血吸虫虫卵抗原诱导的日本血吸虫感染小鼠IFN－γ及IL－4基因转录的研究

本研究调查了日本血吸虫感染的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾细胞的ＩＦＮ－γ和ＩＬ－４ｍＲＮＡ转录。于感染后０，３，５，８，１０和１２周摘取小鼠脾脏，将脾细胞置于含ＳＥＡ或ＣｏｎＡ的培养基中培养，然后提取脾细胞总ＲＮＡ，通过逆转录后ｃＤＮＡ的扩增，分析ＩＦＮ－γ和ＩＬ－４的ｍＲＮＡ水平。ＲＮＡ模板同时进行β－ａｃｔｉｎ的逆转录和扩增，扩增产物被用作ＩＦＮ－γ和ＩＬ－４扩增的标准对照。在ＳＥＡ或ＣｏｎＡ诱导的未感染或感染３周小鼠脾细胞未检测到ＩＦＮ－γ和ＩＬ－４ｍＲＮＡ逆转录ＰＣＲ产物，感染５周和８周的小鼠脾细胞则可以观察到ＩＦＮ－γ和ＩＬ－４ｍＲＮＡ的表达。与感染５周时相比，ＳＥＡ刺激的感染８周小鼠脾细胞的ＩＬ－４ｍＲＮＡ转录显著增强。然而，在感染１０周和１２周小鼠，无论ＣｏｎＡ或ＳＥＡ都不能诱导ＩＦＮ－γ或ＩＬ－４ｍＲＮＡ转录，显示这两种淋巴因子表达受到抑制。结果表明，ＳＥＡ诱导的日本血吸虫感染小鼠脾细胞ＩＦＮ－γ和ＩＬ－４基因转录存在着调节，这种调节可能与感染从急性期到慢性期的对血吸虫虫卵抗原的全身性免疫反应包括对肉芽肿形成的调控有关。     

肾病综合征患者PBMC上清IL—4和IFN—γ及血清IgE水平

本文报道，对４２例原发性单纯型肾病综合征（ＩＮＳ）患者及相应年龄组健康儿童进行ＩＬ－４，ＩＦＮ－γ及血清ＩｇＥ水平均显著高于正常对照组，且两者呈正相关，而ＩＦＮ－γ水平显著低于正常对照组；缓解期患者ＩＬ－４、ＩＦＮ－γ及ＩｇＥ均接近于正常水平，提示ＩＬ－４及ＩＦＮ－γ为ＩｇＥ异常变化的两个重要细胞因子，对ＩｇＥ的合成，ＩＬ－４及ＩＦＮ－γ起着正负反馈的调节作用。     

重组PCR构建bcr—abl mRNA竞争RT—PCR内标物

目的竞争ＰＣＲ可用于ｍＲＮＡ的定量测定，为了得到白血病中ｂｃｒ－ａｂｌｍＲＮＡ定量ＰＣＲ的竞争内标物。方法利用重组ＰＣＲ技术，实施对ｂ３ａ２型ｂｃｒ－ａｂｌｃＤＮＡ中一２７６ｂｐ片段的缺失法定点突变。结果经ＤＮＡ序列分析证实，重组后的ｃＤＮＡ片段与重组前相比，５′和３′端大部分序列相同，仅中间５５ｂｐ的部分序列缺失，同时引入１９ｂｐ外源ＤＮＡ片段，即净缺失３６ｂｐ，得到２４０ｂｐ的重组ＰＣＲ产物。较ｂ２ａ２型ｂｃｒ－ａｂｌｃＤＮＡ相应的２０１ｂｐ扩增片段长３９ｂｐ，使之适于作为ｂ３ａ２和ｂ２ａ２型两类ｂｃｒ－ａｂｌｍＲＮＡ定量ＰＣＲ的通用内标物。结论表明重组ＰＣＲ是一种获得靶基因的竞争性内标物的简便而可靠的方法     

应用RT—PCR技术检测糖尿病人外周血单个核细胞中IL—6mRNA的表…

为探索ＩＬ－６是否在ＩＤＤＭ的发病中起作用，本文报告了我们采用反转录聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）对ＩＤＤＭ病人，ＮＩＤＤＭ病人，正常儿童正常成人四组受试者的外周血单个核细胞中的ＩＬ－６ｍＲＮＡ的表达水平初步研究。以内源性β２微球蛋白的ｍＲＮＡ作为内对照，与靶序列ＩＬ－６ｍＲＮＡ在同一管内同时反转录及扩增，以特异的ＰＣＲ产物产量之比ＩＬ－６／β２ｍ表示ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达的相对水平，结果显示：在１２例     

