华支睾吸虫亚星微结构的研究V.精细胞的分化

目的：研究华支睾吸虫精子的形成。方法：以囊蚴感染家兔，剖检获取成虫，切取睾丸段做超薄切片，电镜观察。结果：精原细胞分布在睾丸被膜下，睾丸深部分布着不同分化阶段的精母细胞、精细胞和精子，精母细胞行不完全分裂，从而存在细胞在细胞质间桥，将３２个精母细胞联接在一起，进行同步发育。结论：华支睾吸虫精子的分化分为两个连续的阶段，一、由精原细胞依次向初级精母细胞、次级精母细胞和精细分化；二、由精细胞分化、变形     

华支睾吸虫减数分裂的观察

本文研究了华支睾吸虫的减数分裂,报道了同源染色体的配对、交换与分离及其细线期、偶线期、粗线期、双线期,终变期的形态学特点,以及华支睾吸虫的单倍体、二倍体、多倍体、精原细胞、精细胞和精子的观察结果。     

华支睾吸虫亚显微结构的研究Ⅵ.精子的形成

华支睾吸虫精子的分化可以分为两部分,一是精细胞的发生,二是精子的形成,本文报道的为第二部分。精子的形成首先由精细胞核向细胞的游离端移动,然后出现细胞突起,在突起内可见中心粒和基体,此为分化区,继之胞质突起延伸形成中央突起,并在其两侧出现两个侧突起。细胞核变长,染色质浓缩,核纵断面呈丝状或版层状,核及线粒体分别移入分化区及中央突起内,随之中央突起与两侧突起融合,形成精子的杆状体,分化区的柱状体形成精子头部。最后精子自领状结构的水平与精细胞的胞质间桥分离,释放入睾丸腔内至此精子完全形成     

华支睾吸虫亚显微结构的研究VI.精子的形成

华支睾吸虫精子的分化可以分为两部分，一是精细胞的发生，二是精子的形成，本文报道的为第二部分。精子的形成首先由精细胞核向细胞的游离端移动，然后出现细胞突起，在突起内可见中心粒和基体，此为分化区，继之胞质突起延伸形成中央突起，并在其两侧出现两个侧突起。细胞核变长，染色质浓缩，核纵断面呈丝状或版层状，核及线粒体分别移入分化区及中央突起内，随之中央突起与两侧突起融合，形成精子的杆状体，分化区的柱状体形成精     

不同地域株华支睾吸虫基因差异的研究

目的探讨湖北、广东、辽宁和韩国4地华支睾吸虫的基因差异,为华支睾吸虫种下分型提供依据。方法取湖北、广东两地的华支睾吸虫,提取基因组DNA,PCR特异性扩增18S rDNA V4区并测序;登陆GenBank,检索中国辽宁(AF217100)和韩国(AF408144)的华支睾吸虫18S rDNA的登录序列,应用系统发生学分析法对所有序列进行排列比较,分析4地华支睾吸虫的基因差异,并构建系统发生树,分析其亲缘关系。结果获得的湖北和广东两地华支睾吸虫18S rDNA V4区的碱基数分别为392 bp和440 bp。通过对18S rDNA V4区基因序列的比较与进化树的构建,证实4个地域株华支睾吸虫的18S rDNA V4区具有较高的同源性(98%~100%),彼此间遗传距离较小(0~0.013);在系统发生树中,湖北株和广东株华支睾吸虫形成一个支系,韩国株和辽宁株华支睾吸虫形成另外一个支系。结论以18S rDNA V4区为分子标记的DNA序列分析表明,湖北、广东、辽宁和韩国4地华支睾吸虫存在基因差异,但亲缘关系较近,即起源于共同的祖先。     

免疫金电转移印斑技术检测华支睾吸虫病人血清抗体

我们应用电转移印斑结合免疫金技术,进行了华支睾吸虫病人血清中抗体的研究,以寻找一个敏感、特异的华支睾吸虫病免疫诊断方法。一、材料和方法 (一)抗原的制备自人工感染华支睾吸虫囊蚴的猫肝中取华支睾吸虫成虫100条,以生理盐水洗涤数次.超声粉碎100w,10min,4℃冰箱冷浸72h,5000r/min离心15min,取上清液。 (二)实验血清1.华支睾吸虫病人血清:采自山东金乡县及宁阳县,经粪便检查,华支睾吸虫虫卵阳性     

