CEA、CK8，18、AFP和AAT在肝细胞癌中表达及意义

用免疫组化方法观察癌胚抗原(CEA)，低分子量细胞角蛋白(CK8，18)，甲胎蛋白(AFP)和a1-抗胰蛋白醇(AAT)在75例肝细胞癌(HCC)中的表达。其中，CEA57／75例阳性(76％)；CK8，18 54/73例阳性(72％)；AFP51／75例阳性(68％)；AAT58／75例阳性(77．3％)。AFP和AAT在中等分亿(Ⅰ级HCC中阳性率最高，CK8，18在低分化(Ⅱ级）HCC中的表达比其他3种相对较高。CEA抗血清能显示HCC的毛细胆管分化，它是HCC的特征性标记，在病理鉴别诊断上有很大意义。CK8，18，AFP和AAT可见于非肝细胞来源的肿瘤，病理上的应用价值有限。AAT在HCC和癌周肝组织的阳性率分别为77．3％和66．7％，远比AFP68％和26．7％高，两有显差异(P<0．01)。因此，血清AAT的检测对HCC的诊断和预后估计可能比AFP更有意义。     

肝细胞癌中EZH2和AFP的表达及临床意义

目的 探讨Zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)和甲胎蛋白(alpha fetal protein,AFP)在肝细胞癌(HCC)中的表达及其临床意义.方法 采用HE染色和免疫组化法检测EZH2和AFP在96例肝细胞癌组织及其癌旁组织的表达情况及其与临床病理因素的关系.结果 HCC组织中EZH2和AFP表达高于癌旁组织(P ＜0.01);EZ-H2的阳性表达率在肿瘤直径≥5cm的HCC (71.4％)中高于直径＜5cm的HCC(45.9％) (P ＜0.05);AFP的阳性表达率与肿瘤大小无关(P＞0.05).AFP在伴有脉管浸润的病例中的阳性表达率(57.7％)高于无脉管浸润者(27.3％)(P＜0.05);EZH2在伴或不伴有脉管浸润的病例中其阳性表达率差异无统计学意义(P＞0.05).EZH2和AFP阳性表达率均在低分化HCC组织中高于高分化HCC (P ＜0.05).EZH2和AFP在HCC组织中的表达呈正相关(x2=25.245,P=0.000).随着HCC分化程度降低,EZH2＼AFP双阳性表达率升高(P＜0.05).肿瘤直径＜5cm且伴有脉管浸润者EZH2＼AFP双阳性率(73.1％)高于EZH2单阳性率(28.6％)和AFP单阳性率(50.0％) (P ＜0.05);EZH2＼AFP双阳性表达与肿瘤大小无关(P＞0.05).结论 EZH2和AFP的联合检测,对于评估HCC浸润、转移具有一定临床意义.     

人羊膜上皮细胞原代培养及肝细胞特异性蛋白的表达

目的 完善人羊膜上皮细胞(AECs)的原代培养技术,检测肝细胞特异性蛋白在AECs中的表达.方法采用胶原酶胰蛋白酶联合消化法分离获取AECs并进行原代培养.分别向培养液中添加10、20、40 ng/mL表皮生长因子(EGF)和10 ng/mL的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),倒置显微镜观察细胞生长和增殖情况,从中选择最适宜AECs原代培养的细胞培养液.以培养液中未添加生长因子的原代培养细胞作为对照.将羊膜组织石蜡切片和AECs细胞爬片进行免疫组化染色,检测4种肝细胞特异性蛋白的表达,分别为白蛋白(Alb)、细胞角蛋白-18 (CK-18)、α-1-抗胰蛋白酶(AAT)和α-1-甲胎蛋白(AFP).结果 经胶原酶-胰蛋白酶联合消化法获得大量较纯的AECs,间杂少数间充质细胞.当细胞培养液中添加10 ng/mL EGF时,AECs生长和增殖速度显著加快,故最终选择添加10 ng/mL EGF配制细胞培养液.免疫化学染色显示,羊膜组织和体外传代培养的AECs中均有Alb、CK-18、AAT和AFP表达.结论 胶原酶-胰蛋白酶联合消化及培养液中添加10 ng/mL的EGF是AECs较为适宜的原代培养方法.人羊膜组织及体外培养AECs能表达肝细胞特异性蛋白,提示AECs具有肝细胞的部分生物学特性.     