血吸虫虫卵抗原诱导的日本血吸虫感染小鼠IFN—γ及IL…

本研究调查了日本血吸虫感染的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾细胞的ＩＦＮ－γ和ＩＬ－４ｍＲＮＡ转录，于感染后０，３，５，８，１０和１２周摘取小鼠脾脏，将脾细胞置于含ＳＥＡ或ＣｏｎＡ的培养基中培养，然后提取脾细胞总ＲＮＡ，通过逆转录后ｃＤＮＡ的扩增，分析ＩＦＮ－γ和ＩＬ－４的ｍＲＮＡ水平，ＲＮＡ模板同时进行β－ａｃｔｉｎ的逆转录的扩增，扩增产物被用作ＩＦＮ－γ和ＩＬ－４扩增的标准对照，在ＳＥＡ或ＣｏｎＡ诱导的未感     

IFN—γ和IL—4对IgE生成的调节作用探讨

本文通过对鸡蛋过敏患者血清及外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）培养上清的ＩｇＥ水平测定，探讨了γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）、白细胞介素４（ＩＬ－４）参与ＩｇＥ生成的调节机制。结果表明：ＩＦＮ－γ可抑制ＩｇＥ的生成，而ＩＬ－４则相反。ＰＢＭＣｓ培养上清中ＩＦＮ－γ和ＩＬ－４与ＩｇＥ浓度之间呈显著相关。     

幽门螺杆菌感染者胃粘膜中IL—1β mRNA的竞争RT—PC …

目的 从分子水平检测胃粘膜中细胞因子ＩＬ－１β ｍＲＮＡ的含量，以探讨幽门螺杆菌（Ｈｐ）感染对其影响。方法 以竞争ＲＴ－ＰＣＲ方法检测１０例Ｈｐ感染者根除治疗前后胃粘膜中ＩＬ－１β ｍＲＮＡ的表达量。结果 根除治疗后粘膜中ＩＬ－１β ｍＲＮＡ的表达量显著下降（Ｐ〈０．０１）。试验证明该方法简便、敏感、结果准确。结论 Ｈｐ感染可诱导粘膜中产生过量的ＩＬ－１β。     

IL—10对外周血单个核细胞体外产生IL—2及IFN—γ的调节作用

为探讨Ｔｈ１与Ｔｈ２两类细胞因子间相互调节，研究了ｒｈＩＬ－１０对ＰＨＡ体外诱导人ＰＢＭＣ产生ＩＬ－２及ＩＦＮ－γ的影响。结果表明，１０ｎｇ／ｍｌＩＬ－１０明显抑制ＰＢＭＣ产生ＩＬ－２及ＩＦＮ－γ（Ｐ＜０．０２及Ｐ＜０．０１）。在加入兔抗人ＩＬ－１０抗体的ＰＢＭＣ体外培养体系中，在５μｇ／ｍｌ浓度时，ＩＬ－２产生可明显增加（Ｐ＜０．０５），随着抗体浓度增加，ＩＬ－２呈剂量依赖性增加（ｒ＝０．９６２，Ｐ＜０．０１），ＩＦＮ－γ产生亦增加，但差异不明显。本研究表明ＩＬ－１０抑制活化人ＰＢＭＣ体外产生ＩＬ－２及ＩＦＮ－γ，而抗人ＩＬ－１０抗体则表现出增强作用。ＩＬ－１０介导Ｔｈ１与Ｔｈ２两类辅助性Ｔ细胞间的相互调节，选择机体对抗原的免疫应答类型，从而对临床疾患的防治有一定指导意义。     

竞争RT-PCR定量测定IFN-γmRNA方法的建立

本文旨在探索定量测定IFN γmRNA的竞争RT PCR方法的最适条件。自行设计和制备了内标准品IFN γcDNA片段作为竞争模板 ,建立定量测定IFN γmRNA的竞争RT PCR法。用所建立的方法测定了健康人PBMC经一定浓度的calciumionophore和不同浓度的PMA培养不同时间所诱生的IFN γmRNA。结果表明 ,在calciumionophore 2 0 μmol/L浓度下 ,用PMA10 0ng/ml诱导 6h ,IFN γmRNA达最高水平。本法可对细胞内用于IFN γmRNA作定量测定和用于IFN γ基因表达机制的研究 ,方法简便且敏感。     

亚急性重型病毒性肝炎患者和正常人PBMCs对IL—4？…

观察不同浓度白细胞介素对亚急性重型病毒性肝炎患者和正常人外周血单个核细胞中肿瘤坏死因子－０６３３和ＩＬ－１α表达的抑制情况，以比较两者ＰＢＭＣｓ对ＩＬ－４的应答性。方法 应用Ｌ９２９细胞毒试验，免疫组织化学法和半定量逆转录－多聚酶链反应检测ＴＮＦ－α和ＩＬ－１α表达水平。     

