一种用滤过膜制备积液细胞标本的方法

临床胸腹水的细胞学检测 ,通常将标本离心 ,取沉淀物直接涂片。此方法细胞背景重 ,特别是血性积液涂片 ,因有大量红细胞而使目标细胞相对减少。此类片子行ＨＥ染色 ,因涂片厚而易脱落 ,行免疫组化染色则易出现非特异性着色。我们用细胞采集器中的滤过膜 ,制成了高质量的细胞悬液涂片 ,细胞背景几乎无色 ,现介绍如下。1　材料和方法临床送检的胸腹水 5～ 10ｍｌ不等 ,滤过膜为细胞采集器的孔径 8μｍ的滤过膜和普通滤纸。操作 :(1)胸腹水常规离心涂片 (10 0 0～ 15 0 0ｒ/ｍｉｎ) 5～ 10ｍｉｎ ,将上清液倒另一容器 ,留取沉淀物及液体约 0 5…     

十六烷基三甲基溴化铵在细胞学血性胸腹水标本制片中的应用

在细胞学标本制片过程中,经常遇到含血的胸腹水,由于标本中含有大量红细胞,使涂片被红细胞覆盖,给细胞学诊断带来困难,特别是含血细胞较多而癌细胞又很少时,红细胞会将很少的癌细胞掩盖,致使细胞学诊断造成漏诊.为此,我们经反复实验,采用十六烷基三甲基溴化铵对血性标本进行溶血,使肿瘤细胞显示更加清晰,消除了背景模糊的现象,从而提高了血性标本中癌细胞的检出率,对肿瘤的细胞学诊断具有较高的使用价值.     

胸腹水细胞沉渣包埋技术及应用

胸腹水细胞学查检常规方法是胸腹水离心涂片后HE染色、镜检。该方法存在缺点：首先涂片中的细胞为散在单个或少数成团细胞，在光镜下有时很难鉴别增生间皮细胞、组织细胞、肿瘤细胞；其次不能像石蜡包埋细胞块，该方法克服了以上缺点，有利于提高胸腹水细胞学诊断的准确率。     

人体体液脱落细胞冷冻切片的可行性分析与临床应用

体液细胞学检查是基层医院病理科的常规工作之一,多数病理医师采用离心后取沉淀物直接涂片染色观察细胞的形态。由于直接法观察细胞数量有限,且体液中脱落的微小组织涂片时染色不佳,影响阳性检出率。常规细胞石蜡切片将体液沉淀物制成切片后观察微小组织,耗时长(至少48 h )。为提高阳性检出率并能在短时间内得出结果,本文对人体体液细胞快速冷冻切片进行探讨和临床应用,现介绍如下。     

血性胸腹水涂片制作技术的探讨

在胸腹水细胞涂片制作中,尤其是血性胸腹水涂片作ＨＥ染色后,镜下可见较多的红细胞,背景深染成红色,给查找癌细胞造成一定的困难。一些作者用低渗液或其它化学试剂加入胸腹水中,以达到消除红细胞的目的,这些方法虽然去除了红细胞,背景染色清晰,但却使其它细胞形态有所改变,尤其是癌细胞的结构不够清晰,给诊断造成困难。为探讨一种较理想的血性胸腹水涂片制作方法,我们做了以下实验。１　材料与方法收到送检的血性胸腹水后立即分别作如下处理：①离心后加生理盐水洗;②加入等量的１０％福尔马林;③加入等量的５０％乙醇;④不加…     

液基细胞学在非妇科领域的应用分析

新柏氏液基薄层制片技术(TCT)在妇科细胞学检查方面已得到广泛应用和认可,其相对于传统涂片的优越性也很明显;但液基细胞学在非妇科领域的应用仍存有争议,尚处在探索阶段.我们对本院1 100例胸腹水、气管刷片的TCT制片进行了细胞形态学观察,并从中取部分与传统涂片对照,探讨TCT制片的优缺点及应用前景.     

