脂联素对高糖环境下hRPE活性及VEGF mRNA表达的影响

目的观察脂联素对高糖环境下人视网膜色素上皮细胞（hRPE）活性及血管内生长因子（VEGF）mRNA表达的影响,探讨脂联素对糖尿病视网膜病变（DR）可能具有的保护机制。方法①将hRPE随机分为对照组、高糖组、甘露醇组、脂联素组,培养48h后MTT法测定细胞活性。②再将hRPE分为对照组、高糖组、脂联素组,分别培养24、48、72h后用荧光定量PCR测定VEGF mRNA的表达。结果与对照组相比,甘露醇组细胞活性无明显改变（P〉0．05）,高糖组明显降低（P〈0．01）;加入脂联素后,细胞活性显著升高（P=〈0．01）。高糖组与对照组相比,mRNA表达明显上调,加入脂联素后表达呈时间依赖性下调,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论脂联素可以促进hRPE增殖,下调VEGF mRNA的表达。提示脂联素可通过下调hRPE VEGF mRNA的表达来抑制DR中病理性新生血管的形成。     

高糖环境下脂联素对人肾小管上皮细胞增殖和Caspase-3的影响

目的探讨脂联素（Adiponectin,ADPN）对高糖环境下人近曲肾小管上皮细胞增殖、凋亡及T-钙黏蛋白（T-cadherin）表达的影响,揭示脂联素在糖尿病肾病中的保护作用。方法将人近曲肾小管上皮细胞用5.5mmol/L葡萄糖（正常对照组）、30.0mmol/L葡萄糖（高糖组）、30.0mmol/L＋2.5μg/ml ADPN（脂联素组）分别培养24h,48h,72h后,运用MTT法测定细胞增殖,运用酶联免疫吸附法（ELISA）测定细胞上清液中Caspase-3的含量,观察细胞凋亡。结果①高糖组人近曲肾小管上皮细胞增殖被抑制（P〈0.05）,加入脂联素（2.5μg/ml）后促进了细胞增殖（P〈0.05）,并呈时间依赖性。②高糖组人近曲肾小管上皮细胞凋亡增加（P〈0.05）,加入脂联素（2.5μg/ml）后延缓了细胞凋亡。结论高糖环境下随着时间的延长,可引起肾小管上皮细胞增生肥大,诱导其凋亡;脂联素可促进细胞增殖,延缓细胞凋亡。     

脂联素对高糖环境下人心肌细胞增殖和凋亡的干预作用

目的探讨脂联素（Adiponectin,ADPN）对高糖环境下人心肌细胞增殖、凋亡的影响,揭示脂联素在糖尿病心肌病变中的保护作用。方法将人心肌细胞用5.5mmol/L葡萄糖（正常对照组）、30.0mmol/L葡萄糖（高糖组）、30.0mmol/L＋2.5μg/mlADPN（脂联素组）分别培养24h,48h,72h后,运用MTT方法检测细胞增殖,Westernblotting检测凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2的表达,用荧光探针DCFH-DA检测细胞内ROS水平,观察细胞凋亡。结果①高糖组人心肌细胞增殖被抑制（P〈0.05）,ROS水平、细胞凋亡增加,并呈时间依赖性。②高糖组人心肌细胞,脂联素（2.5μg/ml）干预后,细胞增殖接近正常对照组,ROS水平下降,延缓了细胞凋亡。高糖环境下随着时间的延长,可引起心肌细胞增生肥大,诱导其凋亡;脂联素可促进细胞增殖,延缓细胞凋亡。     

