特发性血小板减少性紫癜患儿外周血T细胞亚型的分析

T细胞亚型分化漂移可能与一些自身免疫病的发病机制有关。本研究旨在通过分析特发性血小板减少性紫癜（idiopathic thromboeytopenic purpura，ITP）患儿外周血Th／Tc、Th1／Th2、Tc1／Tc2细胞的平衡状态，探讨T细胞亚群失衡在ITP发病机制中的作用。收集30例ITP患儿外周抗凝静脉血，分离纯化得T细胞．以PE标记的抗CRTH2单克隆抗体和Cy5标记的抗CD4、CD8单克隆抗体作双色流式细胞术检测，分析ITP患儿Th／Tc、Th1／Th2、Tc1／Tc2比例的变化。结果显示：ITP患儿外周血T细胞与健康儿童相比，Th细胞百分率及Th／Tc比例明显下降（P〈0.05），Tc细胞百分率无明显变化（P〉0．05）；Th1及Th2细胞百分率明显下降（P〈0．05），Tc1及Tc2细胞百分率无明显变化（P〉0．05），Th1／Th2及Tc1／Tc2比例明显升高（P〈0.05）。结论：ITP患儿外周血可能存在细胞免疫功能低下及T细胞亚群漂移，Th1及Tc1细胞比例升高，呈明显Th1类细胞优势，此结果说明T细亚群分化异常在ITP发病过程中起着重要作用。     

地塞米松对系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中细胞因子分泌及T细胞亚群表达的影响

目的 探讨地塞米松对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中白细胞介素(IL)-17、干扰素(IFN)-γ分泌水平和Th17、Tc17、Th1、Tc1等T细胞亚群表达的影响.方法 SLE患者和健康对照者的PBMCs分空白孔、佛波酯(PMA)/离子霉素(Ionomycin)孔、PMA/Ionomycin+地塞米松(DEX)孔行体外培养,运用四色流式细胞术检测PBMCs表达Th17、Tc17、Th1、Tc1等T细胞亚群的百分比,采用酶联免疫吸附法测定SLE患者和健康对照者血浆及PBMCs培养上清中IL-17、IFN-γ的表达水平.结果 SLE组患者血浆IL-17[138.98(84.82～187.04)ng/L]、IFN-γ[21.92(15.95～27.09)ng/L]含量均高于正常对照组[57.21(47.78～72.12)ng/L,13.43(7.04～17.37)ng/L].无PMA刺激条件下,SLE患者PBMCs培养上清中细胞因子水平、PBMCs中各T细胞亚群的百分比与正常对照组相比差异均无统计学意义(P均＞0.05);加入PMA刺激后,SLE患者PBMCs上清中IL-17的水平[(26.43±10.04)ng/L]和外周血Th17[(2.49±1.49)%]、Tc1[(44.89±16.43)%]细胞的比例均显著高于正常对照组[(18.06±5.42)ng/L,(1.47±0.73)%,(31.41±9.05)%)(P均＜0.05),SLE患者Th1、Tc17细胞百分比与正常对照组相比,差异均无统计学意义(P均＞0.05);地塞米松能明显抑制活化状态下的PBMCs分泌IL-17的水平[(16.72±6.09)ng/L](P＜0.01),且显著下调Th17(1. 34±0.76)%、Tc1(34.62±17.25)%细胞百分比(P均＜0.05),而地塞米松对IL-17的抑制作用更强.结论 SLE患者体内T细胞亚群及其相应细胞因子的表达水平存在明显异常,地塞米松能干扰SLE患者体内细胞因子网络失衡的免疫病理过程,且对IL-17有明显的抑制作用,为临床使用糖皮质激素治疗SLE提供新的理论依据和实验室基础.     

