氯胺酮对脓毒症大鼠血清一氧化氮及心肌组织第二信使的影响

目的研究氯胺酮（KET）对腹腔感染脓毒症大鼠血清一氧化氮（NO）和心肌环磷酸腺苷（cAMP）、环磷酸鸟苷（cGMP）的影响．方法将230只SD大鼠随机分为3组．（1）模型组（CLP，rt=30）；（2）假手术组（SHAM，rt=100）；（3）氯胺酮组（KET＋CLP，rt=100）．测定各组动物血清NO和心肌组织cAMP、cGMP．结果（1）氯胺酮组与模型组血清NO显著升高（P〈0．01），氯胺酮组升高程度显著低于模型组（P〈0．01）．（2）与假手术组比较，氯胺酮组和模型组心肌cAMP显著降低（P〈0．01），心肌cGMP明显升高（P〈0．01）；氯胺酮组心肌cAMP较同期模型组明显升高（P〈0．01），cGMP则显著低于模型组（P〈0．01）．结论一定剂量的KET（50mg／kg）可通过抑制血清NO和心肌cGMP，增加心肌cAMP，从而降低腹腔感染脓毒症大鼠死亡率．     

容量超负荷对大鼠心肌肥大和血压的影响

目的建立容量超负荷大鼠模型，分别测量全心室重、左心室重和右心室重与体重比值以及平均动脉压，观察容量超负荷条件下对大鼠心肌肥大和血压的影响，探讨容量超负荷引起心肌肥大和血压改变的机制。方法动静脉造痿将连有注射器的9号静脉针头斜向上刺穿下腔静脉壁和动静脉联合壁，若刺穿时有突破感，证实针头已进入动脉管腔，用肝素生理盐水冲洗管腔后退出针头。结果手术组与假手术组及正常对照组比较心肌明显肥大；假手术组与正常对照组比较无显著性差异。手术组与假手术组与正常对照组比较收缩压、舒张压及平均动脉压均无显著性差异。结论容量超负荷可引起大鼠心肌肥大，引起肥大的机制可能与心肌细胞对容量超负荷的机械刺激信号产生应答反应，引起心肌细胞跨膜转导信号改变有关。     

磁场作用下急性心肌梗塞大鼠心肌病理改变及相关自由基的变化

目的:探讨磁场对急性心肌梗塞（AMI）大鼠心肌的保护作用。方法：将大鼠随机分为空白对照组、磁场对照组、AMI组、AMI药物（心得安）治疗组和AMI磁场治疗组。采用黄嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸（TBA）、虫荧光素酶法及放射免疫法检测实验性大鼠红细胞超氧化物歧化酶(SOD)、血浆丙二醛(MDA)、心肌三磷酸腺苷(ATP)含量及血浆环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)及心肌梗塞范围(IS)，并对病理形态学、心电图进行观察。结果：AMI磁场治疗组红细胞SOD、心肌ATP明显高于AMI组（P<0.01），与药物治疗组比较差异无显著性（P>0.05）。AMI组血浆MDA、cAMP、cGMP含量明显高于空白对照组及磁场对照组（P<0.01），AMI磁场治疗组与药物治疗组明显低于AMI组（P<0.01）。光学显微镜观察结果表明，AMI组心肌梗塞处肉芽组织增生，未见明显瘢痕形成，磁场治疗组心肌梗塞处可见部分瘢痕形成。AMI磁场治疗组IS明显低于AMI组（P<0.05），AMI组ST段偏移和T波倒置出现率明显高于药物治疗组和磁场治疗组（ P<0.05）。结论:磁场能减少AMI大鼠IS、ST段偏移和T波倒置出现率，有利于梗塞处修复；能降低AMI大鼠血浆MDA、cAMP及cGMP的含量，增加红细胞SOD含量及心肌ATP含量，对心肌具有保护作用。       

