大鼠肠神经系统乙酰胆碱酯酶和抗氟化物酶性磷酸酶双染法研究

用抗氟化物酸性磷酸酶作为感觉神经元的化学标志物。同时结合乙酰胆碱酯组织化学方法，对大鼠小肠壁神经结构进行了组织化学观察。结果发现了三种不同染色的神经元：（１）乙酰胆碱酯酶阳性神经元；（２）抗氟化物酸性酸酶单染神经元；（３）乙酰胆碱酯酶－抗氟氟化物酸性磷酸酶以染神经元。     

大鼠肠肌丛胆碱酯酶和亮氨酸脑啡肽双染法研究

应用酶组织化学和免疫组织化学双染法,对大鼠肠肌丛内胆碱酯酶阳性和亮氨酸脑啡肽神经元进行了研究.在同一张标本上同时显示胆碱酯酶阳性和亮氨酸脑啡肽神经元,后者用二盐酸联苯胺作显色剂.结果观察到三种不同染色的神经元:(1)胆碱酯酶阳性神经元;(2)亮氨酸脑啡肽单染神经元;(3)胆碱酯酶-亮氨酸脑啡肽双染神经元.并同时统计了30个肌间神经节,发现平均每个肌间神经节含这三种神经元的数目依次为8.33,0.07和2.40.以上结果提示亮氨酸脑啡肽可以与乙酰胆碱共存于经典的胆碱能神经元.本文还对大鼠肠肌丛内.胆碱能神经元的类型及其与脑啡肽神经元之间的关系进行了讨论.     

银杏内酯对大鼠基底前脑神经元生长发育的影响

目的：观察银杏内酯对培养的胚胎大鼠基底前脑胆碱能神经元和NADPH-d阳性神经元生长发育的作用。方法：取E17Wistar大鼠胚胎基底前脑进行体外细胞培养，并给予银杏内酯。进行乙酰胆碱酯酶(acetyl cholinesterase，AChE)和NADPH-d酶组织化学染色，并在光镜下进行阳性细胞计数和显微测量胞体及突起发育状况。结果：给予银杏内酯处理后，培养物中乙酰胆碱酯酶阳性神经元和NADPH-d阳性神经元数量均较对照组显著增加，且神经元发育状况好于对照组，胞体大，突起多且长。结论：银杏内酯可以促进体外培养的基底前脑神经元中乙酰胆碱酯酶和NADPH-d的表达，并能促进表达这两种酶的神经元生长发育。     

实验性溶血性贫血对大鼠脾脏影响的组织学与组织化学研究

本文用组织化学方法研究乙酰苯肼(APH)所造成的动物体内急性溶血性贫血对大鼠脾脏的影响,系统地观察了脾脏内酶的活性变化,并用显微分光光度计对巨噬细胞内抗氟化物酯酶的活性进行了定量测定。实验结果表明: 1.注射APH后,随着脾小体缩小和淋巴细胞的减少,脾脏白髓和红髓的琥珀酸脱氢酶、谷氨酸脱氢酶活性逐渐降低,第9天最低,第13天有所恢复。 2.实验动物脾红髓的葡萄糖-6-磷酸酶活性于第3～6天时有所下降,第9天上升至接近正常,第13天稍高于正常水平。 3.注射APH后,脾红髓的酸性磷酸酶和三磷酸腺苷酶活性于实验第6天开始明显增强;非特异性酯酶和抗氟化物酯酶的活性于第3天开始增强,并与注射APH的次数相平行。显微分光光度计测定结果表明,实验动物脾脏巨噬细胞内的抗氟化物酯酶活性于第3,6,9,13天时分别为正常动物的7.4、9.5、20.3和9.4倍。上述酶活性的增强是与巨噬细胞吞噬消化功能的增强相适应的。     

新农药川化018对连继染毒大鼠后代的毒性试验(摘要)

本试验以甲状腺组织学、酶活性组织化学及甲状腺功能等检查为主要指标,观察了新农药川化018[N、N′—甲撑一双—(2—氨基—5—巯基—13.4—噻二唑,]及其“中间体”(2—氨基—5—巯基1.34—噻二唑)对繁殖试验仔一代第二窝后代的慢性毒性。实验发现,川化018(500PPM)及其“中间体”(250PPM)可使甲状腺组织明显增生,所测酶组织化学指标,除酸性非特异性酯酶正常,乳酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、单胺氧化酶、过氧化物酶、乙酰胆碱酯酶,葡萄糖—6—磷酸酶,酸性磷酸酶等都出现不同程度活性增高。而川化018低剂量组(5PPM)与正常对照组未见差异。     

