肝癌患者循环肿瘤细胞的检测及其临床应用研究进展

原发性肝癌发病率和死亡率均较高,其术后转移与复发已经成为影响患者预后的重要因素,临床上迫切需要能够有效预测和防治肝癌转移的检测手段。循环肿瘤细胞（circulating tumor cell,CTC）,作为近些年来新出现的肿瘤检测指标,因其能够实时、无创地监测肿瘤患者的病情状态,在早期诊断、早期治疗,判断预后和制定个体化治疗方案等方面具有重要意义而备受关注。CTC在乳腺癌、前列腺癌、结直肠癌、肺癌等疾病的应用已初步得到临床认可。最新的研究表明,肝癌患者病情状态与血液中CTC的数量也显示出极强的相关性。目前各种CTC检测体系主要包括富集纯化和鉴定两方面;但由于检测方法繁多,不同方法的敏感性、特异性不同限制了其临床应用。近年来,新的CTC检测方法层见叠出,涌现出了很多新技术用于肝癌CTC的临床研究。本文就其相关研究进展做一综述。     

微量循环肿瘤细胞检测技术的研究进展

<正>肿瘤的发生发展是一个多基因参与,多因素、多步骤的复杂的生物学过程。肿瘤刚发生时多为器官局限性疾病,绝大多数肿瘤组织通过其脱落细胞进入血液循环,进而侵袭其它脏器进行远处转移。早于1869年,Ash-worth在一例肿瘤死亡患者外周血中发现了类似肿瘤细胞,并首次提出循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cells,CTCs)的概念[1]。CTCs定义是指自发的或者因诊疗操作由实体瘤或者转移灶释放进入外周血中进行循环的肿瘤细胞[2]。CTCs的检测可能有效地应用于体外早期诊断、化疗药物的快速评估、肿瘤复发的监测以及抗肿瘤新药物的开发等。     

叶酸受体阳性循环肿瘤细胞检测的临床研究进展

循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)是指从肿瘤原发灶脱落后进入外周血的肿瘤细胞,数量稀少,检测难度较大。叶酸受体(folate receptor,FR)被证实普遍高表达于大多数肿瘤细胞表面,而在正常人血液中几乎不表达。因此,叶酸受体已经成为检测外周血中CTCs的理想靶点,被应用于多种实体肿瘤的早期诊断、疗效监测及预后判断。本文对FR阳性CTCs检测的临床研究进展进行阐述,并探讨其在恶性胸腔积液诊断中的应用前景。     

基于微流体技术分选循环肿瘤细胞的方法研究

循环肿瘤细胞（Circulating Tumor Cells, CTCs）主要来源于肿瘤组织自发脱落的外周血液中,其对恶性肿瘤传播转移具有重要影响,已逐渐被认为是肿瘤远处转移的标志。对外周血中极微量的具有特异性、敏感性的CTCs进行分选、富集及检测,不仅有利于肿瘤的早期诊断、疗效评价及复发转移监控,还可以为后续的CTCs鉴定和下游单细胞基因组和转录组测序提供良好基础,为肿瘤靶向治疗提供新策略,在临床上个性化医疗等领域有重要意义。微流控技术可在微米尺度下整合物理、化学及生物学方法,实现对微量CTCs的高通量、高效率以及低成本分选富集,该技术发展迅速并已被广泛研究应用。本文对微流控芯片进行CTCs分选富集及捕获的最新研究进展进行综述,阐述无标记、有标记分选方法的原理及应用实例,分析各种技术的优缺点,对现阶段该领域存在的问题进行讨论,对微流控CTCs分选芯片的应用前景和未来发展趋势进行展望。     

阴性富集联合免疫荧光原位杂交法检测乳腺癌中循环肿瘤细胞

目的探讨阴性富集联合免疫荧光原位杂交法(immuno fluorescence in situ hybridization,im FISH)检测乳腺癌中循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)方法学的可行性及其临床价值。方法建立采用阴性富集及im FISH检测CTC的方法,评估线性、精密度情况,并验证此方法在37例乳腺癌、16例良性乳腺病和15例健康人中的CTC检测效果。结果乳腺癌患者的检出率为67. 6%(25/37),良性乳腺病患者及健康人的检出率分别为18. 8%(3/16)和0(0/15)。结论采用阴性富集联合im FISH法检测乳腺癌患者CTC的方法具有可行性,该方法在预测癌症发生方面有积极的提示作用,CTC可以作为有效手段之一,为临床提供更多的相关信息。     

