一株疑似沙门菌的蜂房哈夫尼亚菌分离与鉴定

[目的]对实验中发现的一株与沙门菌属诊断血清A-F群O多价血清发生凝集反应的蜂房哈夫尼亚菌进行较详细的生化鉴定。为今后的相关细菌鉴定工作提供参考。[方法]参考国家食品卫生检验标准微生物分册GB/T4789—2008方法进行。[结果]该蜂房哈夫尼亚菌株的培养特性、初步生化反应与沙门菌极相似,且与沙门菌属诊断血清A-F群O多价血清存在凝集反应,其最后判断主要依赖全面系统的生化反应结果。[结论]该菌株为蜂房哈夫尼亚菌,若不进行较详细的生化鉴定易误检为沙门菌。     

吴江市1997—2001年186株沙门菌的菌型鉴定

在肠杆菌科中沙门菌是一个重要菌属。该菌属分布面广,且可通过各种方式感染动物与人,常见的可使人引起伤寒、副伤寒、食物中毒及急性肠胃炎等病。为了了解我市沙门菌菌型的分布情况,进一步搞好卫生防疫工作,我们对1997～2001年检验工作中分离收集的186株沙门菌进行了血清分型鉴定,现将鉴定结果报告如下。     

15株沙门菌的鉴定中2株疑难菌株的报告

沙门菌是人畜共患病的病原菌[1],也是在夏秋之际引起食物中毒的病原菌之一[2-3]。该菌是发现较早,研究较深的一种病原菌,国际上至今已发现2000多种,国内也有200多种。我们地区情况如何?故将近年来我们瓯海区检到的15株沙门菌予以鉴定,在鉴定中对2株疑难菌株,我们使用了经典方法与现代化检测技术后,予以确诊,今将鉴定经过与结果报告如下。1 材料与方法1.2 菌株来源 系肠道门诊及饮食行业等人员中检到。1.2 方法1.2.1 常规鉴定 （1）菌株→普通琼脂平板→克氏双糖铁琼脂（包括生化试验,血清学分型） （2）诱导及返祖试验[4] 菌株:0.8％软琼脂平板菌株:作返祖及促使其鞭毛发育良好,以作鉴定用。当仅出现一相抗原时,用该相血清加入软凉脂上,待血清干后,用白金针将待鉴菌点种于该血清中心,次日,取其边缘菌苔,用另一相血清凝集之,如另一相未出现,则再用同法操作之,每试验一次,即     

一株与沙门菌性状非常相似的鲍氏志贺菌鉴定结果分析

[目的]探讨在CHROMagar沙门菌显色培养基上与沙门菌性状特征非常相似的鲍氏志贺菌的鉴定方法。[方法]对CNAS提供的样本运用科玛嘉沙门菌显色培养基,并结合生化反应、血清凝集试验和噬菌体裂解试验等检验技术进行食源性肠道致病菌分离鉴定。[结果]从CNAS提供的样本中分离出的鲍氏13型志贺菌无论在科玛嘉沙门菌显色培养基上生长的菌落形态,还是部分生化反应试验结果、噬菌体试验结果都与沙门菌非常相似,须借助血清凝集试验才能正确鉴定。[结论]应综合详细生化反应、血清凝集试验和噬菌体裂解试验等检验技术更妥善的鉴别细菌种属。     

国内首株克雷米尤沙门菌的分离鉴定

2006年6月在江苏省海安县腹泻患者送检的粪便中，分离到一株血清型（6，8：e，h：1，6）克雷米尤沙门菌，该菌型在国内未见报道。现将鉴定结果报告如下。     

1株类伤寒沙门菌的分离鉴定

伤寒沙门菌是引起人类伤寒的病原菌。最近,本实验室分离到1株正常情况下对人不致病但与伤寒沙门菌性质十分相似的蜂房哈夫尼亚菌,对伤寒沙门菌的诊断起有干扰作用,现将报告如下。     

复合PCR鉴定沙门菌的方法

沙门菌属于肠杆菌科，是具有鞭毛、能运动的革兰阴性杆菌，而且它是导致食源性疾病的主要病原菌之一。为了加强口岸执法管理、缩短检验检疫流程和提高检验检疫工作效率，本实验拟建立复合聚合酶链反应快速检验鼠伤寒沙门菌的方法，以求提高检验工作准确性和速度。本实验在参考国内外文献的基础上，设计了两对引物，建立了较稳定的PCR检测系统。本实验中，使用了不同的菌株作为比较，证实了系统特异性良好，并且从不同的食品来源检出的沙门菌，皆能被本实验系统鉴定检出。使用复合PCR技术，能快速、准确的鉴定肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌，并且较之经典的鉴定方法，时间上提前了2—3d。     

154株沙门菌菌型鉴定报告

沙门菌感染是常见的肠道传染病.沙门菌不仅感染人、畜、家禽而且还污染食品.因此,与人体健康有着密切的关系.搞清沙门菌菌型的分布情况,对流行病学、临床医学、兽医学以及预防食物中毒等都有重大的意义.为此,我们将自1990年以来分离的沙门菌分型鉴定结果报道如下.     

