光动力疗法抑制黑色素瘤的迁移、侵袭和上皮间质转化

目的研究以5-氨基乙酰丙酸为光敏剂的光动力疗法(AlA-PDT)对黑色素瘤细胞A375迁移、侵袭和上皮间质转化的影响。方法体外培养人黑色素瘤A375细胞,采用不同光照强度的ALA-PDT处理,采用CCK8检测不同光照强度对A375细胞增殖能力的影响,采用划痕实验、Transwell法实验检测A375细胞迁移和侵袭能力,采用免疫印迹法(Western blot)检测上皮间质转化相关分子,如上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)、Snail、TGF-β、Smad2和Smad3蛋白表达情况。结果与对照组相比,ALA-PDT处理组A375细胞迁移和侵袭能力有不同程度的降低(P0.05),上皮间质转化相关分子E-cadherin表达量显著增加(P0.01),而Snail、Smad2、Smad3和TGF-β的表达量则显著降低(P0.05)。结论 ALA-PDT不但可以抑制黑色素瘤的迁移和侵袭能力,而且还可以抑制黑色素瘤的上皮间充质转化。     

上皮-间质转化过程中黑色素瘤细胞力学特性变化与迁移关系研究

目的 探讨上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)过程中黑色素瘤细胞力学特性的变化规律及其与细胞迁移的内在联系。方法 使用免疫荧光检测TGF-β1对EMT相关蛋白表达的影响;使用细胞划痕和Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力;借助原子力显微镜检测细胞刚度;通过流式细胞术检测骨架蛋白的动态变化。结果 利用TGF-β1成功诱导A375细胞发生EMT。TGF-β1呈时间依赖性可增加波形蛋白vimentin表达,降低E-钙黏蛋白E-cadherin表达,并增强细胞迁移和侵袭能力。在EMT进程中,细胞的生物力学特性(细胞刚度)发生改变,细胞骨架G-actin/F-actin比值明显上升,细胞刚度明显降低。结论 EMT进程中,黑色素瘤细胞骨架发生解聚,细胞刚度降低,从而增强细胞的迁移和侵袭能力。研究结果为癌症转移的临床治疗提供力学生物学新思路。     

小檗碱调控HIF-1α和TGF-β抑制鼻咽癌细胞增殖和侵袭转移

目的 探讨小檗碱对人鼻咽癌细胞5-8F细胞增殖和侵袭转移的影响及可能机制。方法 体外培养人鼻咽癌细胞5-8F细胞后,将细胞分为对照组(0μmol/L)、12.5μmol/L、25μmol/L和50μmol/L小檗碱处理组。CCK-8检测5-8F细胞的增殖情况;划痕实验检测鼻咽癌细胞迁移能力;穿梭小室实验检测鼻咽癌细胞侵袭能力的变化;Western blot检测各组细胞中HIF-1α信号通路相关蛋白和TGF-β的表达。结果 小檗碱抑制5-8F细胞增殖,并呈浓度依赖性和时间依赖性。划痕实验和穿梭小室实验结果表明小檗碱能显著降低5-8F细胞迁移和侵袭能力。Western blot检测结果发现,HIF-1α和TGF-β的表达在药物作用后显著降低。结论 小檗碱通过抑制HIF-1α和TGF-β的表达抑制人鼻咽癌细胞5-8F细胞增殖、迁移和侵袭。     

羟基红花黄色素A抑制人肝癌细胞系Huh7发生上皮-间质转化

目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对人肝癌细胞系Huh7迁移及侵袭的影响,并通过体内外实验探究其是否影响肝癌细胞上皮-间质转化(EMT)。方法体外培养Huh7细胞,分为对照组、HSYA 80和160μmol/L实验组,分别处理24 h,用transwell小室法和细胞划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力;Western blot检测细胞vimentin和E-cadherin蛋白表达;建立Huh7细胞裸鼠皮下移植瘤模型,HE染色观察移植瘤和肝脏组织形态;免疫组化检测移植瘤组织TGF-β1、vimentin和E-cadherin表达情况。结果与对照组相比,HSYA实验组Huh7细胞迁移与侵袭能力明显下降,E-cadherin蛋白表达升高,vimentin蛋白表达下降(P0.05);与移植组相比,HSYA实验组(2.25 mg/kg)肝内无肿瘤细胞转移,移植瘤组织出现肿瘤细胞坏死,E-cadherin表达升高,vimentin和TGF-β1表达下降(P0.05)。结论 HSYA通过抑制肝癌细胞发生EMT,抑制肝癌细胞的迁移及侵袭能力。     