重组病毒在循环肿瘤细胞检测中的应用及研究进展CSCD

循环肿瘤细胞（Circulating tumor cells,CTCs）是液体活检的重要手段之一,也是非侵入性的个体化实验诊断工具.以FDA首个批准的CTCs检测平台CellSearch为代表的商品化CTCs分离平台已被证实可有效富集监测CTCs,但出现上皮—间质转化的CTCs因不表达上皮细胞粘附分子而可能被漏检.此外大多CTCs检测平台因无法区分活细胞和死细胞而不能有效反映CTCs功能状态,因此如何利用常规设备开发新型分离方法用于检测具有转移潜力的CTCs具有更加重要的现实意义.插入人端粒酶启动子和绿色荧光蛋白（Green fluorescent protein,GFP）的复制选择性溶瘤病毒,主要为单纯疱疹病毒（Herpes simplex virus,HSV）和腺病毒（Adenovirus,ADV）具有特异示踪CTCs的作用.肿瘤细胞感染重组病毒24 h后稳定表达GFP,通过荧光显微镜或流式细胞仪直接检测荧光信号即可对CTCs进行计数,结合PCR、测序等方法亦可进行相关下游分析.此外,通过基因工程改造的复制选择性溶瘤病毒仅在活细胞中生长繁殖,有利于在早期发现具有转移潜能的高活性CTCs.以重组病毒为基础的CTCs检测方法灵敏准确、简便易行,具有较好的临床应用前景.     

循环肿瘤细胞的检测方法

在原发上皮肿瘤形成和生长的早期,肿瘤细胞便可以通过血流播散到远处器官。这些循环肿瘤细胞（circulating tumor cells,CTCs）可以通过不同技术进行富集和检测,其分析被认为是对癌症患者的实时“液体活检”。这种活检能对CTCs特异性亚群进行表征,且有可能为癌症的检测和控制带来革命性的转变。本篇作者将着重讨论当前用于CTCs富集和检测的策略。     

基于明胶膜基底捕获和原位培养循环肿瘤细胞

目前从血液中分离得到高活力的循环肿瘤细胞（CTCs）仍面临一定的挑战,本研究设计了一个明胶膜基底,可以同时实现捕获和原位培养CTCs。该明胶基底对CTCs的捕获效率最高可达86.8%。由于明胶具有良好的生物相容性,明胶膜基底在捕获到CTCs后可直接进行原位培养,减少了释放过程中对细胞的损害,有利于后续细胞分析。该明胶膜基底有望在临床CTCs检测中发挥作用。     

循环肿瘤细胞簇与肿瘤转移的研究进展

循环肿瘤细胞(circulating tumor cells, CTC)被认为是肿瘤发生转移的关键。CTC簇与游离CTC相比,其具有更强的活性和转移能力。分离检测技术为探究CTC簇在血液循环中促转移的分子机制提供支持,并促进了癌症治疗的发展。该文就CTC簇的物理特性及起源、促血行转移的机制及临床价值等方面的研究进展作一综述。     