IFN—γ调节HHV—6诱导单核细胞产生IL—10和IL—12

为探讨人疱疹病毒６型（ＨＨＶ－６）感染对单核／巨噬细胞功能的影响，用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法检测ＩＬ－１０及ＩＬ－１２的产生。ＨＨＶ－６诱导单核细胞、ＴＨＰ－１细胞表达及产生ＩＬ－１０和ＩＬ－１２。细胞因子ｍＲＮＡ动力学观察显示ＩＬ－１２随ＩＬ－１０ｍＲＮＡ积累而减少，用抗人ＩＬ－１０的单克隆抗体阻断ＨＨＶ－６诱导的内源性ＩＬ－１０，ＩＬ－１２ｍＲＮＡ表达和因子产生明显增加，提示内源性ＩＬ－１０抑制ＩＬ－１２产生。在ＨＨＶ－６感染培养中加入ＩＦＮ－γ，ＩＬ－１２基因表达随ＩＦＮ－γ浓度而增加，ＩＬ－１０ｍＲＮＡ测减少，ＩＬ－１２和ＩＬ－１０因子测定结果亦明显增加或降低，表明ＩＦＮ－γ在转录水平调节ＨＨＶ－６诱导的ＩＬ－１２和ＩＬ－１０产生，其机理可能主要与ＩＦＮ－γ抑制内源性ＩＬ－１０有关。     

IL—2,IL—4和IL—7体外诱导人外周血淋巴因子激活的杀伤细胞效应…

比较了淋巴因子ＩＬ－２、ＩＬ－４和ＩＬ－７ 在体外诱导健康人外周血淋巴因子激活的杀伤（ＬＡＫ）细胞活性的效应。结果表明，ＩＬ－７可单独，亦可与ＩＬ－２、ＩＬ－４协同诱导ＬＡＫ细胞，而且ＩＬ－７诱导ＬＡＫ细胞的效应不被抗ＩＬ－２、抗ＩＬ－４所抑制。ＩＬ－７单独诱导的ＬＡＫ细胞活性高峰迟于ＩＬ－２或ＩＬ－４所诱导的活性高峰，且与增殖反应曲线一致。抗ＣＤ８抗体明显抑制ＩＬ－７诱导ＬＡＫ细胞的效应，而ＩＬ     

肾病综合征患者PBMC上清IL－4和IFN－γ及血清IgE水平

本文报道，对４２例原发性单纯型肾病综合征（ＩＮＳ）患者及相应年龄组健康儿童进行ＩＬ－４、ＩＦＮ－γ及血清ＩｇＥ水平测定，结果表明，极期患者ＩＬ－４和ＩｇＥ水平均显著高于正常对照组，且两者呈正相关，而ＩＦＮ－γ水平显著低于正常对照组；缓解期患者ＩＬ－４、ＩＦＮ－γ及ＩｇＥ均接近于正常水平。提示ＩＬ－４及ＩＦＮ－γ为ＩｇＥ异常变化的两个重要细胞因子，对ＩｇＥ的合成，ＩＬ－４及ＩＦＮ－γ起着正负反馈的调节作用。     

γ－干扰素和白细胞介素－4在支气管哮喘发病中作用的研究

阐明ＩＦＮ－γ和ＩＬ－４在支气管哮喘发病中的作用。选择了急性发作期和缓解期病人及正常人各２０例作为研究对象。实验结果表明，急性发作期病人的ＩＬ－４分泌细胞明显高于缓解期和正常对照组，病人血清总ＩｇＥ也高于正常对照组，但在两组病人之间无明显差异。ＰＨＡ－诱导的ＩＦＮ－γ活性在病人和正常对照组之间也无明显的差异。值得注意的是，在急性发作期病人，ＩＦＮ－γ和ＩＬ－４之间，ＩＦＮ－γ和血清总ＩｇＥ水平之间存在着负相关。进一步表明由于病人体内ＩＦＮ－γ和ＩＬ－４之间的不平衡是引起哮喘发作和血清ＩｇＥ升高的重要原因。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中IL—4和IL—13 mRNA的表达

目的探讨Th2型细胞因子在系统性红斑狼疮(SLE)发病机制中的作用及其意义.方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测了34例活动期SLE患者和30例正常人外周血单个核细胞(PBMC)中IL-4和IL-13mRNA的表达水平.结果活动期SLE患者IL-4和IL-13的阳性表达率与正常人对照组相比均无明显差异(P>0.05);活动期SLE患者PBMC中IL-4和IL-13mRNA的平均表达水平(0.938 6±0.168 9,0.898 3±0.115 3)均明显高于正常人对照组(0.5494±0.151 0,0.608 5±0.090 3),差异非常显著(P<0.001).结论Th2型细胞因子IL-4和IL-13在SLE患者中呈高水平表达,这可能与SLE患者外周血T细胞高度活化、功能异常有关.     

静注免疫球蛋白对新生儿单个核细胞IL—2,IL—4mRN …

探讨静注免疫蛋白抑制体外脐血Ｂ细胞免疫蛋白释放的机制。方法运用ＲＴ－ＰＣＲ法观察ＩＶＩＧ对体外新生儿单个核细胞分泌的ＩＬ＿２ｍＲＮＡ及ＩＬ－４ｍＲＮＡ表达的影响。结论ＩＶＩＧ对ＩＬ－２，ＩＬ－４两种细胞因子产生的抑制可能源于转录到分泌至胞外整个阶段任一时相上的抑制 。