半乳糖凝集素-3对垂体腺瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的观察半乳糖凝集素-3(Gal-3)对垂体腺瘤细胞生长的影响并探讨其可能的作用机制。方法采用RNA干扰(RNAi)抑制Gal-3基因的表达,应用Western blot分别检测Gal-3蛋白和细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白的表达情况,然后应用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑(MTT)法和流式细胞仪(FCM)检测大鼠垂体腺瘤细胞系GH3细胞增殖和细胞凋亡的情况。结果①RNAi后24 h、48 h,Gal-3均明显下调(P0.05),至72 h后较48 h略有回升(P0.05),同时伴有Bcl-2表达水平的明显下调(P0.05),而Bax蛋白表达无明显变化(P0.05);②RNAi下调Gal-3表达水平后,在不同时间点(24 h、48 h、72 h)GH3细胞的增殖能力均受到显著抑制(P0.05);③RNAi后GH3细胞的凋亡细胞比例明显增加,由处理前的5.2%上升至21.7%。结论下调Gal-3的表达导致促凋亡基因Bcl-2的表达下调,而抑凋亡基因Bax的表达水平不变,同时导致GH3细胞增殖受抑,细胞凋亡增加,提示Gal-3在垂体腺瘤细胞的增殖和进展中发挥重要作用,有望为垂体腺瘤的防治提供一个新的分子靶点。     

甘草查尔酮A对胶质瘤的增殖抑制及促凋亡作用机制研究

目的探讨甘草查尔酮A(LCA)对人胶质瘤U87、U251细胞的增殖抑制和促凋亡作用及其机制研究。方法通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖抑制作用,并计算出半数抑制浓度(IC50),按IC50和100μM不同浓度进行分组。采用倒置显微镜观察细胞形态,流式细胞术检测细胞凋亡以及Western Blot从蛋白水平检测凋亡相关分子的改变情况。结果 MTT显示LCA对人胶质瘤U87、U251细胞具有明显的增殖抑制作用,呈浓度及时间依赖性,LCA对U87、U251细胞48 h的IC50值分别为61.54μM和53.02μM,倒置显微镜下观察细胞密度减少,形态发生明显改变。流式细胞术结果显示,LCA可促进胶质瘤U87、U251的细胞凋亡(P0.01)。Western Blot结果显示,LCA干预后可显著降低胶质瘤U87、U251细胞内Bcl-2的表达(P0.01),相反,增加Bax的表达(P0.05),呈浓度依赖性。结论 LCA对胶质瘤U87、U251细胞具有明显的增殖抑制作用,可能通过内源性凋亡途径诱导其凋亡。     

苯乙酸对胶质瘤C6细胞增殖和凋亡的影响

目的观察诱导分化剂苯乙酸（PA）对胶质瘤C6细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养胶质瘤C6细胞，用0、2．5、5．0和7．5mmol／L不同浓度的PA，分别在PA诱导24、48、72、96h后。甲基噻唑基四唑（MTT）比色法检测细胞增殖抑制率，进一步用免疫细胞化学检测胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达变化，末端脱氧核糖核酸转移酶介导的脱氧尿嘧啶核苷酸缺口末端标记（TUNEL）检测细胞凋亡。结果PA显著抑制c6细胞增殖，随药物浓度的增加和作用时间的延长，细胞增殖抑制率增加。PA作用后GFAP表达增强。随PA浓度和作用时间的增加，细胞凋亡率增加。结论PA对胶质瘤C6细胞有显著的增殖抑制和诱导凋亡作用，呈时间剂量依赖性。     