系统性红斑狼疮外周血Tc与Th细胞漂移的变化及意义

目的:探讨Tc1/Tc2、Th1/Th2及Tc/Th的失衡与系统性红斑狼疮(SLE)分期的关系及意义。方法:采用全血培养、T淋巴细胞荧光标记的流式细胞术分析SLE稳定期和活动期患者及正常健康人外周血中T淋巴细胞亚群及其细胞内因子γ-干扰素(IFN-γ)和白介素4(IL-4)表达率的变化,比较Tc1、Tc2;Th1、Th2,Tc/Th细胞比率在系统性红斑狼疮患者稳定期、活动期的变化,与SLEDAI分期的相关性。结果:SLE活动期患者的CD4~+/CD8~+比值明显低于正常对照组,而其Tc1、Th1细胞表达水平、Tc1/Tc2、Th1/Th2比值则均明显高于SLE稳定期及正常对照组(P0.05),但在SLE稳定期与正常对照组无差异(P0.05)。结论:Tc/Th的失衡及Tc与Th细胞向Tc1、Th1漂移的变化在SLE的发病机理中有着重要的作用。     

Ⅰ型及Ⅱ型细胞毒性T细胞与血液系统疾病的关系

近年来通过对T细胞亚群及其功能的研究，发现细胞毒性T细胞的细胞亚类即Ⅰ型及Ⅱ型细胞毒性T细胞(Tc1／Tc2)在血液系统疾病的发病及特异性免疫治疗中起着重要的作用。本文就Tc1和Tc2细胞亚群的免疫学特点，体外分离、诱导、扩增及检测的方法和原理，Tc1及Tc2细胞亚群在白血病患者异基因骨髓移植后移植物抗缩主病及移植物抗白血病平衡中的作用及相关机制，在白血病患者异基因骨髓移植后供者淋巴细胞输注治疗中的作用，以及Tc1及Tc2细胞亚群在自身免疫性溶血性贫血和再生障碍性贫血发病中的作用等方面作一综述。     

Ⅰ型及Ⅱ型细胞毒性T细胞与血液系统疾病的关系

近年来通过对T细胞亚群及其功能的研究,发现细胞毒性T细胞的细胞亚类即Ⅰ型及Ⅱ型细胞毒性T细胞(Tc1/Tc2)在血液系统疾病的发病及特异性免疫治疗中起着重要的作用.本文就Tc1和Tc2细胞亚群的免疫学特点,体外分离、诱导、扩增及检测的方法和原理,Tc1及Tc2细胞亚群在白血病患者异基因骨髓移植后移植物抗缩主病及移植物抗白血病平衡中的作用及相关机制,在白血病患者异基因骨髓移植后供者淋巴细胞输注治疗中的作用,以及Tc1及Tc2细胞亚群在自身免疫性溶血性贫血和再生障碍性贫血发病中的作用等方面作一综述.     

甲状腺相关性眼病患者外周血CD4~+T细胞各亚群表达的初步探讨

目的探讨甲状腺相关性眼病(TAO)患者外周血中CD4+T细胞各亚群占外周血的百分比及Th1/Th2、Th17/Treg比值在TAO发病及活动性判断中的意义。方法利用CAS评分及99Tcm-生长抑素类似物眼眶显像结果将TAO患者分为活动组和非活动组;使用美国BD公司FACS Calibur流式细胞仪分别检测活动组TAO、非活动组TAO及正常组外周血中Th1细胞、Th2细胞、Th17细胞、Treg细胞的百分比及Th1/Th2、Th17/Treg的比值,比较三组之间的差异。结果 Th1细胞、Th2细胞、Treg细胞占外周血中CD4+T细胞的百分比在三组间比较差异均有统计学意义(Z值分别为10.137、11.232、6.052,均P<0.05)。Th17细胞所占百分比及Th1/Th2、Th17/Treg在三组比较中差异无统计学意义(Z值分别为2.801、2.722、3.616,均P>0.05)。Th1细胞、Th2细胞三组比较有统计学意义,活动组与非活动组比较差异均无统计学意义(P>0.05);活动组、非活动组与正常组比较均有统计学意义,且病例组显著降低(P<0.05)。结论 Th1细胞、Th2细胞参与了TAO的发病,但与TAO的活动性之间未见明确关系。     

