辐射诱发淋巴细胞HPRT基因位点突变的初步观察

辐射诱发淋巴细胞ＨＰＲＴ基因位点突变的初步观察杨素霞，金璀珍，刘秀林，李煜，樊飞跃，刘国廉电离辐射可引起人体ＨＰＲＴ基因位点突变。ＨＰＲＴ基因位于Ｘ染色体上，对电离辐射变化非常敏感，当细胞中ＨＰＲＴ基因改变时，通过检测人体外周血中抗６－硫代鸟嘌呤（６...     

一例辐射事故病人外周血淋巴细胞HPRT基因突变频率的测定

一例辐射事故病人外周血淋巴细胞ＨＰＲＴ基因突变频率的测定邢瑞云赵艳华夏寿萱次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（ＨＰＲＴ）基因位于细胞Ｘ染色体上，其产物在细胞核酸代谢中参与嘌呤核苷酸合成旁路代谢。ＨＰＲＴ基因对于电离辐射比较敏感，而且ＨＰＲＴ基因突变的细胞能在含６...     

五例60Co源辐射事故病人照后3.5～5.5年外周血淋巴细胞HPRT基因突变频率测定

五例６０Ｃｏ源辐射事故病人照后３．５～５．５年外周血淋巴细胞ＨＰＲＴ基因突变频率测定王惠琛邢瑞云赵艳华夏寿萱ＨＰＲＴ基因（次黄嘌呤磷酸核糖转移酶基因）位于Ｘ染色体上，易受物理化学因素的影响而产生突变，比常染色体隐性基因具有更高的突变频率（ｍｕｔａｔｉ...     

晚期混合裂变产物内照射诱发大鼠外周血淋巴细胞HPRT基因位点突变与微核的比较研究

目的　探索ＨＰＲＴ 基因位点突变检测作为辐射生物剂量计的可行性。方法　运用多核细胞法及胞质分裂阻断微核（ＣＢＭＮ） 法研究大鼠外周血淋巴细胞的ＨＰＲＴ基因位点突变及微核与累积剂量、剂量率之间关系。结果　静注晚期混合裂变产物后第１ 天（ 累积剂量１－７３ ｃＳｖ） ,与对照组相比,ＨＰＲＴ 位点变异频率（Ｖｆ）、微核细胞（ ＭＮＣ） 率、微核（ ＭＮ） 率均已显著增加（Ｐ＜ ０－０１）。ＨＰＲＴＶｆ、ＭＮＣ率、ＭＮ 率与累积剂量间均可拟合成对数回归方程：Ｙ＝ ａ＋ ｂｌｎＸ。在总累积剂量近似相等条件下,ＨＰＲＴ Ｖｆ、ＭＮ率与剂量率之间的关系均可用函数Ｙ＝ ａ ＋ ｂｌｎＸ 表示。ＨＰＲＴ Ｖｆ 与ＭＮ 率间存在线性相关。结论　ＨＰＲＴ基因位点对晚期混合裂变产物内照射非常敏感,有明显的剂量效应关系。ＨＰＲＴ 基因突变检测可望成为评估电离辐射损伤的生物剂量计。     

晚期混合裂变产物内照射诱发大鼠外周血淋巴细胞HP …

目的 探索ＨＰＲＴ基因位点突变检测作为辐射生物剂量计的可行性。方法 运用多核细胞法及胞质分裂阻断微核（ＣＢＭＮ）法研究大鼠外周血淋巴细胞的ＨＰＲＴ基因位点突变及微核与累积剂量、剂量率之间关系。结果 静注晚期混合裂变产物后第１天（累积剂量１．７３ｃＳｖ）,与对照组相比,ＨＰＲＴ位点变异频率（Ｖｆ）,微核细胞（ＭＮＣ）率,微核（ＭＮ）率均已显著增加（Ｐ〈０．０１）。ＨＰＲＴ,Ｖｆ,ＭＮＣ率,ＭＮ率与累     

用多重PCR分析60Coγ射线引起人白血病细胞HPRT基因突变

目的：探讨＾６０Ｃｏγ射线诱导人ＨＰＲＴ基因突变的分子图谱和发生机理,以及与辐射抗肿瘤的关系。方法采用单细胞克隆培养、双向筛选计数、多重ＰＣＲ扩增和电泳分析等方法。结果①随着辐射剂量的增加,细胞接种存活率下降,突变频率升高。②自发突变中９２．３％是点突变,而γ射线诱发突变主要由缺失与点突变两部分组成（两者分别为６１．７％和３８．３％）。③缺失突变可以发生于ＨＰＲＴ基因的每个子外显子,但诱发突变中绝     

