THREE-DIMENSIONAL RECONSTRUCTION OF BENIGN LYMPHOID AGGREGATES IN BONE MARROW TREPHINES

Distinguishing between deposits of low-grade non-Hodgkin's lymphoma and benign lymphoid aggregates in bone marrow trephine sections is a recognized problem in haematopathology. To test the hypothesis that benign lymphoid aggregates do not make contact with a trabecular surface, three-dimensional models were constructed of five serially sectioned bone marrow trephines, containing a total of 19 lymphoid aggregates known to be benign. The computer-generated images showed that benign lymphoid aggregates were located in the central marrow space and did not become paratrabecular. This suggests that a paratrabecular location may help in some cases to distinguish deposits of low-grade non-Hodgkin's lymphoma from benign lymphoid aggregates.     

肱骨上端骨髓腔尖部的X线观察

目的：观察肱骨上端骨髓腔尖部发育的形态特征，并对其位置进行定量分析。材料与方法：随机对１０～９３岁１７７例（男９０例，女８７例）汉族人拍摄双肩部Ｘ线片。观察肱骨发育在Ｘ线片上的表现，测量肱骨上端骨松质长度，计算肱骨上端骨松质指数。结果：肱骨上端骨髓腔尖部在Ｘ线上表现为“突变型”和“过渡型”两种形态。肱骨上端骨松质和蔗和骨松质数均随年龄的增大逐渐减小。结论：应根据肱骨上骨髓腔发育的不同形态特征来判断     

体外培养骨髓基质细胞的类型及来源

用液体静置法体外培养小鼠骨髓基质细胞，对贴壁生长细胞进行倒置显微镜下的原位连续观察和数种酶的细胞化学观察。根据的细胞形态和酶蛋白质活性明显的移行特点，主要区分出三种类型的细胞，即网状细胞，巨噬细胞和成纤维细胞，观察到星形细胞和至少一部分巨噬细胞来源于网状细胞。     

不同年龄大鼠骨髓基质干细胞的增殖特性

为了探讨年龄差异是否对大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)的增殖有影响。本研究采用免疫组织化学和苏木素染色检测体外培养的不同年龄大鼠BMSCs增殖能力的变化。结果显示:在培养的第5d,新生组增殖率为(78.7±5.3)%,成年组为(72.0±3.3)%,老年组为(65.4±3.9)%;在第7d增殖率分别是(78.3±3.2)%、(67.3±3.9)%和(52.6±6.0)%;在第9d,分别是(66.9±3.3)%、(46.4±3.9)%和(39.1±2.2)%。统计分析表明,在培养的第5、7、9d三个年龄组BMSCs的增殖率均有显著性差异(P<0.05)。结果提示:不同年龄的骨髓基质干细胞在体外均能快速增殖,但随着年龄的增大,其增殖能力明显下降。     

中期孕胎儿肝脏与骨髓红细胞系统造血的比较研究

采用瑞氏染色，红细胞内外铁染色和受体的放射配体结构分析法，对２９例１６－２８孕周胎儿肝脏与骨髓红细胞系统进行了比较研究。结果发现：（１），定存铁在正常范围的胎儿的骨髓幼红细胞比例明显低于肝脏，其变异系数均明显高于肝脏；（２）２４－２８周孕的胎儿，其肝脏的红细胞内，外铁均较骨髓为多；（３）骨髓幼红细胞转铁蛋白受体数量及其与配体的亲和力均明显低于肝脏；（４）母体发生缺铁性贫血时，虽然骨髓受体数量明显上     

RAPID DETECTION OF KARYOTYPE CHANGES IN INTERPHASE BONE MARROW CELLS BY OLIGONUCLEOTIDE PRIMED IN SITU HYBRIDIZATION (PRINS)