脂联素对高糖环境下人心肌细胞增殖及VEGF表达的影响

目的通过体外高糖培养人心肌细胞(HCM)及运用脂联素(ADPN)干预以探讨HCM增殖及VEGF表达的影响,以揭示脂联素对高糖环境中的心肌细胞的可能保护机制。方法将HCM分为正常对照组(5.5mmol/L葡萄糖)、高糖组(30.0mmol/L葡萄糖)、脂联素组(30.0mmol/L+2.5μg/mLADPN),分别培养24h、48h、72h,运用MTT测定HCM的增殖情况;通过实时荧光定量PCR(real time PCR)技术测定在脂联素干预和高糖作用下相应时间HCM中VEGF mRNA的含量。结果①高糖组抑制细胞增殖,加入脂联素后促进细胞增殖,且呈时间依赖性;②VEGF mRNA在高糖组表达较高,加入生理浓度脂联素对于VEGF mRNA表达有抑制作用,并随时间的延长VEGF表达逐渐减少。各时间段脂联素组和高糖组相比,VEGF的表达有统计学差异,亦呈时间依赖性。结论脂联素可以促进HCM增殖,对高糖环境下心肌细胞有保护作用。     

脂联素对高糖环境下肾小球系膜细胞转化生长因子β1及细胞间粘附分子1表达的影响

目的研究脂联素(ADPN)对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞转化生长因子β1(TGF-β1)及细胞间粘附分子1(ICAM-1)表达的影响。方法以培养的大鼠HBZY-1肾小球系膜细胞(MCs)为受试对象,将MCs分为3组:正常对照组(5.5mmol/L葡萄糖,NG组),高糖组(30mmol/L葡萄糖,HG组),高糖+不同浓度的脂联素组(30mmol/L葡萄糖,2.5、5.0、7.5、10.0、15.0、20.0μg/mlADPN)分别作用48h后,用ELISA法测定细胞内TGF-β1及ICAM-1表达。结果作用48h后,高糖明显上调细胞内TGF-β1及ICAM-1表达。加入低浓度脂联素对于TGF-β1、ICAM-1表达影响不大,而随着脂联素浓度的升高,TGF-β1及ICAM-1的表达明显下降,与高糖组相比,浓度为10～20mg/L的脂联素组TGF-β1及ICAM-1的表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论中等以上浓度的脂联素能下调TGF-β1及ICAM-1表达,提示脂联素可能通过阻抑TGF-β1及ICAM-1表达起到抗纤维化,从而发挥对糖尿病肾脏的保护作用。     

色素上皮衍生因子对高糖中小鼠视网膜毛细血管周细胞凋亡的影响

目的探讨外源性色素上皮衍生因子(PEDF)对体外高糖培养的小鼠视网膜毛细血管周细胞凋亡的影响。方法在体外培养的小鼠视网膜毛细血管周细胞无血清达氏修正依氏培养基(DMEM)中加入不同浓度葡萄糖(5.5、40、50 mmol/L),并加入浓度为1 g/L的PEDF 1μl,于4 d后检测不同糖浓度中小鼠视网膜毛细血管周细胞凋亡情况。结果未加PEDF组高糖浓度组与对照组相比,凋亡率差异有统计学意义(P<0.01),且糖浓度与周细胞凋亡率呈正相关(P<0.01)。加PEDF的糖浓度5.5 mmol/L组,周细胞凋亡率为(7.5±1.5)%,与未加PEDF的对照组(9.6±0.6)%差异无统计学意义(P=0.139)。未加PEDF高糖浓度组(40、50 mmol/L),呈现出典型的细胞凋亡特征,周细胞凋亡率为(34.8±4.6)%和(41.2±2.2)%。加PEDF高糖浓度组,周细胞凋亡率分别为(17.5±1.7)%和(19.5±3.7)%。2组相比,凋亡率差异有统计学意义(P<0.01)。结论外源性色素上皮衍生因子可有效抑制周细胞的凋亡,细胞凋亡是糖尿病视网膜病变中毛细血管周细胞早期丧失的一种方式。本研究为临床治疗糖尿病视网膜病变提供一定的理论依据。     

