一例胎盘造血干细胞联合脐带血干细胞移植患儿的护理

正脐带血是胎儿娩出、脐带结扎并离断后残留在胎盘和脐带中的血液,胎盘和脐带血作为出生婴儿的附属物,大多数会在出生后被丢弃。脐带血中含有可以重建人体造血和免疫系统的造血干细胞、祖细胞,可用于造血干细胞移植,治疗多种疾病。自20世纪80年代以后,随着脐带血和胎盘来源的细胞和蛋白成分成功应用于临床疾病的治疗,胎盘和脐血的应用价值也逐渐为人们所认知[1]。脐带血作为造血干细胞的重要来源,特别是无血缘关系造血干细胞移植的来     

脂肪干细胞的研究进展

用于细胞作为种子细胞进行组织工程构建,已成为再生医学研究领域的热点。目前应用的干细胞来源有：骨髓问质干细胞、脐带血间充质干细胞、外周血干细胞和脂肪干细胞等。     

脐带血造血干细胞的生物学特性及其基因治疗的临床应用

脐带血是造血干细胞的良好来源,并已广泛应用于移植。本文综述近年来脐带血造血千细胞的生物学特性及其临床应用方面的进展情况。     

脐带血干细胞:组织工程人工心脏研究种子细胞的新来源

背景:脐带血干细胞富含多种干/祖细胞,其各种干/祖细胞移植治疗和作为种子细胞在组织工程领域的研究成为当前的热点.目的:综述脐带血干细胞中存在的多种干/祖细胞的生物学特性及在心脏疾病的实验应用和脐带血干细胞在心脏疾病的实验应用.方法:应用计算机检索1999-01/2009-10中国数字图书馆、维普期刊数据库相关文章,检索词为"脐带血干细胞,造血干/祖细胞,间充质干细胞,内皮祖细胞,内皮细胞,心肌细胞,组织工程,种子细胞",并限定文章语言种类为中文.同时计算机检索1999-01/2009-10 PubMed 数据库相关文章,检索词为"umbilical cord blood stem cells,hematopoietic progenitor cells/hematopoietic stem cells,mesenchymal stem cells,endothelial progenitor cells,endothelial cells,myocardial cells,tissue engineering,seeded cells",并限定文章语言种类为English.同时手工检索<干细胞生物学>专著,共检索到文献95篇.根据纳入标准最终纳入文献30篇.结果与结论:脐带血干细胞是一种成体多能干细胞,富含造血干/祖细胞、间充质干细胞、内皮祖细胞、非限制性体干细胞等.相对于骨髓干细胞和外周血干细胞,脐带血干细胞来源丰富,获得更为容易,更为原始,分化增殖能力更强,排斥反应小,在体外可以分化为血管内皮细胞、心肌细胞等多种细胞.基于脐带血干细胞独特的生物特性、资源优势及在冠心病和缺血性心肌病的治疗上取得了一定的成果,为构建组织工程人工心脏的种子细胞来源提供可能,在心脏再生和组织工程人工心脏方面的应用展示了广阔的前景.     

人脐带血和骨髓来源间充质干细胞的体外分离、培养、分化及生物学特性比较

背景:间充质干细胞由于具有自我更新能力且在适宜微环境下具有多向分化潜能,近年来已成为细胞领域的研究热点.目的:对比观察脐带血与骨髓来源的间充质干细胞其体外分离、纯化及培养条件,并对其进行生物学特性比较.设计:体外细胞学对比观察.材料:新鲜脐带血在征得产妇同意后采集.骨髓由健康的成年志愿者捐赠.方法:取脐带血和成人骨髓分离、培养并纯化间充质干细胞,对获得的间充质干细胞进行形态学观察.主要观察指标:两种来源间充质干细胞的形态和生长特性;流式细胞仪检测脐带血间充质干细胞表面抗原的表达情况;对脐带血间充质干细胞多向分化的能力进行鉴定.结果:两种来源的单个核细胞经体外培养贴壁后均出现间充质样细胞,原代骨髓间充质干细胞的贴壁时间和培养时间均短于脐带血间充质干细胞,两种细胞传代生长呈共同特性:传代培养潜伏期为24～36h,传代培养对数增殖期为接种后3～7d,接种后八九天,生长进入平台期:脐带血来源的间充质干细胞表达相关抗原CD29、CD44、CD105;但不表达造血细胞抗原CD34、CD45:脐带血间充质干细胞可诱导分化为脂肪细胞、成骨细胞.结论:人脐带血和骨髓来源间充质干细胞均可在体外分离培养、扩增:脐带血的间充质干细胞原代贴肇时间、形成细胞克隆的时间、集落交错融合的时间均较骨髓间充质干细胞晚,传代培养的细胞形态,生长速度均无明显差异;两种来源的间充质干细胞具有相同的表面标志物;脐带血间充质干细胞有多项分化潜能,可诱导为脂肪细胞、成骨细胞.     