5例放射事故病人照后5.5年外周血淋巴细胞HPRT基因突变频率…

通过克隆外周血淋巴细胞并用６－巯基鸟嘌呤筛选次嘌呤磷酸核糖转移酶基因（ｈｙｐｏｘａｎｔｈｉｎｅｐｈｏｓｐｈｏｒｉｂｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＨＰＲＴ）缺陷的突变细胞，测定了５例急性放射病人在受２．０～５．２Ｇｙ，＾６０Ｃｏγ射线意外照射后５．５年外周血淋巴细胞ＨＰＲＴ基因突变频率。观察到细胞克隆效率，突变细胞克隆数，ＨＰＲＴ突变频率与受照射剂有一定的依赖性，有多引物聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增     

5例放射事故病人照后5.5年外周血淋巴细胞 HPRT 基因突变频率和突变谱的测定

通过克隆外周血淋巴细胞并用６巯基鸟嘌呤筛选次黄嘌呤磷酸核糖转移酶基因（ｈｙｐｏｘａｎｔｈｉｎｅｐｈｏｓｐｈｏｒｉｂｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＨＰＲＴ）缺陷的突变细胞，测定了５例急性放射病人在受２．０～５．２Ｇｙ６０Ｃｏγ射线意外照射后５．５年外周血淋巴细胞ＨＰＲＴ基因突变频率。观察到细胞克隆效率、突变细胞克隆数、ＨＰＲＴ突变频率与受照剂量有一定的依赖性。用多引物聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增突变细胞ＨＰＲＴ基因全部９个外显子伴以琼脂糖凝胶电泳以分析基因突变谱。结果表明，高剂量受照病人的外显子缺失总数较低剂量者高。与照后３．５年和４．５年的突变谱比较，外显子缺失突变比例逐年下降，而点突变比例逐年升高。可能反映病人机体的恢复和受损ＤＮＡ的修复。     

五例60Co源辐射事故病人照后3.5～5.5年外周血淋巴细胞HPRT基因突变谱分析

目的对５例受２．０～５．２Ｇｙγ射线照射的事故病人照后３．５～５．５年外周血淋巴细胞ＨＰＲＴ基因突变谱进行监测。方法用多引物聚合酶链式反应扩增突变细胞ＨＰＲＴ基因的全部外显子伴以琼脂糖凝胶电泳以分析基因突变谱。结果外显子缺失是电离辐射所致ＨＰＲＴ基因突变的主要特征。随着时间推移，外显子缺失总数由照后３．５年的１８／２４（７５％）下降至４．５年的３１／４６（６７．４）和５．５年的１２／３０（４０％）；而点突变比例则相应地上升。这可能反映了ＤＮＡ损伤的修复和病人机体的恢复。结论ＨＰＲＴ基因突变在体内长期存在，但基因突变谱逐渐发生值得注意的变化，随访观察仍应继续     

五例^60Co源辐射事故病人照后3.5—5.5年外周血淋巴细？…

对５例２．０－５．２Ｇｙ－γ射线照射的事故病人照后３．５－５．５年外周血淋巴细胞ＨＰＲＴ基因突变谱进行监测。方法 用多引物聚合酶链式反应扩增突变细胞ＨＰＲＴ基因的全部外显子拌以琼脂糖凝胶电泳以分析基因突变谱。结果 外显子缺失是电离辐射所致ＨＰＲＴ基因突变的主要特征。随着时间推移，外显子缺失总数由照后３．５年的１８／２４（７５％）下降至４．５年的３１／４６（６７．４）和５．５年的１２／３０（４０％）     

HPRT基因突变分析技术及其在放射生物学中的应用

较系统地综述了ＨＰＲＴ基因突变分析的基本原理、方法、影响因素及其在放射生物学中的应用及存在的问题。研究表明，ＨＰＲＴ基因突变分析可望成为一种生物剂量计。通过检测个体ＨＰＲＴ基因突变频率，对急性照射及慢性低剂量长期照射的生物剂量估算，评价癌患风险等方面均有实用价值。     

HPRT基因突变分析技术及其在放射生物学中的应用

较系统地综述了ＨＰＲＴ基因突变分析的基本原理、方法、影响因素及其在放射生物学中的应用及存在的问题。研究表明，ＨＰＲＴ基因突变分析可望成为一种生物剂量计，通过检测个体ＨＰＲＴ基因突变频率，对急性照射及慢性低剂量长期照射的生物剂量估算，评价癌患风险等方面均有实用价值。     

细胞遗传学技术在辐射事故生物剂量估算的研究进展

对现有几种生物剂量测定方法如：染色体畸变、微核、早熟染色体凝集及新近开展的荧光原位杂交、ＨＰＲＴ、ＧＰＡ等在辐射事故剂量估算中的应用情况作了介绍。     

电离辐射对人淋巴母细胞致突效应的辐射适应性：HPRT突变体的分子分析

电离辐射对人淋巴母细胞致突效应的辐射适应性：ＨＰＲＴ突变体的分子分析［英］／ＲｉｇａｎｄＯ…ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．－１９９４．５４（ｓｕｐｐｌ）．－１９２４ｓ～１９２８ｓ研究者用￣（１３７）Ｃｓ放射源照射指数生长的正常人淋巴瘤样细胞ＡＨＨ＿１，分为正常...     