脂联素对高糖环境下人肾小球系膜细胞增殖及氧化应激水平的影响

目的 探讨脂联素(Adiponectin,ADPN)对高糖环境下人肾小球系膜细胞(HMCs,human Mesangial Cells) 增殖及氧化应激水平的影响,揭示脂联素在糖尿病肾病中的保护作用.方法 ①体外培养HMCs:①将HMCs随机分为正常对照组(5.5 mmol/L 葡萄糖)、高糖组(30.0 mmol/L葡萄糖)、脂联素组(30.0 mmol/L葡萄糖+2.5 μg/ml脂联素),分别培养24、48、72 h后,运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定3组不同时间点HMCs的增殖情况.②将HMCs随机分为上述3组细胞,分别培养24、48、72 后运用硫代巴比妥酸法(TBA法)测定细胞上清液中MDA及SOD的含量.③再将HMCs随机分为上述3组细胞,分别培养24、48、72 h,运用实时荧光定量PCR(RT-PCR)测定HO-1 mRNA的表达,观察细胞氧化应激指标变化.结果 ①24 h高糖组与正常对照组比较细胞增殖无统计学差异(P>0.05),48、72 h两组比较,高糖组细胞增殖明显受抑制(P<0.05).加入脂联素促进细胞增殖,与高糖组比较差异有统计学意义(P<0.05);②24、48、72 h高糖组MDA含量均升高,SOD含量及HO-1 mRNA的表达均下降,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05).加入脂联素后,观察上述氧化应激指标均得到明显改善,差异有统计学意义(P<0.05).结论长期高糖刺激抑制人肾小球系膜细胞增殖,外源性加入脂联素可促进细胞增殖.高糖组均引起氧化应激指标升高,加入脂联素可降低系膜细胞氧化应激水平,提示其对细胞起保护作用.     

水飞蓟宾对高糖诱导人足细胞中VEGF表达的影响

目的 探讨水飞蓟宾对高糖诱导的体外培养人足细胞中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 体外培养的人足细胞分为7组:正常糖(NG,葡萄糖5.5 mmol/L)组、甘露醇对照(MN,甘露醇24.5mmol/L+葡萄糖5.5mmol/L)组、高糖(HG,葡萄糖30mmol/L)组、HG+低浓度水飞蓟宾(HG+LS,水飞蓟宾5 μg/ml)组、HG+中浓度水飞蓟宾(HG+MS,水飞蓟宾10μg/ml)组、HG+高浓度水飞蓟宾(HG+HS,水飞蓟宾20μg/ml)组、HG+二甲亚砜(HG+D,DMSO 1 mg/ml)组.各作用48 h后,RT-PCR半定量法及Western印迹法检测足细胞VEGF mRNA及蛋白表达水平.结果 体外培养人足细胞表达基础水平的VEGF,HG刺激48 h后足细胞VEGF基冈和蛋白表达均显著增加(P＜0.05);与HG组比较,加用5～20μg/ml水飞蓟宾均可抑制HG所诱导的VEGF基因和蛋白表达(P＜0.05),并呈剂量依赖性.结论 HG可使足细胞表达VEGF增加,水飞蓟宾可通过抑制HG诱导足细胞产生过多VEGF而具有潜在保护足细胞和防治糖尿病肾病的作用.     

木瓜酶促进大鼠血管内皮细胞成血管的功能研究

目的　通过体外鼠细胞模型实验,检测木瓜酶在体外培养环境下对血管内皮细胞成血管向分化的促进功能。方法　采用P3代大鼠血管内皮细胞,将木瓜酶溶解于完全培养基内,按照10 μg/ml、50 μg/ml、100 μg/ml浓度配置含木瓜酶的完全培养基,与空白对照组共同培养0、7、14 d,通过逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）法检测成血管分化相关基因VEGF（血管内皮生长因子）、CD31（血小板-内皮细胞粘附分子）的表达水平,通过CCK-8法检测不同组细胞的增殖活力。统计学方法为方差分析。结果　经14 d培养,添加木瓜酶的细胞VEGF、CD31表达水平及增殖能力显著高于空白对照组,木瓜酶浓度达到50 μg/ml时VEGF表达水平达到最高,为空白对照组的3.28倍,CD31表达水平随着木瓜酶浓度升高而升高,最高达到空白对照组的3.66倍。结论　适宜浓度的木瓜酶能够在体外促进内皮细胞的成血管分化及增殖,表明木瓜酶对血管组织形成具有一定的促进作用。     