听源性癫痫大鼠海马的酶组织化学研究

本文以AS大鼠为实验动物,以同品系的正常大鼠作对照,用酶组织化学方法研究AS大鼠癫痫发作时海马内与能量代谢有关的琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞免素氧化酶(CCO)、乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pasc)、镁离子激活的腺苷三磷酸酶(Mg2+-ATPase)、钙离子激活的腺苷三磷酸酶(Ca2+-ATPase)以及单胺类递质的失活酶—单胺氧化酶(MAO)和胆碱类递质的失活酶—乙酰胆碱酯酶(AChE)的酶活性,并按生物体视学方法分析Mg2+-ATPase和Ca2+-ATPase法显示的海马微血管密度;另取实验大鼠和对照大鼠海马作振动切片,用AChE组织化学方法显示海马…     

成年大鼠海马神经元酸性磷酸酶活性的表达

海马是学习与记忆的关键部位和重要的调控中心,与情绪、行为、内脏机能活动和镇痛等方面有密切关系。海马神经元酶活性的表达及改变直接影响海马神经元的功能状态。由于同龄大鼠海马各区神经元酸性磷酸酶(ACP)活性表达的报道较少。本实验选用健康Wistar成年大鼠,采用酶组织化学方法观察了成年大鼠海马神经元酸性磷酸酶活性的表达,从中探讨海马生理功能。实验选用健康Wistar成年大鼠10只,断头取脑,选取海马组织冠状位切片(-20℃恒冷箱)。按Gomori氏硝酸铅改良法进行酸性磷酸酶染色。实验结果表明:海马CA3区神经元ACP活性最强,依次为CA2…     

大鼠回肠肌间神经丛内一种特殊类型的神经元

实验用乙酰胆碱酯酶和一氧化氮合成酶组织化学方法,对１０只大鼠回肠肌间神经丛进行研究。发现肌间神经丛的一些神经元,沿毛细血管周围分布,有的甚至与毛细血管壁相紧贴,将其称为毛细血管周神经元。这些神经元胞体呈梭形,梨形或多角形,均呈一氧化氮合成酶阳性反应,而乙酰胆碱酯酶反应阴性。这种神经元类似于中枢神经系统的接触脑脊液神经元,它们可能具有神经分泌或感受血液中某些化学成分成分变化之功能。     

肝部分切除后再生期间肾上腺皮质的组织化学变化

本研究观察了成年大鼠肝大部切除后1、3、6天肾上腺皮质的组织化学变化。结果表明,MAO(单胺氧化酶)、SDH (琥珀酸脱氢酶)、G6PD(葡萄糖-6-磷酸脱氢酶)、脂类、AlP (碱性磷酸酶)、ATPase (腺苷三磷酸酶) 均有不同程度的变化,而AcP (酸性磷酸酶)、5′-Nase(5′-核苷酸酶)、NsE(非特异性酯酶) 无明显变化。     

房室结区神经结构的组织化学研究

Wistar大白鼠20只,10例用于胆碱酯酶(AchE)组织化学反应.在房间隔内发现AchE阳性神经元,该神经元发出神经纤维延续至房室结及房室束.该结果证实房室结及房室束区副交感神经纤维来源于房间隔内的胆碱能神经元.另外10例行单磷酸硫胺素酶(TMPase)和抗氟酸性磷酸酶(FRAP)组织化学染色,观察到房室结周围区存在(TMPase)阳性神经细胞,室间隔上部近房室结区存在FRAP阳性神经细胞.该二类神经元可能系房室结区局部神经调制结构.     

切断坐骨神经后相应节段脊神经节和脊髓胶状质抗氟化物酸性磷酸酶(FRAP)与乙酰胆碱酯酶(AChE)双重染色及实验研究

在正常组大鼠脊神经节中,除小神经元(B)外,发现少数大神经元(A_1)也呈浓染的FRAP阳性反应;A_1内的FRAP与脊髓胶状质内FRAP的关系,尚待研究。切断坐骨神经后,双重染色显示,脊髓胶状质FRAP活性缺失处,AChE活性仍然存在,可能说明胶状质的AChE活性与一级传入神经元外周突损伤及溃变无紧密关系。切断坐骨神经后继以电针刺,则FRAP活性缺失的范围较单纯切断坐骨神经者为小,提示:电针刺似能减轻切断坐骨神经所致的脊髓胶状质FRAP活性缺失。     

