淫羊藿苷促进骨折愈合作用机制的研究进展

近年来 , 国内外学者对中药淫羊藿主要有效成分淫羊藿苷加速骨折愈合的机制做了一系列研究,目前研究结果显示, 淫羊藿苷加速骨折愈合的机制主要是通过激活 Wnts、BMP、MAPK、ER 等相关信号通路促进 BMSCs、ASCs 的迁移归巢,进行成骨性分化为成骨细胞,同时促进成骨细胞的成熟、矿化以形成骨痂,并抑制破骨细胞的骨吸收活性。本文从淫羊藿苷对相关细胞以及对血管重建的作用方面对淫羊藿苷加速骨折愈合的作用机制做一回顾综述,以期为后续的研究提供参考。     

淫羊藿苷对IgA肾病大鼠纤维化和炎症反应的调控作用

目的Ig A肾病(Ig A nephropathy,Ig AN)是最常见的原发性肾小球肾炎。本文旨在探索淫羊藿苷对Ig AN大鼠纤维化和炎症反应的影响。方法牛血清球蛋白(bovine gamma globulin,BGG)处理建立Ig AN大鼠模型。免疫组化和蛋白印迹检测转化生长因子β1(transforming growth factor beta1,TGF-β1),IV胶原蛋白(type IV collagen,Col IV)和纤连蛋白(Fibronectin)1蛋白水平。酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β),IL-6和IL-18水平。蛋白印迹分析细胞核中抗肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、NF-κB P65和抗血管细胞黏附蛋白(vascular cell adhesion protein 1,VCAM-1)表达。结果与对照组相比,Ig AN模型组尿蛋白,血清肌酐和尿素氮水平明显升高(P<0.05)。模型加药组尿蛋白,血清肌酐和尿素氮水平明显低于Ig AN模型组(P<0.05)。Ig AN模型组TGF-β1、Col-IV和Fibronectin 1表达水平显著高于对照组(P<0.01)。淫羊藿苷处理Ig AN模型大鼠后,TGF-β1、Col-IV和Fibronectin 1表达水平明显下降(P<0.05)。而且,Ig AN模型组血清中IL-1β、IL-6和IL-18水平明显高于对照组(P<0.05)。与Ig AN模型组相比,模型加药组IL-1β、IL-6和IL-18水平明显降低(P<0.05)。另外,Ig AN模型大鼠肾脏组织细胞核的NF-κB P65、TNF-α和VCAM-1蛋白水平显著高于对照组(P<0.01)。与Ig AN模型组相比,模型加药组大鼠肾脏组织细胞核的NF-κB P65、TNF-α和VCAM-1蛋白水平明显下降(P<0.05)。结论淫羊藿苷可改善Ig AN大鼠纤维化水平并抑制炎症反应。     

淫羊藿苷对大鼠血管平滑肌细胞钙化的抑制作用

目的:研究淫羊藿苷(Icariin)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的抑制作用。方法:组织贴壁法培养大鼠胸主动脉VSMCs,取5-8代细胞分为对照组、钙化模型组和淫羊藿苷干预A、B、C组。对照组用DMEM培养基培养;钙化模型组用含10mmol/Lβ-甘油磷酸盐(β-GP)的DMEM培养基培养;干预A、B、C组均以钙化模型组为基础分别与10-6 mol/L、10-5 mol/L和10-4 mol/L Icariin的DMEM培养基共培养,茜素红-S染色法鉴定各组细胞钙化情况,硝基苯酚法测定各组细胞碱性磷酸酶(ALP)活性,RT-PCR检测各组细胞内骨保护素(OPG)和核因子κB(NF-κB)受体活化因子配体(RANKL)的mRNA水平,用Western blotting检测各组细胞OPG和RANKL的蛋白表达。结果:与对照组比较,钙化模型组VSMCs发生细胞钙化,并形成红色结节,ALP活性显著升高(P0.01),OPG、RANKL mRNA和蛋白表达均增加(P0.01);与钙化模型组比较,干预A、B、C组细胞钙化减少,ALP活性减低(P0.01),OPG、RANKL mRNA和蛋白表达均下调(P0.01),尤以干预B组效果最显著。结论:淫羊藿苷可能通过降低ALP活性及OPG、RANKL表达来抑制动脉钙化。     