高血压患者血清脂联素浓度与脉压、脉压指数的相关性研究

目的 研究高血压患者血清脂联素水平及脉压(PP)和脉压指数(PPI)的关系.方法 选取原发性高血压患者36例及健康对照者35例,用酶联免疫吸附法检测各组空腹血清脂联素浓度,同时测定各组的血脂、血糖、血压、脉压、脉压指数等指标,并分析血清脂联素与各指标间的相关性.结果 原发性高血压组血清脂联素水平显著低于正常对照组[(5.36±2.04)μg/ml vs(6.83±2.24)μg/ml,P<0.01],原发性高血压组血清脂联素水平与收缩压、舒张压、脉压和脉压指数之间存在显著负相关,相关分析显示脉压指数是影响脂联素水平的独立危险因素.结论 在原发性高血压患者中,脂联素水平下降并与血压之间存在一定的相关性.脉压和脉压指数高的患者,其血清脂联素浓度相对偏低.     

不同浓度bFGF对体外培养人视网膜色素上皮细胞增殖的影响

目的观察碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对体外人视网膜色素上皮细胞（hRPE）增殖调控的剂量-效应关系、时间-效应关系,明确bFGF体外培养hRPE增殖的最佳浓度和时间,为hRPE替代疗法治疗视网膜变性疾病提供新思路。方法采用经细胞化学染色法鉴定确认的hRPE细胞株,用CCK-8法检测不同浓度bFGF（0、2、4、8、16、32ng/ml）在不同作用时间（0、24、48、72、96 h）对hRPE增殖的影响。结果在相同浓度bFGF作用下,hRPE吸光度值（A值）随作用时间延长而增加,与对照组比较的差异有统计学意义（P〈0.05）。在相同培养时间条件下,hRPE A值随bFGF浓度增加而增加,与对照组比较的差异有统计学意义（P〈0.05）;bFGF浓度〈16 ng/ml的各组相邻浓度实验组组间A值比较的差异有统计学意义（P〈0.05）;bFGF浓度≥16 ng/ml的相邻浓度实验组组间A值比较的差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 bFGF对体外培养hRPE增殖的调控有剂量-效应关系和时间-效应关系。bFGF的促增殖作用在16 ng/ml浓度以上逐渐达到饱和,故促体外培养hRPE细胞增殖的bFGF浓度应以16 ng/ml为佳。     

双倍剂量缬沙坦联合辛伐他汀对糖尿病肾病患者血清超敏C反应蛋白和脂联素的影响

目的探讨双倍剂量缬沙坦联合辛伐他汀对糖尿病肾病(DN)患者血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)和脂联素的影响。方法 90例DN患者随机分为三组,各30例。所有患者均采用常规治疗,A组加用缬沙坦80mg,口服1次/d;B组加用缬沙坦160mg,口服1次/d;C组加用缬沙坦160mg口服1次/d,辛伐他汀20mg,口服1次/每晚。比较24h尿蛋白定量,血清hs-CRP和脂联素。结果三组的尿蛋白均有明显减少(P<0.05,P<0.01);B、C两组与A组治疗后有明显差异(P<0.05,P<0.01);C、B两组之间治疗后有明显差异(P<0.05)。治疗后三组的hs-CRP,脂联素均有明显减少(P<0.05,P<0.01);B、C两组与A组治疗后有明显差异(P<0.05);C、B两组之间治疗后有明显差异(P<0.05)。结论双倍剂量缬沙坦联合辛伐他汀可以减少DN患者hs-CRP和脂联素的表达,从而改善病情。     