恶性肿瘤患者外周血调节性T细胞及Th1、Th2细胞的检测和临床意义

目的:通过检测恶性肿瘤患者外周血中的淋巴细胞亚群、CD4+CD25+调节性T细胞(Treg细胞)以及Th1、Th2细胞的数量,了解恶性肿瘤患者的免疫状态。方法:采用流式细胞仪检测90例恶性肿瘤患者(肿瘤组)及60例健康体检者(对照组)外周血中的淋巴细胞亚群、Treg细胞和以及Th1和Th2细胞数量。结果:肿瘤组外周血CD3+T细胞、CD4+T细胞和NK细胞的数量均显著低于对照组(P<0.05),而Treg细胞显著高于对照组(P<0.05)。肿瘤组分泌IFN-γ的Th1细胞显著低于对照组(P<0.05),而分泌IL-4的Th2细胞显著高于对照组(P<0.05)。结论:恶性肿瘤患者Treg细胞数量增多,Th1细胞数量减少,Th2细胞数量增加,这可能是其免疫功能处于抑制状态的重要原因。     

骨髓增生异常综合征患者T细胞亚型和CD3zeta表达的分析

免疫介导的骨髓抑制和(或)造血异常被认为是导致MDS患者血细胞减少的重要机制之一。本研究旨在通过分析11例骨髓增生异常综合征患者外周血T淋巴细胞亚群及CD3zeta的表达，以进一步评价MDS患者的免疫状态，探讨MDS患者血细胞减少可能的原因。对11例诊断明确的MDS患者，用流式细胞术计数外周血表达IFNγ^ CD4^ 细胞(Th1)、IL4^ CD4^ 细胞(Th2)、IFNγ^ CD8^ 细胞(Tc1)及IL4^ CD8^ 细胞(Tc2)，同时分析CD3zeta在T细胞亚群中的表达。结果显示：CD8^ 细胞在MDS患者外周血中比例明显升高；T细胞亚群Th1／Th2、Tc1／Tc2比值与正常对照无显著差异；T细胞活化信号传导通路上的功能蛋白CD3zeta在CD8^ 细胞中的表达明显增高。结论：MDS患者外周血T细胞亚群比例异常，以CD8^ 细胞增高为主要表现；CD3zeta在CD8^ 细胞中表达明显增高，在CD4^ 细胞中变化不大，提示MDS患者细胞免疫的过度活化主要与CD8^ 细胞有关；T细胞介导的细胞免疫过度活化是MDS患者外周血细胞减少的重要机制之一。     

SLE患者外周血CD3+CD16+CD56+NK T细胞和CD3+CD4-CD8-DN T细胞的流式细胞分析及意义

目的探讨CD3+CD16+CD56+天然杀伤T(NK T)细胞和CD3+CD4-CD8-双阴性T(DN T)细胞在SLE患者外周血中的变化及意义。方法选取32例SLE活动期患者作为SLE活动组、30例SLE稳定期患者作为SLE稳定组、25例健康人作为健康人对照组,用流式细胞术检测各组对象外周血中NK T细胞和DN T细胞的比率,并比较其与SLE疾病活动性指数(SLEDAI)之间的相关性。结果 SLE活动组外周血NK T细胞比率(3.47±1.49)%显著低于SLE稳定组(5.30±1.83)%及健康人对照组(6.24±2.11)%,P均<0.01,但SLE稳定组与健康人对照组差异无统计学意义(P>0.05);SLE活动组外周血DN T细胞比率(5.16±1.97)%显著高于SLE稳定组(4.00±1.37)%及健康人对照组(3.15±1.06)%,P均<0.01,SLE稳定组亦高于健康人对照组(P<0.05)。SLE患者外周血NK T细胞比率与SLE DAI呈显著负相关(r=-0.439,P<0.01);SLE患者外周血DN T细胞比率与SLE DAI呈显著正相关(r=0.446,P<0.01);SLE患者外周血NK T细胞比率与DN T细胞比率之间无明显相关性(r=-0.215,P>0.05)。结论外周血中NK T细胞及DN T细胞比率改变可能参与了SLE的发病过程,且可能与SLE的病情活动性相关。     