压力超负荷致心肌肥大时调控bFGF表达变化的机制研究

目的 阐明急性压力负荷后心肌细胞内cAMP浓升高和心肌碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)变化之间是否存在内在因果关系。方法 用腹主动脉综窄的方法建立急性压力超负荷大鼠模型,检测6个时相点（0．5h,4h,1d,5d,30d)的平均动脉压（MAP）、左室收缩压（LVSP）、左室重量指数（LVMI）;同时分别用免疫组织化学、原位杂交法检测bFGF蛋白及mRNA表达变化,放射免疫法检测心肌cAMP含量;并在心肌细胞培养的基础上,用异丙肾上腺素（ISO）刺激培养心肌细胞,升高细胞内cAMP浓度后检测bFGF蛋白及mRNA表达变化。结果 发现心肌组织中cAMP、bFGF mRNA及蛋白表达分别于0．5h、1d、5d 开始显著增加,5－10d达峰值,术后30h时均降至正常;0．01μmol/L ISO即可刺激心肌细胞使bFGF mRNA及蛋白表达显著增加。结论 cAMP与压力超负荷致心肌肥大时bFGF基因表达有关。     

亚慢性砷中毒大鼠肝脏环核苷酸变化与脂代谢紊乱的关系

目的　探讨亚慢性砷中毒大鼠肝脏中环核苷酸变化及其与脂代谢紊乱的关系。方法　采用亚慢性毒性试验方法 ,大鼠经口灌胃染毒 ,试验期为 6周。实验结束后取肝脏测腺苷环一磷酸 (cAMP)、鸟苷环一磷酸 (cGMP)、一氧化氮 (NO)和丙二醛 (MDA)。结果　染砷大鼠肝脏中cAMP、cGMP含量均显著高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,且肝脏中NO、MDA含量明显升高 ,有剂量反应关系 ,与对照组相比有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论　亚慢性砷中毒大鼠第二信使系统平衡紊乱 ,肝脏内NO、MDA含量增多可能与脂质的分解、合成、转运等多环节出现障碍有关。     

川芎嗪对癫痫模型海马内信号分子的影响

目的：研究戊四氮（pentylenetetrazol，PTZ）点燃癫痫模型大鼠海马内环磷腺苷（Cyclic Adenosine monophosphate，cAMP）、环-磷酸鸟苷（cyclic guanosine monophosphate，cGMP）的变化及川芎嗪（Tetrarnethylpyrazine，TMP）对其的影响。方法：将实验动物随机分为3组，正常对照组、癫痫模型组、TMP治疗组。采用放射免疫法测定海马内cAMP、cGMP的含量。结果：模型组与正常对照组比，cAMP．cGMP含量明显增加，cAMP／cGMP比值明显减小，差异均具有显著性意义（P〈0.01），TMP治疗组与癫痫模型组比，cAMP含量明显增加，cGMP含量则明显减少，caMP／cGMP比值明显增加，差异均具有显著性意义（P〈0．01）。结论：川芎嗪抑制癫痫放电作用与其调节海马内cAMP、cGMP含量变化有关。     

cGMP对大鼠心肌细胞葡萄糖摄取的抑制作用

目的：观察大鼠心脏两种负荷状况时环化鸟苷一磷酸（cGMP）对心肌细胞摄取葡萄糖的影响。方法：应用cGMP类似物8-BrcGMP、一氧化氮合酶（NOS）抑制剂L-NAME和NO供体SNAP灌注Wistar大鼠心脏,并用放免法测定组织内cGMP浓度。根据2-^3H标记率计算葡萄糖摄取量。结果：低负荷状况时8-BrcGMP使冠脉血流增加,细胞内糖原浓度升高。高负荷状况时8-BrcGMP使心排出量减少,心肌细胞对葡萄糖摄取减少和使糖原浓度降低。L-NAME降低心肌细胞cGMP逍度,并刺激葡萄糖摄取,而SNAP作用则相反。结论：心肌细胞内cGMP浓度升高,可抑制葡萄糖摄取;而NOS抑制剂L-NAME则能降低cGMP浓度,使心肌细胞葡萄糖摄取增加,糖原分解减少,使缺血心肌功能受到保护。     