舒芬太尼复合罗哌卡因用于硬膜外分娩镇痛临床观察

目的观察0.1%盐酸罗哌卡因复合0.3μg/ml枸橼酸舒芬太尼硬膜外麻醉对母婴的影响。方法选择足月单胎头位妊娠初产妇60例,ASAⅠ～Ⅱ级,均自愿接受分娩镇痛,能自主使用自控镇痛泵,排除阴道分娩禁忌证及椎管阻滞禁忌证者。随机分为镇痛组和对照组,每组各30例。镇痛组予以0.1%盐酸罗哌卡因复合0.3μg/ml枸橼酸舒芬太尼混合液病人自控硬膜外镇痛（PCEA）＋背景输注（BI）,对照组产妇未行任何镇痛处理。记录、比较两组产妇的视觉模拟（VAS）评分、下肢运动神经阻滞程度、产程、产后2h内出血量、分娩方式、缩宫素使用情况和不良反应、新生儿Apgar评分。结果镇痛组VAS评分明显降低,其余指标两组间差异均无统计学意义。结论 0.1%盐酸罗哌卡因复合0.3μg/ml枸橼酸舒芬太尼病人自控硬膜外镇痛＋背景输注行分娩镇痛效果确切,对母婴影响小。     

黄芩苷联合胰岛素对新诊断2型糖尿病患者胰岛功能的保护作用

目的观察黄芩苷对新诊断2型糖尿病胰岛功能的保护作用。方法新诊断2型糖尿病门诊及住院患者151例,计算机编程随机分为2组。研究组76例,常规使用预混胰岛素基础上加用黄芩苷0．5mg／次,3次／d;对照组75例,常规使用预混胰岛素。4周后测量空腹血糖达标时间、空腹胰岛素（FINS）、血脂、体重指数、瘦素、脂联素、肿瘤坏死因子仅（TNF—OL）及24h尿白蛋白量,计算胰岛素抵抗指数（HOMA—IR）、胰岛素敏感指数（ISI）。结果研究组血糖达标时间较对照组短[（5．6±1．8）d比（10．2±2．3）d],组间差异有统计学意义（P〈0．01）;血胰岛素水平及胰岛素抵抗指数明显低于对照组[分别为（16±7）mlU／L比（20±7）mlU／L,（4．5±2．0）比（6．0±2．5）],差异有统计学意义（均P〈0．05）,胰岛素敏感指数升高[（-3．6±2．1）比（-5．3±2．0）],差异有统计学意义（P〈0．05）;TC、TG较对照组降低,差异有统计学意义（P〈0．05）;血TNF-仅及瘦素水平较对照组降低,差异有统计学意义（P〈0．05）,脂联素水平较对照组升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论黄芩苷可改善新诊断2型糖尿病胰岛素抵抗,保护胰岛功能。其作用机制可能是通过调节脂肪因子水平改善胰岛素敏感性。     

β受体阻滞剂对乳鼠心肌细胞内质网应激致凋亡途径的影响

目的通过体外培养乳鼠心肌细胞,探讨β受体阻滞剂对乳鼠心肌细胞凋亡率及内质网应激作用的影响。方法培养乳鼠心肌细胞,确定β受体阻滞剂的饱和浓度,原代培养乳鼠心肌细胞72h后给予β受体阻滞剂溶液和衣霉素溶液干预,实验分4组:空白对照组、50μg/ml美托洛尔组、10μg/ml衣霉素组、10μg/ml衣霉素+50μg/ml美托洛尔组。确定美托洛尔的饱和浓度;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组内质网应激指标GRP78、内质网应激致凋亡指标Caspase12,流式细胞术检测实验各组乳鼠心肌细胞凋亡率,确定美托洛尔对内质网应激致凋亡途径的影响作用。结果①美托洛尔的浓度为50μg/ml时,对内质网应激的影响已达最大。②与空白对照组比较,50μg/ml美托洛尔组心肌细胞内质网应激致凋亡指标Caspase12表达及心肌细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。10μg/ml衣霉素组、50μg/ml美托洛尔+10μg/ml衣霉素组心肌细胞内质网应激致凋亡指标Caspase12及心肌细胞凋亡率较空白对照组均明显增加(均P<0.05),且在衣霉素组时心肌细胞中内质网应激致凋亡指标Caspase12及心肌细胞凋亡率均最高,而50μg/ml美托洛尔+10μg/ml衣霉素组与10μg/ml衣霉素组比较,心肌细胞内质网应激致凋亡指标Casepase12及心肌细胞凋亡率降低,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论美托洛尔浓度在50μg/ml时为内质网应激保护的饱和浓度,β受体阻滞剂可以减轻内质网应激所致的凋亡途径。     