“6.25”60Co源辐射事故病人远后效应6年随访观察综合报告

通过对１９９０年上海发生的“６．２５”＾６０Ｃｏ源辐射事故所致的５名骨髓型急性放射病患者系统随访观察，探讨电离辐射引起的远后效应及其性质程度和与剂量的关系等。方法 持续６年对患者进行临床表现、造血功能、染色体畸变、免疫功能、神经系统、内分泌功能、生殖功能及眼晶体等检查和ＨＰＲＴ基因突变及其些癌基因检测。结果 发现患者在上述诸方面仍存在不同程度辐射损伤，部分损伤程度与受照常剂量有关。结论 本组患者的     

放射性核素内照射诱发大鼠外周血淋巴细胞HPRT基因 …

阐明放射性素核内照射诱发外周血淋巴细胞ＨＰＲＴ基因位点突变的剂量效应关系,并与染色体畸变剂量效应关系进行比较。方法给动物尾静脉注射放射性核素,注射量为０．５ｍｇ／１００ｇ体重。剂量效应关系组动物注射活度为３．６４＊１０＾５Ｂｑ／ｍｌ,于注射后１、３、６和９ｄ心脏穿刺取血。     

辐射相关基因芯片的制备及其在肺癌细胞中的应用

目的 寻找参与肺癌细胞辐射抗性的基因。方法构建辐射相关的基因芯片，初步筛选出在不同辐射敏感性肺癌细胞系中差异表达的基因。为了评价芯片结果的可靠性，我们对一些差异表达基因进行了RT-PCR验证。结果和辐射敏感的NCI-H446细胞相比，辐射抗性的A549中有18个基因有明显的改变，8个基因是上调，10个基因是下调。在照射后6h和24h，A549细胞中分别有22个基因(19个基因上调，3个下调)和26个基因(8个上调，18个下调)的差异表达；NCI-H446细胞中分别有17个基因(9个基因上调，8个下调)和18个基因(6个上调，12个下调)差异表达。从这些基因中，我们发现一些参与细胞增殖和抗凋亡的基因，在照射后的A549细胞中是增高的，而在NCI-H446细胞中是降低的。另外一些参与DNA修复的基因，在A549中比在NCI-H446细胞中有更高的表达。结论一些参与细胞DNA修复、细胞周期调控、细胞增殖和抗凋亡作用的基因可能有助于A549细胞辐射抗性的形成。     

一低剂量辐射诱导新基因的转录调控和初步功能分析

目的：克隆低剂量辐射诱导基因，研究辐射对其转录调控作用和生物学功能。方法：用mRNA差异显示技术分离辐射诱导表达基因，用RACE技术获取cDNA旁侧序列，Northern杂交分析基因的转录调节，生物信息学分析基因的结构和功能。结果：获得包括3'端在内的辐射诱导新基因LRIGx的cDNA片段，序列同源性比较显示与人染色体20ql 1.2-12一段DNA高度同源（＞99％），Northern杂交结果揭示该基因转录子全长约8．5kb，在0．2Gy照射后2h出现诱导表达，4h后转录子水平为对照细胞的5倍多，也受0．02Gy更低剂量照射诱导表达，2Gy大剂量照射后1h出现短暂诱导表达，但不如低量照射明显，2h后恢复正常水平，生物信息学分析结果显示该基因编码产物含有解旋酶活性保守区，结论：分离鉴定出一低剂量辐射反应基因，其编码蛋白可能参与DNA代谢（如修复）等细胞辐射反应过程。     

癌基因和抑癌基因在辐射致癌中的作用

癌基因和抑癌基因在辐射致癌中的作用赵永良，金璀珍，吴德昌辐射是已知的环境致突、致癌因子之一，它可引起各种基因损伤，包括ＤＮＡ链断裂、缺失、基因重组及点突变等，这些基因损伤对于癌症始动及发展是重要的先决条件，近年来分子生物学技术的应用，特别是癌基因、抑...     

抑制差减杂交筛选辐射致癌差异表达基因

目的筛选研究辐射诱发小鼠肿瘤相关差异表达基因。方法以^60Coγ射线照射诱发的小鼠白血病动物模型为研究对象，采用抑制差减杂交技术构建辐射致癌差异表达基因cDNA文库，鉴定后挑取阳性克隆测序，并与GeneBank数据库进行同源性比对分析。结果抑制差减杂交筛选得到102个阳性克隆，随机挑选30个克隆进行菌液PCR，扩增得到28个特异性插入片段，DNA测序结果经与GeneBank数据库比对发现代表了24个已知基因，其中3个为重复检出基因，暂未发现有未知序列基因。结论成功建立辐射致癌差异表达基因cDNA文库，初步筛选获得24条表达上调的差异片段，该结果将有助于充实完善辐射致癌的分子机制。