊断标准,选取无亲缘关系的CHD患者126例(CHD组)及健康对照组150例提取基因组DNA,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-polymorphism,Restriction Fragment,PCR-RFLP)技术检测-174 G/C、-572 C/G和-634 C/G 3个多态性位点的基因型;采用HaploView4.0及SPSS11.5软件分析各位点基因型、等位基因频率及组间差异.结果 -572C/G位点及-634C/G位点的基因型频率分布在CHD组与正常对照组差异均有统计学意义(P＜0.05),CHD组-572C/G位点的等位基因G频率显著高于正常对照组(P＜0.05),-634C/G位点的等位基因G频率显著高于正常对照组(P＜0.05).连锁不平衡检验结果显示,IL-6基因这3个位点处于不连锁状态,D'＜0.5.结论 IL-6基因-174G/C和-572C/G多态性可能与CHD有关,携带有-572C/G和-634C/G多态性位点G等位基因的个体可能更容易患CHD.     

青岛地区哮喘患者IL-6基因启动子-634C/G位点多态性研究

目的:了解白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)基因启动子区域单核苷酸多态位点-634C/G与青岛地区汉族人群过敏性哮喘的相关性.方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析方法对青岛地区479例健康个体和481例过敏性哮喘患者IL-6基因启动子-634C/G多态性进行观察.结果:过敏性哮喘组与健康对照组CC、CG和GG基因型以及C和G等位基因频率分布均无统计学差异,携带GG、CG、CC基因型个体哮喘患病风险依次递增.结论:IL-6基因启动子-634C/G位点多态性与青岛地区人群过敏性哮喘发生无相关性,但携带CC等位基因型的个体过敏性哮喘的发病风险可能增加.     

白细胞介素6基因启动子-572 C/G多态性与心绞痛的相关性研究

目的探讨白细胞介素6(IL-6)基因启动子-572C/G多态性各等位基因及基因型在心绞痛患者中的分布频率,并分析其基因型及血清水平与心绞痛的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测121例心绞痛患者及140例对照者IL-6基因启动子-572C/G多态性,同时用ELISA法检测心绞痛和对照者血清IL-6水平。结果心绞痛组IL-6血清水平显著高于对照组(P<0.01),IL-6基因启动子-572C/G基因型频率和等位基因频率在心绞痛组和对照组间比较差异有显著性(P<0.05),等位基因频率的相对风险分析发现,G等位基因携带者患心绞痛的风险是C等位基因的1.665倍(OR=1.665,95%CI:1.089~2.544);结论IL-6基因启动子-572C/G多态性与心绞痛的发病具有相关性。     

白细胞介素-6基因启动子-572C/G、-634C/G的多态性与脑梗死的研究

目的探讨脑梗死患者白细胞介素-6（IL-6）基因启动子-572C/G-、634C/G的多态性及其血清水平与脑梗死的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）的分析方法,检测了106例脑梗死患者和92例健康对照者IL-6基因多态性,同时采用酶联免疫吸附试验检测IL-6的血清水平。结果脑梗死组IL-6水平显著高于对照组（P〈0.05）,IL-6-572C/G基因型和等位基因频率在脑梗死组和对照组比较,差异有显著性（P〈0.05）,与健康对照组相比,发现G等位基因携带者患脑梗死的相对风险度增加1.634倍（OR=1.634,95%CI=1.135~2.468）。携带G等位基因的脑梗死患者血清IL-6水平显著高于不携带者（P〈0.05）。IL-6基因-634C/G多态性在脑梗死组和对照组之间比较差异无显著性（P〉0.05）。结论 IL-6基因-572C/G多态性与脑梗死之间存在相关关系,其中G等位基因可能是脑梗死发病的遗传易感基因;携带G等位基因的个体可能通过促进IL-6的高度表达进而增加了脑梗死的发病风险。     