淫羊藿苷调节细胞增殖作用的研究进展

淫羊藿苷是传统补益中药淫羊藿的有效活性成分之一,研究发现可影响多种细胞的增殖。淫羊藿苷主要促进骨组织相关细胞增殖,包括成骨细胞、软骨细胞、骨膜细胞、间充质干细胞,淫羊藿苷抑制多种肿瘤细胞增殖,包括骨肉瘤细胞、乳腺癌细胞和卵巢癌细胞等,淫羊藿苷亦可调节其他细胞的增殖,包括神经干细胞、平滑肌细胞等。但淫羊藿苷对细胞增殖促进和抑制的双重调节机制需要进一步研究,方能为其在细胞增殖紊乱相关疾病中的应用提供理论依据。     

淫羊藿苷对糖尿病大鼠阴茎组织细胞凋亡及亚硝基谷胱甘肽还原酶表达的影响

目的:探讨淫羊藿苷对糖尿病大鼠阴茎组织细胞凋亡以及亚硝基谷胱甘肽还原酶(GSNOR)表达的影响.方法:采用链尿佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型.分为正常对照组、糖尿病模型组、糖尿病淫羊藿苷干预组(高、中、低剂量分别为30、70、100 mg·kg-1·d-1,灌胃,连用21 d).TUNEL法检测阴茎组织细胞凋亡,免疫印迹检测GSNOR表达.结果:淫羊藿苷高、中剂量组阴茎勃起组织细胞凋亡指数降低,与模型组比较差异有统计学意义.淫羊藿苷干预组阴茎组织GSNOR蛋白表达增加,中、高剂量组与模型组比较差异有统计学意义.结论:淫羊藿苷能抑制糖尿病大鼠阴茎组织细胞凋亡并上调GSNOR蛋白表达.     

淫羊藿苷对糖皮质激素诱导的骨微血管内皮细胞损伤的保护作用

目的体外建立糖皮质激素诱导骨微血管内皮细胞（Human bone microvascular endothelial cell,HBMEC）损害的模型,研究糖皮质激素对HBMEC的损害情况;探讨淫羊藿苷（Icariin,ICA）对糖皮质激素所致HBMEC损伤的保护作用。方法HBMEC分离与体外培养,建立体外糖皮质激素杀伤细胞模型,用MTF法观察ICA对激素损伤的HBMEC活性的影响,测定细胞生存率,并对细胞进行台盼蓝染色以观察ICA对激素诱导的HBMEC坏死的影响。结果糖皮质激素诱导HBMEC损害,台盼蓝染色显示细胞损害为坏死而非凋亡,并呈现一定的浓度依赖和时间依赖性;ICA能保护激素诱导的HB—MEC损害,使细胞生存率明显提高,ICA能显著抑制激素诱导的内皮细胞坏死。结论ICA具有保护激素诱导的HBMEC损伤的作用,这为早期干预治疗激素性骨坏死提供了实验药理依据。     

淫羊藿苷调节雄性大鼠生殖功能

目的:探讨淫羊藿苷在环磷酰胺诱导的大鼠睾丸生精障碍动物模型中的作用,研究淫羊霍苷对睾丸功能的影响.方法:分为空白对照组、阴性对照组、模型组、淫羊藿苷治疗组;H-E染色观察睾丸组织结构变化,TUNEL方法检测睾丸生殖细胞凋亡,放射免疫法检测血清睾酮.结果:睾丸H-E染色切片观察显示模型组睾丸生精小管直径缩小,间距增宽,生精上皮变薄,生殖细胞数量减少,生精小管多未见精子形成,与空白对照组比较其生精小管结构变化显著;淫羊藿苷治疗组与模型组比较生精小管壁增厚,含有精子的生精小管明显增多.睾丸生精小管中生殖细胞凋亡的观察模型组与空白对照组比较其生殖细胞凋亡增多,变化显著;淫羊藿苷治疗组与模型组比较生精小管中生殖细胞凋亡数量明显减少.模型组与空白对照组比较血清睾酮明显降低;淫羊藿苷治疗组与模型组比较其血清睾酮明显增加.结论:淫羊藿苷对环磷酰胺诱导生精障碍的睾丸具有改善睾丸生精小管结构、减少生殖细胞凋亡、促进精子发生和间质细胞分泌睾酮的功能.     

淫羊藿总黄酮的药理学研究

目的 研究淫羊藿总黄酮(total flavonoids of epimedium,TFE)对人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用.方法 将人脐静脉内皮细胞体外培养、传代后随机分为六组:空白对照组、TFE模型组、溶血性磷脂酰胆碱(LPC)损伤组、LPC+TFE(50 mg/L)组、LPC+TFE(100 mg/L) 、LPC+TFE(200mg/L)组,比较淫羊藿总黄酮对内皮细胞损伤的作用.结果 TFE模型组与空白组比较,各组数据无明显差异;LPC损伤组中MDA值、LDH值和细胞内KOS水平较空白组显著增加,而NO含量降低;在加入LPC+TFE的三组中,随着TFE的浓度增加,细胞上清液中NO含量升高,MDA和LDH含量以及ROS水平降低.结论 淫羊藿总黄酮对内皮细胞损伤具有保护作用.     