激活素A对L929成纤维细胞迁移、侵袭及细胞因子分泌的影响

目的探讨激活素A(activin A)对小鼠成纤维细胞系L929细胞迁移、侵袭及细胞因子分泌的影响。方法采用5-溴-2’-脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2’-deoxyuridine,BrdU)掺入实验检测L929细胞增殖,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测L929细胞培养上清中细胞因子水平,基质胶transwell侵袭实验分析L929细胞迁移、侵袭,实时细胞分析技术(RTCA)检测L929细胞黏附,Western blot分析细胞内信号蛋白表达水平。结果与对照组相比,激活素A处理对L929细胞增殖没有影响,对L929细胞分泌TNF-α、IL-1β及IL-6等促炎细胞因子也没有影响,但却显著促进纤维化诱导因子TGF-β1分泌。激活素A还能显著增加L929细胞穿透基质胶迁移、侵袭细胞数量(P<0.01),并促进L929细胞黏附,添加阻断剂FST可以显著减弱激活素A诱导的L929细胞侵袭和促进黏附作用。激活素A处理L929细胞可以显著增加p-ERK和p-JNK蛋白水平,但对p-Smad3蛋白水平没有明显影响。结论激活素A可以促进L929细胞分泌TGF-β1、诱导L929细胞侵袭和促...     

长链非编码RNA LINC00260抑制幽门螺杆菌感染胃上皮细胞系引起的炎性反应和细胞迁移

目的探讨长链非编码RNA-LINC00260在幽门螺杆菌(HP)感染引起的胃癌中的作用及可能机制。方法实时荧光定量PCR检测LINC00260在HP感染的胃黏膜正常上皮细胞(GES1)中的表达,在胃癌细胞系SGC-7901中通过瞬时转染siRNA敲低LINC00260后与HP共培养,用q PCR检测炎症相关细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)及白介素8(IL-8)的表达;在敲低LINC00260的表达后,通过划痕愈合实验,观察对胃癌细胞迁移能力的影响。结果 1)HP感染细胞后,GES1和SGC-7901细胞形态学改变;2)LINC00260在HP感染的胃黏膜正常上皮细胞表达显著下降(P0.05);3)敲低LINC00260可抑制HP引起的炎症相关因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8的表达;4)敲低LINC00260抑制胃癌细胞的迁移能力。结论 LINC00260可能是一个癌基因,在HP感染引起的胃癌中发挥重要作用。     

棕榈酸刺激的巨噬细胞对HepG2细胞侵袭和迁移的影响

目的:研究棕榈酸刺激的巨噬细胞对肝癌细胞侵袭和迁移能力的影响,并进一步探讨其作用机制。方法:应用棕榈酸(0.16 mmol/L)刺激人急性单核细胞白血病细胞系THP-1来源的巨噬细胞,并取其上清液处理HepG2细胞。细胞迁移实验检测巨噬细胞的迁移能力,侵袭实验和划痕实验分别观察HepG2细胞的纵向迁移能力和横向迁移能力;RT-qPCR检测巨噬细胞和HepG2细胞的炎症/趋化因子及HepG2细胞上皮-间充质转化标志蛋白(E-cadherin和N-cadherin)的mRNA表达水平。结果:棕榈酸促进了巨噬细胞迁移,显著上调巨噬细胞白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的mRNA表达;用棕榈酸刺激巨噬细胞的上清液处理HepG2细胞,其纵向迁移能力和横向迁移力明显强于未经棕榈酸处理组,且HepG2细胞的多种炎症因子和N-cadherin表达上调,E-cadherin表达下调。结论:棕榈酸可以增强巨噬细胞的迁移能力,刺激巨噬细胞产生大量炎症因子/趋化因子,进一步通过旁分泌/内分泌作用于HepG2细胞,促进HepG2细胞的上皮-间充质转化,增强HepG2细胞的侵袭与迁移能力。     