液基细胞学结合端粒酶活性检测诊断胸腹水良恶性细胞的应用

目的:探讨液基细胞学结合端粒酶活性检测诊断浆膜腔积液良恶性细胞的应用价值。方法:收集201例(临床病理证实为97例恶性,104例良性)胸腹水标本,每例标本采用液基细胞技术制成薄层细胞片,做HE染色,用于细胞学检查;同时采用PCR-TRAP技术检测端粒酶活性。结果:细胞学检查对恶性胸腹水诊断的敏感度为81.4%(79/97),特异性为90.4%(94/104),端粒酶活性检测方法对恶性胸腹水诊断的敏感度为92.8(90/97),特异性为98.1%(102/104),将两种方法相结合,在恶性腹水中二者同时为阳性为74.2%(72/97),而在良性胸腹水中同时为阳性为0.0%(0/104),将两种方法相结合对恶性胸腹水的诊断敏感性为99.0%(96/97),特异度为100.0%(104/104)。结论:液基细胞学结合端粒酶活性检测分析用于胸腹水良性与恶性细胞的鉴别诊断较细胞学方法敏感,避免漏诊。     

TCT技术在胸腹水恶性肿瘤诊断中应用

胸腹水细胞学检查是临床病理检查的常用方法,也是诊断疾病的重要手段,根据细胞形态推测原发灶,为临床治疗提供可靠的诊断依据。近年来,膜式超薄液基细胞学检测技术(thinprep cytologic test,TCT)已广泛用于胸腹水细胞涂片。TCT技术在细胞标本的采集、制片和诊断技术方面都有很大进步,使胸腹水恶性肿瘤的确诊率明显提高。     

TCT联合细胞DNA定量分析在桂西壮族妇女宫颈病变诊断中的应用

目的探讨宫颈液基薄层细胞学检查(TCT)联合DNA定量分析在桂西壮族妇女宫颈病变筛查中的价值。方法选取同时行TCT、细胞DNA定量分析和活组织病理学检查的430例资料进行分析。宫颈脱落细胞液基薄层制片,1张巴氏染色做TCT诊断,1张Feulgen染色,应用全自动细胞图像分析系统扫描诊断。结果以活检结果作为诊断的金标准,TCT、DNA定量分析和联合检测的检出率分别为64.2%、90.6%和96.2%。联合检测与单独DNA定量分析检出率比较,差异不显著(P>0.05),联合检测与单独TCT的检出率比较,TCT与DNA定量分析的检出率比较,差异均显著(P<0.01)。结论 DNA定量分析检出率高于TCT,二者联合应用并不能有效地提高宫颈病变的检出率。     

二氧化硅吸附——PCR检测结核杆菌的研究

利用二氧化硅能够特异性吸附核酸的特性,以二氧化硅与裂解液一步法提取结核杆菌核酸模板,代替常规裂解、抽提等复杂步骤,尔后进行PCR扩增。该法适于脑脊液,胸腹水、血浆等多种临床标本检测。 取脑脊液、胸腹水或血浆标本1.5ml离心后的沉淀物,加入一氧化硅悬液、裂解液(含SDS、NaCl、NaOH)、TEB,总反应体积130μl。置100℃水浴30分钟,其间充分振摇2次,然后离心取沉淀物(吸附有核酸的二氧化硅颗粒)刚70％乙醇洗涤、烤干。加入双蒸水     

利普液基细胞学联合肿瘤标记物检测在恶性胸腹水诊断中应用

1 材料与方法 1.1 材料收集绍兴市人民医院2006年1月～2007年12月间有完整住院病史资料的恶性胸腹水标本(腺癌)20例和良性胸腹水标本40例,所有胸腹水标本采样后立即放入利普专用保存瓶内,混匀后离心,沉淀物加入细胞基液,再次混匀后制成利普液基细胞学(LPT)涂片作细胞免疫组化检测,诊断由手术或活检病理组织学证实.其中胸水42例,腹水18例.胸水腺癌12例,腹水腺癌8例.腺癌组包括肺癌8例、卵巢癌5例、胰腺癌1例、胆囊癌2例和胃癌4例;良性组包括肺炎7例、结核19例、肝硬化9例、肾病综合征5例.     