胰岛素联合罗格列酮治疗2型糖尿病患者疗效观察

目的比较胰岛素联合罗格列酮和单用胰岛素治疗2型糖尿病（T2DM）患者的疗效。方法将120例T2DM患者分成治疗组（胰岛素加罗格列酮）与对照组（胰岛素治疗），随访观察12周。结果2组患者治疗后血糖均得到良好控制，但治疗组胰岛素日需求量明显低于对照组（P〈0．01）；与对照组相比，治疗组血甘油三酯下降，而高密度脂蛋白胆固醇升高（P〈0．05），B细胞功能指数升高（P〈0．05），胰岛素抵抗指数显著降低（P〈0．05），脂联素水平升高（P〈0．01）。结论罗格列酮与胰岛素联用能使2型糖尿病患者血糖、血脂改善，增加胰岛素敏感性，降低胰岛素抵抗，升高脂联素水平，优于单用胰岛素治疗。     

二甲双胍联合运动疗法对抗精神病药致糖脂代谢紊乱患者血抵抗素和脂联素水平的影响

目的 探讨二甲双胍联合运动疗法对抗精神病药致糖脂代谢紊乱患者血抵抗素和脂联素水平的影响.方法 选择山东省滨州市人民医院诊治的200例精神分裂症患者,完全随机分对照组（100例）和研究组（100例）.对照组在持续使用抗精神病药物的同时采用二甲双胍治疗,研究组在对照组治疗基础上联合运动疗法,比较2组患者治疗前及治疗12周后体质量、腰围、空腹及餐后2h血糖、血脂谱、血抵抗素、胰岛素抵抗指数、糖化血红蛋白以及脂联素水平.结果 对照组治疗前体质量、腰围、空腹血糖、餐后2h血糖、糖化血红蛋白、胰岛素抵抗指数、三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇分别为（65 ±8）kg、（84 ±5） cm、（7.2±1.5） mmol/L、（10.8±2.2） mmol/L、（7.8±0.6）％、（6.3±2.6）、（2.5±0.3）mmol/L、（6.2±1.0） mmol/L、（0.7±0.2）mmol/L、（3.4±0.4）mmol/L,治疗后分别为（63±6）kg、（83 ±4）cm、（6.5 ± 1.3） mmol/L、（7.8±0.6）mmol/L、（6.5±0.4）％、（3.5±0.7）、（2.2±0.3）mmol/L、（5.6±0.9）mmol/L、（1.0±0.3）mmol/L、（2.6±0.3）mmol/L.研究组治疗前体质量、腰围、空腹血糖、餐后2h血糖、糖化血红蛋白、胰岛素抵抗指数、三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇分别为（65 ±8） kg、（84 ±5）cm、（7.3±1.6） mmol/L、（10.6±2.3） mmol/L、（7.9±0.6）％、（6.4±2.5）、（2.6 ±0.3） mmol/L、（6.3±1.1） mmol/L、（0.7±0.2）mmol/L、（3.3±0.4）mmol/L,治疗后分别为（58±6）kg、（80 ±4）cm、（5.7±1.2） mmol/L、（7.3±0.5）mmol/L、（6.1±0.4）％、（2.9±0.6）、（1.8±0.3）mmol/L、（4.9±0.8）mmol/L、（1.3±0.3）mmol/L、（2.3±0.3）mmol/L,研究组治疗12周后,体质量、腰围、空腹血糖、餐后2h血糖、糖化血红蛋白、胰岛素抵抗指数、总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇明显低于对照组治疗后和本组治疗前,高密度脂蛋白胆固醇高于对照组治疗后和本组治疗前,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.2组患者治疗前血抵抗素、脂联素等指标比较差异无统计学意义[对照组分别为（45±13）、（30±10）μg/L,研究组分别为（45±13）、（30±10） μg/L,均P＞0.05].治疗12周后,研究组患者血抵抗数、脂联素等脂肪细胞因子明显低于对照组治疗后[分别为（35±8）μg/L比（43±8）μg/L、（22 ±9） μg/L比（28±9） μg/L,均P＜0.05].结论 二甲双胍在影响糖代谢和胰岛素分泌、减轻胰岛素抵抗的同时,可通过降低血抵抗素、脂联素等脂肪细胞因子而产生的作用,运动疗法可减轻体质量,缓解胰岛素抵抗,联合治疗的效果优于单用二甲双胍.     