一氧化氮可抑制牵张刺激心肌细胞肥大反应

虽然有大量实验早已证实单纯压力超负荷即可诱导心肌肥大，但是至今尚不清楚这一力学作用的信号转导机制。有报道指出，细胞形变可直接刺激细胞内腺苷酸环化酶活性及cAMP含量升高。本室研究也提示，急性压力超负荷可诱导心肌组织cAMP含量迅速升高、cGMP含量迅速降低，说明环核苷酸系统与压力超负荷心肌肥大的信号转导机制有关。我们采用体外模拟牵张刺激模型，进一步观察了一氧化氮供体硝普钠对牵张刺激心肌细胞肥大反应的影响。 　　结果表明，应用本室建立的牵张刺激模型进行20%牵张刺激即可显著诱导培养心肌细胞蛋白质合成，同时，牵张刺激使心肌细胞β肌球蛋白mRNA表达也显著升高，而DNA合成未见增加。另外发现，大于3×10－4M／L的硝普钠(NO供体)即可显著抑制牵张刺激诱导的心肌细胞蛋白质合成及β－MHC mRNA表达，在不断保持硝普钠浓度的情况下，则具有持续的抑制作用。在急性压力超负荷大鼠心肌cGMP浓度有一个从正常水平到降低，再到恢复正常的过程，这一变化特点恰与cAMP的变化曲线相反。     

缺氧对乳鼠耳蜗螺旋神经节神经元外向电流的影响及其环磷酸腺苷、环磷酸鸟苷含量变化的研究

目的  观察缺氧时间对体外培养的耳蜗螺旋神经节神经元（SGNs）外向电流的影响及其细胞内第二信使环磷酸腺苷（cAMP）、环磷酸鸟苷（cGMP）含量变化。方法  体外原代培养新生1～3 d SD大鼠SGNs并进行免疫荧光鉴定。用膜片钳全细胞记录模式观察缺氧外液灌流SGNs时,外向电流的变化趋势和特点。用酶联免疫吸附实验检测缺氧5、15和20 min时SGNs内cAMP和cGMP的浓度变化。结果  ①酶解分离可获得生存状态良好的神经元,经免疫荧光鉴定为SGNs。②当电压钳制在-60 mV时,急性缺氧增强SGNs外向电流,主要增强0～+60 mV电压区间的激活电流幅度。缺氧5 min时,+60 mV激活电流幅度从（971.2±50.3）pA增强到（2361.0±207.4）pA,差异有统计学意义（P <0.01）。随后出现下降趋势,11～15 min时,增强的电流幅度与对照组基础电流比较,差异无统计学意义（P >0.05）。③分别检测缺氧5、15和20 min后SGNs中cAMP和cGMP的含量变化。缺氧5 min组与正常对照组比较,cAMP浓度升高,差异有统计学意义（P <0.01）。缺氧15 min组与正常对照组比较,cAMP浓度变化差异无统计学意义;缺氧20 min组与正常组对照组比较,cAMP浓度水平下降（P <0.01）。cGMP浓度随着缺氧时间的延长,总体呈下降趋势,但在20 min后有部分回升（缺氧15 min vs 缺氧20 min,P <0.01）。结论  在SGNs急性缺氧损伤过程中,外向电流增强,增强幅度随缺氧时间变化先升后降,推测在短期缺氧时细胞通过降低兴奋性,影响听觉信息的传导,且该过程与胞内第二信使cAMP和cGMP浓度的改变相关。

     