一种沉降式液基系统制片中加热而不影响细胞形态的方法

正液基细胞制片技术(liquid-based cytology technology,LBC)指细胞学标本收集至细胞保存液内,经过处理减少标本中影响诊断的成分(黏液、血液、炎性渗出物等)后制成薄层细胞片,染色,由细胞病理学医师通过对分布于较小区域内细胞的识别最后作出细胞学诊断。因其操作简单,制片背景干净,细胞均匀平铺,染色质量稳定,阅片强度降低等优势被广泛应用于子宫颈细胞学及胸腹水、痰、尿、肺泡灌洗液等非妇科细胞学领域~([1-4])。     

单克隆抗体免疫细胞化学法在胸腹水肿瘤细胞学检查中意义

用本室制备的对胃癌、结肠癌和肺癌选择较强的单克隆抗体MG7、MG9、MC3及MC5对321例次胸腹水的脱落细胞进行免疫细胞化学检杳。结果表明,用本法检查胸腹水中相应肿瘤细胞,反应灵敏、阳性率高、特异性强、结果可靠。若结合常规病理细胞学检查,对于不典型癌细与异型间皮细胞的鉴别,提高了胸腹水相应癌细胞的阳性检出率,以及推测胸腹水癌细胞的器官来源有较大的价值.尤其适用于解决临床疑难病例的诊断。     

薄片技术在体腔积液诊断中的应用

体腔积液是许多癌症患者的常见并发症 ,积液的细胞学检查有助于良恶性的诊断。多年来应用的传统制片方法存在着一些不利因素 ,如背景不清晰、常有大量红细胞、炎性渗出物及黏液 ;细胞涂片厚、面积过大、敏感性低等。细胞学工作者一直在探讨新的制片技术。薄层细胞检测 (ｔｈｉｎ ｌａｙｅｒｃｙｔｏｌｏｇｙｔｅｓｔ,ＴＣＴ)是 2 0世纪 90年代发展起来的一项制片新技术 ,最初用于妇科宫颈细胞学和传统涂片 (ＣＰ)诊断 ,不仅具有高度一致性 ,而且提高了上皮内病变的检出率[1 4] 。但这项技术在非妇科方面的应用 (包括针吸 )还处于探讨阶段[5 …     

Ki-67在良恶性胸腹水鉴别中的临床价值分析

目的 应用免疫组织化学染色方法,分析增殖细胞核抗原Ki-67在良恶性胸腹水中的表达情况,探讨其临床应用价值.方法 选取56例良恶性胸腹腔积液标本,使用液基薄层制片技术制作细胞学涂片进行常规细胞形态学检查,以及使用细胞石蜡块技术制作组织切片,对石蜡块切片进行免疫组织化学染色检查.结果 以标记指数＞10％为阳性判定标准,本实验中Ki-67在恶性胸腹水中的阳性表达率为83.3％,良性胸腹水中阳性表达率为35％,两者相比差异有统计学意义(P＜0.01).结果 Ki-67免疫组织化学染色作为常规细胞学检查的必要补充,有重要的临床应用价值.     

UF-100尿沉渣分析仪提示红细胞信息的结果分析

目的探讨UF-100尿沉渣分析仪提示红细胞信息的临床意义。方法用UF-100尿沉渣分析仪、DIRUIH-300干化学分析仪、离心沉渣镜检3种方法对880例新鲜尿红细胞进行检测,统计红细胞荧光参数并比较。结果UF-100尿沉渣分析仪红细胞检出率为56.36%,红细胞信息(RBC-Info)提示率为53.02%,其中正常红细胞(Normocytic)比率占28.52%,与离心沉渣镜检符合率为100%;小红细胞(Microcytic)比率占16.35%,与离心沉渣镜检符合率为97.67%;混合红细胞(Non-classifide)比率占55.13%,与离心沉渣镜检符合率为46.21%。结论UF-100尿沉渣分析仪、干化学分析、离心沉渣镜检联合检测是鉴别血尿来源的可靠方法,UF-100红细胞信息提示易受干扰,不能完全替代镜检。     