白细胞介素6基因-174G/C和-634C/G多态性与冠心病的相关性研究

目的探讨白细胞介素6(interleukin6,IL6)基因启动子上游174G/C和634C/G基因多态性,在冠心病患者和正常人群中的分布及与冠心病的相关性。方法应用聚合酶链反应限制性片断长度多态性技术,对汉族199例冠心病患者及189名正常人群,白细胞介素6基因174G/C、634C/G位点进行研究,同时结合血脂、脂蛋白和载脂蛋白水平,探讨两者之间的关系。结果正常人群和冠心病患者的174G等位基因频率均为0.99。174C等位基因频率均为0.01。634C等位基因频率在正常人群和冠心病患者分别为0.82和0.76,G等位基因频率分别为0.18和0.24,两者差异有统计学意义(P<0.05)。冠心病患者634GG基因型频率(0.08)明显高于对照组(0.02)(P<0.05)。结论白细胞介素6基因174位点多态性与冠心病无关,而634位点多态性与冠心病有相关性。G等位基因可能是汉族人群冠心病的易感性标志。     

IL-6基因启动子区域-572C>G和-174G>C多态性与江苏宿迁汉族人群冠心病的相关性

目的 探讨白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)基因启动子区域-572C>G和-174G>C基因多态性与宿迁汉族人群冠心病(coronary heart disease,CHD)的关系。方法 参考2010卫生部CHD诊断标准(WS319-2010),选择2017年1～12月在宿迁市第一人民医院心内科确诊的CHD患者,应用聚合酶链-限制性片段长度多态性(Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)方法检测266例CHD患者和192例体检健康人群(对照组),分析其IL-6-572C>G和IL-6-174G>C基因多态性,并进行Hardy-Weinberg平衡检验,检测血糖、血脂等生化指标。结果 IL-6-572C>G基因型和等位基因频率在两组间分布差异有统计学意义(χ2=11.1,19.5,22.4,均P<0.05),CHD组GG型和CG型OR值分别是CC型的4.88倍(95%CI:2.31～10.31)和1.96倍(95% CI:1.32～2.91); -174G>C基因型和等位基因频率在两组间分布差异无统计学意义(χ2=0.024,0.027,均P>0.05)。结论 IL-6-572G等位基因可能是宿迁汉族CHD的易感基因,IL-6-174G>C基因多态性可能与宿迁汉族人群CHD没有相关性。     

IL-6 174G>C基因多态性与南京地区汉族人群冠心病的相关性

目的探讨IL-6基因启动子区域-174GC基因多态性与南京汉族人群冠心病(CHD)的关系。方法聚合酶链-限制性片段多态性(PCR-RFLP)检测235例CHD患者和175例体检健康者,分析各组IL-6-174GC基因多态性,并进行Hardy-Weinberg平衡检验,选取部分DNA样本进行基因测序,以验证其基因型。同时检测各组血脂、Glu、C反应蛋白、糖化血红蛋白的表达水平。结果 CHD组和健康人对照组GG、GC、CC基因型频率分别为98.7%、1.3%、0和97.7%、2.3%、0,G、C等位基因频率分别为99.4%、0.6%和98.9%、1.1%,基因型和等位基因频率在两组间的分布差异无统计学意义(P均0.05),与健康人对照组相比,CHD组吸烟、SBP、DBP、TG、CHOL、HDL-C、Apo A-I、Apo B、CRP、Hb A1c差异均有统计学意义(P均0.05),而年龄、性别、Glu差异均无统计学意义(P均0.05)。结论 IL-6-174GC基因多态性与南京地区汉族人群CHD没有明显的相关性。     

白细胞介素-6基因型及血清水平与急性心肌梗死的关系

目的分析急性心肌梗死患者白细胞介素-6(IL-6)基因启动子-572C/G、-634C/G的多态性,探讨IL-6的基因型及其血清水平与急性心肌梗死的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的分析方法,检测了128例急性心肌梗死患者和145例健康对照者IL-6基因多态性,同时采用酶联免疫吸附试验检测IL-6的血清水平。结果急性心肌梗死组IL-6水平显著高于对照组(P<0·01),IL-6-572C/G基因型和等位基因频率在急性心肌梗死组和对照组比较,差异有显著性(P<0·05),与健康对照组相比,发现G等位基因携带者患急性心肌梗死的的相对风险度增加1·740倍(OR=1·740,95%CI=1·135~2·668)。携带G等位基因的急性心肌梗死患者血清IL-6水平显著高于不携带者(P<0·01)。IL-6基因-634C/G多态性在急性心肌梗死组和对照组之间比较差异无显著性(P>0·05)。结论IL-6基因-572C/G多态性与急性心肌梗死之间存在相关关系,其中G等位基因可能是急性心肌梗死发病的遗传易感基因;携带G等位基因的个体可能通过促进IL-6的高度表达进而增加了急性心肌梗死的发病风险。     