人羊膜上皮细胞原代培养及肝细胞特异性蛋白的表达

目的 完善人羊膜上皮细胞(AECs)的原代培养技术,检测肝细胞特异性蛋白在AECs中的表达.方法采用胶原酶胰蛋白酶联合消化法分离获取AECs并进行原代培养.分别向培养液中添加10、20、40 ng/mL表皮生长因子(EGF)和10 ng/mL的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),倒置显微镜观察细胞生长和增殖情况,从中选择最适宜AECs原代培养的细胞培养液.以培养液中未添加生长因子的原代培养细胞作为对照.将羊膜组织石蜡切片和AECs细胞爬片进行免疫组化染色,检测4种肝细胞特异性蛋白的表达,分别为白蛋白(Alb)、细胞角蛋白-18 (CK-18)、α-1-抗胰蛋白酶(AAT)和α-1-甲胎蛋白(AFP).结果 经胶原酶-胰蛋白酶联合消化法获得大量较纯的AECs,间杂少数间充质细胞.当细胞培养液中添加10 ng/mL EGF时,AECs生长和增殖速度显著加快,故最终选择添加10 ng/mL EGF配制细胞培养液.免疫化学染色显示,羊膜组织和体外传代培养的AECs中均有Alb、CK-18、AAT和AFP表达.结论 胶原酶-胰蛋白酶联合消化及培养液中添加10 ng/mL的EGF是AECs较为适宜的原代培养方法.人羊膜组织及体外培养AECs能表达肝细胞特异性蛋白,提示AECs具有肝细胞的部分生物学特性.     

原发性肝细胞癌组织中CD40的表达及意义

目的：CD40是肿瘤坏死因子受体家族的一员，它对B细胞的存活，增殖和分化起重要作用。然而除B细胞外，CD40的表达情况还没有很好的研究。因此我们检测原发性肝细胞癌组织中CD40的表达情况。方法：用SABC免疫组化法检测原发性肝细胞癌组织(50例)和非肝癌组织(27例)CD40的表达。结果：40％的原发性肝细胞癌组织检测到CD40抗原；而非肝癌组织未能检测到CD40抗原。结论：原发性肝细胞癌组织中有CD40的表达，为进一步研究肝肿瘤生物学，尤其是抑制FAS和TNFR介导的细胞凋亡与基因治疗原发性肝细胞癌打下基础。     

CK、Ki67、Gly-3及P53在肝细胞癌组织中的表达

目的 探讨细胞角蛋白(CK)、核抗原(Ki67)、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(Gly-3)及抑癌基因P53在肝细胞癌(HCC)组织中的表达.方法 收集16例肝细胞肝癌患者癌组织及癌旁组织,采用免疫组化染色技术,分别检测CK、Ki67、Gly-3及P53,分析其表达情况.结果 免疫组化检测16例HCC癌组织中CK7、CK8/18、CK19的阳性率分别为50%(8/16)、93.8%(15/16)以及62.5%(10/16),Ki67的阳性率为75%(12/16),Gly-3阳性率为87.5%(14/16),P53的阳性率为50%(8/16).结论HCC患者癌组织中CK、Ki67、Gly-3及P53的表达有不同程度的上调,其中以CK8/18阳性率最高,Gly-3及Ki67次之,P53及CK7相对较低.     