我国动物华支睾吸虫的感染

华支睾吸虫寄生于人和犬猫等动物的胆囊和胆管内,造成肝胆的一系列疾病,是一种重要的人兽共患寄生虫病。据估计,全球约有3500万人感染华支睾吸虫,其中我国大约有1500万人感染。华支睾吸虫病分布于我国多个省、市、自治区,其中以广东省人群的感染率最高。华支睾吸虫的第一中间宿主为淡水螺,第二中间宿主为淡水鱼和虾,人为终末宿主,保虫宿主有猪、犬、猫、鼠等多种动物。鱼塘边建厕所和吃。鱼生”是华支睾吸虫病流行的两个重要因素。为了更有效地防制人和动物华支睾吸虫病,我们搜集了20世纪90年代以来我国华支睾吸虫感染的报道,进行整理分析。     

广州珠三角地区家猫自然感染华支睾吸虫的调查及豚鼠模型的构建北大核心CSCD

目的了解广州珠三角地区家猫自然感染华支睾吸虫状况,观察豚鼠感染华支睾吸虫后肝组织病理变化。方法解剖当地家猫,取肝脏,检查华支睾吸虫感染情况,阳性肝脏收集成虫,并取肝组织制作切片;采集阳性鱼,分离华支睾吸虫囊蚴,经口感染豚鼠,60个囊蚴/只,60d后解剖豚鼠,检查肝脏,收集成虫,取病变肝组织制作切片,作病理检查。实验设未感染对照组。结果当地猫华支睾吸虫自然感染率为41.47%(214/516);感染豚鼠华支睾吸虫成虫回收率50.83%(305/600)。与对照组比较,实验组豚鼠肝脏肿大,边缘呈球状隆起,部分肝叶表面可见水泡状凸起病变,水泡内液清亮;病变组织横切面可见胆管管壁增厚,管腔内有华支睾吸虫成虫寄生;镜下可见华支睾吸虫虫卵切面,周围大量炎症细胞浸润,胆管管壁增厚,管周纤维组织增生伴胆管扩张,肝小叶结构破坏。结论广州珠三角地区家猫华支睾吸虫感染率较高。豚鼠是华支睾吸虫合适的终末宿主,且肝脏病变明显。     

不同抗原的免疫学方法诊断华支睾吸虫病的实验观察

近来有人将纯化抗原应用于华支睾吸虫病的诊断,取得了较满意的结果。我们进一步应用硫酸铵分段沉淀华支睾吸虫不同抗原,进行酶联免疫吸附试验及皮内试验,以评价其应用阶值,报道如如下。一、材料与方法(一)华支睾吸虫抗原1.粗提抗原:自人工感染华支睾吸虫囊蚴的猫肝脏中取华支睾吸虫成虫200余条。以生理盐水洗     

广州珠三角地区家猫自然感染华支睾吸虫的调查及豚鼠模型的构建

目的了解广州珠三角地区家猫自然感染华支睾吸虫状况,观察豚鼠感染华支睾吸虫后肝组织病理变化。方法解剖当地家猫,取肝脏,检查华支睾吸虫感染情况,阳性肝脏收集成虫,并取肝组织制作切片;采集阳性鱼,分离华支睾吸虫囊蚴,经口感染豚鼠,60个囊蚴／只,60d后解剖豚鼠,检查肝脏,收集成虫,取病变肝组织制作切片,作病理检查。实验设未感染对照组。结果当地猫华支睾吸虫自然感染率为41．47％（214／516）;感染豚鼠华支睾吸虫成虫网收率50．83％（305／600）。与对照组比较,实验组豚鼠肝脏肿大,边缘呈球状隆起,部分肝叶表面可见水泡状凸起病变,水泡内液清亮;病变组织横切面可见胆管管壁增厚,管腔内有华支睾吸虫成虫寄生;镜下可见华支睾吸虫虫卯切面,周围大量炎症细胞浸润,胆管管壁增厚,管周纤维组织增生伴胆管扩张,肝小叶结构破坏。结论广州珠三角地区家猫华支睾吸虫感染率较高。豚鼠是华支睾吸虫合适的终末宿主,且肝脏病变明显。     