IL-33诱导的THP-1细胞对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨白介素33(interleukin 33,IL-33)对单核细胞THP-1的诱导分化作用以及IL-33诱导分化的THP-1对胃癌SGC7901细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 IL-33刺激THP-1细胞72 h后流式细胞术检测M2巨噬细胞表面分子CD163及CD209的表达;ELISA检测细胞因子IL-10、IL-12、TGF-β、TNF-α的蛋白表达;qRT-PCR检测IL-10、IL-12、TGF-β、TNF-α的mRNA表达。克隆形成实验、细胞迁移侵袭实验检测IL-33刺激后的THP-1细胞与SGC7901共培养对SGC7901细胞增殖、迁移和侵袭的影响;Western blot检测共培养后SGC7901细胞上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相关蛋白E-cadherin、Vemintin以及Snail的表达。裸鼠成瘤实验检测TAM对体内肿瘤生长的影响。结果 IL-33诱导THP-1细胞表型向M2TAM方向分化;IL-33刺激THP-1促进了SGC7901细胞增殖、迁移和侵袭能力;Western blot检测结果显示,经IL-33诱导的THP-1抑制SGC7901细胞E-cadherin的表达,促进Vemintin和Snail的表达,说明IL-33诱导分化的THP-1细胞促进SGC7901细胞发生EMT。IL-33刺激后的THP-1促进SGC7901细胞在裸鼠体内肿瘤的生长。结论 IL-33可以诱导THP-1发生M2型TAM的分化,分化后的TAM通过EMT机制促进胃癌SGC7901细胞的增殖、迁移和侵袭。     

麦普替林对黑色素瘤A375细胞转移和侵袭的影响

目的研究新型抗癌药物麦普替林对人源黑色素细胞瘤A375细胞的作用,探讨其对黑色素细胞瘤治疗效果。方法应用不同浓度的麦普替林药物对A375细胞进行处理,比色定量法检测细胞的凋亡水平。在A375细胞中分别加入无菌水和麦普替林,进行划痕实验;利用Transwell实验,研究麦普替林对于黑色素瘤转移和侵袭的影响。结果麦普替林作用下A375细胞凋亡水平显著增加。划痕实验和Transwell实验显示,A375细胞加入麦普替林后,其增殖、迁移、侵袭的细胞数量都有显著的减少。结论麦普替林显著抑制黑色素瘤,具有良好临床应用前景。     

白细胞介素-33增强人黑色素瘤A375细胞侵袭和增殖作用的机制研究

目的:研究白细胞介素-33(IL-33)对人黑色素瘤A375细胞侵袭和增殖的作用及机制。方法:采用ELISA试剂盒分别检测15例人黑色素瘤患者(患者组)和20例健康人群(健康对照组)血清中IL-33含量;将40只SPF级BALB/C裸鼠分为动物对照组、IL-33低、中、高剂量组,每组10只,构建人黑色素瘤A375细胞荷瘤鼠模型,分析IL-33在体内对肿瘤增长的影响,免疫组化分析肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平。将对数生长期的人黑色素瘤A375细胞分为细胞对照组、1ng/ml IL-33组、3ng/ml IL-33组、30ng/ml IL-33组,通过CCK-8分析各组A375细胞增殖能力;Transwell和划痕实验分析A375细胞的侵袭能力和迁移能力;Western Blot分析细胞VEGF、波形蛋白(Vimentin)、黏钙蛋白N(N-cadherin)、黏钙蛋白E(E-cadherin)蛋白表达水平。结果:患者组血清IL-33水平明显高于健康对照组(P<0.01)。动物实验中,荷瘤鼠模型的肿瘤体积明显增大(P<0.05),免疫组化显示肿瘤组织中VEGF...     

miR-21 通过靶向TIMP3 调控黑色素瘤细胞的免疫抑制

目的:探讨微小RNA-21(miR-21)是否通过调节金属蛋白酶组织抑制因子3(TIMP3)的表达影响黑色素瘤细胞分泌免疫抑制因子。方法:实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测黑色素瘤组织和细胞中miR-21的表达水平。脂质体介导的细胞转染法上调或下调黑色素瘤A375细胞中miR-21的表达。ELISA检测细胞培养上清液中IL-10、转化生长因子-β(TGF-β)和血管内皮生长因子(VEGF)的含量。双荧光素酶报告基因实验检测miR-21与TIMP3靶向关系。Western blot检测细胞中TIMP3蛋白表达水平。结果:黑色素瘤组织和不同黑色素瘤细胞株中miR-21的表达量较癌旁组织和正常黑色素细胞明显降低(P0.05)。在A375细胞中转染miR-21 mimic后,细胞中miR-21表达量显著上升,分泌的免疫抑制因子IL-10、TGF-β和VEGF的含量显著升高(P0.05)。转染miR-21 inhibitor后,细胞中miR-21表达量显著降低,分泌的免疫抑制因子IL-10、TGF-β和VEGF的含量显著降低(P0.05)。生物信息学软件预测miR-21和TIMP3存在靶向结合位点,双荧光素酶报告基因实验验证了miR-21和TIMP3靶向结合关系,miR-21能够负向调节TIMP3蛋白的表达。结论:miR-21能够靶向调控TIMP3的表达影响黑色素瘤细胞分泌的免疫抑制因子IL-10、TGF-β和VEGF的含量。     