联合检测AFP、SCCA与APT在原发性肝细胞癌诊断中的价值

目的探讨甲胎蛋白(AFP)、鳞状细胞癌抗原(SCCA)、异常凝血酶原(APT)检测对原发性肝细胞肝癌(PHCC)诊断的临床意义。方法应用电化学发光法(ECLIA)检测AFP、SCCA、APT肝细胞癌37例,肝硬化40例,正常组41例。结果 PHCC患者血清AFP[(485.31±425.43)μg/L]、SCCA[(175.37±57.45)μg/L]、APT[(987.58±456.23)μg/L]的水平明显高于正常对照组AFP[(13.87±6.75)μg/L]、SCCA[(87.70±41.21)μg/L]、APT[(14.28±5.27)μg/L]及肝硬化组AFP[(80.62±34.98)μg/L]、SCCA[(105.89±37.97)μg/L]、APT[(250.56±102.54)μg/L](P均<0.01),AFP、SCCA、APT联合检测,敏感度可高达91.87%,特异度为85.00%。结论 AFP、SCCA、APT联合检测可提高原发性肝细胞癌的阳性诊断率,对诊断原发性肝细胞癌具有重要临床意义。     

原发性肝细胞癌中血管内皮细胞生长因子的表达及意义

为研究探讨血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）在原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）的表达及其临床病理意义，我们应用免疫组织化学对３４例ＨＣＣ中ＶＥＧＦ的表达作了研究。结果：ＨＣＣ中ＶＥＧＦ的表达较对照组织显增高。     

Survivin、PTEN和GPC3在肝细胞癌中的表达及意义

目的观察Survivin、PTEN和GPC3在肝细胞癌中的表达,探讨其在肝细胞癌发生、发展中的作用。方法应用免疫组织化学Envision法检测Survivin、PTEN和GPC3在40例肝细胞癌、40例癌旁组织及20例正常肝组织中的表达。结果 Survivin及GPC3蛋白在肝细胞癌中表达分别为62.5%、82.5%;显著高于癌旁组织（22.5%、5%）及正常肝组织（0）;PTEN蛋白在肝细胞癌、癌旁及正常肝中表达分别为47.5%、92.5%、97.5%,其在肝癌组织的表达水平显著低于癌旁组织和正常肝组织。结论 Survivin、PTEN和GPC3蛋白异常表达与肝细胞癌的发生和发展有密切关系。     

甲胎蛋白mRNA在肝癌组织中的表达及其意义

目的 :探讨甲胎蛋白 (AFP) m RNA在肝癌组织中的表达及其临床意义。方法 :用巢式逆转录聚合酶链反应 (nestedRT- PCR)检测 19例肝细胞癌患者癌组织 AFP m RNA。结果 :16例 (88.9% )患者癌组织 AFP m RNA呈阳性表达 ,其外周血 AFP m RNA亦为阳性 ;而阴性表达的 3例其外周血 AFP m RNA和血清 AFP亦为阴性。癌组织 AFP m RNA阳性率在血清 HBs Ag阳性组 (93.8% )、合并肝硬化组 (10 0 % )和血清 AFP≥ 2 5 μg/ L 组 (10 0 % )高于 HBs Ag阴性组 (33.3% )、无合并肝硬化组 (5 7.1% )和 AFP<2 5 μg/ L 组 (5 7.1% ) (P <0 .0 5 )。相关分析显示外周血 AFP m RNA阳性率和血清 AFP水平均与癌组织 AFP m RNA阳性表达呈正相关 (r =0 .6 413,P <0 .0 5 ;r=0 .6 0 2 4,P <0 .0 5 )。癌组织 AFP m RNA阳性表达和血清 HBs Ag阳性表达及合并有肝硬化呈正相关 (r =0 .6 5 0 3,P <0 .0 5 ;r =0 .5 90 8,P <0 .0 5 ) ,而与有无门静脉癌栓或肝外转移及癌灶大小无相关性 (P >0 .0 5 )。结论 :大多数肝细胞癌的 AFP基因处于活化状态。外周血 AFP m RNA阳性表达和血清 AFP水平均与癌组织 AFP m RNA阳性表达有关     