低氧-复氧对人鼻咽癌细胞增殖、细胞周期、黏附和侵袭能力的影响

目的: 研究细胞外微环境低氧-复氧对人鼻咽癌细胞(CNE-2Z)增殖、细胞周期、黏附和侵袭能力的影响。方法: 以混合气体(5% CO₂, 95% N₂, O₂<0.1%)置换法建立体外低氧培养模型;MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期分布;同质黏附实验和细胞-基质黏附实验检测细胞黏附能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果: (1) 低氧24 h后抑制CNE-2Z细胞增殖(P<0.01),复氧后细胞快速增殖,在复氧第5 d A值与常氧对照组相比无显著差异(P>0.05);(2) 低氧24 h后细胞阻滞于G₁期(P<0.01),复氧后G₁期阻滞得到快速解除,在复氧24 h细胞周期分布与常氧对照组相比无显著差异(P>0.05);(3)低氧24 h后细胞的同质黏附能力下降(P<0.01)而细胞-基质黏附能力无明显改变(P>0.05),细胞侵袭能力降低(P<0.01);复氧24 h细胞同质黏附能力恢复至常氧对照组水平(P>0.05),而细胞-基质黏附能力(P<0.01)和细胞侵袭能力较常氧对照组显著增加(P<0.01)。结论: 鼻咽癌细胞能耐受微环境低氧的不利影响;低氧环境下存活的鼻咽癌细胞产生的适应性变化赋予肿瘤更强的增殖和转移潜能,从而促进肿瘤细胞的恶性演进。     

血性体液标本涂片制作方法探讨

在临床病理细胞学诊断工作中,临床送检的血性体液标本(如血性胸水、腹水、血尿等)涂片作HE染色后,镜下可见较多的红细胞,背景深染成红色,影响结果的观察,如何既去除红细胞,又保持其它细胞形态的完整性,以利于HE或免疫组化标记后的鉴别诊断,很有必要.本文对3种不同处理的血性体液标本进行了比较,现报道如下.     

免疫组化标志物在鉴别浆膜腔积液恶性肿瘤细胞中的应用价值

目的探讨免疫组化标志物鉴别浆膜腔积液中恶性肿瘤来源及分类的临床价值。方法细胞学筛选恶性浆膜腔积液105例,分别采用常规细胞学涂片、薄层液基细胞技术制片、薄层液基细胞技术制片+常规细胞学涂片以及细胞蜡块切片结合免疫组化检测分析。结果对105例浆膜腔积液恶性肿瘤细胞来源及类型进行鉴别:胸水60例中腺癌58例,分别来源:肺42例、乳腺10例、卵巢4例及胃肠道2例;鳞癌1例;恶性间皮瘤1例。心包积液9例,均为腺癌,分别来源:肺6例,乳腺3例。腹水36例,其中腺癌35例,22例来源于卵巢,胃肠道12例,肺来源1例,弥漫大B细胞淋巴瘤1例。薄层液基细胞技术制片、薄层液基细胞技术制片+常规细胞学涂片以及细胞蜡块切片联合免疫组化检出率明显优于常规细胞学涂片(P0.05)。细胞蜡块切片联合免疫组化检测能准确鉴别浆膜腔积液中恶性肿瘤的来源及分类。结论常规细胞学涂片、薄层液基细胞技术制片、薄层液基细胞技术制片+常规细胞学涂片以及细胞蜡块切片结合免疫组化检测分析,在疑难恶性浆膜腔积液鉴别诊断及分类中具有重要的价值,值得临床推广应用。     

液基细胞学检测联合DNA倍体分析在良恶性胸腹水鉴别诊断中的应用

目的探讨液基细胞学检测联合DNA倍体分析在良恶性胸腹水鉴别诊断中的应用价值。方法收集2011年8月~2012年10月昆明医科大学第一附属医院病理科存档的胸腹水标本258例,其中胸水206例,腹水52例。对所有标本同时行液基细胞学检查和采用全自动细胞图像分析系统(DNAICM)进行DNA倍体分析,比较液基细胞学、DNA倍体分析和两种方法联合检测的结果。结果在258例胸腹水标本中,液基细胞学检测结果:可疑24例,确诊58例,阴性176例,阳性率为31.8%;DNA倍体分析结果:可疑9例,确诊84例,阴性165例,阳性率为36.1%;液基细胞学联合DNA倍体分析发现可疑12例,确诊93例,阴性153例,阳性率为40.1%,与单独使用液基细胞学检查和DNA倍体分析结果相比,差异有统计学意义(P0.05)。结论液基细胞学制作的细胞片适于进行DNA倍体分析,联合液基细胞学检查和DNA倍体分析可明显提高恶性胸腹水的诊断阳性率。