脐带血造血干细胞研究与应用展望

自 1 98 8年Gluckman报道用人白细胞抗原 (HLA)匹配同胞脐带血移植治疗范可尼 (Fanconi)贫血获得成功以来 ,脐带血作为一种重要的造血干细胞来源日益受到重视 ,并在脐带血干细胞生物学、脐带血干细胞库和脐带血干细胞移植临床应用方面取得了长足的进展。一、脐带血干细胞生物学研究实验研究和临床移植已证实 ,脐带血造血干细胞比骨髓和动员的外周血来源的造血干细胞更原始、更具有自我更新、增殖分化和体外扩增潜能 ;脐带血中的淋巴细胞未接受外界抗原刺激 ,其免疫原性较弱。脐带血干细胞的高增殖和体外扩增潜能 ,为通过体外扩增来解决单…     

脐带血造血干细胞的生物学特性及其基因治疗的临床应用

脐带血是造血干细胞的良好来源，并已广泛应用于移植。本文综述近年来脐带血造血干细胞的生物学特性及其临床应用方面的进展情况。     

脐血干细胞的实验与临床应用

大量实验已证实脐带血造血干细胞比骨髓和动员的外周血来源的造血干细胞更原始、更具有自我更新、增殖分化和体外扩增潜能.脐带血干细胞的保存及脐带血移植等临床应用均取得了显著的进展,但也面临许多问题.文章对脐带血中存在的多种干,祖细胞的生物学特性、干细胞的增殖、分化,脐带血库建设及在神经科的临床应用进行探讨,从而寻找解决造血重建迟缓和排斥率高等问题的有效途径.     

骨髓与脐带血间充质干细胞的生物学特性比较

目的:为寻找最佳的间充质干细胞来源,比较脐带血来源间充质干细胞与骨髓来源间充质干细胞在生长、细胞表型及多项分化功能方面的差别.方法:实验于2006-06/2007-03在南昌大学医学院第二附属医院分子实验室、江西省医学分子重点实验室,省级重点实验室完成.[1]实验材料:脐带血30份及正常骨髓30份均取自正常自愿捐献者,实验经医院伦理委员会批准.[2]实验方法:无菌条件下采集脐血及骨髓,分离单个核细胞.将脐血及骨髓单个核细胞以1×109L-1接种于培养瓶中,加入含体积分数0.20自体血清,1mmol/L氢化可的松的IMDM培养液,7d后换液,去除悬浮细胞,以后每三四天换液1次,待细胞90%融合后,经胰蛋白酶 乙二胺四乙酸混合消化,传代培养,取第3代细胞,采用流式细胞术鉴定脐带血来源间充质干细胞表面分子,并比较两种不同来源间充质干细胞的生长特点及向脂肪细胞分化能力的差别.结果:[1]骨髓来源间充质干细胞在较早阶段形态即成长梭形,第3代后与脐带血来源间充质干细胞形态无明显差别.[2]培养至第3代的间充质干细胞表面分子检测与脐血单个核细胞比较结果显示,CD166、CD29、CD54表达增高,CD13、CD34、CD45表达降低.[3]脐带血来源间充质干细胞培养的成功率低于骨髓来源间充质干细胞,在较早阶段脐带血来源间充质干细胞增殖快于骨髓来源间充质干细胞,但后期培养过程中脐带血来源问充质干细胞增殖慢于骨髓来源间充质干细胞,两种来源间充质干细胞均能分化为脂肪细胞,且分化能力无明显差别.结论:脐血来源间充质干细胞作为一种新来源的间充质干细胞在生长速度、培养成功率上虽然低于骨髓来源间充质干细胞,但在细胞表型及分化功能方面无明显差别.     