慢病毒介导的SEMA3G过表达对人胰腺癌细胞系PANC-1的作用

目的通过体外实验探讨过表达SEMA3G对人胰腺癌细胞PANC-1细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法将携带SEMA3G的慢病毒载体转染人胰腺癌PANC-1细胞系,利用real-time PCR和Western blot分别检测mRNA和蛋白质水平。CCK-8法检测细胞增殖,transwell实验检测细胞侵袭和细胞划痕试验检测细胞的迁移。结果成功建立稳定转染SEMA3G胰腺癌PANC-1细胞系。SEMA3G病毒感染组与空白对照组和阴性对照组相比细胞的增殖能力显著降低(P0.05),SEMA3G病毒感染组的细胞侵袭和迁移能力明显低于两组对照组(P0.05)。结论 SEMA3G慢病毒载体能有效过表达人胰腺癌PANC-1细胞中内源性SEMA3G蛋白,进而抑制细胞增殖、侵袭和迁移。     

三七总皂苷抑制胃癌进程的体外研究

目的:探究三七总皂苷对人胃癌细胞系SGC-790、BGC-823及MKN-4的增殖、迁移、侵袭和凋亡等肿瘤生物学行为的影响及可能涉及的机制。方法:通过CCK8方法研究三七皂总苷对胃癌细胞系增殖能力的影响,通过Transwell侵袭实验研究三七总皂苷对胃癌细胞系侵袭能力的影响,通过划痕实验研究三七总皂苷对胃癌细胞系迁移能力的影响,通过流式方法检测三七总皂苷对胃癌细胞系凋亡水平的影响;采用Western blot检测三七总皂苷对胃癌细胞系中Vemintin、SNAIL、MMP2、MMP9、P21、Caspase-3、BAX和β-catenin等蛋白表达水平的影响;采用免疫荧光方法检测三七总皂苷对胃癌细胞系SGC-790中β-catenin的细胞空间分布的影响。结果:CCK8实验结果证实三七总皂苷可以显著抑制胃癌细胞系的增殖能力(P0.05),Transwell侵袭实验证实三七总皂苷可以抑制胃癌细胞系的侵袭能力(P0.05),划痕实验证明三七总皂苷可以抑制胃癌细胞系的迁移能力(P0.05),凋亡实验证实三七总皂苷可以诱导胃癌细胞系凋亡水平增高(P0.05);Western blot方法证实三七总皂苷可以下调Vemintin、SNAIL、MMP2和MMP9的蛋白表达量,并上调P21、Caspase-3和BAX的蛋白水平,可以下调细胞核内β-catenin的蛋白水平(P0.05);免疫荧光结果证实,三七总皂苷可以减少β-catenin的细胞核内荧光强度,改变β-catenin的细胞内空间分布(P0.05)。结论:三七总皂苷可以显著抑制胃癌细胞系的增殖、侵袭、迁移能力,并诱导胃癌细胞系发生凋亡。其机制是三七总皂苷在胃癌细胞内可以抑制WNT/β-catenin通路,其可能是一种治疗胃癌的新药物。     