肝脂酶基因-250G/A多态性与脑梗死

目的:探讨上海汉族人群肝脂酶基因启动子250G/A(HL-250G/A)多态性与脑梗死的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RELP)技术检测133例脑梗死患者和92名正常老年人HL-250G/A多态性基因型,并研究其对血脂水平的影响。结果:脑梗死组的基因型和等位基因频率分布与正常老年组相比,均有显著差异;在男性无突变型中,脑梗死组的高密度脂蛋白胆固醇水平比正常老年组低;在女性中,脑梗死组突变型的三酰甘油水平高于同组的无突变型和正常老年组的突变型,统计学上差异均存在显著性(P     

Matrix metalloproteinase-1 (-1607) 1G/2G and -9 (-1562) C/T promoter polymorphisms: susceptibility and prognostic implications in nasopharyngeal carcinomas

BACKGROUND: Matrix metalloproteinases (MMPs) are proteolytic enzymes that play important roles in tumor invasion and metastasis by degrading extracellular matrix components. Genetic variations in promoter regions of MMP genes, affecting their expression, have been associated with susceptibility to cancers. The aim of this study was to investigate the susceptibility and prognostic implications of the MMP-1 (-1607) 1G/2G and MMP-9 (-1562) C/T polymorphisms in nasopharyngeal carcinomas. METHODS: The variation of the MMP-1 and MMP-9 promoter regions in 174 patients with NPC and 171 healthy control subjects was investigated. Association of the clinico-pathologic parameters and the genetic markers with the rates of the nasopharyngeal carcinoma-specific overall survival and the disease-free survival were assessed using univariate and multivariate analyses. RESULTS: No association was found between genetic variation in MMP-9 and the risk of NPC occurrence. In contrast, a significantly increased risk of NPC was associated with the homozygous MMP-1 (-1607) 2G2G genotype (OR=2.27; p=0.02). A significant association was also found between the 2G2G genotype and the aggressive forms of NPC as defined by large tumor size (T3-T4), lymph node metastasis and advanced stages (III-IV) at the time of diagnosis. Moreover, an association was ascertained between the MMP-1 polymorphism and gender (OR=2.90; p=0.02). In univariate analysis, the MMP-1 (-1607) 2G allele showed a significant association with reduced disease-free survival for NPC patients (p=0.03). CONCLUSIONS: The genetic variation in MMP-1 may represent a marker for the increased risk of nasopharyngeal carcinoma.     

白细胞介素10-819C／T、-1082G／A基因多态性与脑梗死的关系

目的探讨白细胞介素10（IL-10）基因多态性与脑梗死（CI）的关系。方法采用突变错配扩增技术,结合血液生化和血压等临床资料,对189例急性CI患者（CI组）和92例非急性CI者（对照组）的IL-10启动子1082G／A和819C／T基因的单核苷酸多态性（SNP）位点与CI的关系进行研究。结果IL-10启动子1082G／A和819C／T的CI组的基因型和等位基因频率分布与对照组相比差异均无统计学意义（P〉0．05）;CI组的IL-10启动子1082AA型的收缩压明显高于（AG＋GG）型（P〈0．05）,且AA型的收缩压、舒张压、血糖均明显高于对照组（P〈0．05）,（AG＋GG）型的高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）明显低于对照组（P〈0．05）;CI组的IL-10启动子819CC型的收缩压、舒张压均明显高于TT型和CT型（P〈0．05）,且TT型的收缩压、舒张压、血糖均明显高于对照组（P〈0．05）,CT型的HDL—C明显低于对照组（P〈0．05）,CC型的收缩压、舒张压明显高于对照组（P〈0．05）。结论IL．10基因启动子1082G／A和819C／T的多态性与CI发生无明显相关,但与CI的发展和预后有-定关联。     

Interleukin-18 and IL18 -607A/C and -137G/C gene polymorphisms in patients with penicillin allergy