发作期哮喘患儿外周血Th、Tc细胞亚群的变及其相互关系

目的:研究哮喘发作期患儿外周血Th、Tc细胞亚群的变化及其相互关系.方法:应用流式细胞术检测30例哮喘发作期患儿的外周血Th1、Th2、Tc1、Tc2的细胞数.结果:哮喘患儿和正常对照组的外周血Th1细胞数分别为16.12±6.17和7.04±2.66(P<0.05),Th2细胞数分别为15.96±6.10和6.25±0.56(P<0.001),Tc1细胞数分别为9.06±3.80和7.28±3.01(P>0.05),Tc2细胞数分别为7.64±3.67和3.02±1.38(P<0.001).Th1与Tc1、Th2与Tc2均有明显的正相关性(r分别为0.853和0.844,P<0.001).结论:发作期哮喘患儿Th1/Th2、Tc1/Tc2存在着明显的异常,其外周血Th1与Tc1、Th2与Tc2均有明显的正相关性.     

肾癌患者外周血Th1/Th2和Tc1/Tc2细胞因子的表达

目的检测不同临床分期肾癌患者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞中细胞因子的表达水平,分析Th1/Th2及Tc1/Tc2漂移对肾癌发生和转移的临床意义。方法用流式细胞仪检测60例不同分期肾癌患者和40例正常对照者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞分泌的IFN-γ、IL-2、TNF-α、IL-4、IL-6和IL-10的表达水平。结果与正常对照组相比,无症状型肾癌患者各细胞因子的表达无明显差异,而局限型患者Th1、Tc1类细胞因子IFN-γ、IL-2和TNF-α分泌水平降低(P<0.01),局部进展型和转移型肾癌患者Th1、Tc1类细胞因子IFN-γ、IL-2和TNF-α分泌水平明显下降(P<0.01);而Th2、Tc2类细胞因子IL-4、IL-6(P<0.05,P<0.01)分泌水平升高。结论 Th1/Th2偏移和Tc1/Tc2偏移促进了晚期肾肿瘤的进展和转移。T淋巴细胞亚群改变导致免疫功能失调,使肿瘤细胞发生免疫逃逸。     

调节性B细胞对系统性红斑狼疮CD4~+ T细胞亚群的影响

系统性红斑狼疮(SLE)是一种发病机制复杂的自身免疫性疾病。许多研究证实,SLE患者外周血中存在CD4~+T细胞亚群的失衡。因此治疗SLE的关键是纠正紊乱的CD4~+T细胞亚群,恢复免疫稳态。目前有研究发现调节性B细胞(Breg)对CD4~+T细胞亚群的分化有一定的调控作用。这提示分析Breg细胞调节CD4~+T细胞亚群的机制,有助于为SLE疾病的治疗提供新思路。     

SLE患者性激素水平与Th1/Th2的免疫应答

内分泌功能异常是SLE患者发病的重要原因之一 ,辅助T细胞亚群 (Th1/Th2 )在SLE患者中失衡 ,发生向Th2漂移的现象 ,性激素作为免疫调节剂对Th1/Th2的免疫应答起着重要的调节作用。     

不同亚型乙型病毒性肝炎患者T细胞亚群调查研究

目的研究不同亚型乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化及其临床意义。方法选择40例慢性活动性乙型肝炎、30例乙型肝炎病毒携带者、30例乙型肝炎肝硬化、20例急性乙型肝炎患者和30例健康对照者,采用流式细胞仪检测各组外周血T淋巴细胞亚群的表型和频率。结果与正常对照组比较,慢性活动性肝炎、肝炎肝硬变患者外周血CD4 、CD4 /CD8 比值均有显著性下降(P<0.01),以肝炎肝硬变下降最显著,慢性病毒携带者肝炎、急性乙型肝炎外周血T细胞亚群数量和比值变化不明显(P>0.05)。HBV DNA病毒载量与患者外周血CD4 T细胞数量无相关性(P>0.05)。结论慢性活动性乙型肝炎和肝硬化患者的细胞免疫功能降低,其下降程度与病毒复制水平无相关性。     

