昆布多糖通过调节巨噬细胞极化延缓肺纤维化研究

目的 探索昆布多糖基于调节巨噬细胞极化抑制肺纤维化的作用机制。方法 将昆布中提取的硫酸多糖经自由基降解,得到低相对分子质量昆布多糖（low molecular weight fucoidan,LMWF）,并通过高效液相色谱测定了其单糖结构组成。通过免疫组化检测肺纤维化小鼠与LMWF治疗组小鼠M2巨噬细胞极化生物标志物的表达,并通过Western blotting和qRT-PCR检测M1/M2标志物的表达。分别用脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）联合γ干扰素（interferon-γ,IFN-γ）和白细胞介素-4（interleukin-4,IL-4）诱导MH-S细胞,构建体外M1和M2巨噬细胞极化模型,探索LMWF调节巨噬细胞极化延缓肺纤维化的作用机制。结果 LMWF可显着降低肺纤维化小鼠肺组织中M1/M2巨噬细胞标志物的表达（P＜0.05、0.01、0.001）。同样,LMWF可有效抑制细胞模型中M1和M2型标志物的表达（P＜0.05、0.01、0.001）。结论 LMWF可以通过早期抗炎作用调节M1巨噬细胞极化,并在后期通过抑制M2巨噬细胞极化有助于减少纤维化。     

黄芪多糖对黑色素瘤小鼠调节性T细胞的作用

目的: 探讨黄芪多糖对黑色素瘤小鼠调节性T细胞(Treg)免疫活性的影响。方法: 建立B16-F10荷瘤小鼠模型,C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、环磷酰胺(CTX)组、黄芪多糖低剂量组(0.15 g·kg^-1)、黄芪多糖高剂量组(0.3 g·kg^-1)。造模后第2天开始ig给药,给药14 d后处死各组小鼠,取肿瘤称重计算抑瘤率,取脾脏制备单细胞悬液,采用流式细胞术检测小鼠脾脏中Treg的比例,通过实时定量PCR检测小鼠脾脏中转化生长因子-β (TGF-β)mRNA,白细胞介素-10(IL-10) mRNA的表达。结果: 黄芪多糖能够抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长(P<0.05),降低脾脏中Treg的比例(P<0.01),降低脾脏中TGF-β mRNA, IL-10 mRNA(P<0.05)的表达。结论: 黄芪多糖可能通过降低荷瘤鼠脾脏中Treg数目,抑制TGF-β, IL-10分泌,从而实现其抑瘤作用。     

肿瘤中巨噬细胞表型极化的调控机制及中药干预的研究进展

巨噬细胞具有异质性和多样性,可随所在的器官微环境和生理病理条件极化成不同的表型.M1经典性激活和M2替代性激活是巨噬细胞表型极端化后的2个主要亚群,分别表达不同的表面受体,分泌不同的细胞因子、趋化因子,受转录和表观遗传水平各个信号通路的调控,并在肿瘤发展中行使不同的功能,而中药有可能通过调控巨噬细胞表型极化而改善微环境.目前对于巨噬细胞极化途径产生的特异性标志和极化的分子机制尚在研究进程中,该文就目前国内外对于巨噬细胞表型极化和调控机制的研究进展进行综述及对中药干预进行展望.     