This study investigated the association between polymorphisms (-607A/C and -137G/C) in the promoter region of the IL18 gene (which encodes interleukin [IL]-18) and serum levels of IL-18, using standard genotyping techniques (sequence specific primer-polymerase chain reaction) and an enzyme-linked immunosorbent assay, respectively, in patients allergic to penicillin. A higher frequency of A alleles and the AA genotype was found at position -607A/C in patients allergic to penicillin than in control subjects. For the -137G/C position, the C allele was more frequent in patients allergic to penicillin than in control subjects. Haplotype analysis showed that the -607A/-137C haplotype was more frequent in patients allergic to penicillin than in control subjects. The patients had a significantly higher serum IL-18 level than the control subjects. In conclusion, IL18 -607A/C and -137G/C promoter polymorphisms are associated with susceptibility to penicillin allergy. In particular, the -137G/C position appears to play an important role in IL18 expression.     

脂联素基因-11377C/G多态性与缺血性脑卒中的相关性

[目的]探讨脂联素基因(ADIPOQ)-11377C/G多态性与缺血性脑卒中的相关性.[方法] 用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性方法检测302例缺血性脑卒中患者和338例健康对照者的ADIPOQ基因-11377C/G位点的基因型.[结果]①病例组的GG基因型和G等位基因频率明显高于对照组(P=0.034和P=0.010).②GG基因型携带者发生缺血性脑卒中的危险是CC基因型携带者的2.062倍(95%CI:1.145~3.715;P=0.016),校正各种混杂因素后发病危险度为2.165倍(95%CI:1.116~4.197;P=0.022).③-11377C/G位点与动脉粥样硬化性脑梗死的发病有关,与腔隙性脑梗死的发病无关.[结论] ADIPOQ基因的-11377C/G位点的GG基因型和G等位基因可能增加缺血性脑卒中的发病风险,特别是动脉粥样硬化性脑梗死的发病风险,其可能是缺血性脑卒中的危险因素.     

纤溶酶原激活物抑制剂-1(4G/5G)基因多态性与深静脉血栓事件的风险概率

目的分析我国西北地区纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)(4G/5G)基因在不同人群中的分布情况,以及不同基因型患者血栓事件的发生率,为携带PAI-1(4G/5G)基因4G型的手术患者提供数据支持和用药指导。方法收集1 494例行基因位点检测人群血液样本,使用荧光探针原位杂交技术检测PAI-1(4G/5G)基因位点,分析我国西北地区PAI-1(4G/5G)基因在体检健康者、剖腹产患者、烧伤患者、心脑血管疾病患者之间4G基因型的差异性。结果 336例体检健康者中5G5G(野生型)78例(23.21%),4G5G(杂合突变型)152例(45.24%),4G4G(纯合突变型)106例(31.55%)。401例剖腹产患者中5G5G(野生型)60例(14.96%),4G5G(杂合突变型)195例(48.63%),4G4G(纯合突变型)146例(36.41%)。603例烧伤患者中5G5G(野生型)100例(16.58%),4G5G(杂合突变型)295例(48.93%),4G4G(纯合突变型)208例(34.49%)。154例心脑血管疾病患者中5G5G(野生型)21例(13.64%),4G5G(杂合突变型)81例(52.59%),4G4G(纯合突变型)52例(33.77%)。剖腹产患者、烧伤患者、心脑血管疾病患者PAI-1(4G/5G)基因4G型携带率与体检健康人群间的差异均有统计学意义(P0.05)。追踪观察200例烧伤手术患者,患病后2个月内有139例(69.5%)发生深静脉血栓事件,4G4G基因型血栓事件为86.49%(64/74),4G5G基因型血栓事件为65.00%(52/82),5G5G基因型血栓事件为50.00%(23/46),不同基因型深静脉血栓事件发生率的差异有统计学意义(P0.01)。结论通过分析PAI-1(4G/5G)基因在不同人群中的分布以及发生血栓事件的发生率,可预防或降低手术患者发生静脉血栓、脑卒中等的风险。     

Two MMP-2 promoter polymorphisms (-790T/G and -735C/T) in chronic heart failure.