抗华支睾吸虫单克隆抗体的制备和鉴定

目的：建立分泌抗华支睾吸虫成虫的单克隆抗体杂交瘤细胞株并进行鉴定。方法：用华支睾吸虫成虫可溶性抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞ＳＰ２／０融合，筛选分泌高滴度单克隆抗体的杂交瘤细胞株，测定单抗免疫球蛋白亚类和单抗效价，检测单抗与日本血吸虫虫卵抗原、卫氏并殖吸虫成虫抗原和猪囊尾蚴抗原的交叉反应，用ＩＦＡＴ进行单抗识别的抗原定位。结果：获得５株分泌高滴度抗华支睾吸虫成虫单抗的杂交瘤细胞株，其分泌的抗体与日本血吸虫、卫氏并殖吸虫和猪囊尾蚴抗原均不发生交叉反应；５株单抗均属ＩｇＭ；单抗所识别的抗原定位于华支睾吸虫肠管壁。结论：制备的抗华支睾吸虫成虫的杂交瘤细胞株能分泌高滴度和高特异性的单抗。     

华支睾吸虫的器官特异性抗原

随着群众依从性的下降,进行华支睾吸虫病的病原学诊断—粪便检查日益困难。为控制华支睾吸虫病的流行,进行人群筛查十分必要,且血清学诊断正快速地取代病原学检查。该研究的目的在于通过对华支睾吸虫的一些器官的蛋白进行分析,以获得特异性的抗原蛋白。从自然感染华支睾吸虫的淡水鱼获取的囊尾蚴,经口感染兔,8周后解剖获取成虫。解剖并收集华支睾吸虫的睾丸、储精囊、卵黄腺、子宫以及肠道液体。整个虫体或分离的器官分别搅匀并离心,上清液作为粗抗原或单一器官抗原。将100条活的华支睾吸虫在PBS中饲养并收集排泄-分泌抗原。分别对获取的…     

华支睾吸虫cDNA文库的构建

目的　构建华支睾吸虫cDNA文库。方法　采集华支睾吸虫阳性鱼 ,分离囊蚴 ,感染实验动物兔 ,解剖兔收集华支睾吸虫成虫虫体。应用“一步法”提取华支睾吸虫总RNA ;经过mRNA纯化、cDNA合成 ,以PcDNA3(Amp +)质粒为载体构建文库。挑取 2 0个克隆进行扩增 ,选择 9个克隆进行DNA序列测定。序列结果与GenBank中相关基因进行比对。结果　获得含有 9 7× 10 5个重组子库容量的华支睾吸虫cDNA文库。其中PC6号克隆基因序列与华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶序列具有 93%的同源性。结论　已构建成华支睾吸虫cDNA文库。     

重组酶介导的等温核酸扩增技术检测淡水鱼华支睾吸虫囊蚴的初步应用

目的 评价重组酶介导的核酸等温扩增技术(recombinase-aided amplification,RAA)用于淡水鱼肉样本中华支睾吸虫囊蚴检测效果，为后续该方法标准化及现场应用提供科学依据。方法 2022年6—9月在江苏省泰州市姜堰区、兴化市、泰兴市华支睾吸虫感染阳性人群所在行政村河道内采集野生淡水鱼样本。取6份不含华支睾吸虫囊蚴的鱼肉组织(每份5 g)，分别加入0、1、2、4、8、16个华支睾吸虫嚢蚴，提取鱼肉组织基因组DNA后采用荧光RAA法进行检测，评价该方法检测灵敏度；分别以华支睾吸虫、东方次睾吸虫、钩棘单睾吸虫、台湾棘带吸虫嚢蚴基因组DNA为模板，采用荧光RAA法检测，评价其交叉反应；分别采用荧光RAA法和压片法检测现场采集的淡水鱼样本，比较两种方法检测华支睾吸虫效果。结果 含1、2、4、8、16个华支睾吸虫囊蚴的鱼肉组织样本均出现阳性扩增，荧光RAA法可在20 min内对5 g鱼肉组织中含1个华支睾吸虫囊蚴的样本实现阳性扩增；以东方次睾吸虫、钩棘单睾吸虫、台湾棘带吸虫嚢蚴基因组DNA为模板进行RAA检测，结果均为阴性。对采集的1 735条淡水鱼分别采用荧光RAA法和压...     