竹节参总皂苷通过NF-κB通路对LPS致RAW264.7细胞炎症的保护作用研究

目的： 探讨竹节参总皂苷对脂多糖（LPS）刺激的RAW264.7巨噬细胞的抗炎作用。方法：噻唑蓝（MTT）法检测不同浓度的竹节参总皂苷对RAW264.7细胞活性的影响;一氧化氮（NO）试剂盒法检测竹节参总皂苷对LPS刺激RAW264.7细胞的NO释放量;酶联免疫吸附法（ELISA）检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素1-β（IL-1β）分泌;逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR）检测诱导型一氧化氮合酶（iNOS）,TNF-α,IL-1β mRNA的表达;免疫印迹法（Western blot）检测胞核内核转录因子-κB p65（NF-κB p65）蛋白表达。结果：竹节参总皂苷的安全用药范围为≤80 mg·L^-1;与LPS模型组相比,竹节参总皂苷各剂量组（0.1,1,10,40 mg·L^-1）均能显著降低LPS刺激下RAW264.7细胞NO,TNF-α和IL-1β分泌;竹节参总皂苷各剂量组（10,40 mg·L^-1）均能抑制iNOS,TNF-α,IL-1β mRNA表达和NF-κB p65蛋白表达。结论：初步证实了竹节参总皂苷对LPS致RAW264.7巨噬细胞炎症的保护作用,作用机制可能与 NF-κB通路有关。     

丹皮酚对急性心肌梗死大鼠心室重构及NF-κBp65,IL-1mRNA表达的影响

目的：观察草珊瑚多糖对巨噬细胞RAW264.7体外释放一氧化氮,膜表面分子和共刺激分子的影响和细胞因子mRNA的影响。方法：实验分为空白对照组,γ干扰素（IFN-γ）诱导的模型组,草珊瑚多糖低、中、高剂量组,浓度分别为25,50,100 mg·L^-1。药物作用于RAW264.7 巨噬细胞株24 h后,用流式细胞术检测RAW264.7膜分子CD16/32,CD40,CD14,Toll样受体4（TIR4）的表达,实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测炎症因子mRNA表达量;巨噬细胞诱导为M1后给予草珊瑚多糖干预,检测膜蛋白表达量和mRNA表达的差异,Griess方法检测一氧化氮释放的影响。结果：草珊瑚多糖可以有效的增加巨噬细胞RAW264.7膜蛋白CD16/32的表达,由空白的31.0±1.2上升到81.5±3,CD40由空白的5.2±0.9上升到81.5±2.6,CD14 28.5±1.6上升到86.7±5.4,TLR4的表达。对极化为M1亚型的巨噬细胞膜蛋白没有影响;草珊瑚多糖可以提高白细胞介素1β（IL-1β）,IL-10,肿瘤坏死因子α（TNF-α）,诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）mRNA 表达,而且存在剂量依赖性（P<0.01）,能提高M1亚型的因子mRNA的表达。能提高巨噬细胞一氧化氮的分泌。结论：草珊瑚多糖显著促进巨噬细胞相关免疫分子的表达,提高相关免疫因子RNA的表达,调节巨噬细胞促炎和抗炎性细胞因子的表达,对免疫平衡功能的调节具有潜在的应用价值。     

肉桂酸促进糖尿病小鼠创面愈合及创口修复细胞迁移作用研究

目的 探讨肉桂酸对糖尿病小鼠创面愈合及创口修复细胞迁移的影响。方法 将16只雄性db/db小鼠随机分为模型组和肉桂酸（10 mg/kg）组,建立切除性创面夹板模型,另取6只C57BL/6J小鼠作为对照组。连续给药16 d,每2天观察创面愈合程度;给药结束后对皮肤组织进行病理组织学和免疫荧光染色,检测小鼠创面愈合与组织形态学变化和创面血管密度。根据创面愈合的过程,采用不同细胞系进行体外实验。qRT-PCR检测肉桂酸对巨噬细胞炎症因子表达的影响;Matrigel基质胶成管法、划痕实验、qRT-PCR检测肉桂酸对创口修复细胞包括人脐静脉内皮细胞、小鼠成纤维细胞和人角质形成细胞的成管能力、迁移能力、分化能力的影响。结果 给药16 d后,肉桂酸显著加快糖尿病小鼠伤口愈合速度,提高体内微血管密度和创面周围再上皮化率及肉芽组织厚度。肉桂酸可显著降低巨噬细胞炎症因子表达,提高创口修复细胞的迁移能力。结论 肉桂酸通过抑制过度炎症反应,促进创口修复细胞迁移,促进血管生成和胶原沉积,加速糖尿病小鼠创面愈合。     