Remodelling of extracellular matrix by activated matrix metalloproteinases is considered to contribute to progression of ventricle remodelling during chronic heart failure. The aim of this study was to associate two promoter polymorphisms, -790T/G and -735C/T, in the gene for matrix metalloproteinase (MMP)-2 (gelatinase A) with chronic heart failure (CHF). For this purpose, 164 patients (124 men, 40 women, median age 56 years, range 21-91 years) with CHF (functional class NYHA II-IV, ejection fraction median 25%, cardiothoracic index more than 50%) were compared with 196 control subjects without clinical signs of cardiovascular disease (131 men and 65 women, median age 56 years, range 27-84 years) in -790T/G and -735C/T MMP-2 genotype distributions and allelic frequencies. The genotypes were determined by polymerase chain reaction (PCR) with restriction analyses. A significant increase of the T allele of the -790T/G MMP-2 polymorphism (p = 0.04), as well as of the C allele of the -735C/T MMP-2 gene polymorphism, in patients with CHF was proven (p = 0.04). The heterozygote CT of the -735C/T MMP-2 polymorphism exhibits a 7 times higher odds ratio (OR) for the CHF patients with lower levels of total cholesterol (less than 5 mmol/l), especially for non-hypertensive CHF men (OR = 7.28, 95% confidence interval 1.51-35.03, p = 0.006). Determination of MMP polymorphisms in the regulatory area of the gene could help us to comprehend individual susceptibility of patients with CHF to MMP inhibitors based on known risks of MMP genotypes.     

肝脂酶基因-763A／G多态性与混合型高脂血症的关系

目的探讨混合型高脂血症（CHL）与肝脂酶（HL）基因启动子763A／G多态性的关系。方法运用聚合酶链反应一限制性内切酶片段长度多态性技术（RCR—RFLP）,对219名对照者和218例CHL患者的HL基因启动子763A／G多态性进行检测,并研究其对血脂水平的影响。结果总研究组的HL-763A／G多态性的AA、AG和GG基因型频率分别为0．3155、0．4936、0．1908;A、G等位基因频率分别为0．5623、0．4377。在CHL组中除年龄、高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）、载脂蛋白A—I（apoA—I）,AA型的低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）、载脂蛋白B（apoB）及GG型的apoA～I水平外,其余指标均与对照组同基因型之间差异有统计学意义（P〈0．05）;GG型的年龄明显低于AA型（P〈0．05）,apoA—I水平明显高于AA型（P〈0．05）,而apoA—I及apoA—I／apoB水平明显高于AG型（P〈0．05）。在CHL男性组中,除AA型HDL—C、GG型HDL—C、apoA—I水平外,其余血脂水平均高于对照男性组（P〈0．05）,同样,在CHL女性组中,除GG型的HDL—C、apoA—I、非高密度脂蛋白胆固醇（nonHDL—C）、apoB水平外,其余血脂水平均高于对照女性组（P〈0．05）。而CHL女性组GG型的apoA—I水平明显高于AA型（P〈0．05）。结论HL启动子763A／G多态性与CHL的发生相关,并可影响血浆的脂类代谢。     

VKORC1-1639G／A基因多态性与华法林应用剂量关系的研究

目的探讨维生素K环氧化物还原酶复合物1基因（VKORC1）-1639G／A多态性对中国汉族人华法林应用剂量的影响。方法应用PCR—RFLP法检测129例长期口服华法林的患者和198例健康对照者VKORC1-1639G／A多态性，比较VKORC1不同基因型间平均华法林剂量。结果病例组VKORC1-1639AA、AG、GG基因型频率分别为74．4％（96／129）、23．3％（30／129）、2．3％（3／129），等位基因A和G频率分别为86％和14％。病例组与健康对照者VKORC1-1639G／A多态性分布差异无统计学意义（P〉0．05）。VKORC1-1639不同基因型患者所需华法林平均剂量差异有显著统计学意义（P〈0．（301），AA型剂量[（1．444±0．282）mg／INR]显著低于AG型[（1．629±0．258）mg／INR，P=0．002]和GG型患者[（2．031±0．087）mg／INR，P=0．017]。结论中国人华法林应用剂量偏低可能与VKORC1-1639AA型占多数有关。