PTEN蛋白在肝癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨肝癌组织中PTEN的表达。方法：用免疫组化快捷法检测50例肝癌组织和15例正常肝组织中PTEN蛋白的表达,并分析与肝癌临床病理特征,侵袭性的关系。结果：HCC中PTEN阳性表达率明显弱于正常肝组织,PTEN蛋白阳性表达率与HCC组织分化程度、侵袭性有关（p〈0.05）,而与性别、术前AFP水平无关（P〉0.05）。结论：PTEN的表达一定程度上反映HCC侵袭性强弱。     

ERK2蛋白在肝癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨肝癌组织中ERK2的表达。方法：用免疫组化快捷法检测50例肝癌组织和15例正常肝组织中ERK2蛋白的表达,并分析与肝癌临床病理特征,侵袭性的关系。结果：HCC中ERK2阳性表达率明显高于正常肝组织,其与HCC组织侵袭性有关（p〈0.05）,而与HCC组织分化程度、性别、术前AFP水平无关（P〉0.05）。结论：ERK2的表达一定程度上反映HCC侵袭性强弱。     

乙酰肝素酶在原发性肝细胞肝癌中的表达及临床意义

目的 研究乙酰肝素酶在原发性肝细胞肝癌中的表达及临床意义.方法 免疫组织化学S-P法.结果 原发性肝癌45例中乙酰肝素酶表达阳性26例(57.8%);在高分化(6/17)、无肝内转移(12/28)和无淋巴结转移(14/31)的肝癌中乙酰肝素酶阳性表达率明显低于低分化(20/28)、肝内转移(14/17)和淋巴结转移(12/14)的肝癌(P＜0.05).结论 乙酰肝素酶可能是原发性肝细胞肝癌的生物学行为和预后的重要标记物,阳性表达者可能恶性程度高和预后不良.     

肝细胞癌中RhoC mRNA的表达及其临床意义

目的：探讨RhoC mRNA在人肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）组织中的表达及其与HCC复发转移的关系。方法：用荧光定量PCR技术检测82例HCC及其癌旁肝组织,16例正常肝组织中RhoC mRNA的表达情况。分析mRNA表达量与临床资料之间的关系。结果：RhoC mRNA在HCC、癌旁组织和正常组织中均可检测到表达,表达量分别为1.18±0.77、0.67±0.29和0.38±0.18,组间表达量比较差异有统计学意义（P〈0.05）,RhoC mRNA在HCC组织中的表达水平明显高于癌旁肝组织中的表达水平,两者差异有统计学意义（P〈0.05）;RhoC mRNA在HCC中的表达量与结节数目多,门静脉癌栓,术后复发转移相关（P〈0.05）,RhoC mRNA高表达的患者术后5年生存率明显低于RhoCmRNA低表达的患者（P〈0.05）。结论：RhoC mRNA的过表达可能与HCC的发生及复发转移有关,有可能做为HCC患者术后复发转移的预测指标。     

肝细胞癌中乙酰肝素酶与NM23的表达及其临床意义

目的：探讨乙酰肝素酶（HPA）和NM23在肝细胞癌（HCC）中的表达及临床意义。方法：应用免疫组织化学方法检测72例HCC,62例肝硬化及23例正常肝组织HPA和NM23的表达水平,并分析其与HCC临床病理特征的关系。结果：HPA阳性率在HCC中明显高于肝硬化组（P=0．000）及正常肝组（P=0．001）;在临床TNM分期中Ⅰ、Ⅱ期明显低于Ⅲ、Ⅳ期（P=0．001）;无转移组明显低于转移组（P=0．000）;在AFP≥400μg／L组、有门脉癌栓组和多个肿瘤结节组分别明显高于AFP〈400ptg／L组（P=0．01）、无门脉癌栓组（P=0．000）和单个肿瘤结节组（P=0．000）。NM23阳性率在HCC中明显低于肝硬化组（P=0．009）及正常肝组（P=0．000）;在TNM分期Ⅰ、Ⅱ期明显高于Ⅲ、Ⅳ期（P=0．001）;在无转移组明显高于转移组（P=0．000）;在AFP≥400μg／L组和有门脉癌栓组分别明显低于AFP〈400μg／L组（P=0．02）和无门脉癌栓组（P=0．005）。HPA与NM23表达呈负相关（r=-0．271,P=0．001）。结论：HPA高表达与NM23低表达在HCC的发生发展及转移中起重要作用,联合检测HPA与NM23蛋白指标有助于HCC诊断和判断患者预后。     