药食两用物质效用成分对人孕烷X受体的激活效应及细胞增殖抑制筛选

目的 探讨药食两用物质甘草（甘草苷、甘草酸）、鱼腥草（槲皮素、鱼腥草素）、夏枯草（迷迭香酸）、决明子（橙黄决明素）、茯苓（茯苓酸）、百合（百合皂苷、秋水仙碱）、枸杞子（枸杞多糖）7种药食两用物质中10种效用成分对人孕烷X受体（PXR）的激活效应并筛选其潜在的毒性成分。方法 利用细胞增殖与活性检测（CCK-8）法考察了甘草苷、甘草酸、槲皮素、鱼腥草素、迷迭香酸、橙黄决明素、茯苓酸、秋水仙碱（10、20、50 μmol·L^-1）、百合皂苷、枸杞多糖（10、20、50 mg·L^-1）10种成分对正常的人肝细胞（L02）增殖抑制的影响；通过生化分析仪检测药物处理后对L02细胞乳酸脱氢酶（LDH）释放的影响；Hoechst 33342染色考察了10种效用成分对L02细胞凋亡的影响；利用分泌型荧光素酶报告基因系统，将PXR表达载体和含细胞色素P450 3A4（CYP3A4）转录调控区的报告基因载体共转染L02细胞，10 μmol·L^-1利福平（RIF）为阳性对照，用甘草苷、甘草酸、槲皮素、鱼腥草素、迷迭香酸、橙黄决明素、茯苓酸、秋水仙碱（5、10、20 μmol·L^-1）和百合皂苷、枸杞多糖（5、10、20 mg·L^-1）10种成分分别处理24 h，进行荧光素酶活性检测。结果 与空白组比较，秋水仙碱、百合皂苷、槲皮素会导致细胞活力呈浓度依赖性降低（P<0.05，P<0.01），槲皮素、迷迭香酸、甘草酸、秋水仙碱、橙黄决明素、茯苓酸可以增加L02细胞中LDH的释放率（P<0.05， P<0.01），迷迭香酸、甘草苷、枸杞多糖处理后部分细胞的高亮浓染细胞核的比例逐渐上升（P<0.05，P<0.01）；pcDNA3.1-PXR与pGLuc-CYP3A4共转染L02细胞时，与空白组比较，橙黄决明素、茯苓酸对PXR有激活效应（P<0.05），甘草苷、甘草酸对PXR有抑制效应（P<0.05）。结论 在长期服用药食两用物质时，应注意其对药物代谢酶的影响及可能产生的相互作用，提高药食两用物质的安全性。     