淫羊藿苷防治血管性痴呆的实验研究

目的：观察淫羊藿苷(Icariin，ICA)对血管性痴呆(vascular dementia。VD)大鼠学习记忆的保护作用．探讨ICA防治VD的作用机制。方法：采用永久性结扎双侧颈总动脉的方法(2-VO法)以及脑缺血再灌注方法(I10-R10-I10)制作VD大鼠模型，利用Morris水迷宫检测ICA对大鼠空间辨别学习记忆能力的影响；用光化学法检测大脑皮层及海马组织中SOD活性、MDA和AChE含量．并检测大鼠血清中AChE的含量；用免疫组化方法检测海马内AChE及ChAT的水平，并通过图象处理软件进行定量分析；     

淫羊藿苷通过YAP促进大鼠关节软骨细胞增殖的研究

目的 研究淫羊藿苷（Icariin）通过yes相关蛋白（YAP）促进大鼠关节软骨细胞增殖的作用和机制。方法 采用细胞增殖实验、RT-qPCR和免疫荧光染色测定淫羊藿苷促进大鼠关节软骨细胞增殖的作用。采用RT-qPCR检测淫羊藿苷促进YAP表达的作用。通过沉默YAP基因的表达来确定YAP在细胞增殖中的作用以及淫羊藿苷是否通过YAP来促进细胞的增殖。结果 大鼠关节软骨细胞的增殖与YAP表达上调有关。淫羊藿苷能促进YAP表达和去磷酸化,使其进入细胞核内启动增殖相关基因的表达,从而促进软骨细胞增殖。结论 淫羊藿苷通过上调YAP表达以及激活YAP来促进软骨细胞增殖,可能有助于损伤软骨的再生修复。     

淫羊藿苷对哮喘影响的研究进展

哮喘是常见的呼吸道疾病之一,激素类药物因起效迅速、疗效确切而被广泛用于治疗哮喘,但其不良反应多,且哮喘的患病率仍呈逐年上升趋势。寻求新型抗炎药物用于联合甚至替代激素成为目前药物开发的主导方向。淫羊藿苷具有广泛免疫调节作用,可明显减轻气道炎症反应、改善哮喘症状,为联合用药治疗哮喘提供了新方向。本文结合国内外研究,综述淫羊藿苷在哮喘中的作用研究进展,从淫羊藿苷对哮喘气道高反应性、炎症反应（包括炎症类型、炎症细胞因子、转录分化、趋化因子受体等）和气道重塑等方面的影响进行论述,以期为治疗哮喘提供新思路。     

淫羊藿苷对缺血/再灌致神经元损伤的保护作用研究

目的 :观察淫羊藿苷对体外模拟缺血 /再灌致神经元损伤的保护作用 ,初步探讨其可能的作用机制。方法 :原代培养大鼠乳鼠大脑皮层神经元 ,分别在缺氧和缺糖 (6h) /再复氧和复糖培养后不同时间点 (0、3、1 2、2 4h)检测细胞活度、LDH活性、细胞凋亡率和细胞内游离钙离子浓度。结果 :淫羊藿苷 0 .2 5、0 .5和1mg·L 1明显减轻缺氧和缺糖 /复氧和复糖致神经细胞损伤 ,提高神经元MTT值 ,减少乳酸脱氢酶释放 ,减少凋亡和抑制细胞内游离钙离子浓度的升高。结论 :淫羊藿苷具有保护神经元抵抗模拟缺血性损伤的作用 ;其阻止细胞内钙离子超载可能是…     