丝裂霉素联合塞来昔布对膀胱癌T24细胞增殖的影响研究

目的:研究体外丝裂霉素(MMC)联合塞来昔布对浅表性膀胱癌T24细胞增殖的影响及其可能机制。方法:体外培养浅表性膀胱癌T24细胞,分为MMC[0(对照组)、2、5、10、25、50μmol/L]组及其与塞来昔布(50μmol/L)混合组,每个浓度5个复孔,采用MTT法检测作用24h后细胞的增殖抑制率。采用免疫组化法、实时定量聚合酶链式反应法、酶联免疫吸附测定法检测对照组、MMC(50μmol/L)组和混合[塞来昔布+MMC(50μmol/L)]组作用48h细胞中Bcl-2蛋白、作用24h细胞血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达及作用96h内VEGF蛋白浓度。结果:MMC能明显抑制细胞增殖(P<0.05),且呈浓度依赖性;塞来昔布能明显增强MMC对细胞的增殖抑制作用(P<0.05);与对照组比较,MMC组和塞来昔布+MMC组细胞中Bcl-2蛋白、VEGF mRNA表达均明显降低(P<0.05),且后2组组间比较有统计学差异(P<0.05);塞来昔布+MMC组细胞中VEGF蛋白浓度随作用时间延长明显降低(P<0.01)。结论:塞来昔布可协同增强MMC抑制T24细胞增殖的作用,其机制可能与降低Bcl-2、VEGFmRNA表达水平和抑制细胞分泌VEGF蛋白作用有关。     

左旋多巴对脂多糖诱导小胶质细胞产生致炎因子的影响及黄芪保护作用

目的探讨左旋多巴(L-DOPA)对脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞产生致炎因子的影响及黄芪多糖(ASP)的保护作用。方法不同浓度LPS(1、5、10ng/ml)和(或)L-DOPA(50、100、500μmol/L)及ASP(20μg/ml)+LPS(10ng/ml)+L-DOPA(50μmol/L)处理小胶质细胞培养液,于0、4、24、48h动态观察一氧化氮(NO)的含量、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平及黄芪多糖对上述指标的影响。结果 LPS处理小胶质细胞培养液,当LPS浓度5ng/ml48h、10ng/ml24h、L-DOPA浓度为100μmol/L72h、500μmol/L24h以后、LPS+L-DOPA组各个时间点NO的含量均高于对照组(P<0.05),LPS+L-DOPA组显著高于单独用LPS或L-DOPA处理组(P<0.05)。LPS5ng/ml24h、10ng/ml4h、L-DOPA500μmol/L72h、LPS+L-DOPA组各时间点TNF-α的含量均高于对照组(P<0.05),LPS+L-DOPA组显著高于单独用LPS或L-DOPA处理组(P<0.05),黄芪多糖处理组明显降低NO的含量和TNF-α的水平(P<0.05)。结论 LPS致炎作用有时间剂量依赖性,小剂量L-DOPA无致炎作用,但L-DOPA增强LPS的致炎作用,黄芪多糖通过抑制NO、TNF-α的释放发挥抗炎保护作用。