基于模拟炮制技术探究远志炮制前后皂苷类成分转化规律

目的 探讨远志甘草汁煮和水煮前后皂苷类成分转化机制和含量变化规律。方法 采用模拟炮制技术制备远志皂苷B、远志皂苷Z、远志皂苷F、瓜子金皂苷ⅩⅩⅧ单体模拟甘草汁煮品和模拟水煮品，采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法（UPLC-Q-Exactive Orbitrap/MS）分析远志皂苷B、远志皂苷Z、远志皂苷F、瓜子金皂苷ⅩⅩⅧ单体模拟甘草汁煮品和模拟水煮品中的化学成分，采用超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱法（UPLC-QQQ-MS/MS）测定远志、甘草汁煮远志、水煮远志中远志皂苷B、远志皂苷Z、远志皂苷F、瓜子金皂苷ⅩⅩⅧ、细叶远志皂苷的含量。结果 在甘草汁煮和水煮过程中，远志皂苷B可水解生成对甲氧基肉桂酸、desacylsenegin Ⅲ、瓜子金皂苷ⅩⅩⅧ、细叶远志皂苷；远志皂苷Z可水解生成3，4，5-三甲氧基肉桂酸、远志皂苷TF、瓜子金皂苷ⅩⅩⅧ、细叶远志皂苷；远志皂苷F可水解生成3，4，5-三甲氧基肉桂酸、远志皂苷G、瓜子金皂苷ⅩⅩⅧ、细叶远志皂苷；瓜子金皂苷ⅩⅩⅧ可水解生成细叶远志皂苷。远志经甘草汁煮和水煮后远志皂苷B含量明显降低（P<0.05，P<0.01），而远志皂苷Z、远志皂苷F、瓜子金皂苷ⅩⅩⅧ、细叶远志皂苷含量明显升高（P<0.05，P<0.01）；甘草汁煮品中远志皂苷Z和细叶远志皂苷含量较水煮品明显升高（P<0.05，P<0.01），以细叶远志皂苷含量变化最为显著，而远志皂苷B、远志皂苷F、瓜子金皂苷ⅩⅩⅧ在水煮品和甘草汁煮品中的含量无统计学差异。结论 甘草汁煮和水煮均可使远志中远志皂苷B、远志皂苷Z、远志皂苷F、瓜子金皂苷ⅩⅩⅧ发生水解反应，通过脱糖生成次级苷和苷元（有机酸），从而导致远志炮制后皂苷类成分含量发生明显变化，且甘草汁可促进远志中某些皂苷水解为远志皂苷Z和细叶远志皂苷。本研究为揭示远志炮制机制提供了实验依据。     

丹参多酚酸配伍三七总皂苷通过调节M1/M2型小胶质细胞极化对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

[目的] 探究丹参多酚酸配伍三七总皂苷通过调节M1/M2型小胶质细胞极化对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响。[方法] 雄性Wistar大鼠60只，采用线栓法制作大脑中动脉阻塞模型，随机分为假手术组（Sham）、缺血再灌注组（I/R）、依达拉奉组（Eda，6 mg/kg）、丹参多酚酸组（SPA，21 mg/kg）、三七总皂苷组（PNS，100 mg/kg）、丹参多酚酸配伍三七总皂苷组（SPA+PNS，21 mg/kg+100 mg/kg），尾静脉注射给药，每日1次，Sham组与I/R注射等容积生理盐水，连续给药5 d后，观察大鼠脑血流变化、神经功能评分，组织形态学变化，Nissl染色及神经元核蛋白（NeuN）免疫荧光染色观察神经元损伤情况，CD16/Iba-1、CD206/Iba-1免疫荧光双染检测缺血半暗带M1型、M2型小胶质细胞表型情况，蛋白免疫印迹（Western-Blot）法检测M1型小胶质细胞标记物白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的蛋白表达及M2型小胶质细胞标记物CD206、转化生长因子-β（TGF-β）及白细胞介素-10（IL-10）的蛋白表达情况。[结果] 与I/R组比较，SPA组、PNS组、SPA+PNS组在脑血流、神经功能缺损、组织形态、神经元损伤情况均有不同程度改善，并促进M2型小胶质细胞CD206/Iba-1表达，上调CD206、TGF-β、IL-10的蛋白表达；抑制M1型小胶质细胞CD16/Iba-1表达，下调IL-1β、IL-6、TNF-α、iNOS的蛋白表达，且SPA+PNS组改善程度优于SPA组、PNS组。[结论] 丹参多酚酸、三七总皂苷及两者配伍可减轻大鼠脑缺血再灌注损伤，且配伍应用效果优于单独应用，其机制可能与促进小胶质细胞M1型极化向M2型转换有关。     