中药淫羊藿苷抑制肝癌HepG2.2.15细胞增殖和免疫逃逸作用研究

目的:观察中药淫羊藿苷(ICA)对HepG2.2.15细胞增殖及对CD3AK细胞杀伤活性的影响,探讨ICA对肝癌细胞Fas/FasL途径免疫逃逸的逆转作用,为ICA的开发应用提供新的理论和实验依据.方法:MTT法检测细胞增殖和细胞杀伤活性;流式细胞术检测细胞表面分子表达水平和细胞凋亡率.结果:50 μg/mlICA作用HepG2.2.15细胞48、72小时的增殖抑制作用明显,抑制率分别为22.04%、29.68%(P＜0.05),呈时间依赖效应.HepG2.2.15细胞经ICA处理后,FasL的表达率由16.22%显著下降至8.29%,Fas表达率由0.79%提高到1.70%(P＞0.05).ICA可明显抑制HepG2.2.15细胞诱导Jurkat细胞凋亡,凋亡率从46.66%下降为18.20%.ICA处理HepG2.2.15细胞后,不同效靶比的CD3AK细胞的杀伤活性,可分别由对照组的15.81%、35.04%、42.85%显著提高至42.58%、67.55%、88.93%(P＜0.05,P＜0.01),呈效靶比依赖效应.结论:ICA能有效地抑制HepG2.2.15细胞增殖,并有一定时间依赖效应;ICA可下调FasL的表达,上调细胞表面Fas的表达,对HepG2.2.15细胞诱导的T淋巴细胞凋亡作用有一定阻断,逆转肿瘤细胞的免疫逃逸作用;ICA显著增强HepG2.2.15细胞对CD3AK细胞杀伤的敏感性.     

淫羊藿苷对化疗后小鼠骨髓和细胞免疫抑制作用的影响

目的:观察淫羊藿苷(ICA)对环磷酰胺(Cy)所致小鼠骨髓和免疫抑制作用的影响,探讨ICA促进化疗后小鼠造血功能和免疫功能的作用及机制。方法:将小鼠随机分为6组:正常对照组,模型组,阳性对照组,ICA高、中、低剂量组。除正常对照组小鼠外,其余各组小鼠均腹腔注射Cy(200mg/kg)。第2天开始,对ICA高、中、低剂量的实验组小鼠灌胃不同剂量的ICA(150、80、40mg/kg.d),阳性对照组小鼠尾静脉注射参芪扶正注射液(1mL/d),模型对照组给予等量生理盐水,连续给予10d。经HE染色后观察小鼠胸腺组织结构的变化。用MTT比色法检测脾淋巴细胞的增殖率。用乳酸脱氢酶(LDH)法检测腹腔巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤能力。用ELISA试剂盒检测混合细胞培养上清中TNF-α和IL-12的含量。用全自动血液分析仪检测外周血红细胞、白细胞和血小板数量的变化;外周血和股骨骨髓涂片经瑞氏-吉姆萨染色后,光镜下计数单根股骨骨髓细胞(BMC)的数量。结果:ICA具有保护小鼠胸腺、骨髓免受Cy损伤的作用。不同剂量的ICA组小鼠的脾淋巴细胞增殖能力增加,巨噬细胞吞噬能力和分泌细胞因子的能力均增强,外周血红细胞、白细胞和血小板数量均明显上升。结论:ICA可逆转Cy化疗后小鼠骨髓造血和免疫功能的抑制状况。     

淫羊藿苷(ICA)对化疗后免疫抑制小鼠的免疫促进作用

目的:通过观察淫羊藿苷(ICA)对化疗药环磷酰胺(Cy)所致免疫抑制小鼠免疫功能的影响,探讨ICA促进免疫功能的作用及机理.方法:除正常组小鼠外,所有小鼠经腹腔注射Cy(300 mg/kg);第二天开始给予实验组小鼠灌胃不同剂量的ICA[150、80、40 mg/(kg·d)],阳性对照组小鼠尾静脉注射参芪扶正注射液(1 ml/d),模型组给予等量生理盐水,连续干预10天.所有小鼠均于末次给药12小时后处死,计算胸腺指数(TI)和脾指数(SI),光镜下计数外周血和脾淋巴细胞数量.MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖反应.ELISA法检测TNF-α的含量.乳酸脱氢酶实验(LDH)检测小鼠脾脏NK和CTL细胞的活性.流式细胞术(FACS)检测脾淋巴细胞中NKT和CD3+T细胞的比例.结果:模型组小鼠以上各项免疫指标均有所下降.ICA处理组小鼠脾脏指数和胸腺指数均升高(P<0.01),脾淋巴细胞数量显著增加(P<0.01),但未达到正常对照组水平;ICA明显提高小鼠脾淋巴细胞的增殖反应,促进了小鼠脾NK和CTL细胞对肿瘤细胞的杀伤活性(P<0.01),提高了小鼠脾细胞TNF-α的产生(P<0.01).ICA处理组小鼠脾细胞中CD3+T、NKT细胞比例明显增加(P<0.01).结论:ICA能促进小鼠免疫功能,具有逆转化疗后小鼠免疫抑制状态的作用.     