结直肠癌术后循环肿瘤细胞检测的临床意义

目的 探讨结直肠癌(CRC)患者术后外周血循环肿瘤细胞(CTCs)阳性率及其计数与临床病理特征、肿瘤复发转移及预后之间的关系及其临床意义。方法 回顾性分析2016年1月—2017年7月上海交通大学医学院附属第九人民医院首诊并经病理确诊的99例CRC患者的临床资料,其中男66例、女33例,年龄37~79岁。检测患者术后4~8周且辅助治疗前CTCs计数和血清癌胚抗原(CEA)水平,随访患者生存情况,比较患者不同临床病理学特征患者间CTCs表达及计数值的统计学差异,包括性别、年龄、原发灶部位、肿瘤分化程度、原发灶浸润深度(T分期)、区域淋巴结侵袭程度(N分期)、远处转移(M分期)、TNM总分期;观察患者生存情况;采用COX比例风险回归模型进行无进展生存期、总生存期的单因素和多因素分析。结果 99例CRC患者CTCs阳性率为60.6%(60/99),CTCs计数值为0~24(4.909±5.518)。患者的CTCs阳性率和CTCs计数值在T1+T2+T3期、N0期、M0期、Ⅰ~Ⅱ期、CEA＜5 ng/mL和中高分化组患者低于T4期、N1+N2期、M1期、Ⅲ~Ⅳ期、CEA≥5 ng/mL、低分化组患者,差异均有统计学意义(P值均＜0.05)。患者随访3~20个月,死亡22例(22/99,22.2%),其中CTCs阳性21例;疾病进展32例(32/99,32.3%),其中CTCs阳性29例。单因素分析显示:CTCs表达、N分期、M分期、肿瘤分期、和高CEA水平是无进展生存期的影响因素(P值均＜0.05);CTCs表达、N分期、M分期、肿瘤原发灶位于直肠、高CEA水平是总生存期的影响因素(P值均＜0.05)。CTCs和远处转移是CRC患者无进展生存期和总生存期的独立预后因素(HR= 5.418、2.254,95%可信区间:1.595~8.403、1.227~7.986,P值均＜0.05)。结论 在术后CRC患者中,CTCs表达与预后不良有关,对肿瘤复发转移评估具有一定的价值和临床意义。     

硒与肿瘤细胞凋亡研究进展

硒是机体所必需的微量元素 ,缺硒可引起多种疾病 ,人类克山病、心血管疾病、细菌感染、ＨＩＶ感染、运动障碍、前列腺功能异常、精子形成异常以及癌症等均与硒的摄入不足有关[1～ 7] ,有关硒作用机制的研究已相当广泛 ,如硒和硒酶的抗氧化作用 ,硒与Ⅰ型甲腺原氨酸 5′脱碘酶的关系 ,硒与细胞免疫的关系 ,硒对内分泌的作用 ,硒与肿瘤的关系等。以下仅就硒对肿瘤细胞凋亡的作用作简要综述。1　细胞凋亡 (ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)又称程序性细胞死亡 (ｐｏｒ ｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈ ,ＰＣＤ) ,该过程以凋亡小体的形成 ,染色体ＤＮＡ的…     

改良IME-FICC 法检测鼻咽癌患者外周血循环肿瘤细胞及其临床意义分析

目的: 探索改良免疫磁珠富集联合免疫荧光细胞化学技术(IME-FICC)检测鼻咽癌患者外周血循环肿瘤细胞(CTCs)的临床意义。方法: 取76例初治鼻咽癌患者外周血,分离单个核细胞,用与磁珠共价结合的上皮细胞黏附分子(EpCAM)抗体富集外周血中表达EpCAM的肿瘤细胞,再采用宽波段滤板检测细胞角蛋白(CK)8/18阳性的肿瘤细胞。中位随访25个月后,对包括循环肿瘤细胞在内的预后因子做统计分析。结果: 20 例正常人的外周血中未检测到CK8/18,63例鼻咽癌患者的外周血检测到CK8/18,阳性率为82.9%(63/76,P<0.01)。复发患者治疗前检测到的外周血CK8/18⁺ CTC中位数明显高于不复发患者(P<0.01),两组中位病毒壳蛋白抗原(VCA)-IgA滴度无显著差异(P>0.05)。外周血CK8/18⁺CTCs个数在3以上,无复发生存率逐渐下降。VCA-IgA滴度不能预测生存。结论: 外周血中CK8/18⁺CTCs是初治鼻咽癌患者的预后不良因素。     

循环肿瘤细胞的检测对乳腺癌诊治意义的研究现状

目前已有证据表明循环肿瘤细胞（circulating tumor cell,CTC）和无病生存期,无进展生存期和总生存期相关。检测外周血循环肿瘤细胞（peripheral blood circulating tumor cells,CTCS）已经成为在癌症诊断中热门领域之一。检测CTC预测癌转移的方法证明优于一些传统的方法,且具有早期、高效、可靠及可重复性好等特点。本文总结国内外乳腺癌循环肿瘤细胞在检测手段及相关临床意义方面的研究进展,以及有关CTC检测项目在研究肿瘤转移过程中的地位、必要性及未来的发展方向。     