茅莓总皂苷对黑色素瘤的抗肿瘤作用研究

目的：评价茅莓总皂苷对黑色素瘤的体内、外抗肿瘤药效作用。方法：A375人恶性黑色素瘤细胞体外常规传代培养,随机分5组,分别加入环磷酰胺,茅莓总皂苷高、中、低(0.01,0.001,0.000 1 mg·mL^-1)3个质量浓度,以不加药作阴性对照,MTT法检测茅莓总皂苷的体外抗肿瘤作用；用B16黑色素瘤细胞移植小鼠,随机分阳性药(环磷酰胺)组,茅莓总皂苷高、中、低(100,50,25 mg·kg^-1)剂量组及阴性药(生理盐水)组,观察体内抑瘤效果、荷瘤小鼠生存时间和生命延长率；同时采用TUNEL法检测茅莓总皂苷对B16黑色素瘤细胞凋亡的影响。结果：体外抑瘤试验显示,高、中质量浓度茅莓总皂苷组与阴性对照组比较,P<0.05,有统计学意义；体内抑瘤试验显示,高剂量组平均瘤体积明显低于阴性对照组(P<0.05),抑瘤率37.02%；荷B16黑色素瘤小鼠用茅莓总皂苷治疗后存活时间增加；茅莓总皂苷高、中、低剂量组黑色素瘤细胞凋亡指数分别为32.5%,20.5%和5.5%,与阴性对照组(3.5%)比较差异有统计学意义。结论：茅莓总皂苷对体内、外黑色素瘤细胞有抑制作用,并呈量效依赖关系,能通过促进黑色素瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤活性。     

五倍子多糖相对分子质量和单糖组成的测定

目的:研究五倍子多糖精细组分的相对分子质量、单糖组成。方法:五倍子多糖经提取纯化后得到GCP-1,GCP-2和GCP-3 3种精细组分。用高效凝胶渗透色谱(HPGPC)分析其相对分子质量;采用三氟乙酸(TFA)水解和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化的高效液相色谱(HPLC)分析其单糖组成。结果:HPGPC试验结果显示,GCP-1,GCP-2,GCP-3的相对分子质量分别为182,2.1×10~4,6×10~4;单糖组成试验表明,GCP-2和GCP-3的单糖组成类型基本一致,主要为半乳糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸等。结论:用HPGPC和PMP柱前衍生法测得五倍子多糖精细组分的相对分子质量和单糖组成,方法简便可行,可用于五倍子多糖的研究。     

柱前衍生HPLC分析酸枣仁汤中多糖的单糖组成

目的:建立1-苯基-3-甲基-5-吡唑琳酮(PMP)柱前衍生高效液相色谱法分离检测4种单糖和2种糖醛酸的方法.方法:采用水提醇沉法提取酸枣仁汤中多糖,中空纤维超滤膜法纯化,然后用硫酸水解,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生后,利用反相高效液相色谱法,分析单糖的PMP衍生物.以单糖PMP衍生物的峰面积大小为指标,分别对衍生化反应中反应时间、PMP与NaOH的用量、中和温度和盐酸用量进行考察,从而得到较佳的样品衍生化制备条件.并将该方法应用于酸枣仁汤中总多糖(SDP)、相对分子量＜10 kDa多糖(SDP-1)、相对分子量为10 ～ 50 kDa多糖(SDP-2)、相对分子量＞ 50 kDa多糖(SDP-3)的单糖组成分析和含量测定.结果:SDP和SDP-1均由Man-GlcUA-GalUA-Glc-Gal-Ara组成,摩尔比分别为1∶0.8∶0.7∶3.4∶3.3∶2.1和1∶0.5∶0.3∶0.6∶0.6∶0.4.SDP-2由Man-Glc-Gal-Ara组成,摩尔比为1∶2.0∶0.2∶0.3;SDP-3由Man-Glc组成,摩尔比为1∶5.4.结论:方法准确、灵敏度高,适用于酸枣仁汤中多糖的单糖组成测定.     