淫羊藿苷对过载损伤后成骨细胞凋亡和骨架的影响

目的研究淫羊藿苷对过载损伤后成骨细胞的凋亡和细胞骨架的影响。方法应用4点弯曲加载装置模拟过载损伤力学环境,建立过载损伤模型,依据力学加载前后是否加入药物干预,实验分为空白对照组、单纯给药组、单纯损伤组、预防给药组和损伤治疗组。应用细胞流式术进行细胞凋亡检测。应用特异性荧光染料分别标记微丝蛋白和细胞核,在激光共聚焦显微镜下观察细胞骨架的变化。结果与对照组比,过载损伤组的凋亡率最高,单纯给药组最低(P0.05);在过载处理组中,与单纯过载损伤组比,预防给药组的凋亡率最低(P0.05)。单纯过载损伤组的细胞皱缩变形,微丝排列紊乱,骨架排列疏松,轮廓模糊,骨架甚至出现破碎等现象。预防给药组细胞骨架形态变化不大,细胞核未见明显变化。结论淫羊藿苷可以在一定程度上抑制过载损伤后成骨细胞的凋亡,维持细胞骨架稳定。     

淫羊藿对骨的作用研究进展

淫羊藿 (HerbaEpimdii)为小檗科植物 ,又名仙灵脾、三枝九叶草等 ,具有“补肾壮阳 ,益精健骨”之功效。淫羊藿多糖、淫羊藿苷、淫羊藿甙和黄酮类为其主要成份[1 ] 。淫羊藿的作用广泛 ,如对心血管系统、中枢神经系统、血液系统、免疫系统、抗炎、抗骨质疏松、抗衰老、抗肿瘤等均有作用 ,本文就其对骨的作用的研究现状作一综述。一、淫羊藿对成骨细胞增殖与分化的影响成骨细胞是蛋白分泌型细胞 ,能产生Ⅰ型胶原 ,合成分泌骨基质 ,具有高碱性磷酸酶 (ALP)活性 ,并能吸收和转运钙离子 ,是骨形成和骨再建的重要功能细胞。目前认为 ,ALP活性…     

CaSR在淫羊藿苷诱导的胚胎干细胞向心肌细胞分化中的作用

 目的: 观察钙敏感受体(calcium sensing receptor,CaSR)对淫羊藿苷(ICA)诱导小鼠胚胎干细胞向心肌细胞分化的影响。方法: 129小鼠ES-D3细胞经直接悬浮法形成拟胚体(EBs),应用ICA定向诱导,透射电镜观察分化细胞的超微结构;免疫荧光和Western blot分别检测细胞有无α-辅肌动蛋白(α-actinin)和肌钙蛋白I(cTnI)的表达;流式细胞术检测细胞分化率;Western blot检测心肌特异转录因子NKx2.5、GATA-4和CaSR的蛋白表达。结果: ICA诱导2 d后,可见自发性收缩的细胞簇;随着诱导分化时间的延长,α-actinin和cTnI蛋白的表达逐渐增多;CaSR、NKx2.5和GATA-4蛋白在分化早期表达最多,持续表达至晚期;电镜观察分化细胞中可见连接结构、肌丝;CaSR激动剂新霉素能够增加早期EBs中CaSR、NKx2.5和GATA-4的表达,CaSR抑制剂NPS2390能够阻断上述作用。结论: CaSR在胚胎干细胞分化的心肌细胞中有表达,CaSR活化可通过增加NKx2.5和GATA-4的表达促进心肌细胞的分化。     

淫羊藿抗心室颤动作用及其机理研究

在本项研究中,我们发现淫羊藿能有效防止心室颤动的发生,且有显著的对抗ISO 而提高小白鼠耐缺氧能力。     

淫羊藿苷对前列腺癌细胞株活力、迁移与侵袭的作用

目的:探讨淫羊藿苷对前列腺癌细胞株Du145与PC3的存活、迁移与侵袭能力的影响,并初步研究其机制。方法:CCK-8法检测不同浓度淫羊藿苷(0、5、10、20、40和80μmol/L)对Du145细胞与PC3细胞活力的影响;Transwell小室实验检测细胞的迁移和侵袭能力;Western blot检测Notch-1、MMP-2、MMP-9和Hes-1蛋白水平。结果:MTT法检测结果显示淫羊藿苷呈浓度依赖性抑制Du145与PC3细胞的活力,当浓度到达40μmol/L时,抑制作用达到最大;经淫羊藿苷干预后,Du145和PC3细胞迁移和侵袭能力显著下降,Notch-1、MMP-2、MMP-9和Hes-1蛋白表达水平显著下降。结论:淫羊藿苷具有抑制前列腺癌细胞株Du145与PC3生长、迁移和侵袭的作用,其作用机制可能与淫羊藿苷抑制Notch-1、MMP-2、MMP-9和Hes-1蛋白的表达有关。