容量超负荷心肌肥大大鼠血浆肾素、血管紧张素Ⅱ含量变化

目的:建立容量超负荷大鼠模型,测量全心室重/体重(WVW/BW)、左心室重/体重比值(LVW/BW)和血浆血管紧张素Ⅱ水平、血浆肾素活性,观察容量超负荷条件下大鼠心肌肥大与血管紧张素Ⅱ、肾素之间的关系,探讨容量超负荷引起心肌肥大的机制.方法:穿刺A-V联合壁造瘘制造大鼠容量超负荷模型.结果:手术组(0.6±0.1)与正常对照组(0.4±0.1)及假手术组(0.4±0.1)比较,LVW/BW有显著性差异(P＜0.05);手术组(2.1±0.2)与正常对照组(1.8±0.2)及假手术组(2.0±0.2)比较,LVW/BW无显著性差异(P＞0.05).手术组(3 665.0±1 637.4)与正常对照组(1 900.0±1 300.0)及假手术组(1905.3±1302.4)比较,血管紧张素Ⅱ有显著性差异(P＜0.05).手术组(87.3±47.1)与正常对照组(170.0±70.0)及假手术组(172.1±76.3)比较,血浆肾素活性有显著性差异(P＜0.05).结论:容量超负荷可引起大鼠心肌肥大,引起肥大的机制可能与心肌细胞对容量超负荷的机械刺激信号产生应答反应,引起心肌细胞跨膜转导信号改变有关,其中血管紧张素Ⅱ具有特别重要的作用.在容量超负荷下血管紧张素Ⅱ的升高是否存在其他不依赖肾素的途径尚需要进一步的研究.     

苯污染对大鼠肝肾功能及血核苷酸水平的影响

目的 探索苯对Wistar大鼠肝肾功能及血核苷酸水平的影响。方法 给予Wistar大鼠不同浓度苯21 d，用全自动生化仪检测血液不同成分的水平，用酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测血液中环磷酸腺苷（cAMP）、环磷酸鸟苷（cGMP）和热休克蛋白-70（HSP-70）的水平。结果 给予Wistar大鼠不同苯剂量0.19、0.38、0.76 g/（kg·bw），连续21 d，动物血浆中总胆红素水平比对照组升高了134.40%、173.63%、254.75%，谷草转氨酶升高了70.76%、85.44%、106.61%，肌酐升高了24.54%、67.46%、84.50%，肌酸激酶升高了151.35%、180.85%、245.54%，尿素[0.38、0.76 g/（kg·bw）组]升高了0.48%、23.43%；丙氨酸转移酶水平超过了检测值上限，均为1185.60%；cAMP水平比对照组升高了41.84%、264.02%、314.23%，cGMP升高了31.29%、40.46%、272.14%，HSP-70升高了82.11%、187.37%、1484.21%；淀粉酶水平比对照组分别降低了62.03%、63.66%、64.45%。结论 苯污染使血液中cAMP和cGMP比值发生变化，引起新陈代谢的紊乱，导致肝肾功能损伤或病变。     

油酸肺损伤时肺泡内液体清除和肺泡II型细胞内cAMP、cGMP水平的变化

目的 观察油酸致大鼠急性呼吸窘迫综合症(ARDS)模型中肺泡Ⅱ型细胞cAMP、cGMP水平的变化及特布他林的作用.方法 随机将SD大鼠分为对照组、ARDS组、特布他林组.用放射免疫分析法测定肺泡Ⅱ型上皮细胞内cAMP、cGMP水平;应用重力法测定血管外肺水含量(EVLW).结果 ARDS组大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞内cAMP明显降低.cGMP水平升高,EVLW明显增多.给予特布他林治疗后,EVLW下降,肺泡Ⅱ型细胞内cAMP含量升高,cGMP变化不明显.结论 油酸致ARDS时,肺水清除能力下降.特布他林可通过提高肺泡Ⅱ型细胞内cAMP水平提高肺水清除能力.肺泡Ⅱ型细胞内cAMP、cGMP水平变化参与急性肺损伤的分子生物学发病机制.     

基于cAMP/PKA/CREB信号通路独参汤对衰老模型大鼠认知功能障碍的影响

目的:探讨独参汤(DST)对D-半乳糖(D-gal)诱导的衰老模型大鼠神经元损伤、脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)的活性、丙二醛(MDA)和环磷酸腺苷(cAMP)水平的影响以及对cAMP/蛋白激酶A(PKA)/cAMP反应元件结合蛋白(CREB)信号通路的激活,阐明DST对D-gal诱导衰老模型大鼠...     