一种车前子多糖的分离纯化及单糖组成分析

目的:分离纯化车前子多糖,分析车前子均一多糖的单糖组成。方法:采用阴阳弱离子串联树脂柱脱蛋白和初步分离,DEAE Cellulose DE-52和Sephacryl S-400柱色谱分离纯化得车前子均一多糖(PP-B10),利用紫外-可见吸收光谱、红外光谱和高效体积排阻色谱(HPSEC)分析PP-B10的结构特性和纯度,柱前衍生-HPLC法确定PP-B10的单糖组成。结果:PPB10纯度较高,含有少量蛋白,由甘露糖、核糖、半乳糖醛酸、半乳糖、木糖、阿拉伯糖和岩藻糖7种单糖组成,其物质的量比为147.2∶3.2∶22.5∶4.8∶1.1∶95.7∶28.8的酸性多糖。结论:PP-B10是一种全新单糖组成的车前子均一多糖。     

柱前衍生HPLC分析黄连多糖的单糖组成

目的:建立柱前衍生HPLC测定黄连多糖中的单糖组成,并分析3种黄连多糖的单糖差异。方法:采用水提醇沉法提取黄连多糖,经硫酸水解后,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生,再利用HPLC法分析单糖的PMP衍生物。结果:黄连多糖主要由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖7种单糖组成,其中半乳糖醛酸含量最高,葡萄糖次之。另外,雅连多糖、云连多糖和味连多糖中的7种单糖的平均摩尔比分别为1∶2.34∶0.38∶17.58∶12.40∶6.11∶5.93,1∶2.43∶0.25∶16.76∶15.18∶6.51∶9.78和1∶3.25∶0.40∶22.35∶12.96∶6.66∶10.28。结论:建立的方法简便、准确,重复性好,可用于黄连多糖中单糖的组成分析和含量测定。雅连多糖、云连多糖和味连多糖中的7种单糖含量有差异。     

乌头母根、子根、须根多糖的比较

目的:研究乌头母根、子根、须根的多糖含量及单糖组成.方法:分别以精制多糖测得多糖对葡萄糖的换算因子,以苯酚-硫酸分光光度法测定乌头母根、子根、须根的多糖含量;以1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生高效液相色谱法测定多糖中的单糖组成.结果:乌头母根、子根、须根的多糖含量分别为22.0%,33.5%,6.1%;母根、子根、须根的多糖中主要含有葡萄糖,另外含有少量的半乳糖醛酸、半乳糖、阿拉伯糖,子根中还含有甘露糖,须根中还含有甘露糖、鼠李糖、木糖.结论:多糖含量检测方法简便、快速,测定结果更客观、准确;须根中多糖含量最低,且单糖组成与母根、子根有明显不同.     

铁皮石斛花多糖相对分子质量及其单糖组成的研究

为了明确铁皮石斛花中多糖相对分子质量分布及其单糖组成,该研究采用高效凝胶色谱和柱前衍生UPLC对11个铁皮石斛花样品的多糖进行了相对分子质量及其单糖组成分析,并利用SPSS 19.0软件根据组成的单糖峰面积进行聚类分析,结果表明11个杂交家系铁皮石斛花的粗多糖均分离为三部分(DOP-1,DOP-2和DOP-3),其平均相对分子质量分别为5.53×10~5,3.49×10~5和2.12×10~5。铁皮石斛花多糖主要由葡萄糖、甘露糖、半乳糖、半乳糖醛酸和阿拉伯糖5种单糖组成,其中甘露糖组成比例最高,其与葡萄糖比值为0.302~3.335;不同家系样品多糖中各单糖的相对含量存在一定差异,11个家系按单糖组成及相对含量划分为4类,该研究基本明确了铁皮石斛花中多糖相对分子质量分布及单糖构成,为其资源利用打下基础。     

白花蛇舌草总多糖的分离纯化、结构鉴定及初步免疫活性分析

目的:分离纯化白花蛇舌草总多糖,研究其对环磷酰胺致免疫低下小鼠的免疫增强活性。方法:采用超滤技术分离纯化白花蛇舌草总多糖,高效凝胶渗透色谱-示差检测器方法测定相对分子质量,柱前衍生化HPLC分析其单糖组成;采用环磷酰胺致免疫低下小鼠碳粒廓清试验研究其免疫活性。结果:从白花蛇舌草中分离得到1个单一多糖组分ODP-1,其相对分子质量20.88 k Da,单糖组成为甘露糖-鼠李糖-半乳糖醛酸-葡萄糖-半乳糖-阿拉伯糖,摩尔比0.005∶0.033∶0.575∶1.000∶0.144∶0.143;免疫活性试验结果表明,ODP-1可升高环磷酰胺致免疫低下小鼠廓清指数、吞噬指数、胸腺指数和脾指数。结论:白花蛇舌草多糖ODP-1为均一多糖,具有免疫增强活性。     