一氧化氮合酶与乙酰胆碱酯酶在大鼠心内神经节细胞共存的组化研究

用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷磷酸黄递酶反应，结合乙酰碱酯酶组化技术，观察了Ｗｉｓｔａｒ大鼠房后壁内神经节，发现节内存在还原型尼克酰胺泉嘌呤二核苷磷酸黄递酶反应阳性细胞；少量细胞极度深度，并在深染细胞中发现有双突起的细胞：多数轻、中度着色的细胞浆内有蓝色颗粒和棕色反应。     

毁损Meynert基底核造成皮层及海马的乙酰胆硷酯酶减少行为学和形态学研究(英文)

本研究通过毁损Ｍ ｅｙｎｅｒｔ基底核（ｎｂＭ ）建立Ａｌｚｈｅｉｍ ｅｒ氏病（ＡＤ）动物模型。用乙酰胆硷酯酶（ＡＣｈＥ）细胞化学方法对模型动物大脑皮层及海马进行反应，评价ＡＣｈＥ 与ＡＤ 之间可能存在的关系。将４８ 只大鼠分成对照组及实验组，用Ｍｏｒｒｉｓ 水迷宫（ＭＷ Ｍ ）测定行为学变化。在实验组，以局部注射海人藻酸的方法毁损ｎｂＭ 。术后７ ｄ，再次检测其行为学变化。存活不同时间后，用ＡＣｈＥ 酶细胞化学技术染色脑切片，用图象分析系统测算海马层ＡＣｈＥ阳性神经元及纤维的体积密度。结果显示，毁损ｎｂＭ 鼠皮质及海马的ＡＣｈＥ阳性神经元纤维明显减少，其特征为片层结构缺失。这些变化在毁损ｎｂＭ 鼠３～４ 个月及９～１０ 个月组间无显著差异。本研究证明，毁损ｎｂＭ 出现的ＡＣｈＥ减少与ＡＤ 的发生关系密切，且与同一动物模型β 淀粉样蛋白及τ蛋白过度表达在时间上一致，后者是ＡＤ 病人的特征。     

鸡胚海马AChE阳性神经元的分布及发育

用乙酰胆碱酯酶组织化学法观察了14、16、18、20d胚龄的鸡海马中乙酰胆碱酯酶阳性神经元的分布和发育。实验表明，海马前区、隔海马区、海马背内侧区、海马背外侧区、背海马、旁海马区中，从16d胚龄开始出现乙酰胆碱酯酶阳性神经元，这些阳性神经元随胚龄增加发生迁移，形态由圆形到多形，胞体由小变大，密度也发生变化。乙酰胆碱酯酶阳性反应神经元可分为强阳性、中等阳性及弱阳性三种。随胚龄增加，海马大部分区域阳性反应由弱到强，16、18d胚龄反应最强，20d胚龄反应减弱。本文对此变化的意义进行了探讨，认为乙酰胆碱酯酶在鸡胚海马发育的一定阶段具有神经营养因子的作用。     

胚基底前脑原位移植与靶区移植对修复Alzheimer病鼠的影响

本文用使君子酸(quisqualic acid,QA)分两点注入Sprague-Dawley大鼠左侧基底大细胞核制成Alzheimer病动物模型。破坏1周后,一组动物将同种胚基底前脑悬液注入模型鼠的额叶和顶叶,另一组动物则将胚基底前脑悬液原点注入破坏区。移植后5个月行为测试被动回避试验及主动回避试验,与破坏后1周的测试结果相比有显著性差异(p<0.05),表明移植后行为有明显改善。但两组动物移植后行为改善的程度无明显差异。形态学观察发现两组动物移植区均有AChE阳性神经元及阳性纤维终末形成的斑片。原位移植区范围较皮质移植区略大,移植区所见AChE阳性神经元形态与正常基底大细胞核的细胞相似。实验结果表明原位移植亦能获得与靶区移植同样的效应,提示基底大细胞核区在受损后可能产生某种神经营养因子,促进了胚脑细胞的存活。Alzheimer病模型鼠机能的恢复不一定与神经网络的重建有关,而与具有产生ACh递质的内源性微泵有关。     

An immunohistochemical study of the distribution of nitric oxide synthase-immunoreactive neurons and fibers in the reticular groove of suckling lambs