雌激素受体拮抗剂对垂体腺瘤GH3细胞增殖、凋亡、催乳素分泌及雌激素受体蛋白表达的影响

目的 通过检测雌激素受体拮抗剂对垂体腺瘤GH3细胞增殖、凋亡、催乳素(PRL)分泌及雌激素受体蛋白表达的影响,探讨雌激素在垂体催乳素腺瘤发生、发展中的作用机制.方法 对去激素培养条件及加入外源性E2培养条件下的GH3细胞采用不同方法进行检测:应用MTT 法检测OHTam与ICI对GH3细胞增殖的影响;ELISA法检测对GH3细胞PRL分泌的影响;流式细胞仪测定细胞凋亡率;Western blot检测对GH3细胞ERα、ERβ表达的影响.结果 E2对GH3细胞增殖有显著的生长刺激作用,低浓度E2(10-12mol/L)即显著高于去激素培养组;OHTam与ICI对GH3细胞增殖有抑制作用,当给药浓度达到10 -6mol/L时,增殖指数分别为0.62和0.47,呈剂量依赖性;OHTam与ICI可抑制E2对GH3细胞的生长刺激作用;以上结果与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).E2可促进GH3细胞的PRL的分泌,随着E2浓度的增高,PRL的分泌增加;OHTam与ICI可抑制GH3细胞PRL的分泌,并且能够抑制E2的促进作用.OHTam与ICI能够诱导GH3细胞凋亡,以早期凋亡为主.GH3细胞有ERα与ERβ的表达,E2可上调ERβ的表达水平,ICI可下调ERα的表达水平,而OHTam对ERα与ERβ的表达水平无显著影响.结论 雌激素受体拮抗剂是通过抑制细胞增殖、PRL分泌及抗雌激素而发挥抑瘤作用,而ICI的作用还与下调ERα的表达有关.     

蒿甲醚对C6胶质瘤细胞的抑制作用

目的 研究蒿甲醚对大鼠C6胶质瘤细胞的抑制作用.方法 C6胶质瘤细胞经培养后,按是否加入蒿甲醚分为实验组和对照组,均采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、流式细胞技术(FCM)及Hoechst33258荧光染色法检测细胞凋亡情况.结果 MTT法检测显示:24、48、72h3个时间组蒿甲醚对C6胶质瘤细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为(195.08±3.27) μmol/L、(119.64±4.06) μmol/L、(87.84±0.93) μmol/L.FCM法检测显示:24、48、72 h3个时间组C6胶质瘤细胞凋亡率分别为:7.95％、22.01％、31.22％;且G0-G1期细胞比例增加,S期和G2-M期细胞比例降低.荧光染色显示:实验组细胞内出现凋亡小体;而对照组细胞呈弥散均匀荧光.结论 蒿甲醚能抑制C6胶质瘤细胞生长,且其抑制作用呈现时间依赖性和浓度依赖性;蒿甲醚能干扰C6胶质瘤细胞的细胞周期,可将其阻滞在G0-G1期并诱导其凋亡.     

FoxM1抑制剂硫链丝菌素对髓母细胞瘤Daoy细胞增殖与凋亡的影响

目的 探讨FoxM1抑制剂硫链丝菌素对髓母细胞瘤Daoy细胞株增殖及凋亡的影响. 方法 体外常规培养髓母细胞瘤Daoy细胞株,CCK-8法检测0、1、1.5、2、3、5μmol/L硫链丝菌素作用24、48、72 h后细胞存活率的变化;实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫印迹法分别检测0、1、1.5、2μmol/L硫链丝菌素作用48 h后细胞FxoMl mRNA和蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡,免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达. 结果 CCK-8检测显示不同浓度硫链丝菌素作用后Doay细胞存活率下降,且呈浓度和时间依赖性,差异有统计学意义(P＜0.05).24、48、72 h的IC50分别为(2.1±0.15)、(1.69±0.11)、(1.39±0.1)μmol/L; RT-PCR和免疫印迹实验显示,与0 μmol/L硫链丝菌素组比较,1、1.5、2μmol/L硫链丝菌素组细胞FoxMl mRNA及蛋白水平下降,G2/M期细胞细胞比例和凋亡率升高,凋亡蛋白bax表达增加,抗凋亡蛋白bcl-2表达减少,且均呈浓度依赖性,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 FoxM1抑制剂硫链丝菌素可明显抑制Daoy细胞增殖,可能与阻滞细胞周期于G2/M期、改变bcl-2/bax表达诱发凋亡有关.     