肿瘤病人T细胞核仁嗜银蛋白和辅助性T细胞亚群变化

目的　探讨肿瘤病人外周血单个核细胞 (PBMC)中T细胞核仁嗜银蛋白 (AgNORs)变化和辅助性T(Th)细胞亚群变化的关系及其临床意义。方法　PBMC经多克隆T细胞活化剂刺激 ,以图像分析法检测AgNORs区面积与细胞核仁面积的百分比 (I.S % ) ;PBMC被离子霉素和佛波醇酯活化 5h后 ,以酶联免疫斑点法 (ELISPOT)检测γ干扰素 (IFNγ)和白细胞介素 4(IL 4)产生细胞的频度( % ) ;以离子霉素加佛波醇酯刺激 2 4h ,用ELISA试剂盒检测培养上清液中的IFNγ 和IL 4水平。结果86例肿瘤病人和 44名正常人 ,PBMC中活化T细胞AgNORs表达分别为 ( 4 90± 1 2 0 )I S %和 ( 7 82±1 2 8)I S % ,肿瘤组下降非常显著 (P <0 0 5 ) ;肿瘤组PBMC中Th2细胞频度显著上升 ,Th/Th2比值显著下降 ;同时 ,肿瘤组PBMC产生IFNγ 和IL 4水平发生相应变化 ,变化方式与Th亚群变化相似 ;肺癌转移组与未转移组、复发组与未复发组相比 ,Th1细胞数、Th1/Th2之比和IFNγ 的产生下降非常显著 ;在肿瘤组AgNORs表达与Th1细胞频度、Th1/Th2比值、IFNγ 产生和肿瘤病人生活质量评分呈正相关。结论　肿瘤病人PBMC中T细胞表达AgNORs下降 ,与患者Th1细胞功能下降呈正相关。     

CD3^+CD56^+CD16^+ NKT细胞、T淋巴细胞亚群在URSA患者外周血表达的意义

目的探讨CD3^+CD56^+CD16^+NKT细胞、T淋巴细胞亚群在不明原因反复自然流产患者(URSA)外周血表达的意义。方法选择53例URSA患者和22例体检健康妇女(健康对照组)的外周血,通过流式细胞术检测CD3^+CD56^+CD16^+NKT细胞、T淋巴细胞亚群的表达情况。结果CD3^+CD56^+CD16^+NKT细胞在URSA患者外周血的表达率为(8.35±11.48)%,明显高于健康对照组(1.12±0.52)%,差异有统计学意义(t=2.924,P<0.01);Th/Tc比值为1.50±0.61,较健康对照组(1.23±0.22)偏高,差异有统计学意义(t=2.045,P<0.05);CD3+T细胞、CD3+CD4+Th细胞、CD3+CD8+Tc细胞在URSA患者外周血表达率与健康对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。CD3^+CD56^+CD16^+NKT细胞与Th/Tc比值的相关系数为0.0048,其无正相关关系(P>0.05)。结论CD3^+CD56^+CD16^+NKT细胞、Th/Tc比值在URSA患者外周血表达水平的增高对反复自然流产的发生有一定的关系,通过检测CD3^+CD56^+CD16^+NKT细胞和Th/Tc比值对评估USRA患者的免疫功能状态和临床对患者免疫功能的有效干预有重要的意义。     

Ⅰ型糖尿病患者外周血辅助性T细胞亚群Th1/Th2细胞平衡研究

目的探讨辅助性T淋巴细胞亚群Th1/Th2在Ⅰ型糖尿病患者免疫学发病机制中的作用.方法应用流式细胞仪单克隆抗体免疫荧光标记法,对32例Ⅰ型糖尿病患者的外周血辅助性T淋巴细胞Th1亚群CD4 CD45RA 、Th2亚群CD4 CD45RO 的表达情况进行研究.结果Ⅰ型糖尿病患者外周血,辅助性T淋巴细胞Th1亚群CD4 CD45RA 表达升高不明显,Th2亚群CD4 CD45RO 表达显著性下降.CD4 CD45RA /CD4 CD45RO 比值明显升高.结论Ⅰ型糖尿病的发生与Th细胞的优势转化密切相关.对Th细胞的优势转化的干预将为临床上自身免疫性糖尿病的治疗开辟新的途径.     