The reticular groove (RG) is a specialized region of ruminant forestomach which, in suckling animals, via a vagovagal reflex, transforms itself into a tube to ensure the direct transport of milk from the esophagus to the abomasum. The nervous mechanism controlling the RG movement is not fully understood; however, at this level, the enteric nervous system (ENS) shows the highest neuronal density when compared with other forestomach compartments. Because nitric oxide is considered the putative major mediator of non-adrenergic non-cholinergic smooth muscle relaxation, the aim of the present study was to investigate the ENS of the RG of suckling lambs, both in the floor and in the lip, with particular regard to nitric oxide synthase (NOS)-immunoreactivity (-IR), by means of double immunohistochemical staining. NOS antiserum was used in association with some neurochemical markers which have been utilized by many authors in ENS. A rich innervation of fibers extended along the entire length of the RG. Proceeding distally, the number of neurons stained with a pan-neuronal marker increased; they were more numerous in the lips and lip-floor junction than in the floor itself. However, the percentage of NOS-IR neurons was the same in the proximal and distal parts. Many NOS-IR neurons often co-expressed galanin and dopamine β-hydroxylase. Neurochemical markers, such as calbindin, calcitonin gene-related peptide, IB4 and neurofilament 200 kDa, usually used to identify primary sensory neurons were not expressed in RG neurons, and the co-localization of NOS with tyrosine hydroxylase and substance P was rarely found. When compared with other districts, the RG showed some peculiar aspects, such as the lack of both neurons in the submucosal plexus and the lack of typical sensory neurons.     

神经节苷脂GM_1对胚基底前脑移植入Alzheimer病鼠的影响

用使君子酸毁损大鼠左侧基底大细胞核,制成Alzheimer病模型鼠。2周后进行移植,移植组分单纯胚基底前脑细胞悬液移植组(ST组)和含单唾液酸神经节苷脂(GM_1)的胚基底前脑悬液移植组(GM_1组)。移植后2月、6月行为测试发现,两移植组学习和记忆行为均有改善,GM_1T组行为指标在2月和6月时均与模型组有显著差异。而与正常组无显著差异;ST组仅在6月时与GM_1T组相似。GM_1T组动物在移植前后进行了体感诱发电位检测,结果发现移植前损毁侧正常出现的10 ms正波消失,而在移植后2月和6月时此波重新出现或潜伏期呈轻或中度延长。形态学观察发现,破坏后1周或6月时破坏侧基底大细胞核的AChE阳性细胞大部消失,同侧额、顶叶皮质AChE阳性纤维和终末明显减少。GM_1T组移植区较ST组移植区大。GM_1T组移植区AChE阳性细胞较ST组多而且突起长。两组均见有ChAT免疫阳性细胞。实验表明GM_1能保护植入受体脑内的胚脑细胞并促进它们在受体脑内发育生长并发挥功能效应。     

BDNF、NGF对AD模型鼠脑移植区一氧化氮合酶阳性神经元发育生长的影响

用使君子酸（ＱＡ）损毁ＳＤ 大鼠左侧Ｍ ｅｙｎｅｒｔ基底大细胞核,制成老年性痴呆症（ＡＤ）模型。将同种鼠胚基底前脑制成的细胞悬液不加神经营养因子和分别加入脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）、神经生长因子（ＮＧＦ）及ＢＤＮＦ＋ ＮＧＦ者植入ＡＤ 模型鼠额、顶叶皮质,隔日通过脑室灌注人工脑脊液和相应神经营养因子共７ 次。移植后４ 个月,取脑切片作Ｎｉｓｓｌ染色、ＮＡＤＰＨ ｄ和ＮＡＤＰＨ ｄ＋ ＡＣｈＥ 组化染色,计数移植区中ＮＯＳ阳性神经元数及其纤维在１６９００ μｍ ２ 网格中的交点数,并用ＭＩＡＳ ３００ 计算机图像分析系统对移植区中ＮＯＳ阳性神经元的细胞面积进行处理。结果显示：给予神经营养因子的动物,移植区中的ＮＯＳ阳性神经元数、ＮＯＳ阳性纤维交点数和ＮＯＳ阳性神经元的细胞面积等形态学指标均较不给予神经营养因子的对照组为佳,而在应用神经营养因子的各组中又以ＢＤＮＦ＋ ＮＧＦ组为优,提示ＢＤＮＦ、ＮＧＦ能促进移植区中ＮＯＳ阳性神经元的发育生长,ＢＤＮＦ与ＮＧＦ联合使用可发挥协同作用。本文对ＢＤＮＦ和ＮＧＦ促进移植区中ＮＯＳ阳性神经元发育生长的机制进行了探讨。