ephrinA3在脂多糖诱导的星形胶质细胞中的表达变化

目的 探讨ephrinA3在脂多糖诱导的大鼠大脑皮质星形胶质细胞中的表达变化.方法 提取新生大鼠大脑皮质星形胶质细胞并纯化培养,随机分为对照组和实验组,脂多糖10mg/L干预后,实验组又分为30min组、6h组、24h组、48h组和72h组,采用倒置相差显微镜观察星形胶质细胞形态学变化,MTT法检测细胞活力,AO/EB荧光染色检测细胞凋亡和坏死情况,CY3免疫荧光及Western blot方法测定不同时间点ephrinA3的表达变化.结果 在脂多糖作用的不同时间中,与对照组相比,作用24h、48h、72h的细胞存活率显著升高,凋亡率显著下降,ephrinA3表达显著升高.结论 ephrinA3在脂多糖诱导的大鼠大脑皮质星形胶质细胞中的表达增高,持续至少72h,其在中枢神经系统损伤后星形胶质细胞增殖方面起重要调控作用.     

ATRA诱导胶质瘤C6细胞凋亡过程中Bcl-2和Caspase-3表达的研究

目的研究全反式维甲酸（ATRA）诱导胶质瘤C6细胞凋亡过程中Caspase-3和Bcl-2表达情况,探讨ATRA诱导胶质瘤C6细胞凋亡的机制。方法用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法绘制ATRA不同浓度不同时间（6、12、24、48、72h）对胶质瘤C6细胞作用后细胞生长曲线,逆转录酶-多聚酶链反应（RT—PCR）检测凋亡相关基因Bcl-2和Caspase-3 mRNA水平的表达变化影响,Western blot分析Caspased和Bcl-2在胶质瘤C6细胞中的表达情况。结果胶质瘤C6细胞经ATRA诱导后,细胞的增殖明显受到抑制,通过RT-PCR结果证实Bcl-2 mRNA在ATRA作用下明显呈低表达而Caspase-3 mRNA的表达随时间延长逐渐增高,Western blot检测结果显示ATRA作用后,下调凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达并激活了凋亡蛋白Caspase-3的表达。结论ATRA对胶质瘤C6细胞的增殖具有抑制作用。     

表皮生长因子受体拮抗剂靶向抑制胶质瘤细胞增殖的实验研究

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)拮抗剂-吉非替尼对人脑胶质瘤细胞的增殖抑制作用,为胶质瘤干细胞靶向治疗研究作准备。方法荧光定量PCR检测人脑胶质瘤细胞U251、GBM、SHG44及神经干细胞、脑肿瘤干细胞中EG-FR基因的表达。选择不同浓度的吉非替尼作用于U251细胞48h,MTT法检测药物对细胞的抑制率;流式细胞仪分析吉非替尼作用U251细胞后细胞增殖周期和细胞凋亡比率的变化。结果U251和脑肿瘤干细胞中都高表达EGFR。吉非替尼对U251细胞有明显的抑制作用,并呈浓度依赖性,IC50为19.0μM。以12.7μM、19.0μM和25.3μM吉非替尼处理U251细胞,随着药物浓度的增加,G0-G1期细胞比例和细胞凋亡率都逐渐升高。结论EGFR在U251细胞和脑肿瘤干细胞中都高表达,其拮抗剂吉非替尼对U251的细胞增殖有显著的抑制作用,为靶向治疗胶质瘤干细胞的研究开拓了思路。     

马钱子碱诱导人多发性骨髓瘤细胞株U266细胞凋亡与bax基因的表达*

背景：马钱子碱具有抗肿瘤作用,而其对人多发性骨髓瘤细胞生长的影响尚不明确。 目的：探讨马钱子碱诱导人多发性骨髓瘤U266细胞凋亡的机制。 方法：取对数生长期的U266细胞,分别用0,0.05,0.1,0.2,0.4 g/L的马钱子碱干预12,24,48 h,通过MTT法测得IC50,并以此浓度干预U266细胞,通过形态学观察、RT-PCR法检测马钱子碱对人多发性骨髓瘤U266细胞株的诱导凋亡作用。 结果与结论：马钱子碱诱导U266的凋亡呈时间和浓度依赖性(P < 0.05),其作用48 h的IC50为0.16 g/L。在马钱子碱诱导的凋亡细胞中可见凋亡小体,同时,细胞中的促凋亡基因bax的表达量随马钱子碱作用时间的延长逐渐增加(P < 0.01)。说明0.4 g/L浓度范围内的马钱子碱具有诱导U266细胞凋亡的作用,这种作用具有浓度和时间依赖性,可能是通过激活bax基因途径实现的。     