对脐带血临床采集问题分析

干细胞是一种未分化的细胞，具有自我更新、分化、发育再生各种组织器官和人体的潜在功能。1989年，法国的鲁克罗曼教授用HLA相合的同胞脐带血干细胞进行移植，成功地治疗了1例遗传性疾病一范可尼贫血症，之后短短的15年的时间内，医学界利用脐带血干细胞已成功治愈和改善了多种疾病，包括血液系统疾病、免疫系统疾病、神经和血管系统疾病、脑部疾病、肿瘤、糖尿病等。目前在儿童的干细胞移植方面，由于可以存在1个～2个HLA位点的不配型，免疫排斥反应小等原因，脐带血干细胞已成为治疗一些重大疾病的有效手段。     

脐带血干细胞的基础与临床应用进展

脐带血含有丰富的造血干细胞，已经成为替代骨髓移植治疗多种疾病的良好资源，但尚存多种不足与难题。国内外大量研究证实，脐带血干细胞具有肯定的支持造血功能，在体外培养条件下可以扩增，并且在一定的诱导作用下可分化为骨、软骨、肝、内皮等多种组织细胞。脐带血干细胞具有低免疫原性等很多优点，已成为干细胞研究领域的热点。目前分离培养脐带血干细胞的方法多样，日趋成熟，临床应用脐带血干细胞移植治疗的疾病已达80余种，但仍存在许多弊端，尚需进一步的研究。     

来源于骨髓、外周血与脐带血的间充质干细胞生物学特性比较

背景:间充质干细胞存在于人体多种组织,目前研究报道所用细胞来源单一,培养方法差异大,得出的结果不一致,不能证明分离、培养出的细胞是相同的细胞,难以比较.目的:课题提出在体外培养条件下可对同一个体来源的骨髓、外周血来源间充质干细胞及不同个体脐带血来源间充质干细胞的生物学特性进行比较的理论假设.设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2007-06/2008-12在解放军海军总医院血液科完成.材料:解放军海军总医院血液科造血干细胞移植供者10例,取同一供者的骨髓、外周血细胞,细胞体积分别为20 mL与2 mL.解放军海军总医院产科10例健康仞产妇脐带血细胞,细胞体积为30 mL.方法:采用Percoll密度梯度+贴壁法分离骨髓、外周血、脐带血来源的间充质干细胞,加入含体积分数为10%胎牛血清的DMEM/F12培养基.当细胞生长汇合至80%～90%时胰蛋白酶-EOTA消化,制成5×10~8 L-1细胞悬液,计为P_0.重复上述操作,即为P_1,依此类推P_2～P_5.主要观察指标:细胞生长形态观察,细胞瑞氏-吉姆萨染色结果,细胞化学染色结果,细胞增殖数量,流式细胞仪检测细胞表面标记.结果:①骨髓间充质干细胞贴壁时间、汇合至50%时间、汇合至80%时间均早于外周血、脐带血间充质干细胞:骨髓间充质干细胞培养5～7 d时呈漩涡状生长,而外周血、脐带血间充质干细胞无此生长特性.②初始培养和传代培养后,骨髓间充质干细胞多为成纤维样细胞,仅有少量内皮样细胞;而传至第5代的外周血、脐带血间充质干细胞除有成纤维样细胞外,还有较多的内皮样细胞和单核-巨噬样细胞.③P1～P5骨髓、外周血及脐带血来源间充质干细胞PAS染色、碱性磷酸酶染色、苏丹黑B染色均里阴性.④与P_0细胞比较,传代培养至P_5后骨髓间充质干细胞增殖数量明显多于外周血、脐带血间充质干细胞(P＜0.05).⑤CD29,CD44,CD90,CD71,CD105,CD166和HLA-ABC阳性率,骨髓间充质干细胞接种后≤6%,P_0～P_5为55.9%～92.8%;外周血间充质干细胞接种后≤10%,P_0～P_5为19.7%～33.4%;脐带血间充质干细胞接种后≤20%,P_0～P_5为35.4%～93.2%.CD34,CD45和HLA-DR阳性率,3种来源的间充质干细胞均极低.CD14,CD31阳性率,骨髓间充质干细胞极低,外周血间充质干细胞为12.1%～28.3%,脐带血间充质干细胞为8.1%～21.3%.结论:结果显示在体外培养条件下,骨髓、外周血和脐带血均能较好地形成间充质干细胞,以骨髓来源的间充质干细胞含量最高,成分单一,而脐带血和外周血含量次之,细胞成分多.     