循环肿瘤细胞在肺癌诊疗中的临床研究进展

肺癌现已成为发病率及致死率最高的恶性肿瘤,且呈逐年增高趋势,给人类的身体健康及生命安全带来严重威胁。肺癌的复发与转移是导致患者死亡的最主要原因,可能与循环肿瘤细胞（CTCs）进入血液存在一定关系,CTCs在肺癌患者的早期诊断、治疗指导、疗效评估及预后等方面具有十分重要的作用。本文就CTCs在肺癌诊疗中临床应用及研究进展进行综述。     

循环肿瘤细胞检测仪的结构设计与功能分析

为了满足患者对于高质量精准诊疗服务的需求,实现智能化、高通量、高检出率的无创早期筛查,研发一台基于微流控技术的循环肿瘤细胞（CTCs）检测仪。仪器提供高度集成和自动化微流控芯片,采用精准高效的荧光检测系统进行单细胞水平的CTCs检测,并通过检测系统进行程序化检测。仪器可对病人血液中的CTCs进行分离、富集和检测。将人体外周血液样本通过微流控分选芯片得到CTCs富集液,再通过微流控检测芯片和光路检测系统由上位机计数得到血液样本中CTCs的数量。使用裂解红细胞后的模拟血液样本进行了6次实验,在达到0.2 mL/h的最佳流速时, CTCs平均检出率能够达到75.9%以上,组内相关系数大于0.8,证明了该仪器具有较高的检出率和良好的可靠性,可为相关领域的技术突破提供良好的研究设施。     

循环肿瘤细胞与肿瘤恶性行为间的关系

转移和复发是恶性肿瘤最主要的死因。近年研究发现,外周血循环肿瘤细胞（circulating tumor cells,CTCs）可成为判断肿瘤预后的重要指标。在提倡个体化治疗的当下,CTC检测可帮助指导临床设计更有效的治疗方案,从而延长患者寿命,提高患者生存率。本文综述CTCs与肿瘤复发转移的关系和CTCs分离富集检测技术研究进展。     

PCR方法检测循环肿瘤细胞对结直肠癌诊断价值的meta分析

目的系统评价PCR方法检测循环肿瘤细胞对结直肠癌的诊断价值。方法计算机检索Pub Med数据库,按照制定的纳入、排除标准确定合格研究。利用STATA 11.0软件计算合并效应量,绘制综合受试者工作特征曲线并计算曲线下面积。结果24篇研究的合并效应量结果显示,合并敏感度为0.41(95%CI0.30-0.53),特异度为0.98(95%CI 0.93-0.99),合并曲线下面积为0.81(95%CI 0.77-0.84)。亚组分析显示检测敏感度随时间逐渐增高,且CEA作为分子标志物的检测敏感度较CK20略高。结论PCR方法检测CTCs对结直肠癌诊断的特异度较高、敏感度中等,是较好的结直肠癌无创诊断指标。     

推进循环肿瘤细胞和肺癌的发展

肺癌仍然是世界上最致命的肿瘤。每年有超过100万人因此病丧生[1]。（肺）癌最常见的死因是转移癌。肿瘤细胞在起病部位之外的组织中传播和生长,肿瘤负荷迅速增加[2]。非小细胞肺癌（non—small cell lung carcinoma,NSCLC）约占所有肺癌病例的85％,并且是全球癌症相关死亡的首要原因。约70％的患者在就诊时已达疾病晚期,     

用于循环肿瘤细胞捕获的鱼骨型微流控芯片的模拟仿真与优化

目的通过对鱼骨型微流控芯片进行模拟仿真与优化,实现癌症患者外周血中循环肿瘤细胞的高效捕获。方法用Fluent 15.0软件对细胞在微流控芯片中的流动进行建模仿真,通过MATLAB编程统计芯片在不同结构参数(鱼骨宽度、鱼骨间隙、鱼骨高度、通道高度)、液体流动方向与流速等条件(共计250个条件)下所有细胞可被捕获的位置数目,预测细胞捕获效率,并进行实验验证。结果在鱼骨宽度75μm、间隙125μm、深度70μm、通道深度30μm、流体正向且流速1 m L/h的条件下,鱼骨芯片可以达到最高的细胞捕获效率。结论通过计算流体动力学方法对在不同芯片中的细胞捕获进行模拟,利用MATLAB建立捕获效率的统计模型并进行优化,快速筛选出可获得细胞高效捕获的参数组合,并通过实验,对优化的芯片参数进行验证,实现了循环肿瘤细胞的高效捕获。