盐酸小檗碱诱导人脑胶质瘤细胞U251凋亡及其与HERG钾离子通道的表达相关研究

目的探讨盐酸小檗碱(ber)诱导人脑胶质瘤细胞U251凋亡及其与HERG钾离子通道表达相关性。方法使用不同浓度的ber处理人胶质瘤细胞U251,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)染色法测定细胞增值率,Hoechst33258荧光染色法观察细胞形态学改变,流式细胞术测定细胞凋亡率,分别采用实时荧光定量PCR与Western Blotting检测HERG钾通道的RNA及蛋白的表达情况。结果 MTT法检测显示细胞抑制率呈浓度与时间依赖性,且随药物浓度增加而增大(P0.05),其24 h的半数抑制浓度(IC50))是(8.78±0.20)μmol/l;Hoechst33258荧光染色法检测表明处理组出现典型的凋亡特征;且流式细胞术检测结果表明随着ber的剂量增加U251细胞的早期凋亡率及晚期凋亡率逐渐增大(P0.05);RT-PCR与Western Bloting检测结果显示ber处理后U251细胞的HERG钾通道的RNA含量及蛋白的表达均上调,且随着药物浓度的增高而增高。结论在体外ber可诱导人胶质瘤细胞系U251的凋亡,并可能通过上调HERG蛋白的表达抑制U251增殖。     

氟维司群对泌乳素瘤GH3细胞系增殖和分泌的影响

目的探讨雌激素受体拮抗剂氟维司群对泌乳素腺瘤GH3细胞增殖和分泌泌乳素的影响。方法将GH3细胞分为对照组、不同浓度的氟维司群组（0．04、1、25、625nM）和雌二醇组。观察氟维司群和雌二醇对GH3细胞活力、泌乳素水平、凋亡以及转化生长因子-β3（Transforming growth factorβ3,TGF—β3）的影响。结果与对照组相比,雌二醇组GH3细胞活力明显增加（P〈0．01）,氟维司群25nM组和625nM组细胞活力分别下降35．3％和42．4％,差异显著（P〈0．01）。与对照组和雌二醇组相比,1nM组凋亡细胞增加,差异有统计学意义（P〈0．05）,25nM组和625nM组凋亡细胞数分别占总细胞数12．9％和17．3％．差异显著（P〈0．01）。与对照组相比,氟维司群能抑制泌乳素分泌,25nM组和625nM组分别下降62.3％和81．6％,差异佩著（P〈0．01）。蛋白印迹试验证实雌激素可抑制TGF—β3表达,随着氟维司群浓度增加,TGF-β3表达量逐渐上升。结论雌二醇可促进GH3细胞增殖和泌乳素分泌,而雌激素受体拮抗剂氟维司群能够有效抑制雌激素作用,期问有TGF—β3参与,为泌乳素瘤临床治疗提供新的药物选择。     

4-羟基他莫昔芬对泌乳素腺瘤GH3细胞增殖和分泌的影响

目的探讨雌激素受体拮抗剂4-羟基他莫昔芬（OHTam）对泌乳素腺瘤GH3细胞增殖和分泌泌乳素的影响。方法用逆转录多聚酶链反应（RT—PCR）的方法测定泌乳素腺瘤GH3细胞中雌激素受体-mRNA（ER—mRNA）的表达,并观察在去激素培养条件下以及不同浓度的OHTam和雌二醇（E2）对GH3细胞生长速度、生长抑制率、雌激素受体-mRNA（ER—mRNA）及泌乳素分泌水平的影响。结果在E2（10^-8mol／L）组细胞吸光度为0．561±0．018,抑制率为-0．06,细胞计数、生长抑制率、ER—mRNA及泌乳素分泌水平与去激素培养组差异显著（P〈0．05）;E2（10^-6mol／L）＋OHTam（10^-6mol／L）组吸光度为0．504±0．014,抑制率为0．08,细胞计数、ER—mRNA及泌乳素分泌水平与E2（10^-8mol／L）组差异显著（P〈0．05）。结论泌乳素腺瘤GH3细胞有雌激素受体表达,E2可以促进GH3细胞的增殖和泌乳素的分泌,而雌激素受体拮抗剂OHTam能够有效抑制雌激素的作用。     