对脐带血临床采集问题分析

干细胞是一种未分化的细胞,具有自我更新、分化、发育再生各种组织器官和人体的潜在功能.1989年,法国的鲁克罗曼教授用HLA相合的同胞脐带血干细胞进行移植,成功地治疗了1例遗传性疾病-范可尼贫血症,之后短短的15年的时间内,医学界利用脐带血干细胞已成功治愈和改善了多种疾病,包括血液系统疾病、免疫系统疾病、神经和血管系统疾病、脑部疾病、肿瘤、糖尿病等.     

脐带血造血干细胞移植的现状与进展

脐带血造血干细胞代替骨髓移植已成为当今国内外血液学研究的热点。 2 0世纪 70年代初人们就发现脐带血含有大量的造血干细胞 ,脐带血同骨髓一样 ;2 0世纪 80年代末用脐带血代替骨髓移植取得了成功 ;2 0世纪 90年代我国无血缘关系用多个脐带血混合移植治疗小儿晚期恶性肿瘤取得了临床应用 [1 ]。由于细胞刺激因子和各种克隆刺激因子的联合应用 ,对脐带血组细胞进行培养 ,提示脐血中的造血干细胞与骨髓者可相 ,证明带血比成人骨髓细胞有更大的分化能力和更长的生存能力 [2 ] 。因此 ,脐带血造血干细胞移植在临床上越来越广泛应用 ,并且也取得…     

脐带血造血干细胞库管理办法（试行）

第一章 总则 第一条 为合理利用我国脐带血造血干细胞资源,促进脐带血造血于细胞移植高新技术的发展,确保脐带血造血干细胞应用的安全性和有效性,特制定本管理办法。 第二条 脐带血造血干细胞库是指以人体造血于细胞移植为目的,具有采集、处理、保存和提供     

促进脐血造血干细胞应用于成人移植的研究进展

脐血造血干细胞移植(UCBT)因来源丰富、HLA相合程度要求低、移植物抗宿主病(GVHD)发生率及严重程度低等优点,已成为重要的造血干细胞来源,但由于单份脐带血(UCB)细胞有限,应用于成人移植还有一定的局限性.为促进脐血造血干细胞应用于成人移植需从通过改良收集和冷冻复苏、体外扩增、双份UCB移植的方法,从而增加UCB造血干细胞数,弥补干细胞自身缺陷,添加辅助细胞提高干细胞植入效率.     

53份脐带血干细胞制备的初探

目的制备符合临床治疗需求的干细胞制剂,观察脐带血量与提取的细胞数之间的关系。方法本院产科足月妊娠剖腹产分娩的53例婴儿胎儿娩出并断脐后,在清洁状态下迅速采集脐带血于采血袋中,用负收集法分离提取脐带血干细胞。用Sysmex-2100全血细胞分析仪计数提取干细胞悬液的单个核细胞总数。结果采集的净脐带血量为88.9±15.4(70~180)ml,提取干细胞后的单个核细胞计数为3.8±1.73×109[(2.0~6.7)×10~9],运用散点图相关分析,两者相关系数r为0.82。结论提取的单个核细胞含量随脐带血量增加而升高,二者之间呈正相关(r=0.82)。在日常操作中如果能获得较多的脐带血应该就能收集到更多的用于移植的细胞,应用这新的造血干细胞来源,用于任何一个需要移植的病人。     