容量超负荷心肌肥大大鼠血浆肾素、血管紧张素Ⅱ含量变化

目的建立容量超负荷大鼠模型,测量全心室重/体重(WVW/BW)、左心室重/体重比值(LVW/BW)和血浆血管紧张素Ⅱ水平、血浆肾素活性,观察容量超负荷条件下大鼠心肌肥大与血管紧张素Ⅱ、肾素之间的关系,探讨容量超负荷引起心肌肥大的机制.方法穿刺A-V联合壁造瘘制造大鼠容量超负荷模型.结果手术组(0.6±0.1)与正常对照组(0.4±0.1)及假手术组(0.4±0.1)比较,LVW/BW有显著性差异(P＜0.05);手术组(2.1±0.2)与正常对照组(1.8±0.2)及假手术组(2.0±0.2)比较,LVW/BW无显著性差异(P＞0.05).手术组(3 665.0±1 637.4)与正常对照组(1 900.0±1 300.0)及假手术组(1905.3±1302.4)比较,血管紧张素Ⅱ有显著性差异(P＜0.05).手术组(87.3±47.1)与正常对照组(170.0±70.0)及假手术组(172.1±76.3)比较,血浆肾素活性有显著性差异(P＜0.05).结论容量超负荷可引起大鼠心肌肥大,引起肥大的机制可能与心肌细胞对容量超负荷的机械刺激信号产生应答反应,引起心肌细胞跨膜转导信号改变有关,其中血管紧张素Ⅱ具有特别重要的作用.在容量超负荷下血管紧张素Ⅱ的升高是否存在其他不依赖肾素的途径尚需要进一步的研究.     

辛热药仙茅作用于药物代谢酶CYP3A的药性表达研究

目的在观察仙茅对虚寒大鼠神经内分泌功能改善基础上,探讨辛热药仙茅对虚寒状态动物肝脏药物代谢酶的影响及在辛热药性表达中的意义。方法将SD大鼠随机分为空白对照组,虚寒模型组,仙茅大、中、小剂量组。以氢化可的松(3.75 mg/kg)肌肉注射复制虚寒大鼠模型,辛热药仙茅以30、20、10 g/kg干预,红霉素-N脱甲基法检测动物肝脏代谢酶细胞色素P4503A(CYP3A)活性,放免法检测动物血浆环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)含量,Western blot法检测动物肝脏孕烷X受体(PXR)蛋白表达,免疫组化法检测动物肝脏蛋白激酶A(PKA)蛋白表达。结果虚寒大鼠肝脏药物代谢酶活性降低,PXR表达减少,cAMP、cGMP水平降低,PKA表达减少,仙茅各剂量组可提高CYP3A活性和cAMP含量,增强PXR、PKA表达,对cGMP影响不大。结论仙茅可能通过调节cAMP-PKA信号通路改善虚寒状态的代谢功能低下症状,从而表明辛热药的部分药性实质。     

慢性应激对大鼠海马神经元PKA和P-CREB蛋白表达的影响及抗抑郁剂的拮抗作用

目的：探讨慢性轻度不可预见应激对大鼠海马神经元内环磷酸腺苷依赖性蛋白激酶A（cAMP—dependent protein kinaseA，PKA）和磷酸化的环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（phosphorylated cAMP-responsive element binding protein，P—CREB）表达的影响以及抗抑郁剂（氟西汀）的拮抗作用。方法：将36只SD雄性大鼠随机均分为正常组、慢性应激模型组、氟西汀治疗组。选用慢性轻度不可预见性应激加孤养造模，应用免疫组织化学以及蛋白质印迹技术研究各组大鼠脑内PKA、磷酸化的CREB（P-CREB）在海马区域的分布以及表达量的差异。结果：免疫组织化学和蛋白免疫印迹结果显示模型组大鼠海马细胞内的PKA和P-CREB蛋白表达量明显低于正常组（P〈0．05）；氟西汀组大鼠海马细胞内PKA和P-CREB蛋白表达量明显高于模型组（P〈0．05）。结论：慢性轻度不可预见性应激可使大鼠海马神经元内的PKA和P—CREB蛋白表达水平下降，氟西汀具有一定的拮抗作用。     