华蟾素对人脑胶质瘤细胞SHG44增殖及凋亡的影响

目的初步探讨华蟾素对人脑胶质瘤细胞SHG44增殖、细胞周期分布及凋亡的影响机制。方法利用MTT法、流式细胞仪检测华蟾素对人脑胶质瘤细胞SHG44增殖及细胞周期变化的影响。AO／EB染色、透射电镜观察人脑胶质瘤细胞SHG44凋亡细胞形态学的变化。Westernblot检测Bcl-2与Caspase8蛋白的表达。结果华蟾素（1μg／ml、10μg／ml）对细胞株增殖具有显著抑制作用（P〈0．05）,并呈时间和浓度依赖性。沆式细胞仪检测可见凋亡峰,Go／G。期细胞明显增多（P〈0．05）;华蟾素作用后可使Bcl-2蛋白表达降低．Caspase8蛋白表达升高。结论华蟾素可调控人脑胶质瘤细胞SHG44的周期进程,诱导Bcl-2及Caspase8差异性表达,且具有抑制肿瘤细胞增殖及促凋亡的作用。     

Survivin拮抗肽对人胶质瘤U251细胞凋亡的影响

目的探讨Survivin拮抗肽对人胶质瘤U251细胞体外增殖的抑制作用及细胞周期的影响。方法将U251细胞与不同浓度的Survivin拮抗肽进行体外培养,采用四甲基偶氮唑蓝法测定不同浓度的Survivin拮抗肽对U251细胞的生长抑制率;采用流式细胞仪分析细胞周期与细胞凋亡。结果浓度为5、10、20ug／ml的Survivin拮抗肽均能抑制U251细胞的生长,且抑制率与Survivin拮抗肽浓度及作用时间成正比（P〈0．01）。20ug/ml Survivin拮抗肽作用U251细胞72h,抑制率达63．33％。流式细胞仪结果显示,终浓度为5、10、20ug／ml Survivin拮抗肽亦能促进U251细胞凋亡,且随作用浓度增大及作用时间延长凋亡率明显上升（P〈0．01）;20ug／ml Survivin拈抗肽作用U251细胞72h,凋亡率为31．29％。不同浓度的Survivin拮抗肽作用U251细胞72h,随作用浓度增大,G2/M期细胞构成比明显上升（P〈0．01）。结论Survivin拮抗肽对U251细胞增殖具有抑制作用和促进凋亡,其抗胶质瘤细胞增殖作用机制可能为诱导肿瘤细胞凋亡,调控肿瘤细胞周期。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275对脑胶质瘤细胞增殖的影响

目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275对脑胶质瘤细胞系U251细胞增殖的影响。方法应用不同浓度的MS-275作用于U251细胞,分别培养24、48和72h,采用细胞计数试剂盒检测其对U251细胞增殖的抑制作用,瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态变化,碘化丙啶单染法检测细胞周期变化,膜联蛋白Ⅴ-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染法经流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western-blot检测聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)经天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(caspase)3作用后的裂解产物。结果 MS-275对U251细胞增殖的抑制作用在相同作用时间下随药物浓度的增加而增大,在同一浓度作用下随作用时间延长而增大,其最佳浓度为10nmol/L。MS-275作用后U251细胞呈现凋亡,胞质和胞核浓缩或碎裂。10nmol/mlMS-275分别作用24、48和72h后细胞凋亡率分别为(2.1±0.4)%、(11.7±0.5)%和(29.0±2.3)%,三者差异显著(P<0.05);随作用时间延长,G1期细胞所占比例逐渐减少,G2期细胞所占比例先增多后减少,药物作用24h所占比例最高,S期细胞所占比例变化不明显,作用48h后开始出现亚G0凋亡峰,且逐渐增大,而对照组没有出现该峰;PARP被caspase3剪切。结论 MS-275对胶质瘤细胞的增殖抑制作用具有浓度和时间双重依赖性;这种作用是通过激活caspase3信号通路诱导细胞凋亡实现的。     