Fluorescence in situ hybridization (FISH) using DNA probes of several hundred or thousand base pairs in length enables the visualization of chromosomal aberrations in interphase nuclei. A new method for in situ labelling of chromosomes is the oligonucleotide primed in situ labelling (PRINS) technique. So far, this has mainly been used to demonstrate subtle changes in metaphase spreads. The aim of the present study was to investigate the suitability of PRINS for detecting chromosome gains or losses in interphase nuclei. This technique was compared with FISH analysis by examining the bone marrow cells of ten patients in whom the karyotypes were known from conventional chromosome banding. Corresponding results by both PRINS and FISH were obtained for chromosomes 1, 3, 7, 8, and Y in five patients with normal chromosome patterns, as well as in five patients with clonal karyotype changes, e.g., monosomy 7, trisomy 8, or loss of the Y chromosome. Being faster and approximately ten times less expensive, PRINS can replace FISH for detecting numerical karyotype changes. © 1997 by John Wiley & Sons, Ltd.     

婴幼儿胫骨骨髓的血液供应

本文报道用血管注射、显微摄影及扫描电镜等方法,研究了42侧婴幼儿胫骨的骨髓血液供应。滋养动脉是骨髓的主要血供来源。干骺端动脉增强干骺部的血液供应。骨髓静脉比动脉更为丰富。骨髓静脉血主要经由髓静脉窦、集合静脉窦、中央静脉和滋养静脉回流。干骺端的部分血液经干骺端静脉回流。     

兔胫骨骨折愈合微血管重建的研究

目的 为澄清骨折愈合微血管重建意见的分歧。方法 实验用兔２４只,４只用于正常胫骨血管观察,另２０只制成骨折模型,术后分别按３,８,１８,２８,４２天处死,观察微血管重建,结果：（１）微血管数量生长可分为三个时期,初期（约１周）骨折部位无或有少新生血管,中期（２－４周）血管形成达最高峰;后期（５周以后）血管数量减少并逐渐转为正常形成。（２）侧支循环的建立是多源的,包括从骨膜动脉到骨痂;从骺－干骺动脉     

骨髓基质细胞对离体Parkinson鼠脑片单胺类神经递质的影响

为探讨骨髓基质细胞对离体Parkinson鼠脑片单胺类神经递质的影响,本研究通过建立新生大鼠离体“Parkinson鼠病”模型,取成年大鼠骨髓,培养、分离、纯化骨髓基质细胞,将骨髓基质细胞(MSCs)与离体脑片联合培养,应用高效液相法观察了脑片和培养液中多巴胺及其代谢产物3,4-二羟苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)含量的变化。结果显示,经MPTP代谢产物mpp+损伤的脑片多巴胺含量与正常组、联合培养组相比明显减少(P<0.01),而mpp+组培养液内DOPAC和HVA含量也减少(P<0.05)。但联合培养组与正常组相比DA,DOPAC和HVA的变化无显著差异。以上结果提示,联合培养的骨髓基质细胞对mpp+毒性损伤的多巴胺能神经元具有保护作用,该模型也为在脑片上测量单胺类神经递质提供了可靠的方法。     

山羊心脏中心纤维体内的骨髓组织

目的 探讨山羊心脏中心纤维体的组织结构。方法 用石蜡切片,ＨＥ、Ｍａｓｓｏｎ和苏木素－美蓝－天青－伊红染色,光镜观察。结果 山羊中心纤维体为骨组织,其中有骨小梁和典型的骨髓组织。结论 山羊中心纤维体可能具有造血功能。     

成年大鼠及猴骨髓基质细胞的体外培养及向神经元的分化诱导

为了探讨成年动物骨髓基质细胞的体外培养和神经元诱导及其不同培养时程对外源基因的转染率,本实验采用直接和间接两种方法分离、培养成年大鼠和猴的骨髓基质细胞。在体外进行神经元诱导,用免疫细胞化学方法进行鉴定;用携带酪氨酸羟化酶基因的逆转录病毒载体转染体外培养第1～10代大鼠骨髓基质细胞,经免疫细胞化学鉴定并计算转染率。结果显示,成年大鼠和猴骨髓基质细胞以未分化状态至少可持续培养20余代,部分细胞表达干细胞的标志蛋白nestin,经BrdU孵育后呈BrdU抗体免疫阳性;经诱导后细胞具有典型的神经元形态,表达神经元的特异性蛋白NeuN;培养第3代至6代的骨髓基质细胞对外源性基因的转染效率较其他时程明显增高。实验结果说明,骨髓基质细胞可以在体外培养并被诱导成为神经元,它还可携带外源性治疗基因。     