益气活血方药对实验性心肌肥厚大鼠心功能的影响

心肌肥厚常由容量负荷或压力负荷增加引起，与心血管疾病预后不良有关，作为独立的危险因素，越来越受到人们的重视。研究表明连续用受体激动剂异丙肾上腺素（isoproterenol，ISO）刺激大鼠可引起心肌肥厚和纤维化。益气活血方药在临床治疗充血性心力衰竭（CHF）的应用中有良好的疗效，近年临床和实验研究证实有改善慢性充血性心力衰竭患者左心功能的作用，我们着重研究长期应用益气活血方药对ISO致大鼠心肌肥厚模型的心脏结构及功能和血管紧张素Ⅱ水平有何影响，以期进一步探索益气活血中药改善慢性充血性心力衰竭的可能机制。     

阿魏酸钠对弥漫性脑外伤大鼠血浆cGMP含量与听力变化的影响

目的 探讨阿魏酸钠对弥漫性脑外伤大鼠血浆中环磷酸鸟苷含量及听力变化的影响。方法 SD大鼠随机分为正常组,生理盐水组,脑外伤组（伤后24h、72h、168h）及阿魏酸钠治疗组（24h、72h、168h）。在相应时间点上测试大鼠听性脑干反应及血浆环磷酸鸟苷的含量。结果 脑外伤组血浆cGMP含量明显升高,与正常组、生理盐水对照组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;阿魏酸钠治疗组cGMP含量较脑外伤组下降,差异有统计学意义（P〈0.05）;脑外伤后各组ABR阈值及各波潜伏期与正常对照组比较差异有统计学意义（P〈0.01）;脑外伤后各组血cGMP含量与听力变化正相关,阿魏酸钠可影响脑外伤后各组大鼠ABR阈值及各波潜伏期,与血浆cGMP含量仍呈正相关。结论 DBI后大鼠血浆cGMP含量变化与听力损害可能有关,阿魏酸钠对DBI大鼠听力损害有一定保护作用。     

阿霉素肾病大鼠肾环磷酸腺苷减少的机制

目的确定阿霉素肾病大鼠肾内髓组织环磷酸腺苷(cAMP)减少的原因,以及血管升压素的刺激反应.方法应用放射免疫分析法,测定大鼠肾髓质组织中腺苷酸环化酶(AC)、环磷酸腺苷-磷酸二酯酶(cAMPPDE)活性.结果在经过血管升压素处理后,正常对照组、血管升压素组、血管升压素拮抗组、阿霉素组、阿霉素+血管升压素组和阿霉素+血管升压素拮抗剂组的肾髓质AC活性(pmol·mg-1·min-1)分别为237±109、329±36、231±10、251±64、249±26、252±38(F=0.659,P=0.463),cAMP-PDE活性的转换率(%)分别为0.19±0.09、0.18±0.07、0.20±0.11、0.34±0.08、0.35±0.05、0.32±0.03(F=11.209,P=0.0290).结论阿霉素肾病大鼠肾髓质AC的活性不再因血管升压素的刺激而增加,但却由于cAMP-PDC活性的增加而使得cAMP降解加速,导致本模型鼠肾组织cAMP含量的下降及水潴留.     

严重烫伤大鼠肝细胞跨膜信号传导的研究

本文研究３０％体表皮肤全层烫伤大鼠的肝细胞膜胰岛素受体结合性质变化和对肝细胞膜腺苷酸环化酶活性调节，探讨跨膜信号传导在烫伤后胰岛素抵抗中的作用。结果证明烫伤后肝细胞膜胰岛素受体结合容量降低，胰岛素对腺苷酸环化酶抑制的敏感性下降。提示烫伤后肝膜信号传递障碍可能影响糖代谢异常和引起胰岛素抵抗。