苦参素对慢性乙型肝炎患者外周血T细胞亚群和Th1/Th2平衡的调节作用

目的:观察苦参素对慢性乙型肝炎患者外周血T细胞亚群和Th1/Th2平衡的调节作用。方法:选择40例轻中度慢性乙型肝炎患者(治疗组)予以口服苦参素300mg,3次/d,疗程6个月。检测治疗前和治疗6个月后患者外周血CD4+、CD8+T细胞亚群及白介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)含量的变化。选择30例正常健康体检者作为对照组。结果:与对照组比较,治疗组患者外周血CD4+明显减少,CD8+明显增加,CD4+/CD8+比值下降,经过苦参素治疗6个月后,患者外周血CD4+明显增加,CD8+明显减少,CD4+/CD8+比值增加。与对照组比较,治疗组患者外周血培养上清单个核细胞(PBMC)中IL-4水平明显上升,而IFN-γ水平明显下降,经过苦参素治疗6个月后,患者外周血培养上清PBMC中IL-4水平明显下降,而IFN-γ水平明显上升。结论:慢性乙型肝炎患者存在T细胞亚群紊乱和Th1/Th2平衡失调,苦参素既能抑制调节T细胞亚群紊乱,又能调节Th1/Th2细胞因子比例平衡,从而提高细胞免疫反应,使免疫反应由Th2型向Th1型逆转,清除细胞内病毒。     

免疫性血小板减少症患者白介素-22及相关CD4~+ T细胞亚群的表达

本研究通过检测初治的成人免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血中白介素-22(IL-22)及相关CD4+T细胞亚群的表达,探讨其在ITP发病机制中的作用。以我院住院治疗的40例新诊断的急性ITP患者及40例健康对照者为研究对象,应用ELISA法检测外周血血浆中IL-22的含量,采用流式细胞术检测Th1、Th17、Th22细胞亚群的比例,并分析其相关性。结果表明,新诊断的ITP患者血浆中IL-22的含量为(364.12±94.22)pg/ml,显著高于健康对照者(P<0.001);ITP患者外周血Th1细胞比例为(18.92±6.03)%,Th22细胞比例为(2.28±0.51)%,显著高于健康对照者(P<0.05);且ITP患者血浆IL-22水平与Th1和Th22细胞比例之间存在正相关(Th1:r=0.42,P=0.022;Th22:r=0.40,P=0.030);而ITP患者Th17细胞比例与健康对照者比较无明显差异,且与IL-22水平无相关性。结论:成人ITP患者外周血中IL-22水平明显升高,且与Th1、Th22细胞比例之间密切相关,提示IL-22与Th1和Th22细胞在ITP的发病中可能起着协同作用,而Th17细胞可能与ITP的发病无关。     

结核病患者外周血淋巴细胞亚群的检测

目的 通过检测肺结核(TB)患者外周血淋巴细胞亚群的比例变化,来探讨其在结核病发展中的意义.方法 用流式细胞仪分别检测原发型肺结核(Ⅰ型,TB)组(15例),血行播散型结核(Ⅱ型,IB)组(15例)、正常对照组(25例)的外周血淋巴细胞表面标记:CD4、CD8、CD3、CD69、CD25、CD16 CD56、CD19.结果 Ⅰ型结核病人的T细胞亚群的辅助性T细胞(Th)、细胞毒T细胞(Tc)、总T细胞的分布比例与正常对照无显著性差异,而活化的Th,Tc比例都比正常组高(P<0.05).调节性T细胞(Treg)高于正常组(P<0.05),自然杀伤细胞(NK细胞).自然杀伤T细胞(NKT细胞),B细胞都无显著性差异.Ⅱ型TB组与对照组比较Th减少(P<0.05),Tc增加(P<0.05),总T细胞无差异,NK细胞减少(P<0.05),NKT细胞增加(P<0.05),B细胞无显著性差异,活化Th,Tc和Treg高于Ⅰ型IB组(P<0.05).结论 淋巴细胞亚群在结核病患者外周血中分布失衡,可能与疾病的发展相关.