NGF对小鼠骨髓基质细胞体外诱导分化作用

为观察NGF等对小鼠骨髓基质细胞的诱导分化作用,从小鼠骨髓中分离培养基质细胞并传至第3代,采用bFGF预诱导24 h,NGF、维甲酸、β-巯基乙醇等诱导24 h后,进行NF-200、GFAP、fibronectin免疫荧光染色,荧光显微镜观察免疫阳性细胞。结果表明:诱导后小鼠骨髓基质细胞形态改变不明显,但出现表达NF-200、GFAP的细胞,而表达fibronectin的细胞减少,对照组几乎无NF-200和GFAP免疫阳性细胞,主要为表达fibronectin细胞。结论:NGF等可以在体外诱导小鼠骨髓基质细胞分化成表达NF-200和GFAP细胞。     

大鼠骨髓细胞诱导分化神经细胞的形态学观察

本实验探讨了从骨髓诱导培养分化神经细胞的方法,并从形态学上观察了其演变规律。抽取SD大鼠骨髓做全骨髓细胞培养,用光镜、扫描电镜观察不同阶段的形态变化,用免疫细胞化学方法进行鉴定。观察到骨髓细胞由单细胞、细胞分裂、形成克隆团(球)、出芽,直至形成突起成为神经元样细胞的演变过程。可确定神经元样细胞的前体在骨髓阶段是一类"大圆细胞"。24h左右开始贴壁,前体细胞长出"足"样结构与细胞外基质相连接。培养25~35 d细胞分化为神经元样,神经元样细胞的形态多样,有球形、锥形、星形或梭形等,直径在15.3~36.5 μm之间。应用免疫细胞化学鉴定出神经干细胞、神经元和胶质细胞。结果表明,骨髓细胞可分化为神经细胞,扫描电镜从超微结构上给予佐证。为骨髓细胞向神经细胞分化的发育过程提供了形态学资料。     

小鼠骨髓基质细胞和蚕丝丝素材料的体外生物相容性

目的 研究体外培养的小鼠骨髓基质细胞(BMSCs)与蚕丝丝素材料的生物相容性,寻找BMSCs组织工程化神经的支架材料. 方法 通过贴壁法体外分离、培养小鼠(C57BL/6-GFP小鼠和C57BL/6小鼠)的BMSCs,与丝素共培养,通过光学显微镜和扫描电镜,观察细胞的黏附和生长情况.利用丝素浸出液培养BMSCs后,通过透射电镜观察细胞超微内部结构,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测丝素、羟基磷灰石、有机锡浸出液和普通IMDM培养基培养细胞12h、24h、48h、72h、7d的细胞活力,每组重复12次.流式细胞术检测丝素浸出液培养BMSCs的细胞周期及细胞表型,实验重复3次. 结果 通过光镜、电镜观察,发现小鼠BMSCs黏附着丝素纤维、并沿着丝素纤维延伸,一些BMSCs缠绕并包裹丝素纤维,黏附着丝素纤维的细胞有的呈圆,形有的呈梭形.与普通IMDM培养基培养的细胞相比,透射电镜下丝素浸山液培养后的BMSCs内部结构未见异常;丝素和羟基磷灰石浸出液对BMSCs的活力无显著性影响(P>0.05);丝素浸出液对骨髓基质细胞周期和表型无明显影响. 结论 蚕丝丝素与小鼠BMSCs有好的生物相容性,且丝素对BMSCs没有毒性作用,可作为BMSCs构建组织工程化神经的支架材料.     