NF2基因对细胞增殖和细胞周期的影响

目的观察Ⅱ型神经纤维瘤（neurofibromatosisⅡ，NF2）基因对细胞增殖和细胞周期的影响。方法采用脂质体介导法将携带野生型NF2的真核表达载体导入大鼠神经鞘瘤RT4细胞，质粒转染成功后实验细胞分为pEGFP-N1组、pEGFP-NF2组和对照组（未转染质粒组），以Western blot分析目的基因的表达，并采用MTT法和流式细胞仪检测细胞增殖和细胞周期。结果pEGFP-NF2组细胞merlin蛋白出现明显高表达。pEGFP-NF2组细胞生长的抑制率高达37．7％，与对照组相比较，差异具有统计学意义（P〈0.05）；而pEGFP-N1组细胞生长的抑制率与对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。流式细胞仪检测显示NF2可以阻断细胞周期，使其处于G1-G0期。结论野生型NF2可抑制大鼠神经鞘瘤RT4细胞的增殖，阻断细胞周期，使其处于G1-G0期。     

氧化铁磁流体热疗对人良性脑膜瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的观察氧化铁磁流体热疗(MFH)对人良性脑膜瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法15例人脑膜瘤细胞短期原代培养,进行氧化铁磁流体单次加热或3次加热,加热温度42～44℃,持续30min。流式细胞仪检测细胞凋亡,四氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖的变化。结果MFH(44℃,30min)单次加热和3次加热组中,人脑膜瘤细胞增殖抑制率分别为(12.62±0.78)%和(12.78±1.56)%,与对照组相比差异显著(P0.05)。MFH引起部分脑膜瘤细胞裂解坏死,散在细胞凋亡,但各组细胞凋亡率无明显差异。结论在人良性脑膜瘤体外实验中,氧化铁MFH(44℃,30min)可以明显抑制细胞增殖,但不能有效诱发细胞凋亡。     

催乳素对神经母细胞瘤细胞系Neuro2a增殖的调节作用

目的:探讨催乳素(Prolactin,PRL)对小鼠神经母细胞瘤细胞系Neuro2a细胞增殖的影响。方法:用不同浓度PRL作用于无血清培养的各Neuro2a细胞实验组,通过细胞计数,观察PRL对细胞增殖的影响。采用RT-PCR方法检测PRL受体基因在Neuro2a细胞的表达。结果:与对照组比较,10-7mol/LPRL对Neuro2a细胞的增殖具有明确的时间依赖性调节作用。应用PRL第一天可见Neuro2a细胞数明显增加(P<0.01),第三天时Neuro2a细胞增殖达最大峰值,较对照组增高228%(P<0.001)。第四天时实验组与对照组细胞数无明显差异。PRL受体基因在Neuro2a细胞中有明确的表达。结论:PRL能够促进Neuro2a细胞的增殖。提示PRL可能在神经母细胞瘤的发生和发展中发挥了一定作用。     

土贝母苷甲通过上调FADD/caspase-8/caspase-3的表达促进人胶质瘤U251细胞凋亡

目的研究土贝母苷甲(TBMSⅠ)诱导人胶质瘤U251细胞凋亡及其可能的内在机制。方法四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)检测不同浓度的土贝母苷甲对U251细胞增殖的影响。Hoechst 33258荧光染色观察不同浓度土贝母苷甲处理U251细胞后细胞核形态的变化。流式细胞仪检测细胞的凋亡率。Western blot分析土贝母苷甲对FADD、caspase-8和caspase-3蛋白表达水平的影响。结果土贝母苷甲以剂量依赖方式抑制U251细胞的增殖。土贝母苷甲处理后,U251细胞的细胞核表现出固缩浓染等凋亡特征,且随着药物浓度的增加,细胞数目逐渐减少。与对照组相比较,土贝母处理组(10、20、25μg/ml)的早期和晚期凋亡率均显著增加,差异有统计学意义(P﹤0.05)。10、20、25μg/ml土贝母苷甲处理组上调了FADD、caspase-8和caspase-3蛋白的表达水平,差异有统计学意义(P﹤0.05)。结论土贝母苷甲在体外能够明显的抑制U251细胞的增殖,其机制可能与上调FADD、caspase-8和caspase-3蛋白表达从而诱导细胞凋亡有关。