猫体华支睾吸虫肝切片标本制作的体会

有关猫体华支睾吸虫肝组织切片标本制作的报道较少，为了在实验教学中让学生观察华支睾吸虫之肝组织的病理变化，作者于2004年5月在华支睾吸虫病流行区江西省信丰县大塘镇购买了一条重度感染华支睾吸虫的病猫，制作猫体华支睾吸虫肝组织切片标本，现将标本制作过程和体会报道如下。     

南宁市市售猫华支睾吸虫感染调查

目的　了解南宁市猫华支睾吸虫感染情况,为华支睾吸虫保虫宿主防控提供依据。方法　从南宁市猫屠宰点购买猫肝,解剖胆囊和肝脏,查找华支睾吸虫并计数;对收集到的不同形态和大小的华支睾吸虫进行形态学观察和ITS2基因扩增和测序,通过BLAST比对分析确定虫体种类。结果　从南宁市2个猫屠宰摊面共收集了105个猫肝脏,其中有68个发现有华支睾吸虫感染,感染率为64.76%。单个肝脏虫体数量最多达980条,虫体数量中位数为72条/个肝脏。从检出的虫体中分离到3种不同大小和形态的吸虫,经形态学和ITS2基因扩增、测序、比对分析鉴定,均为华支睾吸虫。结论 　南宁市市售猫华支睾吸虫感染率较高,应该加强相关防控措施。     

南宁市市售猫华支睾吸虫感染调查

目的　了解南宁市猫华支睾吸虫感染情况，为华支睾吸虫保虫宿主防控提供依据。方法　从南宁市猫屠宰点购买猫肝，解剖胆囊和肝脏，查找华支睾吸虫并计数；对收集到的不同形态和大小的华支睾吸虫进行形态学观察和ITS2基因扩增和测序，通过BLAST比对分析确定虫体种类。结果　从南宁市2个猫屠宰摊面共收集了105个猫肝脏，其中有68个发现有华支睾吸虫感染，感染率为64.76%。单个肝脏虫体数量最多达980条，虫体数量中位数为72条/个肝脏。从检出的虫体中分离到3种不同大小和形态的吸虫，经形态学和ITS2基因扩增、测序、比对分析鉴定，均为华支睾吸虫。结论 　南宁市市售猫华支睾吸虫感染率较高，应该加强相关防控措施。     

锦州市淡水鱼华支睾吸虫囊蚴感染情况调查

华支睾吸虫病（clonorchiasis）是由华支睾吸虫（Clonorchissinensis）寄生于人和动物肝胆管内引起的以肝胆病变为主的一种重要的人兽共患寄生虫病。全世界有3500万人感染,主要分布于东南亚,     

肝胆B超病理改变与华支睾吸虫感染的相关性探讨

目的 探讨肝胆B超病理改变与华支睾吸虫感染的关系,为华支睾吸虫病诊断和治疗提供参考依据。 方法 对2010年1月至2013年12月,在武宣县人民医院行腹部B超检查发现的疑似华支睾吸虫感染者,采用粪检和酶联免疫法（ELISA）进行华支睾吸虫病原学和血清学检测。 结果 共检测疑似华支睾吸虫感染者113例,虫卵阳性率为64.60%（73例）,血清抗体阳性率为66.37%（75例）。男性虫卵阳性率高于女性,50岁以上年龄组虫卵阳性率高于50岁以下组,差异均有统计学意义（[χ2]= 3.554、6.267,P均< 0.05）。感染者的肝胆B超病理改变程度与华支睾吸虫感染度呈正相关（[χ2]= 64.952,P < 0.01）。 结论 肝胆B超病理改变可能由华支睾吸虫感染引起,B超检查发现肝胆有病理改变者,应进一步进行华支睾吸虫病原学和血清学检测。     

肝胆B超病理改变与华支睾吸虫感染感染的相关性探讨

目的探讨肝胆B超病理改变与华支睾吸虫感染的关系,为华支睾吸虫病诊断和治疗提供参考依据。方法对2010年1月至2013年12月,在武宣县人民医院行腹部B超检查发现的疑似华支睾吸虫感染者,采用粪检和酶联免疫法(ELISA)进行华支睾吸虫病原学和血清学检测。结果共检测疑似华支睾吸虫感染者113例,虫卵阳性率为64.60%(73例),血清抗体阳性率为66.37%(75例)。男性虫卵阳性率高于女性,50岁以上年龄组虫卵阳性率高于50岁以下组,差异均有统计学意义(χ2=3.554、6.267,P均0.05)。感染者的肝胆B超病理改变程度与华支睾吸虫感染度呈正相关(χ2=64.952,P0.01)。结论肝胆B超病理改变可能由华支睾吸虫感染引起,B超检查发现肝胆有病理改变者,应进一步进行华支睾吸虫病原学和血清学检测。