SEPT7基因抑制人胶质瘤细胞系U251MG侵袭的研究

目的 研究SEPT7基因对人胶质瘤细胞系U251MG侵袭的抑制作用及其可能的分子机制.方法 以腺病毒为载体转导SEPT7(rAd5-SEFF7)入U251人脑胶质瘤细胞系;Transwell法和3-D Matrigel法观察U251胶质瘤细胞侵袭能力的变化,划痕实验和2-D Matrigel法观察细胞迁移能力的变化.应用蛋白印记检测MMP2,MMP9,MT1-MMP,TIMP1和TIMP2的表达变化,蛋白印记和免疫荧光检测整合素αvβ3的表达,以及应用激光扫描共聚焦显微镜观察细胞骨架蛋白tubulin-α结构的变化.结果 转染SEPT7后U251MG细胞的侵袭和迁移能力明显受到抑制、细胞MMP2、MMP9、MT1-MMP和整合素αvβ3的表达下调、TIMP1和TIMP2的表达则上调;肿瘤细胞的微管蛋白tubulin-α结构出现了重新分布,发生了扭曲及聚集现象,接近于正常的非肿瘤细胞的tubulin-α结构.结论 SEPT7基因可以抑制胶质瘤细胞的侵袭和迁移能力,其分子机制可能通过逆转MMPs/TIMPs的失衡状态,降低整合素αvβ3的表达,以及改变细胞骨架tubulin-α的结构而实现的.SEPT7可作为基因治疗胶质瘤的重要候选基因.     

STK17A 基因经TGF-β/ SMAD 信号通路调控宫颈癌细胞增殖凋亡及侵袭的机制研究

目的:探究丝氨酸/苏氨酸激酶17A (STK17A)基因介导转化生长因子β(TGF-β)/SMAD信号通路对宫颈癌细胞增殖、侵袭及凋亡的调控机制。方法:收集我院43例宫颈癌患者癌组织及癌旁组织。HE染色观察组织病理结构。免疫组化检测组织中STK17A阳性表达。筛选STK17A低表达宫颈癌细胞系并将细胞系分为阴性对照组(宫颈癌细胞转染含有无关序列的重组质粒)、基因沉默组(宫颈癌细胞转染含有STK17A shRNA的重组质粒)、基因过表达组(宫颈癌细胞转染含有STK17A片段的重组质粒)、通路抑制剂组(TGF-β/SMAD通路特异性抑制剂处理宫颈癌细胞)、联合组(TGF-β/SMAD通路抑制联合STK17A过表达处理细胞)。qRT-PCR和Western blot检测各组细胞STK17A、TGF-β1、SMAD3、E-cadherin、N-cadherin和TIMP3的表达。CCK-8检测各组细胞活力。细胞划痕和Transwell实验检测各组细胞迁移和侵袭能力。Annexin V-FITC/PI双染检测各组细胞凋亡情况。结果:与癌旁组织相比,宫颈癌组织排列紊乱,无极性(层次和结构)且STK17A低表达。细胞实验中:与阴性对照相比,过表达STK17A或抑制TGF-β/SMAD通路后,TGF-β1、SMAD3、E-cadherin mRNA和蛋白表达下调,但N-cadherin、TIMP3 mRNA和蛋白表达上调(均P0.05)。同时,相对于阴性对照组,过表达STK17A或抑制TGF-β/SMAD通路后,24 h和48 h细胞活力受到明显抑制、细胞侵袭转移能力显著降低且细胞凋亡被显著诱导(均P0.05)。结论:STK17A过表达可能通过抑制TGF-β/SMAD信号通路的活化进而抑制宫颈癌细胞增殖、侵袭同时诱导其凋亡,STK17A有望成为宫颈癌治疗的潜在重要靶点。     

MST1过表达抑制宫颈癌细胞系SiHa的增殖、迁移和侵袭

目的探讨哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)对子宫颈癌SiHa细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法Western blot检测正常宫颈上皮细胞H8与宫颈癌细胞SiHa中MST1的表达;构建p J3H-HA-MST1质粒并转染SiHa细胞系,Western blot检测MST1、Ki-67和MMP9的蛋白表达;MTS、划痕实验和Transwell分别检测细胞增殖、迁移和侵袭能力。结果 SiHa细胞的MST1蛋白表达水平明显低于H8细胞(P0.05);SiHa细胞转染MST1质粒后,MST1蛋白表达明显升高,而Ki-67和MMP9蛋白表达水平显著下降(P0.05),SiHa细胞的增殖被明显抑制(P0.05),同时细胞的迁移和侵袭能力也显著降低(P0.01)。结论 MST1过表达可以抑制宫颈癌细胞SiHa的增殖、迁移和侵袭能力。     