人骨髓间质干细胞体外扩增和向成骨细胞分化的实验研究

骨髓间质干细胞（mesenchymal stem cell,MSCs）是一类存在于骨髓中的具有多向分化潜能的干细胞，在体外不仅可分化为间质类细胞，而且可以分化为非间质细胞。本研究探讨人骨髓间质干细胞的体外分离纯化、培养扩增和向成骨细胞诱导分化的条件。利用密度为1．073g/ml的Percoll分离骨髓的单个核细胞，以含10％胎牛血清的低糖DMEM培养基培养与扩增MSCs，细胞纯度可达95％左右。取第二代和第三代的MSCs，以含有不同浓度的抗坏血酸、β－磷酸甘油、地塞米松的诱导培养基向成骨细胞诱导，诱导向的细胞呈现典型的成骨细胞样改变，免疫组化技术显示其I型胶原染色阳性，ALP染色阳性，表明MSCs在体外具有向成骨细胞分化的潜力。     

大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为心肌样细胞

目的 采用骨髓间充质干细胞(MSCs)体外诱导为心肌样细胞,为干细胞移植治疗心衰提供一种新的细胞材料.方法 取SD大鼠四肢骨骨髓,分离培养MSCs,分别用终浓度为5、10、15、20 μmol/L的5-氮胞苷(5-aza)定向诱导,相差显微镜观察细胞形态学变化,应用免疫细胞化学、激光扫描共焦显微镜技术检测结蛋白(desmin),α-横纹肌肌动蛋白(α-sarcomeric actin)、心肌特异性肌钙蛋白(C-TnT)的表达,透射电镜鉴定.在诱导后7d、21 d和28 d,3个时间点以半定量RT-PCR方法检测细胞心肌早期转录因子GATA4和心肌特异性肌凝蛋白重链αMHC的表达.结果 MSCs体外经5-aza诱导后分化的细胞desmin、α-sarcomericactin、C-TnT均表达阳性,5 μmol/L组阳性表达较高,透射电镜下可见到平行排列的肌丝.RT-PCR结果显示,GATA4于诱导后7 d弱表达,21 d表达增强,28 d表达减弱.αMHC在诱导后7 d不表达,21 d弱表达,28 d表达明显.结论 骨髓间充质干细胞能够在体外被诱导分化为心肌样细胞,是自体心肌细胞一种良好的供体来源.     

人胎儿骨骼发育与骨髓造血部位的大体观察

本文观察了不同胎龄胎儿的身长、部分骨骼的长度及增长速度,胎儿骨髓造血部位发生的时间、顺序及其造血灶特点。认为妊娠早期及中期胎儿生长较快,12周胎儿,较多部位的骨骼已出现造血灶。20周时,全身大部分骨髓参与造血。     

骨髓间充质干细胞复合羟基磷灰石/磷酸三钙植骨材料的体外研究

目的研究兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)在羟基磷灰石/磷酸三钙(HA/TCP)植骨材料上的黏附增殖情况。方法抽取兔股骨骨髓,进行贴壁培养BMSCs。在成骨诱导液中诱导BMSCs,于7d用钙钴法检测碱性磷酸酶活性,10d进行茜素红矿化结节染色;在成脂诱导液中诱导BMSCs,于21d进行油红O染色。将BMSCs接种到HA/TCP植骨材料上,加入成骨诱导液,采用倒置显微镜、荧光显微镜及扫描电镜检测,并采用四氮唑蓝(MTT)比色法测定HA/TCP植骨材料上BMSCs的增殖情况。结果BMSCs在成骨诱导液中7d碱性磷酸酶呈强阳性,10d矿化结节染色呈橘红色;在成脂诱导液中,21d油红O染色呈阳性。BMSCs在HA/TCP植骨材料上孔隙周围及孔隙内生长良好并大量增殖。MTT分析结果显示,HA/TCP对BMSCs的体外增殖无抑制作用。结论BMSCs与HA/TCP植骨材料有良好的生物相容性。