人脐血干细胞定向分化为神经细胞的诱导方法

目的:分析人脐血干细胞在体外和体内向神经细胞分化的不同诱导条件。资料来源:应用计算机检索Medline数据库1990-01/2005-10相关脐带血干细胞向神经细胞分化文章,检索词为“umbilicalcordblood,mesenchymalstemcells,neuraldifferentiation”,分别组合进行检索,限定文章语言种类为English,同时计算机检索中文期刊数据库2000-01/2005-10相关脐带血间充质干细胞向神经分化文章,检索词为:“脐带血,间充质干细胞,神经分化”,分别组合进行检索,限定文章语言种类为中文。资料选择:初审资料,选取包括人脐血干细胞分化为神经细胞的文章。纳入标准:①脐带血间充质干细胞。②间充质干细胞向神经细胞分化。排除标准:①脐带血造血干细胞。②文献综述,重复研究,Meta分析类文章。资料提炼:共收集到68篇符合要求的文章,查找全文,选取其中近期相关文章19篇。将所有文章按照脐血干细胞诱导分化体外实验和体内实验进行分类综合。资料综合:脐带血干细胞来源丰富、采集方便、安全,且体外扩增迅速,在体外和体内一定条件下可以分化为神经细胞,然而不同的诱导条件对其分化的影响有不同,人们运用各种手段希望能找到诱导效率较高的诱导方法,包括几种化学诱导剂联合,生长因子之间配伍,化学诱导剂与生长因子联合,或应用接近生理状态的条件培养基等。在改进诱导条件的同时人们开始关注单一表型的细胞群作为实验对象是否能有效地提高诱导效率。研究者以期找到一种高效率而具有应用价值的诱导方法,为将脐带血干细胞应用于神经科学领域提供有力的证据。结论:人脐血干细胞在体外和体内一定条件下可以分化为神经细胞,应用于中枢神经系统疾病的细胞治疗具有广阔前景,然而寻找高效实用的诱导方法仍需要进一步研究。     

干细胞在脑性瘫痪治疗中的应用

背景：干细胞在适当条件下可以分化为神经元细胞、星形胶质细胞与少突胶质细胞,可能从根本上改善脑性瘫痪患儿神经元缺失及神经胶质细胞变性,进而改善患儿脑功能障碍,从理论上达到根治目的。目的：回顾性分析不同来源干细胞经不同途径治疗脑性瘫痪患儿的疗效。方法：由第一作者检索1992/2011PubMed数据及万方数据库有关脑性瘫痪的治疗及不同来源干细胞在治疗脑性瘫痪等方面的文献。结果与结论：神经干细胞在动物神经功能损伤中的修复作用已有很多国内外报道,但目前其在人体的临床应用仍处于临床试验阶段。虽然胚胎、骨髓血、胎儿脐带血、脐带来源的干细胞已在部分医院应用到脑性瘫痪患儿中,并取得了初步的疗效,其具体评定标准及长期疗效仍有待进一步随访、观察。     

人脐血干细胞定向分化为神经细胞的诱导方法

目的：分析人脐血干细胞在体外和体内向神经细胞分化的不同诱导条件。 资料来源：应用计算机检索Medline数据库1990-01／2005-10相关脐带血干细胞向神经细胞分化文章，检索词为“umbilical cord blood，mesenchymal stem cells，neural differentiation”，分别组合进行检索，限定文章语言种类为English，同时计算机检索中文期刊数据库2000-01／2005-10相关脐带血间充质干细胞向神经分化文章，检索词为：“脐带血，间充质干细胞，神经分化”，分别组合进行检索，限定文章语言种类为中文。 资料选择：初审资料，选取包括人脐血干细胞分化为神经细胞的文章。纳入标准：①脐带血间充质干细胞。②间充质干细胞向神经细胞分化。排除标准：①脐带血造血干细胞。②文献综述，重复研究，Meta分析类文章。资料提炼：共收集到68篇符合要求的文章，查找全文，选取其中近期相关文章19篇。将所有文章按照脐血干细胞诱导分化体外实验和体内实验进行分类综合。 资料综合：脐带血干细胞来源丰富、采集方便、安全，且体外扩增迅速，在体外和体内一定条件下可以分化为神经细胞，然而不同的诱导条件对其分化的影响有不同，人们运用各种手段希望能找到诱导效率较高的诱导方法，包括几种化学诱导剂联合，生长因子之间配伍，化学诱导剂与生长因子联合，或应用接近生理状态的条件培养基等。在改进诱导条件的同时人们开始关注单一表型的细胞群作为实验对象是否能有效地提高诱导效率。研究者以期找到一种高效率而具有应用价值的诱导方法，为将脐带血干细胞应用于神经科学领域提供有力的证据。 结论：人脐血干细胞在体外和体内一定条件下可以分化为神经细胞，应用于中枢神经系统疾病的细胞治疗具有广阔前景，然而寻找高效实甩的诱导方法仍需要进一步研究。