IL-37抑制体外培养的SMMC-7721肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移

目的探讨白细胞介素37(IL-37)对SMMC-7721肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法 SMMC-7721肝癌细胞分为重组人IL-37(rh IL-37)处理组和对照组,处理组给予(50、100、200、500)ng/m L rh IL-37,对照组给予等体积培养液。CCK-8法检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞的迁移能力,TranswellTM实验检测细胞侵袭能力;Western blot法检测信号转导子与转录激活子3(STAT3)、磷酸化的STAT3(p-STAT3)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)的水平。结果 CCK-8实验结果显示rh IL-37可抑制SMMC-7721肝癌细胞的增殖;划痕实验结果证明rh IL-37抑制SMMC-7721肝癌细胞的迁移;TranswellTM实验结果显示,rh IL-37可抑制SMMC-7721细胞的侵袭。Western blot结果表明,rh IL-37处理可下调SMMC-7721细胞p-STAT3、MMP-2的水平。结论 IL-37可抑制肝癌细胞SMMC-7721的增殖、侵袭、迁移,可能与下调p-STAT3、MMP-2表达有关。     

缺氧条件下沉默DEC1基因对人乳腺癌MDA-MB-231细胞活力、侵袭及迁移的影响

目的:探讨在缺氧条件下沉默人胚胎软骨发育基因1 (differentiated embryonic chondrocyte gene 1,DEC1)的表达对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响及作用机制。方法:分别检测不同培养条件(常氧和缺氧)下MDA-MB-231细胞中DEC1基因的表达情况;设计、合成靶向抑制DEC1基因的小干扰RNA (small interfering RNA, siRNA),通过脂质体转染入缺氧条件下的MDA-MB-231细胞中,采用RT-qPCR和Western blot法验证细胞转染效率,CCK-8法、Transwell和划痕实验分别检测沉默DEC1基因表达对MDA-MB-231细胞活力、侵袭及迁移能力的影响;此外,采用Western blot法分析转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)/Smad3信号通路关键分子的表达。结果:在缺氧条件下人乳腺癌MDA-MB-231细胞中DEC1表达显著增高(P0.05),沉默DEC1表达后,MDA-MB-231细胞的活力、侵袭和迁移能力显著下降(P0.01);Western blot结果显示,缺氧条件下,沉默DEC1后磷酸化Smad3 (phosphorylated Smad3, p-Smad3)蛋白表达显著降低(P0.05)。结论:在缺氧条件下,沉默DEC1基因表达可能通过阻断TGF-β/Smad3信号通路进而抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞的活力、侵袭及迁移能力。     

SM22α对结直肠癌细胞侵袭和迁移能力的影响

目的:探究平滑肌22α蛋白(SM22α)对结直肠癌细胞侵袭和迁移能力的影响,并探讨其分子机制。方法:通过慢病毒转染人结直肠癌细胞HCTL16构建SM22α过表达细胞,应用细胞划痕实验检测细胞迁移能力的变化;Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力的变化;使用RT-qPCR检测细胞SM22αmRNA表达的改变;通过Western blot法检测细胞外信号调节激酶(ERK)、p-ERK、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和SM22α蛋白水平。结果:成功构建HCT116过表达SM22α细胞;SM22α过表达细胞的侵袭和迁移能力减弱(P0.05);SM22α过表达抑制p-ERK和MMP-9的蛋白水平(P0.05)。结论:SM22α通过抑制ERK/MMP-9信号通路调节结直肠癌细胞侵袭和迁移能力。     

下调Galectin-3 对肺癌H460 细胞生长及NF-κB 信号通路和细胞免疫因子的影响

目的:研究下调半乳糖凝集素-3(Galectin-3)对肺癌H460细胞生长及NF-κB信号通路和细胞免疫因子表达影响。方法:以shRNA Galectin-3重组慢病毒感染肺癌H460细胞,qRT-PCR和Western blot检测下调效果。MTT测定细胞增殖,克隆形成实验测定细胞克隆能力,Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力,Western blot检测细胞中MMP-2、MMP-9和NF-κBp65蛋白表达,qRT-PCR检测IL-6、VEGF、TGF-β1、IL-10 mRNA水平。结果:shRNA Galectin-3重组慢病毒感染后的H460细胞中Galectin-3转录和蛋白表达水平均下降,细胞增殖能力和克隆形成能力降低,细胞侵袭和迁移数目减少,细胞中MMP-2、MMP-9和NF-κBp65蛋白表达水平降低,IL-6、VEGF、TGF-β1、IL-10 mRNA水平也降低。结论:下调Galectin-3抑制肺癌H460细胞生长、侵袭、迁移,并且可以抑制NF-κB信号激活剂和细胞免疫因子的表达。