玉竹中酸性多糖的分离纯化及单糖组成分析

目的:对玉竹粗多糖进行分离纯化,并对所得均一多糖进行定性分析.方法:采用热水提取玉竹粗多糖,乙醇分级沉淀,收集乙醇体积分数为80％条件下析出的多糖沉淀物.再经DEAE-52纤维素离子交换层析和Sephadex G-100分子筛色谱得到玉竹酸性多糖(POAPS0).应用紫外光谱、凝胶柱色谱、纸色谱分析POAP80的纯度,红外光谱和PMP柱前衍生化高效液相色谱分析其结构和单糖组成.结果:从玉竹粗多糖中分离纯化了1种酸性多糖POAP80,主要含有甘露糖、葡萄糖、半乳糖醛酸、半乳糖4种单糖,其摩尔比为0.93∶2.65∶ 29.38∶3.47.结论:POAP80为玉竹中新发现的均一组分多糖,上述方法提供了玉竹POAP80的一些结构信息,为进一步研究其结构和功能提供参考.     

基于多糖组成和含量的3种基原黄精质量比较和识别研究

目的通过定性与定量分析,结合化学计量学方法,比较黄精3种基原植物中多糖的组成和含量差异,为黄精药材质量评价提供参考。方法采用红外光谱法(FTIR)和柱前衍生化-HPLC(PMP-HPLC)法比较3种基原黄精中多糖的差异;采用紫外光谱法(UV)测定总多糖含量。结果 3种基原黄精多糖的IR平均光谱和二阶导数图谱差异明显,主成分分析(PCA)、偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)及聚类分析(HCA)分析均可将3种基原的黄精加以区分;PMP-HPLC图谱显示3种基原黄精中多糖的单糖组成存在差异,共有成分为D-甘露糖、D-核糖、L-鼠李糖、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖醛酸、D-半乳糖、D-葡萄糖、D-木糖、D-阿拉伯糖和L-岩藻糖;结果表明,所测样品多糖含量符合《中国药典》2015年版的要求。结论本研究所建立方法为黄精类药材的多糖组成研究和质量评价提供了新的参考。     

板蓝根多糖的系统分离纯化与组成分析

目的建立板蓝根多糖的系统分离纯化方法,并对分离得到的均一多糖进行组成测定。方法以抗病毒活性较好的80%醇沉板蓝根粗多糖为研究对象,对其进行DEAE-Sepharose Fast Flow柱色谱、Sephacryl-200葡聚糖凝胶柱色谱以及高效凝胶色谱系统分离纯化。分别采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)和邻苯二甲醛(OPA)衍生化HPLC法对分离得到的板蓝根均一多糖进行单糖组成和氨基酸组成测定。结果利用系统分离纯化策略,从80%醇沉板蓝根粗多糖中分离得到2种均一板蓝根多糖(IRPS1A和IRPS1B)和2种均一板蓝根糖蛋白(IRPS2A和IRPS3A)。其中,IRPS1A与IRPS1B的单糖组成均为甘露糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖;IRPS2A的单糖组成为半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖;IRPS3A的单糖组成为甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖。糖蛋白IRPS2A与IRPS3A均含有天门冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、组氨酸、甘氨酸、苏氨酸、精氨酸、丙氨酸、胱氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸,共14种氨基酸残基。同时,IRPS2A还含有酪氨酸残基。结论该系统分离纯化的策略可应用于板蓝根均一多糖(糖蛋白)的获取,为板蓝根多糖的结构分析及药理活性研究奠定基础。