10株沙门菌分型鉴定及药敏试验

沙门菌是人群中重要的肠道传染病病源,其菌型多样,致病性具有种系特异性.该菌属不仅能引起人类沙门菌感染,而且也常引起家禽的沙门菌感染,并且污染食物引起食物中毒.了解该菌属的菌型分布及生物学特性,掌握菌型变迁规律和抗菌药物情况,对防治沙门菌感染,搞好食品卫生管理及预防食品中毒有着十分重要的意义.本文对温州市疾病预防控制中心2002年健康人群体检中获得菌株进行血清分型及药敏试验.现报告如下.     

沙门菌鉴定卡的研究与开发

目的:研究沙门菌快速简易的鉴定方法,并开发出具有应用价值的沙门菌鉴定卡。方法:应用硫化氢琼脂(H2S)、赖氨酸琼脂(LDC)、TTC琼脂(M)、甘露醇琼脂(MAN)、β-半乳糖苷琼脂(ONPG)、蔗糖琼脂(SAC),作为沙门菌鉴定的系列生化制备成鉴定卡。对22株标准菌种和72株本室分离的菌种进行鉴定,并进行了样品检测菌株的鉴定。结果:鉴定卡对菌种的鉴定表明沙门菌在鉴定模式之内;非沙门菌在鉴定模式以外,符合率达100%;样品检测表明鉴定卡和常规法结果一致,符合率也达100%。结论:该鉴定卡敏感性高、特异性强,而且操作简便,鉴定快速。     

沙门菌血清及脉冲场凝胶电泳分型

目的 分析吉林省食品中分离的沙门菌血清型和脉冲场凝胶电泳(PFGE)型别,探讨吉林省食品中沙门菌污染的同源性。方法 于2011年3月-2012年4月,对从市售生鸡肉和中式凉拌菜中分离出的28株沙门菌进行血清学和PFGE分子分型,采用BioNumerics version 6.0软件分析比较同源性。结果 28株沙门菌血清型分别为15株肠炎沙门菌、4株印弟安纳沙门菌、2株猪伤寒沙门菌、2株亚利桑那菌和5株血清未定型沙门菌;PFGE结果主要分为4个大群,其中1群包括14株,相似度为87.3%~100%;2群包括7株,分为2个亚群,2A亚群包括6株,相似度为91.9%~100%,2B亚群1株,相似度为73.6%; 3群包括3株,相似度为88.9%~100%;4群包括4株,分为2个亚群,4A亚群包括3株,相似度为84.6%~94.7%,4B亚群1株,相似度为72.7%。结论 吉林省食品中沙门菌血清型以肠炎沙门菌为主;PFGE结果显示相同血清型别菌株具有高度同源性。     

食品中沙门氏菌血清及PFGE分型研究

目的了解吉林省食品中分离的沙门氏菌血清型与脉冲场凝胶电泳（PFGE）基因分型,探索沙门氏菌的分子多态性。方法将从市售鸡肉、鸡胴体、中式凉拌菜及婴儿配方奶中分离出的10株沙门氏菌进行血清学分型、PFGE分子分型,BioNumerics version软件分析比较同源性。结果 10株沙门氏菌血清型分别为4株肠炎沙门氏菌,3株里定沙门氏菌,2株阿贡纳沙门氏菌和1株雷摩沙门氏菌。PFGE聚类分型结果主要分为4型：1型4株,相似度超过95%;2型3株,又分2个亚型,亚型间的相似度为78%;3型2株,相似度为100%;4型1株。结论吉林省食品中沙门氏菌具有不同血清学及PFGE型别,相同来源和血清型的菌株PFGE型别显示高度同源性。     

一起鼠伤寒沙门菌引起食物中毒的病原学鉴定

沙门菌引起的食物中毒,在细菌性食物中毒中最为常见,尤以鼠伤寒沙门菌为主.2009年6月19日中午阆中市民举办婚宴,就餐后陆续有38人出现发热、恶心、呕吐、乏力、腹泻等症状.首例患者发病时间为19日18时30分,末例发病时间为20日17时,发病高峰时间为19日晚20时.38例患者中年龄最大的70岁,最小的6岁.调查发现患者均食用凉菜,未食用凉菜者不发病.38例患者主要临床表现为发热、恶心、呕吐、头晕、乏力、寒战、腹泻症状.患者均到阆中市人民医院就诊治疗,经抗菌治疗,7 d内全部出院,无死亡病例.根据流行病学调查,结合临床症状及实验室病原学诊断,确诊为一起由鼠伤寒沙门菌感染所致的食物中毒,现将实验室病原菌的分离鉴定结果报告如下.     