Ras和p16基因在肝癌组织中的表达与临床意义

目的：观察基因ras和p16在肝癌组织中的表达，探讨其在肝癌术后复发及预后中的作用。方法：应用免疫组化S－P法，检测53例手术切除肝癌组织和12例正常肝组织的ras和p16表达及与肝癌临床病理指标、术后复发及预后的关系。结果：（1）ras在肝癌和正常肝组织中的阳性表达率分别为66．0％和34．0％，ras表达与肿瘤大小、有无肝内转移密切相关（P均＜0．05）。ras阳性、阴性表达病例3年复发率分别为68．8％、38．9％，3年生存率分别为37．1％、66．7％（P＜0．05）。（2）p16在肝癌和正常肝组织中的阳性表达率各为47．2％、100．0％，p16表达与有无肝内转移、组织分化密切相关（P均＜0．05）。p16阳性、阴性表达病例3年复发率分别为48．0％、67．9％，其3年生存率分别为64．0％、32．1％（P均＜0．05）。（3）ras和p16在肝癌中的表达密切相关（P＜0．01），p16阳性ras阴性与p16阴性ras阳性表达病 列3年复发率分别为35．7％、79．2％，3年生存率分别为71．4％、29．2％，差异有极显著性（P＜0．01）。结论：联合检测p16和ras的表达可作为判断肝癌术后复发及预后的有效指标，多基因分析比单基因分析更有价值。     

PTEN基因在人肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的:研究人原发性肝癌(HCC)PTEN基因的表达及其临床意义.方法:用RT-PCR和免疫组织化学方法分别检测人HCC组织、癌旁组织、正常组织中PTEN-mRNA和人HCC组织、癌旁组织中PTEN蛋白的表达情况.结果:PTEN mRNA在人的正常组织、癌旁组织、HCC组织中的表达依次降低,差异有统计学意义(P＜0.01);PTEN蛋白的表达在人HCC组织显著低于癌旁组织(P=0.038).PTEN基因的表达与临床分期、门脉癌栓、病理分级有密切的关系(P=0.031, P=0.001, P=0.025).临床分期为Ⅰ～Ⅱ期的,其表达较Ⅲ～Ⅳ期的高;无门脉癌栓的较有门脉癌栓的表达高;病理分级为Ⅰ～Ⅱ级的较Ⅲ～Ⅳ级的表达高.结论:HCC的发生中可能存在PTEN 基因的突变或缺失.PTEN基因的表达缺失可能与HCC的恶性程度、疾病的进程及HCC的侵袭转移有密切关系.PTEN基因低表达,HCC病人病程较晚、肝癌的恶性程度较高,较容易发生侵袭转移,预后较差.     

原发性肝癌微血管密度和血管内皮细胞生长因子表达及意义

目的 :探索原发性肝癌组织中微血管密度 (MVD)和血管内皮细胞生长因子 (VEGF)表达的临床意义。方法 :采用 S- P法检测 6 5例肝癌组织、癌旁组织 (1.5 cm)及正常肝组织中 MVD和 VEGF的表达。结果 :肝癌组织和癌旁组织 MVD计数分别为 14 .2 9± 3.74、11.13± 2 .89,VEGF表达分别为 84 .1%、75 .9% ,与正常肝组织中MVD、VEGF比较差异均有显著性 (P<0 .0 1)。 MVD高和 VEGF阳性者与肝癌分化程度、有无完整包膜及静脉癌栓密切相关 ,MVD高、VEGF阳性者预后明显较 MVD低、VEGF阴性者差 (P<0 .0 5 )。结论 :联合检测 MVD和 VEGF有助于临床评估病情、判断预后 ,并为进一步综合治疗提供依据。