福建省50株沙门菌PFGE指纹图谱研究

目的 分析福建省鼠伤寒及肠炎沙门菌脉冲场凝胶电泳(PFGE)指纹图谱,研究其分型特征.方法 收集2009年50株沙门菌临床分离株,其中30株鼠伤寒沙门菌分离自婴幼儿腹泻患者,20株肠炎沙门菌分离自感染性腹泻患者.选择XbaⅠ酶对沙门菌染色体DNA进行酶切,H9812作为脉冲场凝胶分子量标准.采用PFGE技术分析电泳酶切...     

Differentially regulated promoters for antigen expression in Salmonella vaccine strains

In most attenuated Salmonella enterica vaccines, heterologous antigens are expressed under the control of strong inducible promoters to ensure a high level of synthesis. Although high expression levels of the antigen can improve the immunogenicity of the vaccine, they might be toxic to the Salmonella carrier. Expression problems could be avoided by the use of promoters with specific characteristics with respect to strength and timing of expression. To study the expression of ten selected promoters, translational promoter-green fluorescent protein (GFP) fusions were analyzed in three attenuated Salmonella strains, Ty21a, SL3261 and PhoP^C. Promoter expression was evaluated both in vitro and in intracellular conditions using flow cytometry and confocal microscopy, with specific focus on the levels and timing of expression. We identified one major candidate promoter (Pasr) that could be used to express antigens specifically during in vivo conditions, without impairing bacterial growth during in vitro vaccine production.     

实时荧光定量PCR方法在沙门菌鉴定及筛选中的应用

目的在沙门菌鉴定中运用taqman技术建立荧光定量聚合酶链反应(PCR)的方法,并考评该方法的特异性、灵敏度、抗干扰性及重复性。方法根据沙门菌GenBank Accession NO DQ644631基因序列,设计并合成引物和荧光标记探针。建立实时荧光定量PCR反应体系,用沙门菌各种型别对该方法进行考评。结果实时荧光定量PCR技术在沙门菌鉴定中有良好的特异性、极高的灵敏度、较强的抗干扰性及重复性。结论在沙门菌的鉴定和筛选中实时荧光定量PCR方法准确、快速、简便,有很好的应用前景和研究价值。     

单核吞噬细胞应答伤寒沙门菌的实验研究

目的 研究单核吞噬细胞应答伤寒沙门菌的机理。方法 采用体外培养的PMA分化的THP－1细胞，检测其内化和杀伤胞内伤寒沙门菌的活性，以及伤寒沙门菌诱导PMA分化的THP－1细胞产生TNF－α和IL－12的情况。结果 PMA分化的THP－1细胞内化和杀伤Vi阴性伤寒沙门菌的活性明显高于内化和杀伤Vi阳性伤寒沙门菌的活性。IFN－γ明显中此活性。伤寒沙门菌诱导PMA分化的THP－1细胞可以产生一定量的TNF－α和IL－12，然而，IFN－γ活化的PMA分化的HTP－1细胞产生TNF－α和IL－12的量明显增加。结论 伤寒沙门菌在单核吞噬细胞中的存活可能与Vi抗原的存在有关；IFN－γ在调节机体细胞免疫，防循伤寒沙门菌感染中起着重要的作用。     

上海市罕见沙门菌型腹泻的溯源研究

[目的] 初步了解本市罕见沙门菌血清型菌株的分子流行病学特征。[方法] 对分离自不同来源标本的22株7种不同血清型沙门菌进行脉冲凝胶电泳 (PFGE) 分析, 脉冲凝胶电泳选用XbaⅠ限制性内切酶。[结果] 2株列克星敦、2株非丁伏斯沙门菌的电泳图谱显示有较大差异, 2株蒙得维的亚、2株朗根萨尔查、2株乌普萨拉、5株胥戈成格隆、4株波摩那的图谱显示存在同源性。[结论] 本市沙门菌罕见血清型的流行菌株和食品菌株之间既存在分子水平的同源性也存在非同源性, 加强沙门菌综合监测和即时分子分型可预警罕见沙门菌血清型流行。     

1株疑似沙门菌的蜂房哈夫尼亚菌的鉴定

[目的]笔者从砧板涂抹物中检出1株疑似沙门菌的蜂房哈夫尼亚菌。试验过程中发现：该菌ONPG试验结果不明显,容易误判,建议修改GB/T4789.4-2008中条文5.4.2.3;两家厂家生产的血清,血清凝集试验结果相反,试验时需要注意血清质量。